RNA干扰EFEMP1对卵巢癌细胞增殖、侵袭与转移的影响

目的:探讨fibulin糖蛋白家族中fibulin-3(EFEMP1)对卵巢癌细胞增殖、侵袭与转移的影响,为卵巢癌针对性治疗提供理论基础。方法:利用慢病毒转染RNA干扰的方式,转染具有高侵袭转移能力的S1克隆细胞株,抑制EFEMP1表达。Western blot、Real-time RT-PCR和免疫组化对转染效果进行验证。采用体外细胞功能分析技术检测干扰前后EFEMP1对细胞增殖、侵袭与转移能力的影响。建立裸鼠皮下移植瘤模型,体内观察EFEMP1对肿瘤生长的影响。结果:RNA干扰有效抑制EFEMP1表达,EFEMP1降表达显著抑制肿瘤细胞增殖、侵袭和转移能力,裸鼠体内成瘤率降低并且肿瘤体积显著下降,同时肿瘤组织Fibulin基因表达显著降低。结论:EFEMP1与卵巢癌发生发展及侵袭转移密切相关,为卵巢癌的治疗提供新的思路。     

生物钟基因Period2对裸鼠卵巢癌移植瘤生长和血管生成抑制作用的机制研究

目的:探讨生物钟基因Period2对卵巢癌裸鼠移植瘤生长转移和血管生成的作用及可能机制。方法:利用卵巢癌细胞株构建裸鼠卵巢癌皮下移植瘤,利用基因转染技术,外源性导入重组基因Period2,使之在肿瘤组织成功稳定表达,分别采用Real-time定量PCR和Western blot检测移植瘤中Period2表达,治疗期间测量移植瘤体积,治疗2周后处死裸鼠,称取瘤重,免疫组化检测肿瘤组织中血管内皮生长因子/血管通透性因子(VEGF/VPF)、血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)、微血管密度(MVD)(CD34标记)的表达情况,Western blot检测肿瘤转移相关基因(MTA1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9),以及PI3K/Akt信号通路的表达。结果:(1)外源性导入Period2基因在裸鼠移植瘤肿瘤组织中成功稳定表达。(2)Period2组移植瘤体积与其他两组相比较,差异有统计学意义(F=23.469,P0.001)。转染后2周,Period2组移植瘤重量明显低于空质粒组和对照组(P0.05),Period2组抑瘤率达到38.9%。(3)免疫组化结果表明,Period2组的VEGF/VPF、VEGFR1表达下降(F=46.80/48.09,P0.001),MVD计数(CD34标记)显著减少(F=138.4,P0.001)。(4)Western blot结果表明,Period2组MTA-1和MMP-9表达明显少于其他组(P0.05),自噬与凋亡相关信号通路PI3K/Akt中标志性蛋白PI3K、Akt表达明显下调(P0.05)。结论:(1)外源性导入Period2过表达可使卵巢癌生长速度减慢,抑瘤率明显提高。(2)Period2可能通过抑制VEGF/VPF、MTA-1、MMP-9表达而抑制卵巢癌的血管新生和浸润转移。(3)Period2可能通过干扰PI3K/Akt信号通路影响凋亡,抑制肿瘤血管形成来发挥抑瘤作用。     

RNAi介导的WFDC2基因沉默抑制人卵巢浆液性上皮癌生长的体内实验

目的:利用前期已构建WFDC2基因稳定低表达的人浆液性卵巢癌细胞株SKOV3,构建裸鼠皮下移植瘤模型,观察肿瘤生长、转移特点的变化。方法:选择前期构建的稳定株进行体内实验。分组:未处理肿瘤细胞组(OEC组)、转染慢病毒空载体组(OEC-mock组)和转染WFDC2小干扰RNA组(OEC-WFDC2-si组)。组织块移植法建立二代卵巢癌荷瘤裸鼠模型。绘制各组的肿瘤生长曲线,实验终点时比较各组肿瘤的体积和重量,免疫组化检测细胞核增殖抗原(PCNA)表达。结果:OEC-WFDC2-si组皮下移植瘤的生长速度显著慢于OEC组和OEC-mock组,差异有统计学意义(P0.05)。OECWFDC2-si组首次出现可见肿瘤的时间晚于OEC组和OEC-mock组,差异有统计学意义(P0.05)。移植后第23天,OEC-WFDC2-si组的肿瘤重量、体积和细胞核增殖抗原(PCNA)表达均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。实验组和对照组均未发现淋巴结转移。结论:WFDC2基因沉默显著抑制人卵巢癌SKOV3细胞株在裸鼠体内的生长,WFDC2基因可能在人卵巢浆液性上皮癌进展中起重要作用。     

