狂犬病aG毒株适应3aG-V生产株的特性研究

目的研究狂犬病固定毒Vero细胞适应株3aG-V生产株的生物学特性。方法观察毒株形态、培养条件、致病性、免疫原性、毒力试验及其在中枢神经系统是否形成尼氏小体。结果狂犬病aG固定毒3aG-V株具有抗原性好,培养产毒量高,保持有aG固定株弱毒性、传代稳定、无变异的特性。结论狂犬病aG固定毒3aG-V株可作为替代地鼠肾细胞狂犬病疫苗aG毒株,用于Vero细胞培养病毒生产出毒液毒力高、灭活后效力高、安全性好的纯化Vero细胞狂犬病疫苗的生产用疫苗株。     

不同狂犬病毒毒株在Vero细胞上的传代研究

近年来,我国狂犬病流行较为严重,病死数居所有传染病之首。预防和治疗狂犬病的惟一方法是注射狂犬病疫苗,因此,生产优质高效的狂犬病疫苗显得尤为重要。在狂犬病疫苗生产过程中,所选用的毒株直接影响到疫苗的病毒滴度和免疫原性,为了给生产厂家提供一些有效的参考数据,我们对不同的狂犬病毒毒株在Vero细胞上进行了传代比较。1　材料和方法　狂犬病毒液体毒株CTN 1V10 株、CTN BHK株,狂犬病毒脑毒株CTN 1V10 M3 株、aG株,均由中国药品生物制品检定所提供,病毒滴度均在7.0～8.0LogLD50 /ml之间。Vero细胞来源于美国ATCC ,由中国药品…     

柱层析法纯化传代Vero细胞狂犬病疫苗上样量的选择

传代Vero细胞狂犬病疫苗较原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗具有效价高,工艺简单,无外源因子污染,易于大规模生产的优点.其浓缩液经过Sepharose 4FF凝胶柱层析纯化后[1],其杂蛋白去除率可达99%以上,一、二期临床试验证明副反应率极低,且免疫效价可达4.5IU/ml以上,高于<中国生物制品规程>所规定的2.5IU/ml要求.在深入研究纯化工艺最佳条件时,发现待纯化的浓缩疫苗上样量的多少直接影响纯化后疫苗的质量.对此,我们做了研究,结果报告如下.     

两种无佐剂国产狂犬病疫苗的免疫效果观察

目的评价以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)及以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)的免疫效果。方法选取35名(1组)和46名(2组)一般的Ⅱ级暴露后患者,按0、3、7、14和28d的免疫程序,分别接种武汉生物制品研究所(CTN-1株毒种、Vero细胞)和河南普新生物技术公司生产的无佐剂狂犬病疫苗(aG株毒种、原代地鼠肾细胞),观察接种后的不良反应,采用快速荧光灶抑制实验(RFFTT)检测初免后7、14d血清狂犬病毒中和抗体。结果两种疫苗初免后7d的抗体阳转率分别为58.52%和65.22%,无显著性差异,初免后14d的抗体阳转率均为100%,接种Vero细胞狂苗组无不良反应;接种原代地鼠肾细胞狂苗组有1人接种第二针后出现4cm×4cm的红肿。结论两种无佐剂国产狂犬病疫苗产生保护性抗体时间短,以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)免疫效果好于以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)。     

应用柱层析法纯化狂犬病毒的初步研究

根据WHO规程要求，传代细胞制备的人用生物制品须经纯化。因此．我们应用超滤浓缩和柱层析技术，按WHO对Vero细胞狂犬疫苗的指标要求，对Vero细胞狂犬疫苗制备的下游纯化工艺进行了初步研究。1材料与方法1．1细胞与病毒培养Vero细胞源于ATCC株，由卫生部药品生物制品检定所提供。细胞培养采用10L转瓶常规培养、细胞代次控制在150代以内。种毒后7、11、14天收获培养液。1．2毒种使用CTN－V2狂犬病毒固定毒，Vero细胞适应株，由卫生部药品生物制品检定所提供。1．3检测指标及方法病毒毒力滴定及效力试验，均参照《中国生物制品规程》…     

