髓源性树突状细胞过继转移诱导1型糖尿病小鼠免疫耐受及其机制

目的:探讨髓源性树突状细胞(DC)过继转移诱导1型糖尿病(IDDM)小鼠免疫耐受的作用及其机制.方法:体外培养BALB/c小鼠骨髓来源DC,测定纯度,经ip小鼠体内.随后,采用少量多次链脲佐菌素(STZ)ip的方法建立IDDM小鼠模型.每周测定血糖,第4周时处死动物,分离脾脏淋巴细胞并进行体外培养,MTT法测定小鼠脾淋巴细胞增殖反应,采用流式细胞术检测CD4 CD25 调节性T细胞.ELISA法测定血清IL-2,IL-4含量.结果:过继转移表达CD11c 的DC4wk后,小鼠的血糖可明显降低,与模型对照组有极显著差异(8.32±1.05mmol/Lvs18.36±1.55mmol/L,P<0.01).与模型对照相比,过继转移DC可使小鼠脾淋巴细胞增殖能力降低(0.264±0.019vs0.489±0.012,P<0.05),流式细胞术测定结果显示CD4 CD25 T细胞亚群比例上升到5.28%,而模型对照组仅1.56%.DC过继可有效抑制IL-2分泌(121±19ng/Lvs195±32ng/L,P<0.05),而提高IL-4含量(187±36ng/Lvs76±30ng/L,P<0.01).结论:过继转移髓源性DC可以诱导免疫耐受防止IDDM的发生,其机制与促进体内CD4 CD25 T细胞亚群产生,重建Th1/Th2细胞因子平衡相关.     

树突细胞表面共刺激分子在小鼠哮喘模型中的作用及其机制的研究

目的　探讨树突细胞 (DC)表面共刺激分子在哮喘发病中的作用及其机制。方法BALB/c小鼠 12 0只 ,分为 3组 (每组 4 0只 ) :哮喘组 [用卵蛋白 (OVA)致敏和激发建立小鼠哮喘模型 ]、磷酸盐缓冲液 (PBS)对照组 (以PBS替代OVA致敏和激发 )、健康对照组。对 3组小鼠取肺组织做病理观察 ,行支气管肺泡灌洗液 (BALF)计数细胞并分类 ,ELISA测血清特异性IgE(sIgE)及脾脏T淋巴细胞白细胞介素 (IL) 4和IL 5水平。分离、培养脾脏DC ,用流式细胞仪 (FACS)测CD11c,鉴定表型。用FACS分析哮喘小鼠DC表面共刺激分子CD80 、CD86表达的变化 ;并将哮喘小鼠的DC与健康小鼠的T淋巴细胞共同培养 ,ELISA测培养上清IL 4和IL 5水平。结果　哮喘小鼠肺组织表现为以嗜酸性粒细胞、淋巴细胞浸润为主的炎症改变 ,BALF中嗜酸性粒细胞计数显著增加 (P <0 0 1) ,血清sIgE水平显著升高 (P <0 0 1) ,脾脏T淋巴细胞IL 4和IL 5的水平亦显著升高 (P <0 0 1)。与PBS对照组比较 ,哮喘小鼠CD80 表达上调 ,CD86无明显变化。哮喘小鼠DC能刺激健康小鼠T淋巴细胞IL 4和IL 5水平升高 (P <0 0 1)。结论　DC可能通过上调CD80 在哮喘Th2类免疫反应的维持和放大中发挥作用。     

TIM4对小鼠食物过敏模型中抗原特异性Th2细胞分化的影响

目的:研究微生物产物对树突状细胞(dendritic cell,DC)和TIM4的作用,探讨在微生物产物参与的食物过敏(food allergy,FA)中TIM4对CD4+T淋巴细胞分化的影响.方法:培养Balb/c小鼠骨髓来源的树突状细胞(bone marrow-derived DC,BMDC),培养的DC分为两组:...     

