膀胱移行细胞癌组织中Nodal的表达变化及意义

目的观察胚胎成形素Nodal在膀胱移行细胞癌（下称膀胱癌）组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法采用Westernblot及RT—PCR方法分别检测17例膀胱癌组织及6例膀胱正常组织中Nodal蛋白及mRNA。17例膀胱癌病理分级：I级5例、Ⅱ级7例、Ⅲ级5例;TNM分期：Ta期7例、T1期6例、T2～T4期4例。结果正常膀胱组织中没有检测到Nodal蛋白、mRNA的表达,17例肿瘤组织均存在Nodal蛋白及mRNA的阳性表达;且Nodal表达与肿瘤病理分级、临床分期有关,其分级、分期越高,Nodal表达亦越强,Ⅲ级〉II级（P〈0．05）〉I级（P〈0．01）,T2-T4期〉T1期〉Ta期（P均〈0．05）。结论膀胱癌组织中Nodal蛋白、mRNA呈高表达,其表达强弱与膀胱癌病理分级及临床分期有关。Nodal有望成为膀胱癌早期检测及治疗的重要靶点。     

膀胱尿路上皮癌及正常膀胱组织microRNA21、205表达研究

目的 探讨microRNAs (miRNAs)在膀胱尿路上皮癌与正常膀胱组织中的表达差异性及意义.方法 采用基于2-△△cT的实时定量PCR(Real-time PCR)方法 检测50例膀胱尿路上皮癌与21例正常膀胱组织中miR-21及miR-205的表达情况.结果 与正常组织相比,癌组织miR-21表达上调(P＜0.01),miR-205表达下调(P＜o.o1).癌组织中miR-21与miR-205表达量的比值约3.6倍于正常组织中表达量的比值.结论 miR-21高表达、miR-205低表达可能参与膀胱尿路上皮癌的发生、发展.     

microRNA-378表达结合DW-MRI对老年直肠癌腹腔镜术前T、N分期的评价

目的探讨microRNA-378表达结合磁共振弥散加权成像(DW-MRI)对老年直肠癌腹腔镜术前新辅助治疗后T、N分期评价。方法经病理证实的直肠癌患者60例分两组。A组在采用奥沙利铂进行新辅助治疗后行DW-MRI检查,B组行micro RNA(miR)-378、DW-MRI检查。对比两组术前T、N分期及DW-MRI对淋巴结良恶性鉴别的准确率。结果 B组术前T分期准确率(86.67%)显著高于A组(63.33%,P0.05)。B组直肠癌N分期准确率(96.67%)显著高于A组(76.67%,P0.05)。DW-MRI扫描下,良恶性淋巴结具有不同的表观扩散系数(ADC)值,且良性均高于恶性(P0.05)。结论 miR-378表达结合DW-MRI可有效地评价直肠癌术前分期,外周血清miR-378及DW-MRI都是简单、快捷、无辐射、可重复操作的检查,具有较大的实用价值。     

microRNA-21及相关技术在心血管疾病中的研究进展

microRNAs（miRNAs）是近年发现的一类保守单链非编码RNA分子，由约19~24个核苷酸组成，在转录后水平调控基因的表达。miRNAs参与多种细胞进程，在疾病发生发展中也起重要作用。microRNA-21（miR-21）在多种类型肿瘤及心血管系统中均有表达，在心血管疾病的发生发展过程中发挥重要作用。本文从miRNAs的功能机制、研究方法，miR-21与心血管疾病的关系，靶基因预测及其表达干预手段等方面综述了miRNAs及miR-21现阶段的研究进展。     

膀胱癌组织端粒酶活性表达及其与临床病理特征关系的研究

目的 探讨膀胱移行细胞癌（transitional cells carcinoma,TCC）组织端粒酶活性表达与膀胱癌临床病理特征的关系.方法 应用端粒酶重复序列扩增（telomeric repeat amplification protocol,TRAP）银染TRAP-ELISA方法检测25例膀胱癌组织（实验组）和4例膀胱正常组织（对照组）中端粒酶活性的表达,并与临床病理分期、病理分级及预后关系进行分析.结果 实验组中端粒酶活性表达率为96%,对照组无表达,实验组端粒酶活性高于对照组（P＜0.001）;端粒酶活性临床病理分期T2高于T1、T3高于T2（P＜0.01）,晚期组高于早期组（P＜0.001）;端粒酶活性病理分级G2高于G1、G3高于G2（P＜0.01）.结论 实验组端粒酶活性高表达,并与膀胱癌临床病理分期、病理分级呈正相关,端粒酶激活可能在膀胱癌的发生及发展过程中起重要作用,端粒酶可作为膀胱癌早期诊断及判定预后的分子生物学标记.     

