贝类中GⅠ、GⅡ诺如病毒快速检测与分群方法的建立

目的建立贝类中GⅠ、GⅡ诺如病毒快速检测与分群方法。方法对比分析6株主要流行的GⅠ、GⅡ诺如病毒及参考诺如病毒的基因序列,筛选保守区域引物,优化建立SYBR Green Ⅰ荧光定量检测与熔解曲线快速分群方法,并对实际样品检测验证。结果引物P289/290可同时检测GⅠ、GⅡ诺如病毒,SYBR Green Ⅰ荧光定量检测方法在病毒浓度10~3～10~9 copies之间呈现良好的线性关系(R~2=0.993,P0.01),熔解曲线Tm值可区分GⅠ和GⅡ不同基因群的诺如病毒(F=7 507.60,P0.05)。120份贝类样品阳性检出率5.83%,其中阳性结果测序鉴定与快速分群方法结论一致。结论该方法成本低、检测快速、分群准确,具有良好重复性,适用于贝类中GⅠ、GⅡ诺如病毒的快速检测与分群。     

舟山海岛地区新重组GII.P16-GII.2型诺如病毒基因特征分析

目的 对舟山市海岛地区2017年4起诺如病毒暴发疫情进行型别鉴定及分子特征研究。方法 对舟山市县区暴发疫情所在地上送的40份急性胃肠炎病例样本,采用荧光PCR筛查病原体,常规RT-PCR扩增诺如病毒聚合酶及衣壳蛋白区基因序列,并进行分子特征分析。结果 27份样本筛查为诺如病毒GII型阳性,经基因序列分子特征分析,证实本轮暴发疫情由新重组GII.P16-GII.2型诺如病毒所引起,重组位点位于ORF1-ORF2连接区处1 120-1 122 bp,并分别与同处沿海地区江苏省,北京市2016年报道的GII.P16及GII.2型毒株同源性最高;对其中1例样本近乎完整的聚合酶区及衣壳蛋白区氨基酸序列与代表株相比对,发现2016-2017年GII.P16型c簇中聚合酶区5个特异位点发生变异。结论 本次为舟山市海岛地区首次检测出诺如病毒重组株GIIP.16-GII.2型,并引起急性胃肠炎暴发,在今后的监测工作中应同时开展诺如病毒的聚合酶区及衣壳蛋白区的序列检测,及时识别新出现的变异株,为本区域诺如病毒的防控提供依据。     

索磷布韦和维帕他韦联合利巴韦林治疗基因2、3型慢性丙型肝炎患者近期疗效和耐受性观察*

目的 研究应用索磷布韦/维帕他韦联合利巴韦林治疗基因2、3型慢性丙型肝炎(CHC)患者的近期疗效及耐受性。方法 2018年6月～2019年4月收治的58例基因2、3型CHC患者,采用抽签随机法分为两组,每组29例。给予对照组利巴韦林联合干扰素α-2b治疗,观察组接受索磷布韦/维帕他韦联合利巴韦林治疗,两组均持续治疗3个月。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清HCV RNA载量,采用基因芯片法检测HCV基因分型。结果 观察组快速病毒学应答(RVR)和早期病毒学应答(EVR)率分别为72.4%和89.7%,显著高于对照组的44.8%和65.5%(P＜0.05);在治疗4周末,观察组外周血白细胞计数为(5.8±2.1)×10⁹/L,显著高于对照组【(3.7±1.9)×10⁹/L,P＜0.05】;在治疗12周结束时,观察组外周血白细胞和血小板计数分别为(3.4±0.4)×10⁹/L和(99.60±24.2)×10⁹/L,均显著高于对照组【分别为(2.9±0.9)×10⁹/L和(82.01±14.8)×10⁹/L,P＜0.05】;两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05),均未出现终止治疗情况。结论 应用索磷布韦/维帕他韦联合利巴韦林治疗基因2、3型CHC患者近期临床疗效确切,安全性较好,值得进一步观察。     