趋化性细胞因子MIP-1α动员DC前体细胞的体内抗胃癌效应

目的:研究趋化性细胞因子巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammation protein-1α, MIP-1α)在外周血中快速动员树突状细胞 (DC)前体细胞,并荷载小鼠前胃癌(MFC)抗原后,其体内的抗肿瘤免疫效应．方法:B6小鼠尾静脉注射MIP-1α,分选出外周血B220-CD11c 细胞,以GM-CSF、IL-4及 mTNF-α培养5-6 d,检测其表型和混合淋巴细胞反应;B220-CD11c 细胞荷载MFC抗原后制备成DC疫苗,经皮下回输MFC荷瘤小鼠,观察小鼠瘤体生长和存活时间,检测其体内抗肿瘤效应．未荷载肿瘤抗原的MIP-1α动员的胃癌DC疫苗、MFC肿瘤可溶性抗原和PBS缓冲液作为对照．结果:MIP-1α注射B6小鼠4 h后外周血中 B220-CD11c 细胞即升高,48 h达到高峰,占外周血单个核细胞(MNC)13．7％±0．8％．新鲜分离的B220-CD11c 细胞不具有成熟DC的特征, 经过细胞因子培养的B220-CD11c 细胞具有典型的DC表面标志,在混合淋巴细胞反应中具有极强的刺激T细胞增殖的能力．当荷载MFC 抗原后制成的DC疫苗皮下回输MFC荷瘤小鼠后,观察至第27天,MIP-1α动员的胃癌DC 疫苗和骨髓源性的胃癌DC疫苗实验组小鼠的瘤体大小分别为(2．7±0．6)cm3和(2．8±0．8) cm3,两者之间无显著性差异(P>0．05);而对照组小鼠瘤体迅速生长,瘤体大小分别为23．7± 1．7 cm3、26．4±1．9 cm3和31．2±2．2 cm3,实验组与对照组之间有显著性差异(P<0．05)．此外, 对照组小鼠在荷瘤后25 d内全部死亡,而实验组小鼠的生存期则明显延长,且治疗组小鼠在无瘤存活35 d后,再次接受MFC细胞冲击,继续观察小鼠至60 d仍存活,实验组和对照组的差异有统计学意义(P<0．05)．结论:注射MIP-1α可以直接快速动员B220- CD11c DC前体细胞进入小鼠外周血,这些 DC前体细胞荷载MFC抗原后制成的胃癌DC 疫苗,可激活机体T细胞,产生明显的体内抗肿瘤效应．     

慢性丙型肝炎患者Ⅰ型树突状细胞、淋巴细胞亚群的特点及临床意义

目的对慢性丙型肝炎患者Ⅰ型树突状细胞（dendritic cell 1,DC1）、淋巴细胞亚群的免疫学特点进行研究。方法对18例慢性丙型肝炎患者及18名健康献血员外周血进行DC1分离、体外诱导培养及特异性DC1表面标志测定,同时对患者淋巴细胞亚群及各项生化指标和病毒载量进行检测,并对部分患者治疗前后的指标进行比较。结果体外培养可诱导出大量的DC1。表达于慢性丙型肝炎患者DC1表面的共刺激分子（CD80、CD86、CD1a）及MHC-Ⅱ类分子（HLA-DR）的水平均明显降低（患者分别为14．82％±13．32％、18．68％±13．76％、6．33％±4．98％和29．14％±14．00％;正常人分别为76．46％±12．25％、84．38％±9．72％、89．56％±8．96％和92．47％±9．34％）,2组间差异有统计学意义（P〈0．01）;患者CD4^＋T淋巴细胞数量较正常对照组升高（P〈0．001）、CD8^＋T淋巴细胞数量降低（P〈0．01）,CD4^＋／CD8^＋比值高于健康人（P〈0．001）,CD16＋56＋NK细胞低于健康人水平（P〈0．01）;慢性丙型肝炎患者ALT值与DC1数量、HBVDNA水平与DC1数量之间均存在负相关趋势;3例完成6个月仪一干扰素治疗的患者,外周血单核细胞（PBMC）体外诱导培养产生的DC1数量均升高。结论慢性丙型肝炎患者DC1功能低下可能是HCV持续感染和免疫耐受的重要原因之一。HCV持续感染患者的淋巴细胞亚群发生变化,加重了丙型肝炎的慢性化。     

