PCNA、P16蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床价值的探讨

目的：研究PCNA、P16蛋白在卵巢癌中的表达及临床价值。方法：应用免疫组化法检测89份卵巢癌组织PCNA、P16蛋白的表达。结果：PCNA表达在上皮性,中、低分化以及晚期卵巢癌中的表达显著高于非上皮性,高分化及早期卵巢癌（P＜0．05）,PCNA表达与残存癌灶大小、是否发生淋巴结转移无关（P＞0．05）。在晚期、残存癌灶≥2cm的卵巢癌中P16蛋白的表达明显低于早期、残存癌灶＜2cm者（P＜0．05）;P16蛋白表达与组织类型、组织分化、淋巴结有无转移无关（P＜0．05）。生存分析表明,PCNA、P16蛋白尚不能作为卵巢癌的独立预后因素。结论：肿瘤细胞的过度增殖在卵巢癌的发生、发展中起一定作用。P16蛋白表达的缺失与卵巢癌的进展有关。测定卵巢癌组织P16、PCNA的表达,对客观评价肿瘤的增殖状态,进行“个体化”治疗有指导价值。     

CIP2A在卵巢癌组织中的表达及其临床意义研究

目的 探讨CIP2A在卵巢癌组织中的表达情况和临床意义。方法 选取2008年1月至2010年7月在中国医科大学附属盛京医院手术切除的卵巢癌组织77例及正常卵巢组织6例,并收集其临床病理特征。采用兔抗人CIP2A多克隆抗体以SP免疫组化法、实时定量PCR进行研究,并分析CIP2A表达与临床病理因素的关系。结果 在6例正常卵巢组织中,CIP2A的表达为阴性或低表达;而在77例卵巢癌组织中,33.77% （26/77） 具有CIP2A 阳性表达。CIP2A在卵巢浆液性癌、子宫内膜样癌、黏液性癌和透明细胞癌中的阳性表达率分别为39.13% （18/46）、23.53%（4/17）、16.67% （2/12）和 100% （2/2）。CIP2A的表达与卵巢癌病理分期和肿瘤病理分级有关。实时定量PCR结果证实,相比正常卵巢组织,卵巢癌组织CIP2A转录水平显著提高（P<0.05）。结论 CIP2A在卵巢癌中高表达并且与FIGO分期和肿瘤病理分级有关。CIP2A可能成为卵巢癌诊断的新指标和治疗中的新靶点。     

14-3-3γ在人卵巢上皮性癌中的表达检测

目的:检测14-3-3γ在卵巢上皮性癌组织的表达,探讨在卵巢上皮性癌发病机理中14-3-3γ蛋白家族的作用机制。方法:应用实时荧光定量PCR方法检测14-3-3γ在15例正常卵巢组织和52例卵巢上皮性癌组织中的表达差异,应用原位杂交方法检测14-3-3γ mRNA在正常卵巢组织和卵巢上皮性癌组织中的定位。结果:实时荧光定量PCR结果经过Mann-Whitney U检验,表明卵巢癌组的14-3-3γ mRNA水平显著高于正常卵巢组。14-3-3γ mRNA定位于卵巢癌细胞中,在正常卵巢组织中没有明显信号出现。结论:在人上皮性卵巢癌中,14-3-3γ转录上调,14-3-3γ mRNA定位于癌细胞。由此推测,14-3-3γ可能参与了人上皮性卵巢癌的发生。     

卵巢癌中微小RNA-210的表达及临床意义

目的：检测上皮性卵巢癌组织中微小RNA-210（miR-210）的表达水平,初步探讨miR-210在卵巢癌发病中的作用。方法：采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量反转录聚合酶链反应［ｐｏｌｙ（Ａ）－RT-qPCR]检测上皮性卵巢癌、良性上皮性卵巢肿瘤及正常卵巢组织标本中miR-210的表达。结果：miR-210在卵巢癌组中表达低于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组,3组间差异有统计学意义（F=893.213,P=0.000）;且随着卵巢癌组织临床分期及组织分化的进展,miR-210表达有下降的趋势。结论：miR-210在上皮性卵巢癌组织中低表达,在卵巢癌发生发展中发挥重要的抑癌基因作用,且与卵巢癌分期、组织分级及淋巴结转移密切相关。     

Linc-ROR靶向miR-181a-5p调控卵巢上皮性癌细胞恶性生物学行为的研究

目的:探讨长链基因间非编码RNA-重编程调节因子（Linc-ROR）及微小RNA 181a-5p（miR-181a-5p）在卵巢高级别浆液性癌（HGSOC）组织中的表达,并探讨两者对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法:（1）收集2019年6月—2021年6月在青岛大学附属医院行手术治疗的36...     

