碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β对人巩膜成纤维细胞的生长调控研究

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob-last growth factor,bFGF)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)对人巩膜成纤维细胞的生长调控,进一步明确bFGF和TGF-B影响近视的作用部位及可能机制.方法 取角膜移植后的3只健康供体眼球,分离培养巩膜成纤维细胞并建立细胞系.取第3～5代生长良好的细胞,在培养液中分别加入1 ng/ml、3 ng/ml、10 ng/ml、30 ng/ml、100ns/ml、300 ng/ml的bFGF以及0.1 ng/ml、0.3 ng/ml、1ng/ml、3 ng/ml、10 ng/ml、30 ns/mJ的TGF-β,两组均设空白对照.6 d后进行细胞计数.选用t-test进行统计分析.每株细胞重复3次,共重复3株细胞,观察bFGF和TGF-β对巩膜成纤维细胞的生长调控作用.结果 bFGF能明显促进人巩膜成纤维细胞的生长,随浓度增加呈明显剂量效应关系.bFGF大于10 ng/ml时(包括10 ng/ml),和无bFGF的正常培养液比较,差异具有显著性(P<0.05).TGF-β能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长,抑制细胞生长的作用亦呈明显的剂量效应关系.TGF-β大于0.3 ng/ml时(包括0.3 ng/ml),和无TGF-β的正常培养液比较,差异具有显著性(P<0.05).结论 本实验结果显示,bFGF对人巩膜成纤维细胞生长具有明显促进作用,而TGF-β则表现为明显抑制作用.进一步证实外源性bFGF和TGF-β可能作用于巩膜组织,并通过调控巩膜成纤维细胞的生长及巩膜细胞外基质合成代谢单独或协同作用参与巩膜重塑过程.     

与血管生成相关的生长因子及其受体在巩膜穿刺孔嵌顿组织内的表达

目的 了解玻璃体手术巩膜穿刺孔嵌顿的眼内组织是否表达了与血管生成相关的生长因子及其受体。 方法 在玻璃体手术中，共取10例从巩膜穿刺孔脱出的眼内组织。冰冻切片，用免疫组织化学方法检查血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)、血小板源性生长因子-A(platelet-derived growth factor-A, PDGF-A)、转化生长因子-β1(transforming growth factor, TGF-β1)及其受体。 结果 脱出的眼内组织包括：视网膜和玻璃体组织各3例、变性的红细胞2例，睫状体和纤维组织各1例。VEGF和bFGF及其受体在所有标本均为阳性，PDGF-A、TGF-β1及其受体仅在大部分标本阳性。阳性染色包括了视网膜的细胞、睫状体色素细胞和非色素细胞、纤维细胞和部分玻璃体内的细胞。 结论 嵌顿在巩膜穿刺孔的眼内组织表达了与血管生成相关的生长因子及其受体，可能会参与前段增殖性玻璃体视网膜病变发生发展。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 34-37)     

碱性成纤维细胞生长因子与转化生长因子β在近视眼巩膜中作用的研究进展

近视是世界最常见眼病之一,其发病机制尚不完全清楚。有研究发现,细胞生长因子与近视的发生发展密切相关,其中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）与转化生长因子β（TGF-β）作为关键的信号分子可以通过调控巩膜细胞外基质的合成与降解参与近视眼巩膜重塑,但具体转导途径和机制还不十分清楚。现就bFGF和TGF—β在近视眼巩膜中的表达及其调控巩膜重塑的可能机制进行综述。     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β受体在人巩膜成纤维细胞内的表达

目的了解人眼巩膜成纤维细胞是否表达碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)受体FGFR1和转化生长因子(TGF-B)受体TBRⅠ和TBRⅡ。方法角膜移植后的4只眼球,应用定点解剖及游走促进法进行巩膜成纤维细胞的分离培养,建立细胞系,采用免疫荧光染色法检测bFGF受体FGFR1和。TGF-β受体TβRⅠ和TβRⅡ蛋白的表达。结果分别应用FGFR1、TβRⅠ和TβRⅡ的特异多克隆抗体染色,整个细胞表面或细胞核周呈现特异性黄绿色荧光,受体位于细胞胞膜上。肉眼观察TβRⅠ和TβRⅡ呈强阳性表达,FGFR-1表达较弱于TβRⅠ和TβRⅡ。结论人巩膜成纤维细胞表达bFGF受体FGFR和TGF-β受体TBRⅠ、TBR的功能性蛋白,巩膜是bFGF和TGF-β发挥作用的一个部位。外源的bFGF和TGF—β通过与巩膜成纤维细胞上的上述相应受体结合发挥作用,是影响实验性近视发生发展的机制之一。     