microRNA-145在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

[目的]探讨肝细胞肝癌中microRNA-145(miR-145)水平的变化及其临床意义。[方法]采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测30例肝癌组织、癌旁组织及3例正常肝组织中miR-145表达量,以及Hep G2肝癌细胞、L-O2胎肝细胞中miR-145表达量并计算miR-145相对表达量。结合采集组织的性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、HBV感染、AFP浓度等临床病理参数分析miR-145表达水平有无明显差异。[结果]肝癌组织中miR-145表达明显低于正常肝组织,差异有统计学意义(P0.05),癌旁组织与正常肝组织及肝癌组织之间表达差异无统计学意义(均P0.05),Hep G2细胞中miR-145表达明显低于L-O2细胞,差异有统计学意义(P0.05)。miR-145在肝癌中的表达异常与性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、HBV感染、AFP浓度无相关,差异无统计学意义。[结论]miR-145在肝癌患者中低表达,在肿瘤发生发展过程中可能担任了抑癌基因的角色,对肝细胞肝癌的临床诊断有意义。     

microRNA-433在胃癌组织中的表达下降及对胃癌细胞系生长的影响

目的:探讨胃癌组织中microRNA-433表达差异以及其可能下调的机制,及在低表达microRNA-433胃癌细胞系中提升其表达的量对细胞生长的影响.方法:取胃癌组织及其正常癌旁组织43例,实时定量检测两者表达差异,并结合病例分析.使用1、5、10mol/L5-Aza-CdR干预胃癌SGC-7901细胞,检测每组microRNA-433的表达变化.转染microRNA-433mimics进入SGC-7901细胞,用流式细胞术检测细胞增殖凋亡情况.结果:胃癌组织相对其正常癌旁组织,microRNA-433表达量明显减低,差异有明显统计学意义(P<0.05),microRNA-433表达与性别、分化、年龄无明显关系(P>0.05),同肿瘤分期有统计学意义(P<0.05).胃癌细胞系SGC-7901中microRNA-433的表达相对于正常胃黏膜上皮细胞GES-1明显减低.SGC-7901细胞通过甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR以浓度1、5、10mol/L处理5d之后,分别检测microRNA-433的表达,相对未处理组,其表达均有上升并且呈现出剂量依赖性.将microRNA-433mimics转染至SGC-7901中提高其表达,通过流式细胞术检测发现,相比未处理组,提高表达后肿瘤细胞凋亡率上升,具有统计学意义(P<0.05).结论:microRNA-433在胃癌组织中表达减低,并且同肿瘤分期有关.使用5-Aza-CdR作用SGC-7901肿瘤细胞系后,microRNA-433的表达明显上升.其表达下调的机制可能是由于前端启动子区域高甲基化造成,转染提升肿瘤细胞中microRNA-433的表达,可以促进肿瘤细胞的凋亡.microRNA-433具有潜在的抑癌作用.     

肝癌患者血清microRNA-21水平变化

目的：分析不同肝病患者血清microRNA-21（miR-21）水平,以探讨miR-21对肝细胞癌（HCC）的诊断价值。方法以实时定量逆转录PCR法检测正常人、慢性乙型肝炎（CHB）、肝硬化和HCC患者（各组均为25例）血清miR-21水平,分析miR-21水平与HCC临床病理学特征的关系。结果正常人、CHB和肝硬化患者血清miR-21相对水平分别为（1.1±1.7）、（2.3±2.6）和（2.8±2.5）,而HCC患者为（22.6±4.4）,显著高于前三组（P〈0.001）;HCC患者术后1w和1m血清miR-21相对水平分别为（18.4±3.5）和（3.1±2.7）,均较术前显著降低（P＜0.001）;HCC患者血清miR-21水平与肿瘤大小、癌栓以及HBV感染相关,与肿瘤分化程度、数目和血清AFP水平无相关性。结论 miR-21在HCC患者血清中显著升高,可能作为HCC早期诊断的潜在标志。     

microRNA-199在肝癌中的表达及对患者预后的影响

目的探讨肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)组织中microRNA-199(miR-199)的表达变化及其对肝癌患者预后的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,RTqPCR)法检测2005至2015年间就诊的300例HCC患者的癌组织及其癌旁组织标本中miR-199的表达情况,结合临床病理参数,分析miR-199的表达变化对肝癌患者预后的影响。结果与癌旁组织相比,HCC组织中miR-199的表达水平显著降低(P0.05);miR-199的表达与肝癌的侵袭转移相关。发生肝癌转移的患者组明显低于未转移组(P0.05)。结论人HCC组织中miR-199的表达下调,且miR-199的低表达可能影响肝细胞癌临床预后效果。     