酪氨酸激酶受体阳性单核细胞对卵巢肿瘤生长及微血管、淋巴管生成作用研究

目的 探讨酪氨酸激酶受体阳性（Tie2+）的单核细胞(Tie2+-U937)对裸鼠移植瘤生长和微血管、淋巴管生成的作用。方法 2013年1月至2014年2月在上海交通大学医学院构建裸鼠卵巢肿瘤皮下和原位模型,转染Tie2+-U937和NC-U937,分别将转染了荧光的人卵巢癌细胞系(SKOV3ip1-luc)与Tie2+-U937或者NC-U937按1:10比例混匀,注入裸鼠皮下和卵巢包膜下,单独的SKOV3作为阴性对照组,观察裸鼠成瘤时间和肿瘤大小;免疫组化检测肿瘤微血管和淋巴管的表达。结果 Tie2+-U937能够促进裸鼠皮下和原位移植瘤生长。皮下成瘤模型：注射后第8、21天Tie2组肿瘤总荧光强度值大于其他两组(P<0.05)。裸鼠于21d处死并称其肿瘤重量,Tie2组(0.43±0.16)g,U937组(0.18±0.04)g,Control组(0.13±0.08)g,Tie2肿瘤重量较其他两组重(P<0.05);Tie2组免疫组化CD31的表达明显大于其余两组(P<0.05);原位模型：注射后第14、35天Tie2组肿瘤总荧光强度值大于其余两组(P<0.05);Tie2组免疫组化CD31和LYVE-1的表达明显大于其余两组(P<0.05)。结论 Tie2+单核细胞能够促进卵巢肿瘤裸鼠皮下、原位移植瘤的生长,并且其促进肿瘤增殖的作用与微血管和淋巴管生成有关。     

RNAi沉默CD147基因对卵巢癌细胞HO-8910pm生物学行为的影响

目的:采用RNA干扰(RNA interference,RNA i)技术,利用构建的稳定转染CD147 shRNA表达质粒载体的HO-8910pm/pGE-1 CD147shRNA细胞株观察卵巢癌细胞系HO-8910pm CD147基因的沉默作用及生物学效应。方法:用免疫细胞化学法、激光共聚焦检测HO-8910pm细胞CD147的表达;MTT法绘制细胞生长曲线,观察裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的成瘤性。结果:pGE-1CD147shRNA转染人卵巢癌细胞系后,CD147的表达受到高效且特异的抑制,细胞侵袭力减弱,荷瘤裸鼠成瘤力下降,抑瘤率达58.8%(P<0.01)。结论:RNA i沉默CD147基因可影响卵巢癌的侵袭和成瘤,有可能成为治疗卵巢癌的新途径。     

酞胺哌啶酮对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的作用

目的 :观察酞胺哌啶酮对人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的抑制作用。方法 :于裸鼠背部右侧皮下接种SKOV3 瘤源 ,随机分为 4组 :治疗组 - 1和对照组 - 1,皮下移植后次日开始分别给予酞胺哌啶酮 2 0 0mg kg .d-1、等体积 0 .5%羧甲基纤维素钠腹腔内注射 ,共 4周。治疗组 - 2和对照组 - 2 ,皮下移植第 15天开始分别给予酞胺哌啶酮 2 0 0mg kg .d-1和等体积 0 .5%羧甲基纤维素钠 ,共 2周。定期检测皮下瘤体积和裸鼠体重。用免疫组化方法检测肿瘤组织微血管内皮细胞的表达情况 ,在光学显微镜高倍视野下 (2 0 0× )分别计数肿瘤组织的微血管密度 (MVD)。结果 :治疗组裸鼠皮下瘤体积较对照组明显减小 :治疗结束时 ,治疗组 - 1抑瘤率为 4 0 .2 % (P <0 .0 1) ;治疗组 - 2抑瘤率为 2 8.5% (P <0 .0 5)。治疗组裸鼠体重与对照组无明显差异 (P >0 .0 5)。两治疗组皮下瘤的MVD明显降低 ,治疗组 - 1的抑制率为 4 3.7% (P <0 .0 1) ,治疗组 - 2的抑制率为4 2 .1% (P <0 .0 5)。结论 :酞胺哌啶酮能抑制人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤生长及微血管生成 ,其生长抑制作用以早期应用效果显著 ,且其副作用不明显     

