人粪便中波形蛋白基因甲基化在结直肠癌早期诊断中的意义

目的 分析结直肠癌患者粪便中波形蛋白基因甲基化状态,探讨其作为结直肠癌早期诊断分子标志物的可行性和临床意义.方法 从郑州大学第一附属医院收治的60例结直肠癌患者、门诊行结肠镜检查的17例结直肠腺瘤患者及30名正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法分析其波形蛋白基因甲基化状态.结果 60例结直肠癌患者粪便中波形蛋白基因甲基化阳性率为51.67％(31/60),17例结直肠腺瘤患者粪便中波形蛋白基因甲基化阳性率为4/17,30名正常对照中无一例检测到波形蛋白基因甲基化.结论 粪便中波形蛋白基因甲基化是结直肠癌进展过程中的早期事件,粪便中波形蛋白基因甲基化分析有望成为结直肠癌早期诊断的标志物之一.     

人粪便中OSMR和TFPI2基因甲基化在结直肠癌诊断中的意义

目的:探讨检测人粪便中抑瘤素M型受体(OSMR)基因和组织因子途径抑制子2(TFPI2)基因甲基化对于结直肠癌及腺瘤诊断的可行性及临床意义.方法:从60例结直肠癌患者和17例腺瘤患者及30名正常对照者的粪便中分别提取DNA,应用甲基化特异性PCR方法检测人粪便中OSMR和TFPI2基因的甲基化状态.结果:结直肠癌患者粪便中OSMR及TFPI2基因甲基化检出率分别高于腺瘤患者和正常对照者[OSMR:35%(21/60)vs12%(2/17),7%(2/30);TFPI2:70%(42/60)vs18%(3/17),3%(1/30);均P<0.01].二者联合检测甲基化检出率为81.7%(49/60),特异性90%.结论:检测粪便中OSMR和TFPI2基因甲基化在结直肠癌诊断和筛查中有潜在的应用价值.     

粪便Vimentin和SFRP2甲基化在结直肠癌筛查中的作用

目的探讨粪便中Vimentin和SFRP2甲基化状态在结直肠癌筛查中的价值。方法收集患者合格的粪便标本69例,其中结直肠癌23例、进展期腺瘤24例和健康人群22名,采用甲基化特异性PCR技术分析Vimentin和SFRP2甲基化状态,并与单个基因甲基化和粪便免疫隐血试验(FIT)的检测性能相比较,评价其在结直肠癌筛查中的灵敏度和特异度。结果结直肠癌组中单个Vimentin和SFRP2甲基化检出率分别为82.6%和69.6%,进展期腺瘤组为62.5%和41.7%,正常对照组为13.6%和13.6%。Vimentin和SFRP2联合检测在结直肠癌组的灵敏度为87.0%,高于FIT的56.5%(χ~2=5.25,P0.05),与单基因检测比较,差异无统计学意义(P0.05)。进展期腺瘤组中,联合检测的灵敏度为70.8%,高于SFRP2的41.7%(χ~2=4.15,P0.05)和FIT的29.2%(χ~2=8.33,P0.01),与Vimentin检测比较差异无统计学意义(P0.05)。正常对照组联合检测的特异度为86.4%,与单基因检测相同,与FIT(72.7%)比较,差异无统计学意义(P0.05)。联合检测在管状腺瘤中检出率为92.3%,高于SFRP2的53.8%(χ~2=4.9,P0.05),与Vimentin(76.9%)比较,差异无统计学意义(P0.05),在绒毛状管状腺瘤和管状腺瘤/绒毛状管状腺瘤中检出率与Vimentin相同,与SFRP2比较,差异无统计学意义(P0.05)。联合检测在伴有上皮内瘤变中的检出率与单基因检测差异均无统计学意义(P0.05)。结论粪便中联合Vimentin和SFRP2检测优于单基因及FIT检测,在结直肠癌筛查中具有潜在的应用价值。     