恒温扩增荧光检测技术在基层结核病实验室的应用价值

目的 探讨在基层结核病实验室采用恒温扩增荧光检测技术检测可疑肺结核患者痰标本诊断结核病的价值。 方法 搜集河南省4个项目点县级结核病实验室2014—2015年期间可疑肺结核患者的痰标本4242例,分别进行痰涂片、痰培养和恒温扩增荧光检测技术检测,比较恒温扩增荧光检测技术和传统痰涂片、痰培养方法的敏感度、特异度等。计数资料采用χ ²检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果 纳入的4242例患者中,痰涂片检出阳性者351例,阳性检出率为8.21%(351/4276);痰培养检出阳性者576例,阳性检出率为13.47%(576/4276);恒温扩增荧光检测技术检出阳性者733例,阳性检出率为17.14%(733/4276)。3种检测技术的阳性检出率比较,差异有统计学意义(χ ²=153.412,P<0.001)。以痰培养试验结果为标准,恒温扩增荧光检测技术的敏感度和特异度分别为86.81%(500/576)、93.64%(3433/3666);阳性预测值为68.21%(500/733),阴性预测值为97.83%(3433/3509),与痰培养有较高的一致性(Kappa值为0.722)。痰涂片检测的敏感度为57.29%(330/576),特异度为99.43%(3645/3666),阳性预测值为94.02%(330/351),阴性预测值为93.68%(3645/3891);Kappa值为0.679。痰涂片与恒温扩增荧光检测技术检测痰标本的敏感度比较,差异有统计学意义(χ ²=153.336,P<0.001)。 结论 恒温扩增荧光检测技术检测的敏感度和特异度均明显高于传统的痰涂片,且其具有检测快速、操作简便等优势,便于在我国基层结核病实验室中推广应用。     

RNA恒温扩增实时荧光检测技术对结核性胸腔积液的诊断价值

目的 探讨RNA恒温扩增实时荧光检测技术(simultaneous amplification and testing, SAT-TB)对结核性胸腔积液的诊断价值。方法 选取2014年6月至2016年6月聊城市传染病医院收治的有胸腔积液的患者210例作为研究对象,其中143例临床诊断为结核性胸膜炎,作为结核性胸膜炎组;其余67例患者作为对照组。应用涂片法、改良罗氏培养法、SAT-TB法检测研究对象胸腔积液标本,比较各检测方法的检测效能。结果 SAT-TB检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为36.36%(52/143)、98.51%(66/67)、98.11(52/53)、42.04%(66/157)。SAT-TB检测的敏感度明显高于涂片法[3.50%(5/143)]及罗氏培养法[20.28%(29/143)],差异均有统计学意义(χ ²=19.08,P=0.021;χ ²=9.12,P<0.01)。SAT-TB法检测完成时间为1~2h,罗氏培养法完成时间为6~8周。 结论 SAT-TB法能快速检测胸腔积液中的结核分枝杆菌,敏感度高于涂片法和罗氏培养法。     