CD105对绒毛膜癌裸鼠移植瘤生长及耐药性的影响

目的:探讨绒毛膜癌裸鼠移植瘤模型中的成瘤情况,以及CD105及相关蛋白在移植瘤中表达水平与化疗耐药的相关性。方法:将90只健康BALB/c裸鼠随机分为3组JEG-3细胞(野生型)、JEG-3/CD105 OE(过表达型)与JEG-3/shCD105(敲减表达型),每组30只,建立CD105表达相关的绒癌裸鼠移植瘤模型。甲氨蝶呤单药化疗5天后,比较野生型、过表达型和敲减表达型中各化疗组和对照组移植瘤的质量及体积,并计算抑瘤率。Western blot法和免疫荧光法检测各组裸鼠移植瘤中CD105、BMP9及Smads蛋白水平,ELISA法检测各组裸鼠血清中CD105的水平。结果:各型移植瘤成瘤率均为100%。野生型移植瘤的生长速度均慢于过表达型而快于敲减表达型,差异有统计学意义(P<0.05)。野生型、过表达型、敲减表达型移植瘤的生长抑制率分别为(42.23±2.33)%、(31.03±5.76)%和(56.00±3.15)%;过表达型移植瘤对化疗的耐药性高于野生型、敲减表达型移植瘤,差异有统计学意义(P<0.05)。野生型移植瘤中CD105、BMP9表达水平均低于过表达型而高于敲减表达型,差异有统计学意义(P<0.05)。野生型、过表达型、敲减表达型移植瘤裸鼠血清中CD105浓度分别为(3356.27±453.19)pg/mL、(3661.90±471.09)pg/mL和(3226.91±471.10)pg/mL,过表达型裸鼠血清CD105浓度高于野生型和敲减表达型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在裸鼠移植瘤模型中证明了移植瘤体中CD105、BMP9表达水平、血清中CD105表达水平与移植瘤的耐药程度具有一致性,为后续绒癌裸鼠移植瘤的耐药性机制研究奠定了基础。     

血管抑素基因治疗人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究

目的:研究血管抑素(Angiostatin)基因转染治疗人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的作用及其相关机理。方法:使用人卵巢癌细胞株SKOV3建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型。随机将荷瘤裸鼠分为基因治疗组、空质粒组和空白对照组,分别于瘤体注射Angiosta-tin/PCDNA3、空质粒PCDNA3和无菌生理盐水,质粒用脂质体DOTAP介导转染细胞。观察各组动物的肿瘤生长曲线,检测各组肿瘤Angiostatin、VEGF的表达和微血管密度(MVD),利用TUNEL染色法行原位细胞凋亡分析,计算细胞凋亡指数(AI)。结果:基因治疗组裸鼠的肿瘤生长在早期受到明显抑制,大约1周后生长速度有所加快,肿瘤组织中Angiostatin蛋白局部高表达,VEGF的表达高于空质粒组和空白对照组,AI(4.21±0.49)高于空质粒组和空白对照组,MVD(19.3±3.2)低于空质粒组。结论:Angiostatin基因可以通过抑制血管生成而在一定程度上抑制肿瘤生长,其作用的发挥是独立于VEGF的。     

bFGF单克隆抗体对卵巢癌移植瘤血管生成的抑制作用

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在卵巢上皮性肿瘤中的表达强度与肿瘤血管生成之间的关系,及其单克隆抗体bFGFMAb对人卵巢癌移植瘤血管生成和肿瘤生长的影响。方法:(1)应用免疫组化法和图像分析系统研究bFGF在正常卵巢组织,良性、交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达部位和强度;以及bFGF的表达强度与肿瘤新生血管的关系;(2)利用卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,每周2次将不同浓度的bFGFMAb注射于瘤体周围,连续8周,每周测量肿瘤体积,绘制移植瘤生长曲线;对移植瘤组织行Ⅷ因子的免疫组化染色,测定肿瘤内微血管密度(MVD)。结果:(1)bFGF主要在卵巢上皮性肿瘤细胞浆内表达,在交界性和恶性肿瘤中,部分细胞同时存在核表达;bFGF在正常卵巢组织,良性、交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达强度逐步增强,同时MVD逐步增高,二者呈正相关(P<0.001);(2)30、20、10μgbFGFMAb组移植瘤体积分别是对照组的31.34%、49.20%和71.25%,MVD分别是对照组的27.80%、52.37%和81.86%(P<0.05),其作用呈浓度依赖性。结论:bFGFMAb能明显抑制卵巢癌的血管生成和肿瘤生长,有望成为卵巢癌生物治疗的新方法。     