不同浓缩倍数的Vero细胞狂犬病疫苗的效力结果及稳定性结果比较

我国现行的狂犬病疫苗是人用纯化狂犬病疫苗 ,为了给疫苗的生产和使用提供有效的实验数据 ,我们将毒力合格的Vero细胞狂犬病疫苗进行了 10 0倍浓缩和纯化 ,而后对之进行不同倍数的稀释 ,同时将部分不同浓度的样品在 3 7℃放置 14d ,按《中国生物制品规程》的方法做效力试验及热稳定性试验。1　材料和方法　1.1　材料　人用纯化Vero细胞狂犬病疫苗 ,由沈阳安迪生物高科技公司生产 ;1.0ml 剂 ,液体佐剂苗。攻击用毒株 (CVS)及标准狂犬病疫苗 (第 6批 ) ,均由中国药品生物制品检定所提供 ;实验用小白鼠 (昆明种 ) ,由中国医科大学动物室提供…     

精制Vero细胞狂犬病疫苗的研制及免疫学效果观察

目的　以Vero细胞为基质，研制新一代精制Vero细胞狂犬病疫苗。方法　以CTN-1V10为生产毒株，以＜150代Vero细胞为培养基质，采用转瓶旋转培养，按不同时间收获病毒液，经过澄清、浓缩、纯化、灭活制成精制Vero细胞狂犬病疫苗。从以此工艺制备的疫苗中选取一批做为免疫学效果观察的受试疫苗。按暴露后免疫程序接种63人，其中受试疫苗接种33人，法国维尔博狂犬病疫苗接种30人，观察不良反应和测定中和抗体。结果　新研制的精制Vero细胞狂犬病疫苗各项指标完全符合WHO的有关质量要求。两种疫苗全程免疫后中和抗体阳转率均为100%，中和抗体受试组为11.94IU/ml;维尔博疫苗对照组为11.69IU/ml。结论　精制Vero细胞狂犬病疫苗不但制造工艺合理，而且副反应轻微，免疫原性良好。     

密度梯度离心法纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗

我国因动物咬伤年需注射狂犬病疫苗 50 0万人次以上 ,但我国现行的浓缩原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗 ,虽然免疫效果尚可 ,但接种者的局部及全身副反应率较高 ,甚至偶有死亡病例。为此 ,我们对地鼠肾细胞狂犬病疫苗进行密度梯度离心法纯化研究。一、材料与方法1 材料 :用 11～ 13ｇ健康金黄地鼠 ,无菌取肾 ,按常规方法用 10Ｌ转瓶培养单层细胞 ,33℃、37℃培养 ,接种后 4ｄ、7ｄ两次收获病毒液 ,即为粗制疫苗。使用北京ａＧ株狂犬病毒株为生产用毒株 (中国药品生物制品检定所提供 )。病毒毒力滴定、蛋白含量及效力试验测定均参照文献 [1],小牛血…     

剖析狂犬病（六）狂犬病疫苗使用须知

狂犬病疫苗是预防狂犬病的有力武器。随着科学技术的发展，狂犬病疫苗的种类不断更新，产品质量也不断提高。目前，我国生产的狂犬病疫苗主要是：原代地鼠肾细胞疫苗和Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞）疫苗。由于原代地鼠肾细胞疫苗时常出现一些过敏反应，导致个别患者无法完成全程注射，因此又开发出了纯化地鼠肾细胞佐剂疫苗和纯化地鼠肾细胞无佐剂疫苗。     

人用精制狂犬病疫苗的免疫效果观察

新一代人用精制狂犬病疫苗研制成功，替代人用浓缩狂犬病疫苗已成为必然趋势。为了解不同人用狂犬病疫苗及不同剂量精制狂犬病疫苗在不同人群中的免疫效果，进行了未成年人、成年人接种效果观察，结果如下。 一、对象与方法 1．疫苗 人用浓缩狂犬病疫苗由武汉生物制品研究所提供，批号为20001257-4，每支剂量≥2.5IU，中华地鼠肾细胞人用精制狂犬病疫苗由河南普新……