粪便DNA中MGMT、XAF1基因启动子甲基化联合检测在结直肠癌筛查中的应用研究

目的使用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测粪便DNA中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)基因启动子甲基化情况,并探讨其在结直肠肿瘤诊断中的意义。方法收集40例结直肠腺癌、40例腺瘤性息肉、52例正常对照住院患者粪便标本,使用试剂盒提取其粪便中肠道脱离细胞DNA,通过MSP方法检测其MGMT、XAF1基因启动子甲基化情况。结果 MGMT、XAF1基因启动子甲基化在结直肠腺癌中的阳性率分别为50.0%、55.9%;在腺瘤性息肉中的阳性率分别为42.1%、52.6%;二者联合检测在结直肠腺癌及腺瘤性息肉中的阳性率分别为73.5%、68.4%;特异性为52.0%。结直肠腺癌患者粪便中粪便潜血阳性率为35.3%,CEA阳性率为35.3%。结论通过试剂盒提取粪便DNA具有较高成功率;粪便DNA中MGMT、XAF1基因启动子甲基化状态用于检测结直肠腺癌及腺瘤性息肉具有较高的敏感性。检测粪便基因甲基化有望成为CRC高风险人群筛查的一个重要途径。     

人粪便SFRP2基因甲基化分析对结直肠癌的诊断价值

目的探讨人粪便中分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)基因甲基化分析用于结直肠癌(CRC)早期诊断的可行性。方法从87例结直肠癌或良性病变的患者及24例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)技术分析其SFRP2基因甲基化状态。结果CRC、腺瘤、增生性息肉和溃疡性结肠炎患者的SFRP2基因甲基化阳性率分别为94.2%(49/52)、52.4%(11/21)、37.5%(3/8)和16.7%(1/6)。1例正常对照SFRP2基因甲基化检测阳性。检测SFRP2基因甲基化诊断CRC及癌前病变的敏感性和特异性分别为90.5%和85.4%。结论SFRP2基因甲基化是CRC进展过程中的早期事件。粪便SFRP2基因甲基化分析可望成为CRC早期无创诊断或CRC高风险人群筛查的新途径。     

结直肠癌基因DNA甲基化标志物筛查的价值

结直肠癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,通过人群早期筛查和诊断结直肠癌是疾病防治的关键.近年来发现了一系列启动子高甲基化的相关基因,在结直肠癌的发生发展中发挥着重要的作用.多数在肿瘤组织中发生高甲基化基因的启动子片段在血液、粪便标本中同样被检测到.这些高甲基化基因对结直肠癌诊断的敏感性和特异性均明显优于传统筛查指标如血癌胚抗原和粪便潜血等.本文将重点介绍目前结直肠癌基因DNA甲基化标志物筛查的研究进展以及将来可能的研究方向.     

粪便基因甲基化分析对大肠癌的早期诊断价值

目的探讨人粪便中分泌型卷曲相关蛋白(SFRP2)及增生性息肉蛋白(HPP1)基因甲基化分析对患者大肠癌诊断的价值。方法从30例结直肠癌患者、30例结直肠腺瘤患者及30例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)技术分析其SFRP2及HPP1基因甲基化状态。结果大肠癌、腺瘤和正常对照组的SFRP2基因甲基化阳性率分别为66.6%(20/30)、50.0%(15/30)和3.3%(1/30)。大肠癌、腺瘤和正常对照组的HPP1基因甲基化阳性率分别63.3%(19/30)、43.3%(13/30)和6.6%(2/30)。结论 SFRP2和HPP1基因甲基化是大肠癌进展过程中的早期事件。粪便SFRP2和HPP1基因甲基化分析可望成为大肠癌早期无创诊断的新途径。     