Treg细胞/Th17细胞比例失衡在卵巢癌的生长以及微血管、淋巴管生成中的作用

目的:探讨Treg细胞/Th17细胞比例失衡对移植瘤生长及微血管和淋巴管生成的影响。方法:构建卵巢癌裸鼠皮下和原位移植瘤模型,用磁珠分选人外周血CD3+淋巴细胞,加曲古抑菌素A(TSA)刺激使其Treg/Th17细胞比例失衡,采用流式细胞仪检测Treg/Th17细胞比例。分别将Treg/Th17细胞比例较高和较低的淋巴细胞与人卵巢癌细胞系SKOV3按1∶20比例注射入裸鼠皮下和卵巢包膜下,分别于注射后28天和35天处死称重,观察其对移植瘤生长的影响;免疫组化CD31和LYVE-1染色检测微血管(MVD)和淋巴管(LVD)的表达。结果:Treg高组能促进皮下和原位卵巢癌的生长。皮下模型:注射后第21和28天,Treg高组的肿瘤总荧光强度值均大于Th17高组和对照组;Treg高组的肿瘤重量为(0.60±0.07)g,Th17高组(0.35±0.24)g,对照组(0.25±0.22)g,Treg高组肿瘤重量较Th17高组和对照组重。原位模型:注射后第28天Treg高组肿瘤总荧光强度值均大于其他两组;Treg高组(0.34±0.20)g,Th17高组(0.06±0.03)g,对照组(0.17±0.05)g,Treg高组肿瘤重量比Th17高组重。Treg高组的MVD和LVD表达高于Th17高组和对照组(P0.05)。结论:Treg细胞/Th17细胞比例失衡在卵巢癌裸鼠移植瘤生长中起着重要作用,且Treg高组能影响卵巢癌的生长、微血管和淋巴管的形成。     

Gestational trophoblastic diseases: 1. Pathophysiology of hyperglycosylated hCG

OBJECTIVE: Hyperglycosylated hCG (hCG-H) is a glycosylation variant of hCG produced by cytotrophoblast cells at implantation of pregnancy and in choriocarcinoma. We investigated the biological function of hCG-H in invasion in vitro and in vivo and the use of hCG-H antibodies in blocking tumorigenesis and cancer growth in vivo. METHODS AND RESULTS: hCG-H accounts for 43% to 100% of total hCG immunoreactivity in the culture fluid of choriocarcinoma cell lines and 100% in primary cultures of pregnancy cytotrophoblast cells. We investigated the action of hCG and hCG-H on isolated cytotrophoblast cell primary cultures and on 3 different lines of choriocarcinoma cells cultured on Matrigel basement membrane inserts (culture models for assessing tumor invasion). The addition of hCG-H to medium significantly promoted invasion of membranes with both pregnancy and cancer cell line sources, while regular hCG had no significant effect. JEG-3 human choriocarcinoma cells were transplanted subcutaneously into athymic nude mice. Tumors rapidly formed. B152, mouse monoclonal antibody against hCG-H, and non-specific mouse IgG (control) were administered twice weekly once tumors were clearly visible. While a correlation between time and growth was observed with the control group (r(2)=0.97), no correlation was observed with the B152-treated mice (r(2)=0.15). B152 blocked tumor growth (t test, IgG vs. B152, P=0.003). In a second experiment, antibody B152 or IgG was administered to mice at the time of choriocarcinoma transplantation. B152 significantly inhibited tumorigenesis (t test P=0.0071). CONCLUSIONS: hCG-H is a critical promoter in human cytotrophoblast and human choriocarcinoma cell invasion in vivo and in vitro, promoting tumor growth and invasion through an autocrine mechanism. hCG-H is a signal for choriocarcinoma cell invasion, making it a biological tumor marker. Antibodies against hCG-H block tumor formation and growth. Human or humanized antibodies against hCG-H may be useful in treating and managing choriocarcinoma and other gestational trophoblastic malignancies.     

