转化生长因子-β1对培养的人眼小梁细胞微丝肌动蛋白的影响

目的 了解转化生长因子－β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－β１,ＴＧＦ－β１）对培养的人眼小梁细胞微丝肌动蛋白的影响,探讨房水引流阻力在原发性开角型青光眼（ｐｒｉｍａｒｙｏｐｅｎａｎｇｌｅｇｌａｕｃｏｍａ,ＰＯＡＧ）的病因和发病机制中的作用。方法 小梁网来源于除眼部疾病患以外的各种原因死 ６岁以下儿童,在２３４ｈ内取材于３４例６７８只正常眼球,用各相对质量浓度的ＴＧＦ－β１有     

人眼小梁细胞体外表达表皮生长因子mRNA和表皮生长因子受体

目的 了解培养的小梁细胞分泌表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ＥＧＦ）及细胞膜上表皮生长因子受体（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＧＦＲ）的情况。方法 进行人眼小梁细胞体外培养。用ＥＧＦ ｃＤＡＮ探针,α＾－３２ｐ同位素标记及斑点杂交放射自显影法,检测小梁细胞分泌ＥＧＦｍＲＮＡ的情况。结果 人眼小梁细胞体外培养成功。免疫组化染色显示小     

生长因子对培养人眼视网膜色素上皮细胞增殖的调控作用

目的探讨生长因子对人眼视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞增殖的调控作用。方法建立人眼ＲＰＥ细胞培养体系，利用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和细胞计数观察表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ－ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂ－ＦＧＦ）、胰岛素样生长因子（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＩＧＦ－Ｉ）对培养ＲＰＥ细胞的作用。结果（１）ＥＧＦ，ｂ－ＦＧＦ，ＩＧＦ－Ⅰ与对照组比较，可明显增强人眼ＲＰＥ细胞ＤＮＡ合成６．６～１２．２倍，增强能力为ＥＧＦ＞ｂ－ＦＧＦ＞ＩＧＦ－Ⅰ。（２）当生长因子联合作用时，可数倍明显增强３Ｈ－ＴｄＲ掺入，能较单一因子更有效地刺激人眼ＲＰＥ增殖。结论结果提示，生长因子的协同作用可能是增殖性视网膜病变发生的重要机理之一。     

5－氟尿嘧啶对体外培养牛眼小梁细胞的毒性研究

目的探讨５－氟尿嘧啶（５－ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ，５－Ｆｕ）在临床应用中对小梁细胞的毒性损伤。方法在体外培养牛眼小梁细胞，从细胞的形态、结构、生存及吞噬功能等方面观察５－Ｆｕ对牛眼小梁细胞的影响。结果５－Ｆｕ对牛眼小梁细胞的安全浓度为１×１０－６ｇｍｌ－１。结论结合５－Ｆｕ在兔眼前房的药代动力学研究资料，推论目前在人眼应用的剂量，不致对小梁细胞造成损伤。     

表皮生长因子对牛眼小梁细胞c—fos基因表达的诱导

目的研究表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）对小梁细胞的作用。方法应用分子杂交技术研究ＥＧＦ对体外培养的牛眼小梁细胞ｃ－ｆｏｓ基因表达的诱导和３Ｈ胸腺核苷酸（３Ｈ－ｔｈｙｍｉｄｉｎｅｉｎｃｏｒｐａｒａｔｉｏｎ，３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法观察细胞ＤＮＡ的合成。结果小梁细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入率随着ＥＧＦ浓度不同而变化，浓度为２０～１５０ｎｇ／ｍｌ时，细胞掺入率随浓度增加升高（Ｐ＜０．０１）。与对照组相比，ＥＧＦ刺激停止生长的小梁细胞０．５小时后，ｃ－ｆｏｓ基因开始表达，１小时后达高峰，至２小时后消失。不同浓度ＥＧＦ刺激小梁细胞１小时后，ｃ－ｆｏｓ基因表达呈浓度依赖性。结论实验结果表明ＥＧＦ刺激小梁细胞增殖或进入生长状态，可能与ｃ－ｆｏｓ基因产物的信号传递作用有关。     