参芪十一味颗粒治疗抗结核药物所致白细胞减少症的疗效

目的 评价参芪十一味颗粒治疗抗结核药物引起白细胞减少症的临床效果。方法 收集2015年9月至2017年2月河南省许昌市结核病防治所结核内科收治的规范抗结核药物治疗后引起白细胞减少症的初治肺结核患者158例,按照随机数字表法将患者分为单一服用参芪十一味颗粒治疗白细胞减少症组(简称“A组”,79例)和单一服用利可君片治疗组(简称“B组”,79例),疗程均为1个月。观察治疗1个月后两组患者白细胞减少症的改善有效率,以及治疗前后患者外周血白细胞计数(WBC)和白细胞减少症相关主要症状的改善情况,并记录两组患者药物不良反应的发生情况。结果 A组白细胞减少症改善总有效率[94.44%(68/72)]、外周血WBC值[(5.12±0.76)×10 ⁹/L]均明显高于B组[72.97%(54/74)和(4.09±1.02)×10 ⁹/L](χ ²=10.14,P=0.021;t=4.38,P=0.017);治疗后A组和B组外周血WBC值均明显高于治疗前 [(3.26±1.02)×10 ⁹/L和(3.18±0.82)×10 ⁹/L] (t=5.79,P=0.010;t=4.15,P=0.018)。治疗后A组和B组患者的头晕[8.33%(6/72),9.46%(7/74)]、低热[2.78%(2/72),2.70%(2/74)]、乏力[5.56%(4/72),4.05%(3/74)]等主要症状较治疗前[27.78%(20/72),28.38%(21/74); 15.28%(11/72),16.22%(12/74);40.28%(29/72),41.89%(31/74)]均有明显改善 (χ ²=12.34,P=0.008;χ ²=12.09,P=0.008; χ ²=8.83,P=0.011;χ ²=8.16,P=0.010; χ ²=17.26,P=0.020;χ ²=18.09,P=0.020);但两组患者间治疗后的头晕、低热、乏力等主要症状的改善情况,差异均无统计学意义(χ ²=1.43,P=0.437;χ ²=2.62,P=0.406; χ ²=1.95,P=0.410)。A组患者药物不良反应的发生率[83.33%(60/72)]与B组患者[86.49%(64/74)]比较,差异无统计学意义(χ ²=3.03, P=0.382)。 结论 参芪十一味颗粒可有效改善抗结核药物所致的白细胞减少症,减少白细胞减少引起的症状,安全性较高,有较好的临床效果。     

实时荧光环介导等温扩增技术检测土壤中的类鼻疽伯克霍尔德菌

目的 结合荧光染料EvaGreen与环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)探索快速检测类鼻疽伯克霍尔德菌的可行性。方法 根据类鼻疽伯克霍尔德菌filc基因片段设计了LAMP引物,利用荧光染料EvaGreen建立实时荧光环介导等温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification,RealAmp),优化反应条件,扩增产物经电泳鉴定。通过类鼻疽伯克霍尔德菌和其他致病菌验证特异性,比较RealAmp与普通LAMP技术的敏感度,并测定人工污染土壤模拟样本的检出限。结果 恒温63 ℃条件下,20~60 min即可完成RealAmp检测;利用该方法检测类鼻疽伯克霍尔德菌为阳性,其余致病菌如鼠疫杆菌、布鲁氏杆菌、大肠杆菌等13株参考菌株及蜱虫的DNA(含大量假单胞菌属细菌)呈扩增阴性;RealAmp技术检测类鼻疽伯克霍尔德菌核酸的灵敏度为10² CFU/mL,检测克隆株质粒的灵敏度可达10¹ copies/μL,比普通LAMP技术的灵敏度高10倍;人工污染土壤模拟样本RealAmp的检出限为4.4×10¹ CFU/g,且20 min左右即可判定结果;直接检测24份浓度为4.4×10¹ CFU/g~4.4×10⁸ CFU/g的类鼻疽伯克霍尔德菌人工污染土壤样本,在检出限以上,检出率同荧光定量PCR一致。结论 该方法特异性强、灵敏度高,且可实时监测类鼻疽伯克霍尔德菌,有望成为快速检测类鼻疽伯克霍尔德菌的有效方法,增强抵御生物恐怖战争的能力。     

三种快速检测技术诊断早期结核性脑膜炎的评价

目的 评价3种快速检测技术在早期结核性脑膜炎诊断中的应用价值。方法 采用离心涂片抗酸染色法、改良抗酸染色法、GeneXpert MTB/RIF技术(简称“GeneXpert技术”)对2016年8月至2018年6月河北省胸科医院和石家庄市第五医院收治的根据临床表现、影像学及实验室检查等临床确诊的45例结核性脑膜炎、42例非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本进行分枝杆菌检测,并对结果进行分析。采用SPSS 19.0软件进行统计学分析,率的比较采用χ ²检验、校正χ ²检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 以临床诊断为标准,45例结核性脑膜炎患者脑脊液分别应用离心涂片抗酸染色法、改良抗酸染色法、GeneXpert技术检测分枝杆菌的敏感度分别为4.44%(2/45)、88.89%(40/45)、35.56%(16/45);依次两两比较,差异均有统计学意义(χ ²值分别为64.46、13.16、27.23,P值均=0.000)。42例非结核性脑膜炎患者的脑脊液用离心涂片抗酸染色法、改良抗酸染色法、GeneXpert技术检测分枝杆菌均为阴性。3种检测技术检测分枝杆菌的特异度均为100.00%。结论 改良抗酸染色法较离心涂片法及GeneXpert技术检测分枝杆菌阳性率高,具有较好的确诊结核性脑膜炎的价值。     