CD4+CD25+调节性T细胞回输对大鼠肝移植急性排斥反应的影响

目的:探讨回输CD4 CD25 调节性T细胞对大鼠肝移植急性排斥反应的影响．方法:免疫磁珠阴性加阳性分选Lewis大鼠脾脏、外周淋巴结内的CD4 CD25 调节性T细胞,分离后的细胞与丝裂霉素C处理过的DA 大鼠脾细胞混合培养3 d．淋巴细胞增殖实验评价新鲜分离和体外培养后的CD4 CD25 调节性T细胞对CD4 CD25-T细胞增殖的抑制作用．以DA大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,建立4组原位肝移植模型,每组12例,共48例．A 组术后不进行任何干预;B组术后0-6 d FK506 0．2 mg/(kg·d)灌胃;C组、D组术前1 d经阴茎背静脉分别向受体回输新鲜分离、体外培养后的1×106的CD4 CD25 T细胞．术后7 d每组随机处死6只,收集血标本作血清天冬氨酸氨基转移酶(asparate transaminase,AST)、总胆红素(bilirubin,BIL)检测,取肝脏标本作病理学检查,每组各留6只观察生存期．结果:分选后的CD4 CD25 T细胞纯度为 90．2％±1．8％(86％-93％,n=10),淋巴细胞混合培养实验中新鲜分离和体外培养后的 CD4 CD25 T细胞均可抑制CD4 CD25-T细胞的增殖(7 681．7±1 004．9,6 573．3±1 722．7 cpm vs 24 918．7±2 276．3 cpm;P=0．000,P =0．000)．术后7 d,新鲜细胞回输组以及体外培养细胞回输组AST低于对照组(8．1±2．0 μkat/L vs 17．9±3．8 μkat/L,P=0．000;8．4±1．4 μkat/L vs 17．9±3．8 μkat/L,P=0．000),BIL亦低于对照组(45．8±9．0 μmol/L vs 98．4±21．2 μmol/L,P=0．000;44．7±12．0 μmol/L vs 98．4 ±21．2 μmol/L,P=0．000)．四组的Banff评分比较,两组细胞回输组与对照组比较有统计学差异(P<0．05)．两组细胞回输组生存时间均大于对照组(21．7±1．7 d vs 12．8±0．5 d,P=0．0001; 30．3±1．7 vs 12．8±0．5 d,P=0．000 4),体外培养细胞回输组生存时间大于新鲜细胞回输组 (30．3±1．7 d vs 21．7±1．7 d,P=0．0017)．结论:回输新鲜分离/经供体抗原体外激活的受体CD4 CD25 调节性T细胞,可以明显减轻大鼠肝脏移植的急性排斥反应,延长生存期; 其中经供体抗原体外激活的CD4 CD25 调节性T细胞的作用更持久．     

1型糖尿病患者外周血中CD4^＋CD25^＋与CD8^＋CD28^-调节性T细胞水平的研究

流式细胞仪检测1型糖尿病（T1DM）患者外周血CD4^＋CD25^＋与CD8^＋CD28^-调节性T细胞的水平,发现其外周血CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞水平[（2．02±0．43）％]显著低于2型糖尿病（T2DM）组[（6．79±1．75）％]和健康对照（NC）组[（7．84±1．45）％],而CD8^＋CD28^-调节性T细胞水平三组间无差异。     

肺癌胸腔积液中树突状细胞的诱导培养及功能分析

目的 证实癌性胸腔积液中存在树突状细胞(dendritic cell,DC)的前体细胞,体外培养可获得DC。方法 双层Ficoll密度梯度离心法获得胸腔积液中的单个核细胞,在贴壁的单个核细胞中加入粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)。应用光镜、电镜观察细胞形态;用流式细胞仪对DC进行表型鉴定;四甲基偶氮唑蓝法检测DC的功能;酶联免疫吸附法(ELISA)检测致敏的DC刺激T淋巴细胞分泌干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果GM-CSF和IL-4是DC体外增殖、分化的必要条件,TNF-α能促进DC的成熟及功能表达。培养的DC显示其特有的形态特征,并且高表达CD86(84.6±6.1)％、HLA-DR(81.1±13.O)％、CD40(42.0±21.7)％、CD1a(20.O±9.5)％,低表达CD14(4.8±3.5)％。DC具有强大的刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力和明显的诱导T淋巴细胞分泌IFN-γ的功能。结论 恶性胸腔积液中可以获得具备正常形态、表型、功能的成熟DC。     

氧化苦参碱对小鼠树突状细胞成熟和功能的影响

目的:研究氧化苦参碱(OXY)对小鼠树突状细胞(DC)成熟、表型及功能的影响。方法:流式细胞术检测DC表面分子CD40的表达;混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC对T淋巴细胞的刺激能力;ELISA法检测MLR上清中细胞因子IFN-γ的分泌。结果:第0天OXY处理组较对照组DC表面分子CD40的表达明显升高(P<0.01),刺激T细胞能力增强,分泌细胞因子IFN-γ明显升高(P<0.05),对LPS诱导的DC成熟,与DC LPS组对照显著升高(P<0.05)。结果:OXY对DC的成熟和功能有一定的促进作用。     