卵巢上皮性肿瘤的临床病理特征及其细胞周期素D1和p53蛋白表达的研究

目的研究卵巢上皮性癌（卵巢癌）和交界性上皮性肿瘤的临床病理特征及其细胞周期素D1（cyclin D1）和p53蛋白表达的情况,探讨卵巢癌和交界性上皮性肿瘤在发病机制上的联系。方法分析45例卵巢癌（卵巢癌组）和54例卵巢交界性上皮性肿瘤（交界性肿瘤组）的临床病理资料,采用免疫组化法检测两组组织中cyclin D1、p53蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征的相关性。结果（1）临床病理特征：①年龄：交界性肿瘤组平均年龄为42．5岁（14～82岁）,中位数年龄41岁;卵巢癌组平均年龄为53．5岁（26～80岁）,中位数年龄51岁。②分期：按国际妇产科联盟（FIGO）分期标准,交界性肿瘤组Ⅰ期48例、Ⅱ期3例、Ⅲ期3例;卵巢癌组Ⅰ期6例、Ⅱ期8例、Ⅲ期26例、Ⅳ期5例。③病理类型：交界性肿瘤组以黏液型为主[占56％（30／54）],其次为浆液型[其中普通型11例,微乳头型5例;占30％（16／54）];卵巢癌组以浆液型（其中低度恶性19例,高度恶性3例）为主[占49％（22／45）]。④病理分化程度：卵巢癌组高分化5例,中分化17例,低分化或未分化23例。⑤预后：交界性肿瘤组5年生存率为98％,卵巢癌组为51％,两组比较,差异有统计学意义（P=0．000）。（2）cyclin D1和p53蛋白的表达及其与卵巢癌和交界性肿瘤临床病理特征的相关性：卵巢癌组cyclin D1和p53蛋白的阳性表达率分别为31％（14／45）和56％（25／45）,p53蛋白表达强度与病理分化程度呈正相关（r=0．320,P=0．032）;交界性肿瘤组cyclin D1和p53蛋白的阳性表达率分别为69％（37／54）和6％（3／54）。其中,普通型浆液性交界性肿瘤与高度恶性浆液性癌比较（两者cyclin D1蛋白阳性表达率分别为91％和26％,p53蛋白分别为0和58％）,差异有统计学意义（P〈O．01）;而微乳头型浆液性交界性肿瘤与低度恶性浆液癌比较（两者cyclin D1蛋白阳性表达率分别为3／5和2／3,p53蛋白分别为1／5和1／3）,差异则无统计学意义（P〉0．05）。结论cyclin D1蛋白的过度表达常见于卵巢浆液性交界性肿瘤及低度恶性浆液性癌组织中,而p53蛋白的过度表达更多见于高度恶性浆液性癌组织中。卵巢浆液性交界性肿瘤与高度恶性浆液性癌具有不同的发病机制,而微乳头型浆液性交界性肿瘤与低度恶性浆液性癌的关系可能更为密切。     

C－erbB2、p53、P_（21）、在卵巢浆液性囊腺癌的表达及临床意义

Ｃ－ｅｒｂＢ２、ｐ５３、Ｐ＿（２１）、在卵巢浆液性囊腺癌的表达及临床意义李文锦，颜士杰，钱和年，宋和存，王建六，张香云，贾鉴慧卵巢癌是妇科肿瘤诊治中较困难的疾患。本研究通过对７０例卵巢浆液性囊腺癌（浆液性癌）组织中Ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因、ｐ５３抑癌基因...     