HMGA2在膀胱尿路上皮癌中的表达

目的 探讨高迁移率组蛋白A2(HMGA2)在膀胱尿路上皮癌中的表达与临床病理特征及复发的关系.方法 选择膀胱尿路上皮癌病理组织标本49例,正常膀胱组织标本5例,通过免疫组化方法检测两组标本中HMGA2蛋白的表达.结果 在正常膀胱组织中HMGA2蛋白未见表达,在膀胱癌组织中HMGA2蛋白的表达随着临床分期及病理分级的升高而增加.在Ta、T1、T2膀胱癌中HMGA2蛋白表达的阳性率分别为20％、47.6％、75％,差异有统计学意义(P＜0.05).在低级别、高级别膀胱癌组织中HMGA2蛋白表达阳性率分别为25％、56％,差异有统计学意义(P＜0.05).术后随访18 ～40个月,42例中复发18例,HMGA2蛋白在复发组与未复发组中阳性表达率分别为62.5％、30.8％,差异有统计学意义(P＜0.05).另外,HMGA2蛋白的表达与肿瘤的大小、性别、年龄无关(P＞0.05).结论 在膀胱癌组织中HMGA2蛋白的表达明显高于正常膀胱组织,且与肿瘤的分期、分级及复发有关;HMGA2蛋白可以作为评价膀胱肿瘤进展和预后的一个潜在指标.     

膀胱癌患者血、尿及癌组织中血管生成因子和抑制因子的表达变化

目的观察膀胱癌患者血、尿及癌组织中血管生成因子和抑制因子的表达水平与膀胱癌分级、分期的关系。方法 ELISA法检测20例不同分级、不同分期膀胱癌患者血清、尿液中的血管内皮生长因子（VEGF）、血管抑素（AS）、内皮抑素（ES）、Kringle 5（K5）基因蛋白,免疫组织化学法（IHC）检测膀胱癌组织中的VEGF、AS、ES、K5蛋白。结果高分级、高分期组膀胱癌患者血清及尿液中的VEGF、AS、ES、K5蛋白表达水平较低分级、低分期组高（P均〈0.05）;VEGF、AS、ES在浅表和浸润膀胱癌组织中表达有差异（P均〈0.05）。结论不同分级、不同分期膀胱癌患者癌组织及血清、尿液中VEGF、AS、ES、K5的表达不同。     

microRNA-101和环氧合酶-2在胃癌中的表达及其临床意义

背景：microRNAs是一类对靶基因表达具有转录后调控作用的非编码小RNA。microRNA-101（miR-101）在多种恶性肿瘤中呈低表达,而过表达外源性miR-101可发挥肿瘤抑制作用。前期体内、外实验发现外源性miR-101可抑制胃癌细胞增殖和环氧合酶-2（COX-2）表达。目的：检测胃癌组织中的miR-101、COX-2表达并探讨其临床意义。方法：收集手术切除胃癌组织和配对癌旁非癌组织标本30例,以实时荧光定量RT—PCR检测miR-101、COX-2mRNA表达,分析两者间以及两者与胃癌主要临床病理特征的关系。结果：绝大多数胃癌组织中miR-101表达低下,COX-2mRNA则呈过表达。胃癌组织与癌旁非癌组织间miR-101、COX-2mRNA表达量差异显著（P〈0．01）,且两者表达在癌组织和癌旁组织中均呈负相关（癌组织：r=-0．767,P=0．000;癌旁组织：r=-0．718,P=0．000）。TNMⅢ、IV期胃癌和伴淋巴结转移的胃癌中,miR-101表达分别显著低于TNMI、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例（P〈0．05）,COX-2mRNA表达分别显著高于TNMI、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例（P〈0．05）。结论：miR-101与COX-2之间的负相关性可能有助于胃癌的临床诊断;miR-101表达低下伴COX-2过表达与胃癌临床进展和转移有关,对预后判断有一定参考价值。     