肺结核及肺外结核患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义

目的 探讨肺外结核患者外周血CD3 ⁺、CD4 ⁺、CD8 ⁺T淋巴细胞亚群及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值的变化及其临床意义方法 搜集2017年11月至2019年1月在成都市公共卫生临床医疗中心结核病区住院的147例患者(包括63例单纯肺结核、60例肺结核并发肺外结核和24例单纯肺外结核患者,分别为肺结核组、肺结核并发肺外结核组和肺外结核组)作为研究对象。采用流式细胞仪及四色淋巴细胞亚群检测试剂盒检测纳入的各组患者外周血CD3 ⁺、CD4 ⁺、CD8 ⁺T淋巴细胞的绝对计数及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值,分析上述各组患者外周血T淋巴细胞亚群的差异。结果 肺结核并发肺外结核患者外周血CD3 ⁺和CD4 ⁺T淋巴细胞计数分别为596.000(377.500,823.250)个/μl和347.500(214.000,479.250)个/μl,均低于单纯肺结核患者的698.000(572.000,904.000)个/μl和409.000(311.000,545.000)个/μl,差异均有统计学意义(Z=-2.507,P=0.012;Z=-2.431,P=0.015)。肺结核并发肺外结核患者的CD8 ⁺T淋巴细胞计数与CD4 ⁺/CD8 ⁺比值分别为195.500(137.250,278.750)个/μl和1.670(1.258,2.273),较肺结核患者的244.000(154.000,317.000)个/μl和1.770(1.290,2.350)降低,但差异均无统计学意义(Z=-1.892,P=0.058;Z=-0.546,P=0.585)。单纯肺外结核患者外周血CD3 ⁺和CD4 ⁺ T淋巴细胞计数分别为551.500(283.750,949.000)个/μl和295.500(134.250,461.750)个/μl,低于单纯肺结核患者的698.000(572.000,904.000)个/μl和409.000(311.000,545.000)个/μl,差异均有统计学意义(Z=-2.089,P=0.037;Z=-2.460,P=0.014);单纯肺外结核患者外周血的CD8 ⁺T淋巴细胞计数[185.000(92.000,366.250)个/μl]及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值[1.455(1.018,2.128)]与单纯肺结核患者[分别为244.000(154.000,317.000)个/μl和1.770(1.290,2.350)]相比,差异均无统计学意义(Z=-1.315,P=0.188;Z=-1.429,P=0.153)。结论 随着肺结核患者外周血CD3 ⁺、CD4 ⁺ T淋巴细胞计数的逐步降低,结核分枝杆菌可能更易播散至肺外;外周血CD8 ⁺T淋巴细胞计数及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值在肺外结核发生机制中的作用尚需进一步探讨。     

细粒棘球绦虫TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

目的 为建立高效、特异的细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)检测方法。方法 本研究设计了一组基于Eg线粒体基因的特异性引物和TaqMan探针,通过反应体系及条件的优化,建立了Eg荧光定量PCR检测方法。结果 该方法线性关系好,灵敏度高,在10⁹~10²拷贝/μL相关系数达0.998,灵敏度达10²拷贝/L;在特异性试验中,与其他病原虫株无交叉反应,特异性较好;重复性试验变异系数均低于3%。应用该方法对50份临床样品进行检测,发现6份为Eg感染阳性。结论 由此可见,建立的荧光定量PCR方法可快速、灵敏、特异地检测细粒棘球绦虫,具有一定的实际应用价值。     

No association between histo-blood group antigens and susceptibility to clinical infections with genogroup II norovirus

Noroviruses (NoVs) are a leading cause of viral gastroenteritis in humans. In the present study, the association between NoV susceptibility and the ABO histo-blood group was studied during 2 outbreaks of acute gastroenteritis in military units in Israel caused by genogroup II (GII) NoVs. The findings demonstrate that, unlike for genogroup I of NoV, there is no association between the ABO histo-blood group and clinical infection with GII NoVs. This is the largest study to test the association between NoVs, proven clinical infection with GII, and the ABO histo-blood group.     