基因芯片在筛选卵巢癌基因中的应用研究

目的:研究人卵巢癌相关基因在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的差异表达。方法:用含512条癌及抑癌基因的cDNA表达谱芯片研究一组卵巢癌组织样本的基因表达谱。结果:共筛选出差异表达与癌相关的基因54条,其中18条表达上调,36条表达下调。结论:用基因表达谱芯片研究基因谱,可有效的筛选出新的卵巢癌相关基因。     

NM23-H1B基因mRNA在卵巢上皮性肿瘤组织中表达的研究

目的研究NM23-H1B基因与卵巢上皮性肿瘤的相关性。方法收集2003年4月至2004年2月手术切除的卵巢上皮性肿瘤标本48份,其中卵巢上皮性癌（卵巢癌）40份,卵巢交界性上皮性肿瘤8份,正常卵巢组织标本8份。采用RT-PCR技术、RNA印迹（northern blot）法、原位杂交实验,检测NM23-H1B基因mRNA的表达。结果经RT-PCR方法检测在所有的标本中均有NM23-H1B基因mRNA的表达,在正常卵巢组织中表达较低,而在所有的卵巢肿瘤中表达均高于正常卵巢组织,早期（Ⅰ、Ⅱ期）卵巢癌中的表达高于晚期（Ⅲ、Ⅳ期）。northern blot法检测结果显示NM23．H1B基因mRNA在正常卵巢组织的表达较低,交界性肿瘤中的表达则与正常卵巢组织中相似,而在卵巢癌组织中表达明显增高,在早期卵巢癌中分化好（G1级）者表达明显高于分化较差（G2、G3级）者。原位杂交实验检测结果显示,在所有的卵巢癌标本中NM23-H1B基因mRNA阳性表达率为100％（40／40）,在正常卵巢组织中阳性表达率为0,在8份卵巢交界性肿瘤标本中,有2份NM230H1B基因表达阳性,阳性表达率为2／8。结论NM23-H1B基因与卵巢癌发生发展有相关性。     

血管内皮生长因子C及其受体3mRNA在上皮性卵巢癌组织的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子C（VEGF-C）及其受体3（VEGFR-3）mRNA在上皮性卵巢癌组织的表达及与癌周淋巴管生成及淋巴转移的关系。方法 2003-04—2004-06第三军医大学附属西南医院采用RT-PCR方法，检测VEGF-C及VEGFR-3mRNA在良、恶性上皮性卵巢肿瘤组织的表达及组织化学淋巴管染色并计数，分析其与VEGF-C mRNA表达及淋巴转移的关系。结果 VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA在卵巢良、恶性肿瘤的表达差异有显著性。VEGF-C mRNA表达阳性及有淋巴结转移组的癌组织淋巴管密度分别大于VEGF-CmRNA表达阴性及无淋巴结转移组的癌组织，二者差异均有显著性。结论 VEGF-CmRNA在上皮性卵巢癌组织的表达上调导致了癌周淋巴管生成，促进了肿瘤的淋巴道转移。     

GNAS-AS1靶向miR-2116-3p基因表达调控卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制研究

目的:探讨GNAS-AS1对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:RT-qPCR法检测正常人卵巢上皮细胞HUM-CELL-0088及卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3和A2780细胞中GNAS-AS1和miR-2116-3p表达水平。以SKOV3细胞为研究对象,分别转染GNAS-AS1小干扰RNA、miR-2116-3p模拟物或抑制剂,CCK-8法、Transwell和Western blot法分别检测下调GNAS-AS1、上调miR-2116-3p或下调miR-2116-3p对细胞增殖、迁移和侵袭及CyclinD1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin、Vimentin和E-Cadherin蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证GNAS-AS1与miR-2116-3p调控关系。结果:与HUM-CELL-0088细胞比较,卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3和A2780中GNAS-AS1表达升高(P<0.05),miR-2116-3p表达降低(P<0.05)。下调GNAS-AS1表达或上调miR-2116-3p表达后,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭细胞数及细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。GNAS-AS1在SKOV3细胞中负调控miR-2116-3p表达。下调miR-2116-3p表达或同时下调GNAS-AS1和miR-2116-3p表达后,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭细胞数及细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9和N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:GNAS-AS1在卵巢癌细胞系中表达升高,下调其表达可降低卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其可能通过负调控miR-2116-3p表达发挥作用。     