颗粒化日本血吸虫M_r22600抗原对小鼠树突状细胞和CD4~+CD25~+调节性T细胞的作用

目的研究颗粒化日本血吸虫Mr22600抗原对小鼠树突状细胞(DCs)功能的影响及诱导CD4+CD25+调节性T细胞的作用。方法体外实验:分别用Sepharose 4B偶联rSj22.6/26GST抗原与可溶性rSj22.6/26GST抗原负载DCs,流式检测DCs表型变化,混合淋巴细胞增殖实验检测DCs功能。将不同抗原负载的DCs,与CD4+T细胞共培养,流式检测观察对CD4+CD25+Foxp3+T细胞数量的影响。体内试验:将42只BALB/c小鼠随机分6组(每组6～8只),A组免疫Sepharose4B偶联rSj22.6/26GST抗原,B组免疫福氏佐剂乳化rSj22.6/26GST抗原,C组免疫rSj22.6/26GST抗原,同时设Sepharose4B对照组(D组),福氏佐剂对照组(E组)和PBS对照组(F组),各组均为皮下多点免疫50μg抗原,隔2周加强免疫,共免疫2次。末次免疫后2周处死,无菌取腹股沟淋巴结,制备细胞悬液,流式检测DCs占淋巴结细胞的比例;同时取脾脏,制备成脾脏单个核细胞,流式检测各免疫组CD4+CD25+Foxp3+T细胞占脾细胞的比例。用免疫磁珠分选各免疫组CD4+CD25+T细胞,与CD4+CD25-T细胞共培养,氚标记胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测细胞增殖情况。结果体外实验结果显示,DCs经可溶性抗原刺激后表面分子CD40、CD80、CD86表达率分别为(43.5±6.2)%、(37.7±0.1)%和(71.4±1.4)%,经Sepharose4B偶联抗原刺激后表达率分别为(31.2±5.4)%、(32.0±1.6)%和(63.8±1.0)%,与可溶性抗原相比,Sepharose4B偶联rSj22.6/26GST抗原不能有效刺激DCs成熟。Sepharose4B偶联rSj22.6/26GST抗原负载DCs可诱导CD4+CD25+调节性T细胞扩增。体内实验结果显示,Sepharose4B偶联rSj22.6/26GST抗原免疫小鼠可诱导CD4+CD25+调节性T细胞数量增加,且与可溶性抗原组(cpm值为3558±147)相比,Sepharose4B偶联rSj22.6/26GST抗原组(cpm值为1420±335)来源的CD4+CD25+调节性T细胞的抑制能力更强。结论 Sepharose4B偶联rSj22.6/26GST抗原与可溶性抗原相比,更易诱导CD4+CD25+调节性T细胞,诱导的CD4+CD25+调节性T细胞具有更强的抑制功能,且这一作用可能与不同性状抗原干预DCs的功能状态有关。     

DC与CIK或LAK联合对结肠癌细胞株SW480杀伤作用的研究

[目的]研究树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导或未诱导的杀伤细胞(CIK)或淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)对结肠癌细胞株SW480的杀伤活性.提供DC联合CIK或LAK治疗结肠癌的实验依据.[方法]取人外周血分离出单个核细胞(PBMNC),诱导生成DC、CIK、LAK细胞;流式细胞仪检测DC经SW480肿瘤抗原冲击后的表型变化;以CIK+DC细胞、CIK细胞、LAK+DC细胞及LAK细胞作为效应细胞,SW480为靶细胞,以15∶1、30∶1、45∶1为效靶比,LDH释放法测定细胞杀伤试验活性;ELISA检测杀伤试验中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、IL-12、IL-17的分泌水平.[结果]流式细胞仪检测DC经SW480肿瘤抗原冲击后,其表面分子HLA-DR、CD40、CD80和CD86表达分别平均为90.23％、73.68％、85.96％、57.55％,与未经肿瘤抗原冲击DC比较,DC成熟的表面标志分子表达明显增加(P＜0.01).相同效靶比下,CIK+DC细胞组对SW480的杀伤作用最强,明显高于其他细胞组(P＜0.01);CIK+ DC细胞组在效靶比为45∶1时,杀伤活性最强(P＜0.01);单独CIK细胞组的杀伤活性明显高于LAK+DC细胞组(P＜0.01);LAK+ DC细胞组的杀伤活性明显高于单独LAK细胞组(P＜0.01).效靶比为45∶1时,各杀伤试验细胞组上清液中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-17的分泌量,CIK+DC细胞组的IFN-γ、IL-12的分泌量显著高于其他细胞组(P＜0.05);LAK+DC、单独LAK细胞组IL-2的分泌量明显高于CIK+DC、单独CIK细胞组(P＜0.05);单独CIK细胞组IFN-γ的分泌量明显高于LAK+DC、单独LAK细胞组(P＜0.05).[结论]CIK+DC细胞组对SW480的杀伤活性明显强于单独CIK、LAK+ DC组、单独LAK细胞组.其机制可能是,SW480抗原致敏的DC分泌IFN-γ、IL-12等刺激、诱导CIK细胞的活化和增殖,明显增强CIK细胞杀伤SW480的活性.     