转移生长因子β1在牛眼小梁网的表达

目的研究转移生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１，ＴＧＦ－β１）与开角型青光眼的关系。方法用异硫氰酸胍法提取２４只新生牛眼小梁网的总ＲＮＡ，将ＴＧＦ－β３３质粒导入大肠杆菌ＨＢ１０１中充分扩增、ＢａｍＨＩ酶切后，片段以α－３２－Ｐ－ｄＡＴＰ标记成ｃＤＮＡ（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙＤＮＡ）探针，ＲＮＡ斑点杂交，放射自显影法观察和测定牛眼小梁网的ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达。结果牛眼小梁网中有ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达。结论房水中的部分ＴＧＦ－β１由小梁细胞分泌。此结果可以作为利用分子生物学手段研究ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的异常合成、活化、清除及与开角型青光眼病理改变间关系的基础。     

体外培养牛眼小梁细胞表达转化生长因子-β及其受体蛋白

从蛋白质水平了解体外培养牛眼小梁细胞是否表达转化生长因子β及其受体。方法采用Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ法对体外培养第３代牛眼小梁细胞进行ＴＧＦ－β１，ＴＧＦ－βＲ免疫组化的检测。结果小梁细胞ＴＧＦ－β，－β２和ＴＧＦ－βＲⅠ，ＲⅡ，ＲⅢ免疫组化染色的阳性信号分别位于胞浆内和胞膜上，阴性对照未见阳性信号。结论牛眼小梁细胞表达ＴＧＦ－β，ＴＧＦ－βＲ蛋白。较之猪眼小梁细胞，牛眼小梁细胞更适用于今后研究ＴＧ     

牛眼小梁网细胞蛋白多糖的生经测定及意义

目的 确定培养的牛眼小梁网细胞中细胞层和培养液中蛋白多糖（ｐｒｏｔｅｏｇｌｃａｎ,ＰＧ０单链的种类和构成比。方法 在第３代牛眼小梁网细胞层和培养液中分别掺入＾３Ｈ葡萄糖胺,用４ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍提取ＰＧ单链,依次行葡聚糖凝胶（ｓｅｐｈａｄｅｘ）Ｇ－５０、二乙氨乙基葡聚糖纤维素（ＤＥＡＥ－ｓｅｐｈａｃｅｌ）、经共价交联的琼脂糖凝胶（ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ）的柱层析、碱水解等,放射测量获得ＰＧ的     

转化生长因子-β2（TGF-β2）诱导人视网膜色素上皮层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达及意义

目的　探究转化生长因子-β２（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ-β２,ＴＧＦ-β２）诱导人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ,ＲＰＥ）层细胞上皮-间质转分化中ｍｉＲＮＡ-２９ｂ的表达变化及意义。方法　使用不同浓度ＴＧＦ-β２刺激ＲＰＥ细胞上皮-间质转分化后,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、ＲＴ-ＰＣＲ检测成纤维化相关分子纤维连接蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｏｎ,ＦＮ）、神经钙粘连蛋白（ｎｅｒｖｅｃａｌｃｉｕｍａｄｈｅｓｉｏｎｐｒｏ-ｔｅｉｎ,Ｎ-Ｃａｄｈｅｒｉｎ）的表达。采用ＲＴ-ＰＣＲ检测不同浓度ＴＧＦ-β２及不同时间ＴＧＦ-β２（５μｇ·Ｌ－１）刺激ＲＰＥ细胞后ｍｉＲＮＡ-２９ｂ的表达。结果　ＴＧＦ-β２刺激后的ＲＰＥ细胞形态呈纤维化改变。在一定浓度范围内（１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１）,随着ＴＧＦ-β２浓度的增加ＦＮ、Ｎ-Ｃａｄｈｅｒｉｎ及相应ｍＲＮＡ随之增加,１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１组与对照组（０μｇ·Ｌ－１）相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。ＴＧＦ-β２在一定浓度范围内（０μｇ·Ｌ－１、１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１）以剂量依赖的方式诱导ＲＰＥ细胞ｍｉＲＮＡ-２９ｂ表达的降低,１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１组与对照组（０μｇ·Ｌ－１）相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）,在ＴＧＦ-β２浓度为５μｇ·Ｌ－１时ｍｉＲＮＡ-２９ｂ表达量最低。ＴＧＦ-β２在一定时间范围内（０ｈ、３ｈ、６ｈ、１２ｈ）以时间依赖的方式诱导ＲＰＥ细胞ｍｉＲＮＡ-２９ｂ表达的降低,３ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ组与０ｈ相比差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　一定范围内ＴＧＦ-β２以剂量和时间依赖的方式诱导ＲＰＥ细胞ｍｉＲＮＡ-２９ｂ的表达,为进一步研究ｍｉＲＮＡ-２９ｂ与ＴＧＦ-β２在ＲＰＥ细胞上皮-间质转分化过程中的相互作用提供理论基础。     