Ezrin蛋白在膀胱癌中的表达及意义

用EnVision免疫组织化学方法检测Ezrin蛋白在膀胱癌中的表达。结果膀胱癌组织Ezrin蛋白阳性表达率高于癌旁组织，癌旁组织高于正常膀胱组织（P均〈0．05）；Ezrin蛋白的表达与组织学分级和病理学分期无相关性（P〉0．05）。提示Ezrin蛋白可能参与膀胱癌的发生，但其表达水平与肿瘤恶性程度无关。     

microRNA-328参与心房颤动患者体内氧化应激损伤机制的初步研究

目的:基于microRNA-328(miR-328)的表达探究心房颤动(atrial fibrillation,AF)患者体内氧化应激损伤的可能机制。方法:以本院就诊的AF患者作为AF组(54例),另选择未发生过AF的窦性心律者作为对照组(22例)。采用qRT-PCR法测定所纳入患者血清miR-328的表达水平,酶标仪测定血清和右心耳组织中氧化应激相关标志物的表达,HE染色和Masson染色观察右心耳组织的病理改变和纤维化程度。分析miR-328与氧化应激指标的相关性,采用多因素Logistic回归模型分析AF患者氧化应激损伤潜在的影响因素。结果:与对照组比较,AF组血清miR-328的表达显著升高(P0.01);阵发性AF、持续性AF以及永久性AF患者miR-328表达具有显著统计学差异,其中永久性AF患者miR-328表达最高(P0.01)。AF组血清中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达水平较对照组均显著上升,右心耳组织中ROS和AOPP的表达也显著上升(均P0.01)。HE切片染色和Masson切片染色结果显示,AF患者右心耳组织中胶原纤维较对照组显著增生,且心肌细胞排列杂乱,心肌细胞结构基本被破坏。相关性分析显示,AF患者血清miR-328的表达与左心房内径、血清MDA和ROS含量呈正相关性(r=0.483、0.314、0.516,均P0.05),与患者年龄和肺动脉压力无显著相关性。多因素Logistic回归分析显示,左心房内径和miR-328的表达与心脏氧化应激损伤的发生显著相关(均P0.05)。结论:AF患者体内miR-328的表达显著增加,可能与发生氧化应激损伤的机制有关。     

E—CD和CD44V6在膀胱癌组织中的表达及临床意义

应用免疫组化SABC法对81例膀胱移行细胞癌患者癌组织中细胞粘附分子上皮钙粘附素（E－CD）和CD44V6的表达进行检测。结果显示,E－CD的异常表达与膀胱癌临床分期、病理分级、淋巴结转移显著相关（P均＜0．05）。CD44V6的阳性表达与膀胱癌临床分期、病理分级有显著关系（P均＜0．05）,伴淋巴结转移组的CD44V6阳性表达率显著低于未转移组（P＜0．01）。认为E－CD和CD44V6均与膀胱癌浸润转移明显相关,两者结合分析能够更准确地反映膀胱癌的生物学行为。     

膀胱移行细胞癌中细胞凋亡、P27及PCNA的表达

为探讨细胞凋亡、P^27及增殖细胞核抗原（PCNA）表达与膀胱移行细胞癌（简称膀胱癌）分级、分期及预后的关系，采用DNA末端标记法（TUNEL）和免疫组化法检测53例份膀胱癌组织中细胞凋亡指数（AI）、P^27标记指数（P^27LI)、PCNA标记指数（PCNALI）。结果显示，AI、P^27LI与PCNALI在膀胱癌不同分级之间差异有显著性，PCNALI在膀胱癌不同分期之间差异有显著性，而AI与P^27LI在T2、T3间差异有显著性，P均＜0.05。在复发的膀胱癌中AI、PCNALI显著高于未复发者，P^27LI显著低于未复发者。表明AI、P^27LI、PCNALI可作为评估膀胱癌恶性程度及预后的指标。     

microRNA-21与PDCD5表达交互作用及其对老年非小细胞肺癌患者化疗效果的评估

目的 分析microRNA-21与程序性细胞死亡因子(PDCD)5表达的交互作用及其对老年非小细胞肺癌患者化疗疗效的影响。方法 回顾性分析老年非小细胞肺癌化疗患者100例的临床资料，均采用顺铂联合吉西他滨化疗方案，对比化疗前后microRNA-21与PDCD5表达水平，分析二者与患者病理特征指标的关系。按照化疗疗效将患者分为有效组及无效组，分析microRNA-21、PDCD5与化疗疗效的关系。结果 有效组与无效组化疗前microRNA-21与PDCD5表达水平差异无统计学意义(P>0.05),化疗后两组均降低，差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、病理类型microRNA-21与PDCD5的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。有吸烟史者、分化程度为低分化者、TNM分期为Ⅳ期者、存在淋巴结转移者microRNA-21表达水平较高，差异有统计学意义(P<0.05)。分化程度为低分化者、TNM分期为Ⅳ期者、存在淋巴结转移者PDCD5表达水平较高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 microRNA-21与PDCD5在老年肺癌患者中呈较高表...     