实时荧光聚合酶链反应定量检测大鼠视网膜中 转化生长因子β1和β2的表达

转化生长因子β(TGF-β)是一种具有控制增生和分化等生物过程的自分泌或旁分泌生长因子。TGF-β及其受体、细胞内下游信号转导分子的突变在糖尿病视网膜病变的发生、发展中扮演了非常重要的角色。研究TGF-β的不同成员在视网膜中的表达，有助于深入了解它们的来源和作用机制。我们以实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测TGF-β1和TGF-β2在大鼠视网膜中的表达，为研究TGF-β在视网膜病变中的作用机制提供依据。     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β对人巩膜成纤维细胞的生长调控研究

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob-last growth factor,bFGF)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)对人巩膜成纤维细胞的生长调控,进一步明确bFGF和TGF-B影响近视的作用部位及可能机制.方法 取角膜移植后的3只健康供体眼球,分离培养巩膜成纤维细胞并建立细胞系.取第3～5代生长良好的细胞,在培养液中分别加入1 ng/ml、3 ng/ml、10 ng/ml、30 ng/ml、100ns/ml、300 ng/ml的bF     

视网膜下液中转化生长因子-β1水平及受体细胞的检测

孔源性视网膜脱离的视网膜下液中的细胞以视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞为主。有认为,RPE细胞对生长因子的特殊敏感性与增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的发生有关。孔源性视网膜脱离患者其视网膜下液中碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)呈现高水平表达,本文将进一步研究PVR患者的视网膜下液中的转化生长因子-β1(transforming growth factor—beta 1,TGFβ1)水平和受体表达细胞。     

血管内皮生长因子-A165对形觉剥夺性近视豚鼠巩膜重塑的影响

目的：探讨玻璃体腔内注射血管内皮生长因子-A165(VEGF-A165)对形觉剥夺性近视(FDM)豚鼠巩膜重塑的影响。方法：健康3周龄三色豚鼠120只随机分为6组，每组20只，其中空白组不做任何干预，FDM组仅建立FDM模型，PBS组建立FDM模型前玻璃体腔内注射PBS缓冲液2.5μL，1ng组、5ng组、10ng组建立FDM模型前玻璃体腔内分别注射VEGF-A165 1、5、10ng。用半透明气球遮盖豚鼠右眼14d建立FDM模型，造模前后测量豚鼠右眼屈光度和眼轴长度，造模14d后采用高效液相色谱法检测视网膜中多巴胺(DA)含量，用RT-PCR、Western blot法检测巩膜中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)、转化生长因子(TGF)-β1、TGF-β2、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白表达情况。结果：造模前，各组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度均无显著差异(P&#x003E;0.05)。造模14d后，与空白组相比，FDM组豚鼠右眼近视度数升高，眼轴增长，视网膜中DA含量减少，巩膜中MMP-2、TGF-β2、α-SMA表达量均增加，TIMP-2、TGF-β1表达量均减少(P&#x003C;0.01)； 与FDM组相比，1ng组、5ng组、10ng组豚鼠右眼近视度数均降低，眼轴增长趋势均减缓，视网膜中DA含量均增加，巩膜中MMP-2、TGF-β2、α-SMA表达量均减少，TIMP-2、TGF-β1表达量均增加(P&#x003C;0.01)，且随着玻璃体腔注射VEGF-A165浓度的升高，豚鼠右眼近视度数逐渐升高，眼轴逐渐延长，视网膜中DA含量逐渐减少，巩膜中MMP-2、TGF-β2、α-SMA表达量均逐渐增加，TIMP-2、TGF-β1表达量均逐渐减少。结论：玻璃体腔内注射VEGF-A165可以增加FDM豚鼠视网膜中DA含量，影响巩膜中MMP-2、TIMP-2、TGF-β1、TGF-β2、α-SMA的表达，抑制巩膜重塑，其中1ng VEGF-A165效果最明显。     

糖尿病患者眼前房液血管内皮生长因子与转化生长因子β2的变化

目的:验证糖尿病患者眼前房液中转化生长因子β2(TGF-β2)变化的临床意义,研究TGF-β2在新生血管形成过程中的作用和作用机制及其与血管内皮生长因子(VEGF)之间的关系。方法:收集糖尿病不伴有眼底改变与患有糖尿病视网膜病变白内障患者的前房液标本,并以无糖尿病白内障患者的前房液标本作为对照,用ELISA方法测定了前房液中TGF-β2和VEGF的含量。结果:和对照相比较糖尿病患者眼前房液中VEGF的含量均显著增加,并且随着糖尿病视网膜病变的进展而增高;而糖尿病无眼底改变患者前房液中TGF-β2含量与正常相比无明显变化,单纯型糖尿病视网膜病变患者的TGF-β2含量下降,伴有增生型的视网膜病变患者TGF-β2含量升高。结论:TGF-β2在DR形成过程中有重要作用,在DR后期TGF-β2和VEGF具有协同作用。     