粪便SDC2、TFPI2、SFRP2基因甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的临床价值

目的 探讨粪便SDC2、TFPI2、SFRP2基因甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的临床价值。方法 收集苏州大学附属第一医院2021年6月至2022年2月就诊患者105例，其中结直肠癌组患者30例，腺瘤组患者45例，健康对照者30名，采用荧光定量PCR法检测患者粪便SDC2、TFPI2、SFRP2的甲基化情况。分析粪便SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化及其三者联合检测诊断结直肠癌的敏感度及特异度，以病理结果为金标准，通过ROC曲线分析该检测方法对疾病的诊断效能。结果 结直肠癌组患者粪便SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化及其联合结直肠癌检测阳性率高于腺瘤组和正常对照组，且腺瘤组高于正常对照组。SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化及其联合检测结直肠癌的敏感度分别为46.7%、53.3%、66.7%、76.7%;特异度分别为96.7%、93.3%、96.7%、86.7%。ROC曲线分析显示粪便SDC2、SFRP2、TFPI2甲基化联合检测筛查结直肠癌的效能较高。结论 粪便SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化联合检测对结直肠癌早期筛查的诊断价值较高，具有重要意义。     

粪便中正大麻受体相关作用蛋白1和α-突触核蛋白基因甲基化联合检测在结直肠癌诊断中应用价值

[目的]探讨粪便中正大麻受体相关作用蛋白1和α-突触核蛋白基因甲基化联合检测在结直肠癌诊断中应用价值。[方法]收集我院2014年5月~2016年5月收治的结直肠癌患者、癌前病变患者以及健康志愿者各50例的清晨粪便标本,分别作为结直肠癌组、癌前病变组和健康对照组,做好标记后,应用巢式甲基化特异性PCR(nested methylation specific PCR,nMSP)技术对3组正大麻受体相关作用蛋白1(cannabinoid receptor interacting protein 1,CNRIPl)和α-突触核蛋白(synuclein-alpha,SNCA)基因甲基化状态进行检测、比较,并对比此种诊断方案和粪便隐血(feces occult blood test,FOBT)对结直肠癌组诊断的灵敏度和特异度、诊断准确度。[结果](1)结直肠癌组DNA的CNRIPl和SNCA基因启动子甲基化率分别为74.0%和60.0%,癌前病变组分别为50.0%和40.0%,正常对照组分别为8.0%和4.0%,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P0.05)。(2)经病理检查确诊的结直肠癌组50患者中,经粪便中CNRIPl和SNCA基因甲基化联合检测确诊43例,灵敏度及诊断准确度均为86.0%,特异度为0;经FOBT确诊16例,灵敏度及诊断准确度均为32.0%,特异度为0。2种检查手段在直肠癌诊断中的灵敏度及诊断准确度比较,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]粪便中CNRIPl和SNCA基因甲基化联合检测在结直肠癌诊断中具有较高的灵敏度和准确度,可作为结直肠癌及癌前病变筛查的理想方法,安全无创,应用价值高。     

实时荧光定量PCR和甲基化特异性PCR检测结直肠癌APC、MLH1基因甲基化状态

背景：启动子区甲基化致肿瘤抑制基因失活在结直肠癌的发生、发展中起重要作用,检测肿瘤相关基因的甲基化状态,可能为寻找新的结直肠癌诊断、预后相关标记物提供依据.目的：比较实时荧光定量PCR（FO-PCR）与甲基化特异性PCR（MSP）检测基因甲基化状态的差异.方法：以FQ-PCR检测66例结直肠癌组织和20例癌旁组织中与结直肠癌的发生、发展相关的抑癌基因APC和错配修复基因MLH1的甲基化状态,同时以MSP检测结直肠癌组织中APC基因的甲基化状态.结果：根据FQ-PCR结果,结直肠癌组织中APC、MLH1基因甲基化阳性率显著高于癌旁组织（48.5%和54.5%对0%和0%,P=0.000）.FQ-PCR和MSP可检出的甲基化阳性对照DNA最低浓度分别为0.015 ng/μl和1.5 ng/μl,两者对APC基因甲基化状态的检测结果差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：在DNA甲基化的检测手段中,FQ-PCR的敏感度优于MSP.