TGF-β1调节miR-99家族对卵巢癌细胞恶性行为的影响

目的:探讨TGF-β1通过调节miR-99家族各miRNA对卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭行为的影响。方法:TGF-β1、miR-99家族各miRNA模拟物、miR-99家族各miRNA抑制物分别刺激或转染卵巢癌细胞系A2780及SKOV3。实时荧光定量PCR检测miR-99家族各miRNA表达水平。CCK-8法检测细胞增殖能力。划痕实验检测细胞迁移能力。Transwell检测细胞侵袭及迁移能力。结果:与空白对照组比较,TGF-β1处理组卵巢癌细胞中miR-99家族各miRNA表达上调(P0.01),卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭能力明显增强(P0.05);miR-99家族各miRNA模拟物转染组细胞增殖减弱(P0.05),迁移及侵袭能力增强(P0.05);miR-99家族各miRNA抑制物转染组细胞增殖增强(P0.05),迁移及侵袭能力减弱(P0.05)。结论:TGF-β1可通过调节miR-99家族表达水平促进卵巢癌细胞系A2780及SKOV3的增殖、迁移及侵袭能力,TGF-β1及miR-99家族表达水平可能作为卵巢癌恶性程度预测及预后判断的参考指标。     

CircKIF4A靶向调控miR-384表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

Objective?To explore the effect of circKIF4A on the proliferation and apoptosis of ovarian cancer SKOV3 cells and its regulatory mechanism on miR-384. Methods?The qRT-PCR method was used to detect the expression of circKIF4A and miR-384 in ovarian cancer tissues and adjacent tissues. si-NC, si-circKIF4A, miR-NC, miR-384 mimics, si-circKIF4A and anti-miR-NC, si-circKIF4A and anti-miR-384 were transfected into SKOV3 cells respectively. The qRT-PCR method was used to detect the expression of circKIF4A and miR-384 in SKOV3 cells. MTT experiment and flow cytometry experiment were used to detect cell proliferation and apoptosis respectively. The dual luciferase reporter experiment was used to detect the targeting relationship between circKIF4A and miR-384. Results?Compared with adjacent tissues, the expression level of circKIF4A in ovarian cancer tissues was increased [(1.00±0.06), (4.28±0.32)] (t=62.915, P＜0.05), and the expression level of miR-384 was decreased [(1.00± 0.05), (0.43±0.03)] (t=61.047, P<0.05). After transfection with si-circKIF4A, the OD value of SKOV3 cells was decreased [(0.75±0.05), (0.41±0.03)] (t=17.493, P＜0.05), and the apoptosis rate was increased [(6.36±0.53)%, (23.19± 2.21)%] (t=22.216, P<0.05). After transfection of miR-384 mimics, the OD value of SKOV3 cells was decreased [(0.73±0.05), (0.47±0.04)] (t=12.182, P＜0.05), and the apoptosis rate was increased [(7.53±0.41)%, (19.11)±1.06)%] (t=30.567, P<0.05). The dual luciferase report experiment confirmed that circKIF4A could adsorb miR-384 and can act as a sponge molecule for miR-384. After co-transfection with si-circKIF4A and anti-miR-384, the OD value of SKOV3 cells was increased [(0.40±0.04), (0.65±0.03)] (t=15.000, P＜0.05), and the apoptosis rate was decreased [(25.20± 2.21)%, (10.37±0.86)%] (t=18.761, P＜0.05). Conclusion?Inhibition of circKIF4A expression could negatively regulate the expression of miR-384, thereby inhibiting the proliferation of ovarian cancer cells and inducing apoptosis.     

表达特异性多肽的噬菌体对卵巢癌细胞生物学行为的影响

目的探讨表达特异性多肽的噬菌体对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法选取卵巢癌细胞株A2780、SKOV3,分别与特异性的噬菌体共同作用,通过台盼蓝拒染法、流式细胞仪、平板克隆形成实验、四甲基偶氮唑蓝比色法、Boyden小室体外侵袭实验等方法,检测卵巢癌细胞生物学行为的变化。将A2780、SKOV3细胞按实验目的分别分为3组:(1)实验组,加入可与卵巢癌细胞特异性结合的噬菌体(阳性噬菌体);(2)空白对照组,不加噬菌体;(3)阴性对照组,加入不与卵巢癌细胞结合的噬菌体(阴性噬菌体)。结果实验组、阴性对照组和空白对照组的平均活细胞比例分别为(72·1±6·2)%、(84·8±4·6)%和(93·1±2·5)%,与阴性对照组及空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0·05);实验组A2780和SKOV3细胞的凋亡率分别为20·39%和43·99%,而阴性对照组均未见凋亡峰的出现;实验组细胞的平均克隆形成率为4%,阴性对照组为15%,空白对照组为15%,实验组与阴性对照组及空白对照组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组A2780和SKOV3细胞的生长抑制率分别为11·07%和9·58%,均明显高于各自的阴性对照组(分别为2·05%和1·09%),与各自的阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);实验组A2780和SKOV3细胞的侵袭指数,都低于各自的阴性对照组和空白对照组,分别与各自的阴性对照组和空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0·05)。结论筛选出的特异性噬菌体对卵巢癌细胞的生长、增殖和迁移有一定的下调作用,与噬菌体结合的卵巢癌细胞表面受体可能与肿瘤的发生和转移有关。     