转化生长因子-β、白细胞介素-1和碱性成纤维细胞生长因子对人晶状体上皮细胞的影响

目的:研究体外细胞培养中转化生长因子-β(transforma-tion growth factor beta,TGF-β)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对人晶状体上皮细胞(human lens epi-thelial cell,HLEC)的增生作用,对白内障术后晶状体后囊浑浊的预防提供依据。方法:首先进行人晶状体上皮细胞的原代培养,传代培养的晶状体上皮细胞分成各5个实验组,分别加入不同剂量的TGF-β、IL-1,设空白对照组,进行3H-TDR掺入实验,观察TGF-β、IL-1、bFGF对晶状体上皮细胞的作用。结果:TGF-β、IL-1、bFGF对在体外的HLEC增生均有促进作用,并随剂量增加而增强(P<0.05)。结论:TGF-β、IL-1、bFGF在白内障术后的后发性白内障的形成发展过程中起促进作用。     

实验性近视眼巩膜TGF-β2、CTGF的表达及其关系

目的豚鼠镜片诱导型近视眼取后极部巩膜测定转化生长因子β2(transforming growth factor β2,TGF-β2)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表达,对近视眼的发病机制进行探讨。方法2周龄豚鼠10只用镜片诱导方法随机选取1眼制备近视动物模型,实验前后检测双眼屈光度、眼轴长度。造模45 d后,观察后极部巩膜的光镜电镜变化,并对TGF-β2、CTGF的表达进行定性及半定量分析。结果45 d镜片诱导后,实验眼形成明显近视,诱导出(-8.48±0.80)D的相对近视,眼轴相对延长(1.92±0.19)mm,实验前后差异有显著统计学意义(P<0.001)。光镜电镜观察实验眼发生退行性改变。TGF-β2表达实验眼多于对照眼,2组比较差异有显著统计学意义(P=0.008)。CTGF的表达2组比较差异无统计学意义(P=0.678)。TGF-β2与CTGF经统计学分析无相关性(r=0.130,P=0.720)。结论实验性近视眼发生的退行性改变是其发生发展的组织病理学基础;TGF-β2与实验性近视的形成有关;CTGF在实验性近视的形成中无明显作用,TGF-β2与CTGF在近视的形成中无明显关系。     

碱性成纤维细胞生长因子与转化生长因子β在近视眼巩膜中作用的研究进展

近视是世界最常见眼病之一,其发病机制尚不完全清楚。有研究发现,细胞生长因子与近视的发生发展密切相关,其中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）与转化生长因子β（TGF-β）作为关键的信号分子可以通过调控巩膜细胞外基质的合成与降解参与近视眼巩膜重塑,但具体转导途径和机制还不十分清楚。现就bFGF和TGF-β在近视眼巩膜中的表达及其调控巩膜重塑的可能机制进行综述。     

转化生长因子β与视网膜病变

转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)是一类具有多种生物学功能的多肽生长因子,能调节多种细胞的生长、分化和移行,参与细胞外基质成分的合成和免疫调节,它不仅是正常眼内组织代谢及功能的基本因素,在许多眼内病理过程中它也起着重要作用。文章就TGF-β的结构、功能以及它与视网膜疾病关系作一简要综述。     

视网膜色素上皮-脉络膜在近视发病中的作用

目的 :探讨人眼视网膜色素上皮细胞 (RPE)、黑素细胞、成纤维细胞与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、β转化生长因子 (TGF β)和肝细胞生长因子 (HGF)的关系。 方法 :①用不含血清的培养液培养三种细胞 48h ,收集培养液 ,用酶标免疫吸附法测量生长因子含量 ;②将各种生长因子加入含有三种不同细胞的培养液中 ,五天后行细胞计数。结果 :在RPE和成纤维细胞培养液中能测出HGF、bFGF和TGF ,而在黑素细胞培养液中则不能测出。bFGF能刺激上述三种细胞的生长 ,HGF能刺激RPE与黑素细胞的生长 ,而TGF β能抑制三种细胞的生长。结论 :RPE、成纤维细胞和黑素细胞具有上述生长因子受体 ,其中RPE和成纤维细胞还能产生上述生长因子。视网膜产生的各种与近视有关的信使不能透过RPE—脉络膜 ,所以不能直接作用于巩膜。RPE、成纤维细胞和黑素细胞通过产生、抑制和应答各种生长因子、神经递质及激素 ,在近视发生中产生作用     