树突状细胞对不同诱导时间LPAK抗肝癌作用的影响

目的　比较ＤＣ对诱导４ ｄ（Ｌ４） 和诱导７ ｄ（Ｌ７） 的ＬＰＡＫ 细胞体外杀伤人肝癌细胞株ＢＥＬ－ ７４０２（Ｂ） 的杀伤力和杀伤模式的影响．方法　Ｌ４ 组为Ｂ＋ Ｌ４ ,ＬＤ４ 组为Ｌ４ 组＋ ＤＣ;Ｌ７ 组为Ｂ＋ Ｌ７ ,ＬＤ７ 组为Ｌ７ 组＋ ＤＣ．Ｌ４ 和Ｌ７ 与Ｂ的效靶比均为５∶１ 和１０∶１两种． 采用杀伤细胞检测技术及电镜技术,比较各组的杀伤效应和杀伤模式．结果　各组的细胞毒活性为ＬＤ４ ＞ Ｌ４（ Ｐ＜ ０－０１） ,ＬＤ７ ＞ Ｌ７（ Ｐ＜ ０－０１） ．Ｌ４ 组和ＬＤ４ 组的ＢＥＬ７４０２ 细胞呈现不同程度的变性坏死,Ｌ７ 组和ＬＤ７ 组的ＢＥＬ７４０２ 细胞则呈现不同程度的凋亡改变．结论　ＤＣ对不同诱导时间的ＬＰＡＫ 细胞体外杀伤肿瘤细胞都有明显的促进作用,但并不改变ＬＰＡＫ 细胞对肿瘤细胞的杀伤模式．     

Thymic stromal cells support differentiation of natural killer cells from CD34+ bone marrow cells in vitro

Abstract: Natural killer (NK) cells are CD3^? CD56⁺ lymphocytes characterized by exhibiting non-MHC restricted cytotoxicity. A developmental relationship between NK cells and T lymphocytes has been proposed, and, moreover, the thymus has been shown to contain NK cell precursors. In this study we utilized an in vitro assay, devised to study T-lymphocyte development from bone marrow progenitors, to investigate the ability of thymic stromal cells to support generation of NK cells from CD34⁺ bone marrow cells. CD34⁺ cells purified from healthy adults were seeded on adherent thymic stromal cells. The cells emerging after culture were phenotypically characterized by flow cytometry. We show that lymphocytes expressing the phenotypical characteristics of NK cells were generated from CD34⁺ bone marrow cells, and that these cells represented 1% of the cells recovered from the cultures. Furthermore, this was accomplished without supplement of exogenous interleukin 2 which is required for NK cell differentiation in bone marrow cultures.     

人类胚胎干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞的研究进展

人类胚胎干(hES)细胞具有极其强大的增殖能力,理论上具有分化为机体所有组织细胞的潜能.治疗性克隆技术可用于制备带有患者基因型的hES细胞及其分化而来的胰岛素分泌细胞,但存在激烈的伦理学争论.新近,通过体外转基因处理可诱导人类体细胞重构形成hES样的多潜能干细胞.本文着重介绍hES细胞定向分化为胰岛素分泌细胞的研究进展.     