转导人肿瘤坏死因子α基因对耐药性绒毛膜癌裸鼠移植瘤耐药性的逆转作用

目的　探讨转导人肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor α,TNF α)基因 ,对耐药性绒毛膜癌 (绒癌 )裸鼠移植瘤耐药性的逆转作用。方法　将绒癌细胞系JEG 3(A细胞系 )、耐药性绒癌细胞系JEG 3/VP2 (B细胞系 )和转导TNF α基因的耐药性绒癌细胞系JEG 3/VP2 /TNF α(C细胞系 )接种于裸鼠颈背部皮下 ,建立绒癌裸鼠移植瘤模型。每种细胞系移植瘤模型均分为对照组 (腹腔注入生理盐水 )和化学药物治疗 (化疗 )组 [腹腔注入鬼臼乙叉甙 (VP 1 6) ] ,观察移植瘤的生长特点、组织学结构以及对化疗药物的敏感性 ;用逆转录聚合酶链反应方法和免疫组织化学方法 ,检测转导TNF α基因的耐药性绒癌裸鼠移植瘤中多药耐药 (multidrugresistance ,MDR1 )基因在mRNA和蛋白水平表达的改变。结果　移植成瘤率均为 1 0 0 % ,潜伏期 1 0～ 1 4d ;移植瘤组织学特征符合绒癌特点 ;C细胞系移植瘤的生长速度最慢 ,明显低于A、B两个细胞系的生长速度 (P均 <0 0 5) ;C细胞系对照组裸鼠的移植瘤[体积 (4 2± 0 5)cm3,重量 (0 95± 0 1 2 )g]比B细胞系对照组 [体积 (7 9± 0 3)cm3,重量 (1 60± 0 0 6)g]明显减少 (P <0 0 5) ,应用同样剂量的化学药物作用后 ,C细胞系化疗组肿瘤的抑制率 (41 0 %～42 5 % )接近A细胞系化疗组 (46     

沙立度胺对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤血管生成的影响

目的　探讨沙立度胺(Thd;商品名:反应停)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的影响。方法　建立 15只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成 3组: (1)Thd组:腹腔内注射Thd(200mg·kg-1·d-1,浓度为 62 5mg/L); (2 )Thd+环磷酰胺 (CTX)组:按上述Thd剂量,加入浓度为 100mg/L的CTX(100mg·kg-1·d-1 ),腹腔内注射; (3)生理盐水组:腹腔内注射 0 2ml生理盐水。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化,并采用RT PCR、酶联免疫吸附法、及Picture二步免疫组化法检测各组瘤组织中血管内皮生长因子 (VEGF)mRNA、外周血中VEGF含量及瘤组织中微血管密度(MVD)。结果　 ( 1 )Thd组、Thd+CTX组皮下移植瘤体积明显小于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Thd组瘤组织中VEGFmRNA为 55±9,血中VEGF含量为(29±10)pg/ml;Thd+CTX组瘤组织中VEGFmRNA为 26±7,血中VEGF含量为(12 ±6)pg/ml;生理盐水组瘤组织中VEGFmRNA为 79±7,血中VEGF含量为(71±16)pg/ml。Thd组、Thd+CTX组瘤组织中VEGFmRNA和血中VEGF含量分别与生理盐水组比较,差异均有统计学意义 (P<0.01)。(3)Thd组MVD计数为 (12.6±3.3)条,Thd+CTX组为 (10.6±1.9)条,均明显低于生理盐水组的(19 3±2 8)条(P<0 01)。结论　Thd有抗卵巢癌皮下移植瘤血     

TRAIL对3AO裸鼠移植瘤治疗作用的实验研究

目的 :探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)对 3AO裸鼠皮下及腹腔移植瘤的治疗作用。方法 :将 5× 10 6 和 2× 10 7对数生长期的 3AO分别接种于BALB/C裸鼠右下肢皮下和腹腔内 ;待皮下组移植瘤长至 0 .2 5cm3,腹腔移植瘤组移植后 96h ,随机分为 5组。裸鼠皮下和腹腔移植瘤A、B组为TRAIL组 ,剂量分别为 0 .5 μg/ml和 1μg/ml;C组为TRAIL0 .5 μg/ml加cDDP 1.5mg/kg ,D组为cDDP 3mg/kg ;E组为对照组 (将生理盐水分别注射于瘤周和腹腔 ) ,观察移植瘤成瘤率、裸鼠生存期和生存期延长率。同时观察停药后 1d、1周、2周裸鼠移植瘤细胞的细胞凋亡率及CD95、Apo2 .7、P5 3、Bcl 2基因表达的变化。结果 :(1)A、B、C和D组裸鼠皮下移植瘤的抑制率分别为 2 3%、4 9.1%、6 2 .3%和 5 2 .6 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(2 )腹腔移植瘤组 :A、B、C、D组裸鼠移植瘤的成瘤率分别为 89.1%、72 .3%、5 1.7%和 6 1.5 % ;差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(3)TRAIL作用裸鼠移植瘤后CD95与Apo2 .7的表达均升高 ,P5 3基因表达稍升高 ,Bcl 2基因表达降低。结论 :(1)TRAIL对人卵巢癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用 ,TRAIL能明显降低裸鼠的成瘤率及死亡率 ,延长生存期 ;(2 )其机制可能与基因CD95、Apo2 .7、Bcl 2的调节有关     