转化生长因子β2对培养的人视网膜色素上皮细胞DNA合成增殖的影响

目的：研究转化生长因子β2（TGF-β2）对培养的人视网膜色素上皮细胞DNA合成与增殖的作用。方法：取眼库眼球游离其视网膜色素上皮细胞，用DMEM加10％血清及MEM氨基酸和庆大霉素，进行细胞传代培养。用溶血磷脂酸（LPA）、转化生长因子β2（TGF-β2）及TGF-β2 LPA进行视网膜色素上皮细胞增殖试验，用细胞染色法进行细胞计数，提取视网膜色素上皮细胞DNA，用分光光度计进行DNA定量测定。结果：含有或缺乏1％小牛血清的两种LPA(10μM)均明显刺激视网膜色素上皮细胞增殖，但这种细胞的增殖被2nG/ml的转化生长因子-β2所阻滞。结论：转化生长因子-β2能阻滞体外培养的人视网膜色素上皮细胞DNA合成与增殖，TGF-β2在增殖性玻璃体视膜病变及RPE细胞中的确切作用，仍需进一步研究。     

转化生长因子-β在眼科的研究进展

转化生长因子 - β(transform ing growth factor- β,TGF- β)最初是由 Roberts等 [1 ] 学者在 1981年作为一个可诱导大鼠肾成纤维细胞增殖的因子描述的。随着对其研究的不断深入 ,现已知它是一个对各种细胞具有刺激或抑制作用的多功能细胞因子。它通过自分泌或旁分泌 ,在调节细胞增殖、分化、细胞外基质形成、细胞移动、粘附、胚胎发育、创伤修复、骨的重建等方面发挥重要作用。近几年来 ,许多学者对TGF- β在眼科领域方面作了许多研究。1　 TGF-﹀与青光眼Jampel等 [2 ]在人的眼房水中检测到 TGF- β,并推测TGF-β在内眼手术的愈…     

青光眼术后滤过区生长因子的表达及干扰素拮抗生长因子作用的初步研究

目的探讨青光眼术后滤过区局部生长因子的表达及干扰素α-2b(interferon alpha-2b,IFNα-2b)在体内环境下对b成纤维生长因子(beta-Fibroblastic Growth Factor,bFGF)、转化生长因子β1(Transforming Growth Factor beta1,TGFβ1)的作用.方法采用冰冻切片的免疫组化染色技术.标本取白兔眼行巩膜咬切术后的滤过区组织,实验分为正常对照组和用药组两组,各4只兔8只眼.全部兔眼局麻下行标准统一的巩膜咬切手术.用药组于术后当时、术后隔天接受滤过区旁结膜下注射干扰素α-2b 5×105 IU 0.2ml各1次,正常对照组不用药.分别检测术后第3、5、7、14d滤过区标本内bFGF、TGFβ1抗原的表达.结果正常对照组标本中,术后3d的滤过区细胞问质已能检测出bFGF或TGFβ1阳性表达产物及阳性细胞;第5至7d达到高峰;第14d的明显减少.用药组的标本中,表达两种生长因子的物质和细胞显著减少.结论抗青光眼术后手术区局部"沐浴"着生长因子,术后伤口愈合的发生有bFGF、TGFβ1生长因子的参与.而INFα-2b体内环境下具有拮抗bFGF、TGFβ1的作用.眼科学报2001;17106～110.     

转化生长因子-β2与眼病关系的研究进展

转化生长因子-β2(TGF-β2)在角膜、巩膜和视网膜等多种眼组织中均有表达,在眼组织细胞的增殖、分化和转移中发挥重要作用。近年来研究发现,TGF-β2可通过参与上皮-间充质转化和细胞外基质重塑等生物学进程参与疾病的发病进程,与青光眼、纤维化白内障、角膜损伤、增生性玻璃体视网膜病变和近视等多种眼科疾病的发病密切相关。本文就TGF-β2在眼部疾病中的作用和机制进行综述。     

表皮生长因子在眼科疾病中的作用

表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)是一种多功能生长因子,通过与其受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)结合,在体内外对多种组织细胞生长和增殖具有明显的调节作用.研究证实,EGF在角膜、视网膜和巩膜均有表达,在眼球主动生长和结构重塑过程中起重要作用.EGF还与角膜损伤、视网膜增生性疾病、近视、翼状胬肉、青光眼、白内障、眼科肿瘤等多种眼科疾病密切相关.本文就EGF在眼科疾病中的作用进行综述.     

碱性成纤维细胞生长因子对视网膜缺血再灌注损伤中蛋白激酶C表达、Ca2+ 含量变化的影响

蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)是调控细胞凋亡过程中的一个信号传导分子，Ca^2 则在视网膜缺血再灌注细胞凋亡的诱导和信号传导中起到重要作用。有研究发现，碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)在视网膜缺血再灌注损伤中起到治疗作用。我们通过建立视网膜缺血再灌注损伤模型，眼内注射bFGF，观察视网膜PKC表达和细胞内Ca^2 含量的变化，探讨bFGF在视网膜缺血再灌注损伤中发挥作用的途径。