尿激酶型纤溶酶原激活因子介导的卵巢上皮癌细胞浸润转移体外的实验研究

目地:探讨尿激酶型纤溶酶原激活因子在卵巢上皮癌浸润转移中的作用机制。方法:用RT-PCR技术从人卵巢上皮癌组织总RNA中逆转录uPA基因cDNA全长,克隆至pGEM-T Easy Vector,鉴定后与真核表达载体PCMV-HA连接,酶切及测序。用脂质体法将重组质粒DNA转染至SKOV3细胞。加压筛选并培养PCMV-HA-uPA及对照细胞。分别用RT-PCR和W estern blot方法检测转染前后SKOV3细胞uPA的表达。细胞增殖能力测定用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验,细胞周期测定用流式细胞仪法,细胞体外侵袭,迁移和黏附能力测定分别采用Matrigel Invasion,TranswellM igration和Adhersion Assay方法。结果:(1)uPA阳性表达能介导SKOV3细胞克隆形成,与对照组细胞的差异有统计学意义(P<0.05);(2)uPA阳性表达能介导SKOV3细胞的细胞周期中S期比例增加,与对照组细胞的差异有统计学意义(P<0.05);(3)uPA阳性表达介导SK-OV3细胞的体外侵袭,迁移和黏附能力均明显强于对照细胞株,差异有统计学意义(P=0.0002,<0.0001和0.0049)。结论:uPA通过促进肿瘤细胞侵袭,迁移和黏附能力在卵巢上皮癌浸润转移中起了重要作用。     

卵巢上皮性癌淋巴结转移相关差异表达蛋白内质网氨基肽酶1的表达及意义

目的 从基因转录及蛋白表达的水平检测内质网氨基肽酶1(ERAP1)在卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞、组织中的表达,探讨其与卵巢癌转移的关系.方法 应用实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法检测在卵巢癌淋巴结非定向转移细胞系(SKOV3)与淋巴结定向高转移细胞系(SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-pm4)中ERAP1 mRNA和蛋白的表达情况;并应用免疫组化方法在人卵巢癌原发灶与相应的淋巴结转移灶、裸鼠卵巢癌移植瘤原发灶与相应的淋巴结转移灶中对ERAP1的蛋白表达进行验证.结果 SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-pm4细胞中ERAP1 mRNA和蛋白的表达呈下降趋势(分别为0.118±0.012、0.031±0.003、0.028±0.003、0.016±0.005;0.91±0.33、0.09±0.03、0.10±0.04、0.05±0.04),其中,SKOV3细胞中ERAP1 mRNA和蛋白的表达显著高于SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-pm4细胞,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).ERAP1蛋白在人卵巢痛原发灶(184±14)和相应的淋巴结转移灶、裸鼠卵巢癌移植瘤原发灶(143±22)和相应的淋巴结转移灶(97±12)中的表达均呈下降趋势,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 卵巢癌中ERAP1表达的下降或缺失与淋巴结转移有关.     

电压门控钠通道在卵巢癌中功能性表达的研究

目的:探讨电压门控钠通道(voltage-gated sodium channels,VGSC)不同亚型表达及与卵巢癌转移的关系。方法:以人卵巢癌细胞和卵巢肿瘤组织标本为研究对象,用RT-PCR,激光共聚焦,MTT及Transwell小室法,检测卵巢癌细胞中VGSC表达的亚型及VGSC特异性阻断剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)对卵巢癌体外侵袭性的影响。结果:卵巢癌高转移细胞系(CAOV3,A2780,SKOV3)中高表达的VGSC亚型Nav1.5与卵巢癌的恶性生物学特性明显相关;30μmol/L TTX对CAOV3,A2780,SKOV3细胞体外的侵袭力的抑制率约为50%,差异有统计学意义(P<0.05),对不表达Nav1.5的低转移卵巢癌细胞Anglne的转移级联过程则没有明显影响。结论:VGSC亚型Nav1.5与卵巢癌的体外转移明显相关,可能成为卵巢肿瘤的潜在标记物和治疗靶点。     

