双氢青蒿素对肝纤维化小鼠TGF-β1和TNF-α的影响

目的探讨双氢青蒿素(DHA)对四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量的变化。方法实验小鼠随机分成对照组、纤维化组和DHA干预组3组,通过向腹腔注射四氯化碳建立小鼠肝纤维化模型。DHA干预组口服DHA;对照组、纤维化组均口服等剂量的含二甲基亚砜的生理盐水。各组的肝组织切片经苏木素-伊红染色和天狼猩红染色法观察其形态结构变化;生物化学分析法检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的含量。ELISA测定肝组织中TGF-β1和TNF-α的含量。结果观察各组苏木素-伊红染色和天狼猩红染色后肝组织的形态结构表明肝纤维化动物模型的成功建立。纤维化组小鼠肝内肝细胞坏死,汇管区纤维组织和胆总管明显增生,血清中ALT[(142.952 3±23.762 4)U/L]和AST[(177.561 1±15.547 7)U/L]含量增加,肝组织中TGF-β1[(34.121 1±3.091 2)μg/L]和TNF-α[(48.675 3±4.221 3)ng/L]的含量升高,与对照组相比,差异均有统计学意义(均P0.05)。经过DHA治疗后小鼠肝内肝组织坏死减少,肝内纤维组织增生降低,血清中ALT[(87.674 5±16.546 1)U/L]、AST[(127.644 3±21.345 2)U/L]含量减少,肝组织中TGF-β1[(25.901 1±3.567 1)μg/L]和TNF-α[(38.665 1±3.906 5)ng/L]的含量降低,与对照组相比差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 DHA可以拮抗小鼠肝纤维化,是通过减少小鼠肝组织中的TGF-β1和TNF-α的含量来发挥作用的。     

丹参川芎嗪对乙型肝炎大鼠转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α表达影响

目的观察丹参川芎嗪对乙型肝炎大鼠病理形态学及TNF-α、TGF-β1表达影响。方法选择雄性SD大鼠,随机分为对照组(A)、模型组(B)和丹参川芎嗪组(C),每组10只;静脉注射乙型肝炎病毒抗原复制肝炎模型,C组腹腔注射丹参川芎嗪,连续给药3周;免疫组化法检测肝组织TNF-α、TGF-β1表达,ELISA法测定血清TNF-α、TGF-β1、HA、PCⅢ、LN,HE染色观察肝组织病理形态。结果与A组比较,B组ALT、AST、HA、PCⅢ、LN、TNF-α、TGF-β1明显升高;TNF-α、TGF-β1表达增加,肝组织病理损伤明显;C组ALT、AST、HA、PCⅢ、LN、TNF-α、TGF-β1明显低于B组;TNF-α、TGF-β1表达降低,肝组织病理损伤显著改善,上述差异均有统计学意义(P0.05)。结论丹参川芎嗪可改善乙型肝炎大鼠肝纤维化程度,其作用可能与下调TNF-α、TGF-β1表达有关。     

芹菜素纳米乳对肝纤维化的治疗作用

目的 研究芹菜素纳米乳对肝纤维化大鼠的治疗作用,并对其作用机制进行初步研究.方法 采用四氯化碳(CCl4)复制大鼠肝纤维化模型,90只SD大鼠经适应性饲养1周后,随机分为6组,每组15只.正常组以2 mL/kg橄榄油皮下注射;模型组以25％CCl4橄榄油为造模剂,按2 mL/kg皮下注射;治疗组分3组,在皮下注射25％CCl4橄榄油的同时灌胃给予芹菜素纳米乳25、50、100 mg/kg,1次/d;阳性对照组给予造模剂的同时给予水飞蓟宾100 mg/kg.每周造模2次(间隔2d),连续8周.末次给药后24 h,取大鼠血清和肝脏,观察芹菜素纳米乳对大鼠血清肝功能指标ALT和AST,肝纤维化指标透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和肝组织中丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),转化因子-β1(TGF-β1)、金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.结果 芹菜素纳米乳能显著降低ALT、AST、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平(F=13.851、6.877、5.352、7.469、20.874,P均＜0.01),升高SOD和GSH-PX活性,降低Hyp含量(F=5.470、20.734、195.76,P均＜0.01),显著降低TIMP-1、TGF-β1和α-SMA的表达(F=82.281、72.359和91.226,P＜0.01).结论 芹菜素纳米乳对CC14致肝纤维化大鼠具有一定的治疗作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化反应、影响TGF-β1、TIMP-1、α-SMA表达有关.     