沉默MMP-2对人宫颈鳞癌SiHa细胞生物学行为的影响

目的:研究基质金属蛋白酶2(MMP-2)对人宫颈鳞癌SiHa细胞增殖、迁移、侵袭及裸鼠成瘤能力的影响。方法:分别用MMP-2沉默慢病毒感染人宫颈鳞癌SiHa细胞(MMP-2-LV组)、空载慢病毒感染人宫颈鳞癌SiHa细胞为阴性对照组(NC-LV组)。转染后采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)观测MMP-2 mRNA的表达,蛋白质印迹(Western blotting)检测MMP-2蛋白的表达,流式细胞技术、Transwell侵袭、迁移和CCK-8细胞增殖实验观测MMP-2对细胞凋亡、侵袭、迁移和细胞增殖的影响,在裸鼠上构建移植瘤模型观测MMP-2对小鼠皮下成瘤能力。结果:转染后,与NC-LV组比较,MMP-2-LV组细胞MMP-2 mRNA和蛋白的表达量较低(P<0.05),增殖能力降低(P<0.01),侵袭、迁移能力降低(P<0.05),而细胞凋亡率升高(P<0.05)。裸鼠成瘤实验显示,接种MMP-2-LV组细胞的裸鼠皮下成瘤体积小于接种NC-LV组细胞的裸鼠皮下成瘤体积(P<0.01)。结论:沉默MMP-2可抑制SiHa细胞增殖、侵袭及迁移能力并促进其凋亡,MMP-2可能是宫颈鳞癌的潜在诊疗靶点。     

荷人卵巢上皮癌裸鼠冻融卵巢组织移植的效果评价

目的:获取人卵巢上皮癌裸鼠原位移植瘤癌旁正常卵巢组织,经安全筛查并冻融后移植至去势裸鼠体内,探讨移植后效果,为临床应用提供依据。方法:将人卵巢上皮癌OVCAR3细胞种植于裸鼠皮下以获取瘤源,并进行卵巢原位移植,建立卵巢癌原位移植瘤模型,解剖裸鼠获取癌旁正常卵巢组织。癌旁组:取筛选后的癌旁卵巢组织进行玻璃化冷冻,复苏后分别进行皮下及原位移植,各20例;对照组:同龄正常裸鼠卵巢组织,皮下移植及原位移植各20例;去势裸鼠组:20只同龄去势裸鼠;正常卵巢组:20只同龄正常裸鼠。移植12周后,分析各组裸鼠卵巢组织内卵泡形态及激素分泌功能。结果:40只人卵巢上皮癌裸鼠原位移植瘤模型中共获取35份活检正常的癌旁卵巢组织,获取率87.5%(35/40)。玻璃化冷冻前后卵巢组织中卵泡形态及各级卵泡比例均无显著差异(P>0.05),癌旁冷冻组织和癌旁新鲜组织的异常卵泡比例差异无统计学意义(P>0.05),冷冻组织以初级卵泡及次级卵泡等窦前卵泡为主。癌旁组皮下移植组织存活率80%(16/20),对照组皮下移植组织存活率90%(18/20),癌旁组原位移植组织存活率90%(18/20),对照组原位移植组织存活率95%(19/20)。移植后组织内卵泡以次级卵泡及窦状卵泡为主,各级卵泡的形态及构成比和未移植的同龄正常裸鼠卵巢相似(P>0.05);癌旁组卵泡数明显低于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01);皮下移植和原位移植组织内的各级卵泡数差异无统计学意义(P>0.05)。癌旁组卵泡刺激素水平明显低于去势裸鼠组,而雌二醇水平明显高于去势裸鼠组(P<0.01);癌旁组卵泡刺激素水平明显高于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01),而雌二醇水平明显低于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01);皮下移植和原位移植的卵泡刺激素水平和雌二醇水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:癌旁卵巢组织冻融移植后有正常卵泡发育及激素分泌功能;皮下移植和原位移植均可取得较好的效果;癌旁卵巢组织冻融移植有望作为卵巢上皮癌患者治疗后恢复卵巢内分泌功能的有效手段。