体外培养的人眼小梁细胞的糖胺多糖生化分析和意义

目的测定培养的人眼小梁细胞糖胺多糖（ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ，ＧＡＧ）的构成比。方法在体外培养从无眼病尸体眼取得的小梁细胞（ｔｒａｂｅｃｕｌａｒｍｅｓｈｗｏｒｋｃｅｌ，ＴＭＣ），掺入氚标葡萄糖胺，再用生物化学方法测定细胞层及培养液中的糖胺多糖，包括依次酶降解、醋酸纤维电泳及液体闪烁放射活性测定等。结果共获得５种糖胺多糖，其构成比是透明质酸３０．５％、硫酸软骨素２１．７％、硫酸皮质素１４．９％、硫酸类肝素１９．２％、硫酸角质素５．４％及其他物质８．３％。结论此结果与直接从人眼小梁细胞组织所测得的糖胺多糖的构成比颇为接近，可为进一步研究各种因素对人眼小梁细胞糖胺多糖代谢的影响及开角青光眼的发病学提供基础。     

人眼小梁细胞体外培养与细胞鉴定

建立人眼小梁细胞体外培养方法和确定该细胞的鉴定要点。方法：小梁网和我巩膜组织来源于除眼部疾患以外各种原因死亡的６岁以下儿童，在２４小时内取材的３４人６８只正常眼球。组织块原代培养和细胞传代培养。用光镜和电镜观察培养细胞，用免疫组织细胞化学Ｓ－Ｐ法染色培养细胞的细胞外基质包括纤粘连蛋白，层粘连蛋白和Ⅳ型胶原。     

米非司酮对培养的人眼小梁细胞外纤维连接蛋白表达的影响

目的　探讨糖皮质激素受体拮抗剂米非司酮对培养的人眼小梁细胞外纤维连接蛋白(fibronectin ,FN)表达的影响。方法　按组织块培养法进行人眼 (8只眼 )小梁细胞体外培养 ,在传 3代的小梁细胞培养液中分别先后加入不同浓度的地塞米松和米非司酮 ,应用免疫组织化学联合计算机图像分析的方法 ,检测细胞外染色区域的吸光度 (A值 )。结果　根据培养细胞的生长特性和形态特征及细胞外基质染色特点等 ,确定培养的细胞为人眼小梁细胞。含有不同浓度地塞米松和米非司酮的小梁细胞培养组与对照组比较 ,FN变化所对应的A值排列顺序为 :1 0 - 6 mol/L地塞米松 (1 2d) >1 0 - 7mol/L地塞米松 (1 2d) >1 0 - 7mol/L地塞米松 (5d) >对照组≈ 1 0 - 7mol/L地塞米松 (5d) +1 0 - 8mol/L米非司酮 (7d)。结论　地塞米松能促进体外培养的人眼小梁细胞分泌与合成FN(A值升高 ) ,米非司酮可在受体水平拮抗并逐步逆转地塞米松引起的小梁细胞外FN的过度表达 (A值下降 )。糖皮质激素受体 (glucocorticoidrecepter,GR)拮抗剂米非司酮的降眼压作用尚有待在体内环境得到证实     