Noroviruses in oysters from local markets and oyster farms in southern Thailand

One hundred and eighteen oyster samples collected from local markets and oyster farms in southern Thailand were examined for noroviruses (NoVs) and bacterial indicators of fecal contamination (fecal coliforms and Escherichia coli). Using a virus concentration procedure followed by RT-nested PCR, NoVs were detected in 38% of the samples. Oysters collected from oyster farms were found with NoVs at a higher detection rate (25/53 samples) than oysters from local markets (20/65 samples). Of the 45 NoV-positive oyster samples, 67% belonged to NoV genogroup I (GI), 15% to GII, and 18% to both GI and GII. DNA sequencing showed that 2 NoVs belonged to NoV GI-2 genotype. Fecal coliforms in NoV-positive oyster samples were in the range of < 3.0 to 1.5 x 10(4) most probable number (MPN)/g and 33% of NoV-positive oyster samples contained fecal coliforms within the standard acceptable level of raw shellfish (< 20 MPN/g). E. coli was found in the range of < 3.0 to 1.5 x 10(4) MPN/g and 9% of NoV-positive oyster samples were within acceptable levels of E. coli contamination (< 3 MPN/g). These findings indicate that NoV contamination in oysters obtained from both markets and oyster farms might pose a potential risk of acute gastroenteritis associated with raw oyster consumption. Examination for both fecal bacterial indicators and enteric viruses should be conducted for microbiological food safety of shellfish.     

缺少医疗服务肺结核病人的经济地理因素分析

目的分析影响新涂阳结核病人中缺少医疗服务病人比例和经济地理因素,并提出了相应干预措施意见,以减少缺少医疗服务病人的比例。方法通过问卷调查获得36个县缺少医疗服务病人比例,同时与人均GDP、结防机构医疗服务半径、地形特征分别进行卡方检验分析。结果不同人均GDP的各组中缺少医疗服务病人比例构成无显著性差异(χ²=1,P＞0.2)。不同医疗服务半径的各组中其缺少医疗服务病人比构成有显著性差异(χ²=8.236,P＜0.002);30 km以上组比25～30 km组其缺少医疗服务病人比例高(χ²=7.063,P＜0.05);30 km以上组比小于25km组其缺少医疗服务病人比例高(χ²=7.469,P＜0.05)。不同地形的3组中其缺少医疗服务病人比例的构成有显著性差异(χ²=8.800,P＜0.001);山区组比丘陵组其缺少医疗服务病人比例高(χ²=6.085,P＜0.05);山区组比平原组其缺少医疗服务病人比例高(χ²=4.5,P＜0.05)。结论不同人均GDP的地区其缺少医疗服务比例之间没有差异;医疗服务半径越大的地区其缺少医疗服务病人比例越大;缺少医疗服务病人比例山区组高于丘陵组和平原组。在现有各项活动资金得到保障的前提下,适当给予病人一定的激励。首先考虑面积大,山区等交通不便的地区,其次再考虑经济人口等别的因素。     