树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞杀伤作用

目的探讨树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞的杀伤作用。方法采用胃癌患者自身血液中单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经体外诱导分别扩增出DC和CIK细胞,二者共同培养后,利用MTT法检测DC细胞联合CIK细胞体外杀伤人胃癌细胞株(MNK-45、MNK-28、SG-7901)的活性。结果DC与CIK细胞共培养后得到的细胞群高表达CD3 CD56 ,平均值达到(56.74±7.63)%。通过彼此相互作用诱导出的细胞群体对胃癌细胞株MNK-45、MNK-28、SG-7901有杀伤作用,且杀伤活性随着效靶比的增加而增强。结论DC与CIK细胞共培养后有很强的增殖能力,对胃癌细胞具有杀伤活性,且其杀伤作用与胃癌细胞类型无相关性。     

Natural cytotoxic cells from rat liver and spleen kill human glioma cells

Summary Natural cytotoxic cells from rat spleen and rat liver, (isolated using the collagenase method) were found to be cytotoxic against different lines of human gliomas: T406, T508, T705, HeRo, HeRoCl 1, HeRoCl8, and HeRo-SV 7/114. After 18 h the lytic units ranged from 75 to 251 in the liver and from 5 to 24 in the spleen. Analyzing the ratio of lysis at 4 h/ 18 h, it may be concluded that this natural killing is predominantly macrophage (Kupffer cell)-dependent. Lysis by Kupffer cells cannot be increased by transforming glioma cells with SV40. Experiments with SV40-transformed mouse fibroblasts (3T3) and virustransformed human cell lines (SV80) suggested a SV40 receptor on Kupffer cells. Thus Kupffer cells have receptors for glioma cells and SV40-dependent membrane structures.     

祖细胞和干细胞与缺血性疾病的治疗

缺血性疾病是严重危害人类健康的疾病之一,主要包括缺血性脑血管疾病、缺血性心血管疾病、下肢缺血性疾病等。祖细胞和干细胞都是具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它们可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞,虽然胚胎干细胞具有万能分化型功能,但伦理学方面的争议使其研究困难重重,而成体干细胞相较胚胎干细胞,不仅避免了伦理学方面的争议问题,而且无移植后免疫排斥反应。本文主要讨论成体干细胞和祖细胞在缺血性疾病中的应用。近年来,关于祖细胞和干细胞在缺血性疾病中应用的研究日益增多,受到了广泛的关注,为我们提供了一条治疗缺血性疾病的新思路。     

Clusterin induces differentiation of pancreatic duct cells into insulin-secreting cells

Aims/hypothesis We recently reported that expression of the gene encoding clusterin (Clu) is upregulated in the regenerating pancreas, particularly in tissues undergoing differentiation. This led us to propose that clusterin participates in the cytodifferentiation of pancreatic tissue, particularly the endocrine islet cells. The aim of this study was to investigate whether clusterin induces the differentiation of duct-lining cells into insulin-secreting cells. Methods We isolated ductal tissue from rat pancreas and cultured it to develop epithelial cell explants for transfection of the Clu cDNA as well as for treatment of clusterin protein. Results The number of newly differentiated insulin cells increased 6.9-fold upon Clu overexpression compared with controls. Ins1 mRNA and peptide levels were also increased. Furthermore, glucose-stimulated insulin secretion was observed in the differentiated insulin cells. These cells were immunoreactive for insulin and C-peptide, but negative for other islet hormones and for cytokeratin-20, which indicates a fully differentiated state. Insulin cell differentiation was also increased in a dose-dependent manner by treating duct cells in culture with clusterin, indicating a growth-factor-like action of clusterin in insulin cell differentiation. Conclusions/interpretation These results suggest that clusterin can be considered as a potential morphogenic factor that promotes differentiation of pancreatic beta cells.     

Immune regulatory cells in umbilical cord blood: T regulatory cells and mesenchymal stromal cells

A major goal in haematopoietic cell transplantation (HCT) is to retain the lymphohaematopoietic potential of the cell transfer without its side effects. In addition to the physical injury caused by the conditioning regimen, donor T cells can react to alloantigens of the recipient and cause graft- versus -host disease (GVHD), which accounts for the largest share of morbidity and mortality after HCT. Immune modulator cells, such as regulatory T cells (Tregs) and mesenchymal stromal cells (MSCs) have shown promise in their ability to control GVHD and yet, in preclinical models, preserve the graft- versus -malignancy effect. Initially, MSCs and Tregs have been isolated from adult sources, such as bone marrow or peripheral blood, respectively. More recent studies have indicated that umbilical cord blood (UCB) is a rich source of both cell types. We will review the current data on UCB-derived Tregs and MSCs and their therapeutic implications.