Proteins secreted by human trabecular cells. Glucocorticoid and other effects

The capacity of cultured human trabecular meshwork (HTM) cells to secrete an extracellular matrix was studied by indirect immunofluorescence. Synthesis of nine extracellular matrix (ECM) proteins known to be present in the normal trabecular meshwork was assessed in three HTM cell lines. Fourteen primary antibodies were used and cultures were labeled two and four weeks after confluence. The HTM cell lines showed consistent labelling patterns for the normal extracellular connective tissue constituents including collagens (types I, III, IV, V and VI), glycoproteins (laminin and fibronectin) and a basement membrane-associated proteoglycan. These antigens were localized to the basal cell surface in an extracellular reticular pattern corresponding to cell margins. Dextran addition at confluence helped to intensify the staining of these components, but ascorbate had no apparent effect. Interestingly, elastin, another normal component of the trabecular meshwork, was not identified under standard conditions, or after addition of ascorbate or dextran. However, elastin could be detected intracellularly following dexamethasone treatment for three days, and extracellularly in punctate deposits when this treatment was used for 1 or 2 weeks. Our findings indicate that HTM cells may be responsible for the secretion and maintenance of all the major ECM constituents of the trabecular meshwork. The elastin results suggest a possible mechanism contributing to obstruction of outflow in steroid glaucoma if increased amounts of elastin are also produced in vivo. This approach can also serve as a useful baseline for comparison with HTM cell lines treated with glaucoma medications or obtained from patients with glaucoma.     

Bone morphogenetic protein-7 is an antagonist of transforming growth factor-beta2 in human trabecular meshwork cells

PURPOSE: The increase in intraocular pressure in primary open-angle glaucoma (POAG) may involve transforming growth factor (TGF)-beta2 signaling, as TGF-beta2 is found in higher amounts than normal in the aqueous humor of patients with POAG. In vitro, TGF-beta2 causes an accumulation of extracellular matrix (ECM) in the trabecular meshwork (TM) and an increase in TM outflow resistance. The present study was undertaken to determine whether bone morphogenetic protein (BMP)-7 signaling antagonizes the effects of TGF-beta2 on TM cells. METHODS: Cultured TM cells from nine human donors were treated with BMP-7, TGF-beta2, or a combination of both for 24 or 72 hours. The expression of connective tissue growth factor (CTGF); thrombospondin (TSP)-1; fibronectin; collagen types I, III, and IV; plasminogen activator inhibitor (PAI)-1; and matrix metalloproteinase (MMP)-2 were analyzed by immunohistochemistry, real time RT-PCR, Western and Northern blot analysis, and zymography (MMP-2). RESULTS: Treatment with TGF-beta2 induced the expression of CTGF, TSP-1, fibronectin, collagen types IV and VI, and PAI-1. All these effects were inhibited when TGF-beta2 was added in combination with BMP-7, whereas BMP-7 alone had no effects. Treatment with TGF-beta2, BMP-7, or the combination of both had no effect on the expression of collagen types I and III. CONCLUSIONS: BMP-7 strongly antagonizes in vitro the TGF-beta-induced expression of a broad panel of molecules, which would result in an accumulation of TM ECM in situ. As BMP-7 is expressed in the adult human TM in situ, it seems reasonable to assume that it similarly modulates and antagonizes the effects of TGF-beta2 signaling on the tissues of the outflow pathways in vivo. The pharmacological modulation of BMP-7 signaling in the TM might be a promising strategy to treat POAG.     