CT引导下经皮肺穿刺活检术诊断菌阴肺结核的应用研究

目的 分析CT引导下经皮肺穿刺活检术诊断菌阴肺结核时取材部位的病灶形态、密度与诊断阳性率的关系,以提高菌阴肺结核的诊断准确率。方法 搜集首都医科大学附属北京胸科医院2017年1—12月收治的103例经穿刺活检病理证实或临床试验性治疗确诊的菌阴肺结核患者,回顾性分析经CT引导下穿刺活检时各类病灶CT征象与诊断阳性率之间的关系。统计学处理采用IBM SPSS 24.0 软件,计数资料的比较采用χ ²检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果 (1)病变形态:磨玻璃样影穿刺活检阳性率33.33%(1/3)。结节、实变、空洞、团块病灶穿刺活检阳性率分别为91.67%(33/36)、94.74%(18/19)、100.00%(21/21)、75.00%(18/24),该4种形态病灶穿刺活检阳性率差异有统计学意义(χ ²=8.918,P=0.030);两两比较,结节组与实变组、空洞组、团块组比较(χ ²=0.174,P=0.677;χ ²=1.847,P=0.174;χ ²=3.137,P=0.077),实变组与空洞组、团块组比较(χ ²=1.134,P=0.287;χ ²=3.031,P=0.082),空洞组与团块组比较(χ ²=8.058,P=0.014)。差异无统计学意义。(2)病变密度:纵隔窗不可测量组3例,病灶穿刺活检阳性率33.33%(1/3)。0~20HU无强化组、>20HU无强化或强化不明显组、>20HU且强化明显组的穿刺活检阳性率分别为96.88%(31/32)、94.34%(50/53)、60.00%(9/15),差异有统计学意义(χ ²=17.790,P=0.000)。该3种密度病灶穿刺阳性率两两比较, 0~20HU无强化与>20HU且强化明显组比较,差异有统计学意义(χ ²=10.956,P=0.001)。>20HU无强化或强化不明显组与>20HU且强化明显组比较,差异有统计学意义(χ ²=12.005,P=0.001)。0~20HU无强化与>20HU无强化或强化不明显组比较差异无统计学意义(χ ²=0.286,P=0.593)。(3)病理检测:HE染色阳性33例、抗酸染色阳性87例、TB-DNA检测阳性91例, HE染色阳性率32.04%(33/103)、抗酸染色阳性率84.47%(87/103)、TB-DNA检测阳性率88.35%(91/103)比较,差异有统计学意义(χ ²=94.084,P=0.001)。 结论 CT引导下经皮肺穿刺活检术对菌阴肺结核诊断具有重要价值,正确选择取材病灶的形态、密度进行穿刺能够提高穿刺活检的阳性率。     

非结核分枝杆菌肺病和活动性肺结核的高分辨率CT表现异同性分析

目的 探讨非结核分枝杆菌肺病和活动性继发性肺结核的高分辨率CT(HRCT)表现异同性。方法 回顾性分析2012年1月至2017年12月首都医科大学附属北京胸科医院住院并经临床及实验室检查确诊为非结核分枝杆菌肺病患者74例(NTM肺病组)和初治活动性继发性肺结核患者100例(肺结核组)的HRCT表现,比较两组病变分布及HRCT表现。采用SPSS 17.0软件进行统计学分析,计数资料采用χ ²检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 两组患者CT分型比较,NTM肺病组结节-支气管扩张型(51.4%,38/74)多于肺结核组(14.0%,14/100),两组比较差异有统计学意义(χ ²=28.316, P=0.000);肺结核组结节-肿块型(21.0%,21/100)多于NTM肺病组(8.1%,6/74),差异有统计学意义(χ ²=5.392,P=0.020)。肺结核组病变分布优势部位位于上叶者(82.0%,82/100)明显多于NTM肺病组(59.5%,44/74),差异有统计学意义(χ ²=10.817,P=0.001); NTM肺病组优势部位位于中叶和(或)舌叶者(16.2%,12/74)较肺结核组(5.0%,5/100)患者多见,差异有统计学意义(χ ²=6.069,P=0.014)。比较HRCT表现,肺结核组支气管扩张的发生率(61.0%,61/100)较NTM肺病组(93.2%,69/74)低,差异有统计学意义(χ ²=23.403,P=0.000);且NTM肺病组支气管扩张分布优势部位位于中叶和(或)舌叶者(39.1%,27/69)多于肺结核组(13.1%,8/61),差异有统计学意义(χ ²=11.138,P=0.001);而肺结核组分布优势部位位于上叶者(70.5%,43/61)多于NTM肺病组(39.1%,27/69),差异有统计学意义(χ ²=12.813,P=0.000);肺结核组实变影(86.0%,86/100)较NTM肺病组(67.6%,50/74)多,差异有统计学意义(χ ²=8.465,P=0.004)。NTM肺病组空洞位于肺周边邻近胸膜增厚者(95.1%,39/41)较肺结核组(61.8%,42/68)多,差异有统计学意义(χ ²=14.909,P=0.000)。NTM肺病组中结节<1cm者(88.5%,54/61)较肺结核组(54.9%,50/91)多见,差异有统计学意义(χ ²=19.059,P=0.000);肺结核组中多种大小不等的结节混合存在者(31.9%,29/91)较NTM肺病组(8.2%,5/61)多见,差异有统计学意义(χ ²=11.784,P=0.001)。肺结核组并发胸腔积液(34.0%,34/100)较NTM肺病组(20.3%,15/74)多见,差异有统计学意义(χ ²=3.963, P=0.047)。 结论 NTM肺病和肺结核HRCT表现有一定的相似性及相异性。CT分型、支气管扩张的分布及优势部位、实变的发生率、结节的大小对鉴别诊断有意义,紧密结合临床有助于诊断。     