胃癌组织中miR-451与MIF的表达及与临床病理的关系

目的探讨胃癌组织中microRNA-451(miR-451)与巨噬细胞游走抑制因子(MIF)的表达及与临床病理的关系。方法收集2013年3月至2014年3月该院接受治疗的30例胃癌患者,取其肿瘤及肿瘤旁相关组织,采用RT-PCR法检测组织内的miR-451与MIF的表达水平,并分析其与胃癌临床病理的关系。结果肿瘤组织中的miR-451相对表达为(0.287±0.143),显著低于肿瘤旁组织的(0.520±0.257)(t=-4.021,P0.05);肿瘤组织中的MIF相对表达为(1.542±0.023),显著高于肿瘤旁组织的(0.631±0.027)(t=-23.183,P0.05);miR-451与MIF的相对表达呈现显著负相关性(t=-0.721,P0.05);肿瘤组织中miR-451及MIF与胃癌的组织类型(高、中、低分化)、TNM分期(Ⅰ+Ⅱ、Ⅲ+Ⅳ)、浸润深度(T1+T2、T3+T4)及淋巴结转移(有、无)相关(均P0.05)。结论胃癌组织中miR-451及MIF的表达与胃癌的组织类型、TNM分期、浸润深度及有无淋巴结转移相关,推测miR-451反向抑制MIF,进一步调控胃癌在人体内的发生及发展。     

microRNA-21在非小细胞肺癌患者体内外周血和癌组织中的表达水平及其通过调节PTEN蛋白参与抑癌的机制

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血清和癌组织中microRNA-21表达水平及其对肺癌细胞的侵袭和增殖影响。方法 32例NSCLC患者为研究组,30例同期肺部良性病变患者为对照组,采用Real-time RCR检测研究组肿瘤组织、癌旁组织及两组血清中microRNA-21的表达水平;此外,对肺癌细胞株A549转染microRNA-21的抑制物(inhibitor)或模拟物(mimics)后,采用transwell及CCK-8法观察microRNA-21对肺癌细胞株的侵袭及增殖的变化,并采用Western印迹检测A549中张力蛋白同源基因(PTEN)蛋白水平。结果研究组血清及肿瘤组织中microRNA-21的表达水平显著高于对照组及癌旁组织(均P<0.05);A549转染microRNA-21 mimics后细胞的侵袭和增殖能力显著增加(P<0.05),转染microRNA-21 inhibitor后,细胞的侵袭和增殖能力显著降低(P<0.05),而PTEN蛋白转染后,表达水平与上述结果相反。结论 NSCLC患者肿瘤组织和血清中高表达的microRNA-21可能通过抑制PTEN蛋白参与癌细胞侵袭和增殖能力的调节。     

肝细胞肝癌组织中miR-21表达水平及与预后的相关性

目的探讨肝细胞肝癌患者组织中miR-21的表达水平及其预后意义。方法共收集50例肝细胞肝癌的患者,采用免疫组化法检测肝细胞肝癌及配对癌旁组织中miR-21的表达水平,分析miR-21蛋白的表达与患者临床病理特征及预后生存的相关性。结果肝细胞肝癌组织中miR-21表达水平显著高于癌旁组织(58.0%vs 6.0%,χ~2=31.07,P0.000 1)。miR-21高表达与临床T分期相关(χ~2=8.043,P=0.018);但miR-21蛋白表达水平与患者年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、N分期及分化程度均无显著关联(P0.05)。高表达miR-21的肝细胞肝癌患者总生存时间明显降低(P=0.032),但患者无疾病进展生存期差异无统计学意义(P=0.116)。结论肝细胞肝癌患者miR-21高表达可能作为肿瘤患者预后不良的重要标志物之一,而与肿瘤的发生及发展的机制性研究尚需进一步验证。