木疏胶囊抗大鼠肝纤维化机制

目的观察木疏胶囊对大鼠肝纤维化相关基因表达和细胞免疫的影响,探讨其抗纤维化机制。方法 40四氯化碳,皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型。大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、木疏胶囊预防组和木疏胶囊治疗组、鳖甲软肝片预防组和鳖甲软肝片治疗组。HE和Masson染色观察肝组织病理改变,RT-PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),胶原蛋白Ⅰ(Col-Ⅰ),胶原蛋白Ⅲ(Col-Ⅲ)基因表达,流式细胞术检测血CD4、CD8水平。结果各用药组与模型对照组比较,肝组织学明显改善。木疏胶囊预防组和治疗组与鳖甲软肝片预防组和治疗组比较,α-SMA,Col-Ⅰ、Col-Ⅲ表达显著降低(α-SMA0.40±0.02vs0.64±0.04、0.51±0.05vs0.70±0.04,Col-Ⅰ0.82±0.14vs0.95±0.05、0.73±0.14vs1.04±0.14,Col-Ⅲ0.37±0.02vs0.59±0.03、0.45±0.04vs0.56±0.05,P<0.05,P<0.01),TNF-α表达差异无统计学意义。与模型对照组比较,木疏胶囊预防组和治疗组CD4和CD4/CD8均显著升高(CD...     

虾青素抑制MCD饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝纤维化

目的通过蛋氨酸-胆碱缺乏(Methionine-Choline-Deficient,MCD)饮食诱导的小鼠脂肪性肝炎(NonAlcoholic Steatohepatitis,NASH)模型研究虾青素抗非酒精性脂肪肝纤维化效应及其机制。方法将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和虾青素组,每组10只。模型组饲喂MCD饲料,对照组在MCD饲料基础上每kg饲料添加3 g L-蛋氨酸和2 g胆碱;虾青素组在MCD饲料基础上用虾青素口服液灌胃(20 mg/kg.bw),每周2次。4周后,称量各组小鼠体重、肝重并计算肝脏指数;测定小鼠血清TG、TC、ALT、AST及肝脏TG、TC水平。肝组织苏木素和伊红(Hematoxylin and Eosin,HE)染色观察组织形态学变化;荧光定量PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原的m RNA表达水平。结果模型组小鼠血清ALT、AST水平,肝脏TG、TC水平及α-SMA和Ⅰ型胶原的m RNA表达与对照组相比显著升高(P0.05),上述指标虾青素组与模型组相比显著降低(P0.05);模型组和虾青素组小鼠血清TG、TC水平与对照组相比显著降低(P0.05)。HE染色结果表明,模型组肝组织可见大量脂肪变性,而虾青素组脂肪变性程度明显减轻。结论虾青素可以改善肝功能,且可能通过调控α-SMA和Ⅰ型胶原基因的表达减缓MCD饮食诱导的非酒精性脂肪肝纤维化进程。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对矽肺大鼠肺内P38信号转导通路蛋白表达的调节

目的观察N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠矽肺纤维化模型Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、转化生长因子-β1(TGF-β1)与P38分裂原活化蛋白酶(MAPK)蛋白表达的影响,探讨AcSDKP拮抗矽肺纤维化可能的作用机制。方法选用非暴露式气管灌注法制作大鼠矽肺模型,并给予AcSDKP。免疫组化法、Western-blot法检测肺组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、磷酸化P38 MAPK(phospho-P38 MAPK)、P38 MAPK蛋白的表达。结果与对照组相比,矽肺模型组大鼠肺组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、phospho-P38 MAPK蛋白表达均增加;与矽肺模型组相比,AcSDKP治疗后,大鼠肺组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、phospho-P38 MAPK蛋白表达均明显降低。而各组间比较,P38 MAPK蛋白表达无明显改变。结论AcSDKP可能通过抑制TGF-β1介导的P38 MAPK信号转导途径,从而发挥抗矽肺纤维化的作用。     

贝那普利对肝纤维化小鼠肝组织TGF-β1、IL-1β、iNOS表达的影响

目的:研究贝那普利对肝纤维化小鼠肝组织TGF-β1、IL-1β、iNOS表达的影响。方法 :检测四氯化碳致肝纤维化小鼠的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、水平;实时荧光定量PCR检测肝组织TGF-β1、IL-1β、iNOS等m RNA的表达水平;肝组织进行HE染色、Masson染色。结果 :贝那普利治疗组ALT、AST、TGF-β1、iNOS、IL-1βmRNA水平均低于模型组,均具有差异性(P0.05),贝那普利治疗组HE染色、Masson染色中肝细胞破坏和纤维化程度均低于模型组。结论 :贝那普利对小鼠肝纤维化具有一定的治疗作用,发挥作用的机制可能与TGF-β1、IL-1β、iNOS等的调节有关。     