miR-101对上皮性卵巢癌SKOV3细胞抗失巢凋亡的作用研究

目的:探讨miRNA-101(miR-101)对上皮性卵巢癌SKOV3细胞抗失巢凋亡的作用,以及在失巢凋亡过程中可能的作用机制。方法:构建失巢凋亡模型模拟卵巢癌细胞转移的生长状态;用脂质体Lipofectamine 2000将miR-101 mimics及miR-NC转染SKOV3细胞,随机分为阴性对照组、miR-空白质粒组(miR-NC组)和miR-101质粒组。RTPCR法检测细胞内miR-101 mRNA表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell侵袭实验及划痕实验检测细胞的侵袭及迁移能力;RT-PCR及Western blot法检测c-fos基因mRNA和蛋白表达水平。结果:失巢凋亡模型构建成功,模型中SKOV3细胞呈悬浮、团簇状生长;将miR-101 mimics转染SKOV3细胞后,SKOV3细胞中miR-101表达水平增加,同时癌细胞失巢凋亡增加;透膜细胞数量及细胞迁移距离减少;c-fos mRNA和蛋白表达水平均降低。结论:miR-101过表达可增加SKOV3细胞失巢凋亡,降低细胞侵袭及迁移能力,下调c-fos基因表达可能是其作用分子机制。     

二甲双胍对卵巢癌细胞侵袭迁移及MTA1表达的影响

目的:体外细胞培养实验检测二甲双胍对卵巢癌细胞SKOV3侵袭迁移能力的影响,以及其对转移相关因子1(MTA1)表达的影响。方法:用不同浓度二甲双胍处理卵巢癌细胞,采用划痕实验和transwell实验检测二甲双胍对细胞侵袭迁移能力的影响,Western blot法检测二甲双胍对细胞中MTA1蛋白表达的影响,qRT-PCR检测二甲双胍对细胞中MTA1 mRNA表达的影响。结果:与对照组(0mmol/L)相比,二甲双胍干预组的细胞迁移速度明显下降(P0.01);作用24h时,2.5mmol/L与5mmol/L组未见差异(P0.05);作用48h时,卵巢癌细胞的迁移速度随着二甲双胍浓度的增加而减弱(P0.01)。随着二甲双胍浓度的增加,穿膜细胞数减少(P0.01);二甲双胍干预组的MTA1 mRNA及MTA1蛋白表达明显降低(P0.05),不同药物浓度之间无差异。结论:二甲双胍抑制SKOV3细胞侵袭迁移,抑制作用与浓度呈正相关,其机制可能与抑制MTA1表达有关。     

CTHRC1对卵巢癌细胞顺铂耐药的作用及机制研究

目的:探究胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)对卵巢癌细胞顺铂耐药的作用及其相关机制。方法:Western blot法检测卵巢癌细胞株A2780、SKOV3及顺铂耐药细胞株A2780/DDP、SKOV3/DDP中CTHRC1蛋白表达水平。慢病毒lenti-sh CTHRC1转染SKOV3/DDP细胞,下调CTHRC1表达水平。CCK-8法检测沉默CTHRC1后SKOV3/DDP细胞增殖情况及顺铂半数抑制浓度(IC_(50))的变化。Western blot法检测转染后SKOV3/DDP细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况及Akt、STAT3的磷酸化水平。结果:与A2780和SKOV3细胞相比,顺铂耐药细胞株A2780/DDP和SKOV3/DDP细胞中CTHRC1蛋白表达水平相对较高(P0.05)。靶向下调CTHRC1表达后,SKOV3/DDP-sh CTHRC1细胞的增殖能力无明显变化,但顺铂的IC_(50)显著降低(P0.01),Akt、STAT3磷酸化水平受到抑制,Bcl-2表达水平降低(P0.05)。结论:CTHRC1可能通过Akt、STAT3信号通路,调节抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,继而影响卵巢癌细胞对顺铂的敏感度。