交叉引物恒温扩增技术检测创伤弧菌的应用研究

目的 建立一种快速检测创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的交叉引物恒温扩增(cross priming amplification,CPA)技术。方法 针对创伤弧菌vvhA基因序列保守区域设计CPA引物和探针,并优化反应体系和反应条件,同时验证方法的灵敏度和特异性。结果 对创伤弧菌的检测具有高度特异性;对创伤弧菌菌液检测的灵敏度达到了1.28×10³ CFU /mL,此法 40～60 min 内即可完成检测。利用CPA法针对本实验室前期研究的CB型、EA型、CAB型、CA型和EB型等亚型创伤弧菌毒株计算特异性和敏感性,5种亚型中除了CB亚型特异性和敏感性为95.65%和100%,其余亚型特异性和敏感性均为100%。结论 本研究建立的CPA法具有较高的特异性和灵敏性,可有效缩短检验时间提高检验效率。     

聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林标准抗病毒治疗慢性丙型肝炎患者疗效再研究*

目的 分析比较应用聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林(RBV)抗病毒治疗慢性丙型肝炎(CHC)患者的疗效。方法 2017年2月～2020年4月我院收治的102例CHC患者,采用随机数字表法将其分为对照组50例和观察组52例,分别给予利巴韦林(RBV)联合普通α-2b干扰素治疗或应用RBV联合聚乙二醇干扰素α-2a治疗6个月。采用实时荧光定量PCR法检测血清HCV RNA载量,使用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群。结果 观察组治疗结束时病毒学应答率(ETVR)为88.5%,显著高于对照组的62.0%(P＜0.05),持续病毒学应答率(SVR)为82.7%,显著高于对照组的62.0%(P＜0.05);在治疗结束时,观察组血清ALT水平为(36.8±4.1)U/L,显著低于对照组【(61.5±4.3)U/L,P＜0.05】,血清AST水平为(38.4±3.4)U/L,显著低于对照组【(51.6±3.6)U/L,P＜0.05】;在治疗4 w、12 w和24 w,观察组血清HCV RNA水平分别为(4.6±1.2)Ig IU/mL、(4.1±1.1)Ig IU/mL和 (3.6±0.9)Ig IU/mL,显著低于对照组【分别为(5.1±1.1)Ig IU/mL、(4.7±1.2)Ig IU/mL和(4.2±1.0)Ig IU/mL,P＜0.05】;在治疗结束时,观察组外周血CD3⁺细胞百分比为(73.8±7.5)%,显著高于对照组【(65.6±6.9)%,P＜0.05】,CD4⁺细胞百分比为(49.5±6.3)%,显著高于对照组【(34.8±5.8)%,P＜0.05】,而CD8⁺细胞百分比为(17.6±3.8)%,显著低于对照组【(25.9±4.6)%,P＜0.05】,CD4⁺/CD8⁺细胞比值为(1.0±0.2),显著低于对照组【(1.4±0.3),P＜0.05】。结论 应用聚乙二醇干扰素α-2a联合RBV抗病毒治疗CHC患者疗效尚可,在不能应用直接抗病毒药物的情况下继续应用标准疗法仍可获得一定的抗病毒治疗效果。     