积雪草苷对心肌梗死大鼠TGF-β1、ColⅠ和Col Ⅲ表达的影响

目的研究积雪草苷对心肌梗死(心梗)大鼠左室心肌纤维化和心肌组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、胶原Ⅰ(collagenⅠ,ColⅠ)和胶原Ⅲ(collagenⅢ,ColⅢ)表达的影响。方法结扎雄性SD大鼠左冠状动脉前降支建立心梗模型,随机分为假手术组(Sham组)、假手术+积雪草苷组(Sham+Asiaticoside组)、心梗模型组(MI组)和心梗模型+积雪草苷组(MI+Asiaticoside组)。造模当天给药,早晚各1次,2周后分别测定各组大鼠心脏左室重量与体重之比、左室梗死面积;免疫组织化学(免疫组化)检测心肌组织非梗死区TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ的表达。计量资料采用t检验,P0.05为差异有统计学意义。结果 MI组左室梗死面积为(24.37±5.69)%,MI+Asiaticoside组左室梗死面积为(25.89±6.27)%,差异无统计学意义(P0.05);MI组左室重/体重为(3.46±0.26)mg/g,MI+Asiaticoside组左室重/体重为(2.53±0.35)mg/g,差异有统计学意义(P0.05);免疫组化染色结果显示,与MI组相比[(8.34±0.62)、(37.66±2.21)、(12.39±1.37)μm2],MI+Asiaticoside组非梗死区心肌TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ的表达[(5.97±0.78)、(17.90±1.36)、(8.14±1.23)μm2]明显降低,差异均有统计学意义(均P0.05)。心梗大鼠非梗死区心肌组织ColⅠ、ColⅢ表达与心肌组织TGF-β1的表达正相关。结论积雪草苷可减少心梗大鼠非梗死区TGF-β1的表达,从而减弱非梗死区心肌组织ColⅠ、ColⅢ异常合成与沉积,减轻心梗后左室心肌纤维化程度,延缓左室重构的发展。     

雷帕霉素对染尘大鼠肺组织胶原蛋白表达的影响

目的探讨雷帕霉素对染矽尘大鼠肺组织胶原蛋白表达的影响。方法对50只SPF级健康雄性大鼠建立肺纤维化模型,随机分为模型组和雷帕霉素组,两组均一次性气管灌注二氧化硅(250 mg/kg);同时,分别腹腔注射生理盐水和雷帕霉毒[2μg/(kg·d)],均隔天给药,持续28 d,分别于第7、14、28、60、90天,用酶联免疫法测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)含量,用Massson染色观察大鼠肺组织病理组织学变化,用q RT-PCR法测定肺组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原m RNA含量。结果大鼠肺组织Massson染色结果显示,雷帕霉素组大鼠肺纤维化较模型组严重。随着时间的延长,模型组大鼠血清中TNF-α和TGF-β逐渐升高,差异有统计学意义(P0.05)。雷帕霉素组大鼠血清中TNF-α和TGF-β随着时间的延长而升高,在60 d时降低,90 d时再次升高;除60 d外,其他时间均高于模型组(P0.05)。随着时间的延长,模型组大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原m RNA逐渐升高,且差异有统计学意义(P0.05)。雷帕霉素组大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原m RNA表达随各时间点呈降低-升高波动趋势,其中Ⅰ型胶原m RNA表达在除60 d外的各时间点均高于模型组,Ⅲ型胶原m RNA表达在7、28、90 d高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论雷帕霉素后期给药可能通过抑制m TOR信号通路而加重染尘大鼠的肺组织纤维化程度。     

PI3K/Akt信号通路与放射性肝损伤的关系研究

目的探讨PI3K/Akt信号通路与放射性肝损伤的关系。方法选取大白兔20只,随机分为观察组(n=10)和对照组(n=10),两组大白兔再随机分为照射前组和照射后7 d组,各5只。观察组给予右半肝伽玛刀单次照射,对照组给予假照射,检测两组大白兔肝功能,采用HE染色和Masson染色观察肝脏组织结构,免疫组化染色检测TGF-β1、α-SMA和p-Akt表达。结果观察组照射后7 d谷丙转氨酶(AST)、谷草转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)和总胆红素(TB)分别为(164.51±25.64)、(76.68±12.10)、(301.15±40.41)和(5.68±0.41)μmol/L,明显高于照射前及对照组(P0.05);照射后7 d,观察组大白兔肝细胞排列紊乱,部分细胞胞质疏松,脂肪变性,呈空泡状,肝小叶结构紊乱,肝小叶内逐渐呈纤维间隔;观察组照射后7 d TGF-β1、α-SMA和p-Akt表达吸光值分别为(0.087±0.012)、(0.073±0.010)和(0.075±0.014),明显高于照射前及对照组(P0.05)。结论 PI3K/Akt信号通路可能参与了放射性肝损伤过程,值得进一步研究。