转化生长因子β1对培养人眼小梁细胞分泌Ⅳ型胶原的影响

目的观察转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对培养人眼小梁细胞分泌Ⅳ型胶原的影响.方法在成功地培养人眼小粱细胞的基础上,应用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay ELISA)及免疫组织化学技术,分别观察1ng/ml TGF-β1作用于小梁细胞后培养上清液中及细胞铺片上Ⅳ型胶原的含量.结果ELISA法TGF-β1作用第一个4天,实验组Ⅳ型胶原的含量为187.50±29.01pg/ml(x±s),对照组为93.75±20.56pg/ml,两者间的差异有统计学意义.TGF-β1作用第二个4天,实验组为128.75±52.02 pg/ml,对照组为91.25±21.36pg/ml,差异无统计学意义.Ⅳ型胶原的含量在对照组之间及实验组之间也无统计学差异.免疫组化法TGF-β1作用12天,实验组铺片与对照组相比Ⅳ型胶原的阳性着色增强.结论TGF-β1可以促进培养的人眼小梁细胞分泌Ⅳ型胶原,它可能是原发性开角型青光眼患者小梁细胞外基质堆积的原因之一.眼科学报2000;16217～219.     

白细胞介素-1α对猪小梁细胞基质金属蛋白酶／基质金属蛋白酶抑制剂表达的影响

背景房水外流通路的阻塞或小梁网细胞外基质（ECM）的异常堆积导致房水流畅系数降低是引起眼压升高的原因之一,基质金属蛋白酶（MMPs）和组织金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）的平衡对ECM的代谢至关重要,白细胞介素-1α（IL-1α）可以通过调节MMPs的表达而调节房水的外流。目的研究猪重组IL-1α对体外培养的猪眼小梁细胞MMP-2、MMP-3及TIMP-1表达的影响。方法从猪眼取出带有小梁组织的巩膜,用组织块培养法培养小梁细胞并进行传代,第3代的猪小梁细胞应用纤维连接蛋白（FN）和层黏连蛋白（LM）进行鉴定。第3代小梁细胞血清饥饿培养24h后分为2组,对照组加入无血清培养基,IL组加入10m／L IL-1α,分别培养30min。采用细胞免疫化学法分析IL组MMP-2、MMP-3及TIMP-1蛋白在培养小梁细胞中的表达;采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测小梁细胞中MMP-2mRNA、MMP-3mRNA及TIMP-1 mRNA的表达,并与对照组的检测结果进行比较。结果传3代的细胞对FN和LM呈现阳性反应。与对照组比较,IL组小梁细胞中MMP-3和TIMP-1蛋白的表达量（A值）明显升高,差异均有统计学意义（t=-7．694、t=-5．199,P〈0．05）,但2组间小梁细胞中MMP-2表达的差异无统计学意义（t=-2．365,P〉0．05）。IL组小梁细胞中MMP-3mRNA和TIMP-1mRNA的表达量（A值）明显高于对照组,差异均有统计学意义（t=-3．025、t=-1．921,P〈0．05）,而2组间小梁细胞中MMP-2mRNA的表达差异无统计学意义（t=-1．173,P〉0．05）。结论外源性IL-1α能增加猪眼小梁细胞中MMP-3、TIMP-1的表达,引起MMP-3／TIMP-1平衡改变,促进小梁网ECM的分解,增加房水外流,而对MMP-2的表达无影响。     

白细胞介素-1β对人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3表达的影响

目的观察自细胞介素-1β（IL-1β）对体外培养的人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinases 3，MMP-3）表达的影响。方法采用组织块培养法对人眼小梁细胞（human trabecular ceils，HTCs）进行体外原代及传代培养，取传3代小梁细胞分别加入含有IL-1β终浓度为0ng／ml（对照组）、5、10、25、50ng／ml的无血清培养液，24h后采用RT-PCR法及ELISA法检测MMP-3量的变化。结果RT-PCR法检测IL-1β终浓度为5、10、25、50ng／ml实验组MMP-3／GAPDH的相对灰度比值分别为0．3437±0．0764、0．8588±0．0443、1．0079±0．0347、1．3466±0．0309，均高于对照组的相对灰度比值0．1037±0．0494，且各实验组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）；ELISA法检测IL-1β终浓度为5、10、25、50ng／ml实验组的MMP-33浓度值分别为（2．0325±0．2456）ng／ml、（2．4607±0．350）ng／ml、（2．8532±0．1392）ng／ml、（3．5858±0．1141）ng／ml，均高于对照组的浓度值（1．2437±0．3910）ng／ml，且各实验组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论IL-1β在一定范围内促进MMP-3的表达，并且呈现一定的剂量依赖性，推测IL-1β可以通过促进MMP-3的表达来减少小梁网组织细胞外基质（ECM）的堆积，使房水引流通畅，降低眼内压。     