皖南地区HLA-Brs34933313基因多态性与肾综合征出血热的相关性分析

目的 探讨皖南地区汉族人群HLA-B基因单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP)rs34933313与肾综合征出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)的相关性。方法 采集HFRS患者14例(病例组)和健康组50例(对照组)新鲜血样,提取基因组DNA,通过等位基因特异引物-聚合酶链反应(ASP-PCR)对HLA-B基因位点分型,应用SPSS22.0统计分析其等位基因及基因型两组间的差异。结果 HLA-B基因rs34933313位点受试人群分布符合哈迪-温伯格(Hardy-Weinberg,H-W)遗传平衡,两组等位基因G、C(χ²=4.38,OR=2.45,P=0.04)和基因型GG、GC、CC(χ²=6.47,P=0.04)频率分布差异均有统计学意义;病例组中C等位基因的分布频率高于G等位基因,且携带C等位基因罹患HFRS的概率是G等位基因的2.45倍;亚组分析发现 HLA-B基因rs34933313位点在显性遗传模型下(χ²=6.45,P=0.01,OR=10.21,95%CI=1.24~84.18)与HFRS发病风险具有相关。结论 皖南地区汉族人群HLA-B基因rs34933313位点与HFRS发病风险存在相关性,且携带C等位基因者会提高HFRS的发生风险。     

Correlation analysis between clinical characteristics and flow cytometry cells subsets in peripheral blood of patients with pulmonary tuberculosis

目的 了解肺结核患者临床特征与外周血流式细胞亚群[T淋巴细胞亚群及自然杀伤 (NK)细胞]的相关性。方法 连续性收集2019年1月1日至5月25日期间同济大学附属上海市肺科医院肺结核住院患者1000例的临床资料进行回顾性分析。将患者各临床特征数据与外周血流式细胞亚群的检测值采用Eviews 8.0软件分别建立多元线性逐步回归模型,以明确各临床特征与外周血流式细胞亚群的检测值之间的相关性。结果 (1)肺结核患者的肺部病灶范围及呼吸道标本抗酸染色涂片结果与CD3⁺T细胞表达有关:肺部病灶范围越大、呼吸道标本抗酸染色涂片阳性程度越高,CD3⁺ T细胞数量越低(回归系数分别为-0.255、-0.499, P值分别为0.021、0.027)。(2)患者的年龄、性别、结核分子生物学检测结果与CD4⁺ T细胞表达有关: 0~<20岁年龄段患者CD4⁺ T细胞数量低于其他年龄段患者(回归系数-4.710,P=0.031);男性CD4⁺ T细胞数量低于女性患者(回归系数-2.150, P=0.001);分子生物学检测阳性的患者CD4⁺ T细胞数量高于检测阴性的患者(回归系数1.433, P=0.030)。(3)初治患者CD8⁺ T细胞数量高于复治患者(回归系数1.247, P=0.029);呼吸道标本抗酸染色涂片阳性程度越高CD8⁺ T细胞数量越高(回归系数0.442, P=0.033)。(4)并发肺外结核者的NK细胞低于未并发肺外结核者(回归系数0.375, P=0.030)。结论 肺结核患者的肺部病灶累及范围、呼吸道标本抗酸染色阳性与外周血流式细胞亚群CD3⁺ T细胞具有相关性;年龄、性别、结核分子生物学检测结果与CD4⁺ T细胞具有相关性;是否初治、呼吸道标本抗酸染色阳性与CD8⁺ T细胞具有相关性;是否并发肺外结核与NK细胞表达水平具有相关性。