The effect of TGF-beta2 on human trabecular meshwork extracellular proteolytic system

Our study aimed to investigate whether transforming growth factor-beta2 (TGF-beta2), increased in the aqueous humor of eyes with primary open angle glaucoma (POAG), can affect factors responsible for the activity of matrix metalloproteinases (MMPs) in human trabecular cell cultures. With this goal in mind cultures of human trabecular meshwork (hTM) cells derived from 8 donors were treated with TGF-beta2 for 24, 36 and 48 hr. Influence of TGF-beta2 on expression of MMP-2, MMP-9, membrane type 1-MMP (MT1-MMP) and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) was examined using RT-PCR, Northern Blot, Western Blot and zymography. The influence of TGF-beta2 treatment on PAI-1 expression was also investigated using immunohistochemistry. It appeared that treatment with TGF-beta2 significantly increased expression of the proform of MMP-2, whereas the active form was not detectable. MMP-9 and MT1-MMP expression were not influenced by TGF-beta2 treatment. There was, however, a significant increase in PAI-1 expression. To investigate whether transformation of the proform of MMP-2 to the active form was inhibited by PAI-1, the influence of treatment with TGF-beta2 and a PAI-1 neutralizing antibody on MMP-2 was investigated using zymogram method. With this treatment protocol the active form of MMP-2 was clearly visible, indicating that TGF-beta2 enhancement of the PAI-1-expression decreases MMP activity. Inhibition of MMP activity through elevated levels of TGF-beta2 might contribute to the increase in ECM in the trabecular meshwork of glaucomatous eyes.     

转化生长因子-β2对牛眼小梁细胞外基质合成的影响

目的观察人眼房水中转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2, TGF-β2)对体外培养牛眼小梁细胞外基质合成的影响.方法将体外培养的第3～5代牛眼小梁细胞分为对照组和实验组,实验各组分别经0.32×103 ng/L、1.00×103 ng/L、3.20×103 ng/L TGF-β2作用48 h后,分别应用3H-脯氨酸掺入及液体闪烁测量技术、酶联免疫吸附法和放射免疫技术检测小梁细胞胶原(collagen, CA)、纤维连接蛋白(fibronectin, FN)及透明质酸(hyaluronic acid, HA)的合成.结果与对照组相比,不同浓度的TGF-β2均可促进牛眼小梁细胞CA的合成.0.32×103 ng/L、1.00×103 ng/L TGF-β2组与对照组比较差异有显著意义(q′=3.85、4.38, P<0.05),3.20×103 ng/L TGF-β2组与对照组比较差异有非常显著意义(q′=11.40, P<0.01),3H-脯氨酸掺入量呈浓度依赖性增高;1.00×103 ng/L、3.20×103 ng/L TGF-β2组促进牛眼小梁细胞合成FN, 与对照组比较差异有显著意义(q′=3.63, P<0.05) 和非常显著意义(q′=20.10, P<0.01); 1.00×103 ng/L、3.20×103 ng/L TGF-β2组均抑制牛眼小梁细胞合成HA, 与对照组比较差异有非常显著意义(q′=15.15、16.92, P<0.01).结论 TGF-β2可能在正常人眼小梁网细胞外基质的增龄性变化及原发性开角型青光眼患者小梁网及其邻管组织内细胞外基质异常沉积的过程中发挥了重要作用.