微型核糖核酸-29c靶向调控血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1在子宫内膜异位症不孕中的作用

目的明确微型核糖核酸-29 c(microRNA-29 c)与血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1(serum and glucocorticoid-inducible kinases 1,SGK 1)的靶向调控关系,并探讨该调控关系与子宫内膜异位症伴不孕的关系。方法收集2015年1月至2016年3月于德州市中医院行腹腔镜手术治疗的单纯子宫内膜异位症患者(24例)、子宫内膜异位症伴不孕患者(22例)分泌期在位子宫内膜上皮细胞,另取同期健康对象(18例)的分泌期在位子宫内膜上皮细胞,采用荧光定量聚合酶链反应技术(quantitative polymerase chain reaction,q PCR)检测并对比3组miRNA-29 c及SGK 1 mRNA表达量,分析miRNA-29 c与SGK 1 mRNA相关性;以子宫内膜异位症伴不孕患者子宫内膜细胞为标本,原代培养人子宫内膜细胞,以pre-miRNA-29 c转染,使miRNA-29 c在细胞中过表达,应用q PCR技术检测miRNA-29 c与SGK 1 mRNA变化情况。结果 1子宫内膜异位症伴不孕患者miRNA-29 c及SGK 1 mRNA表达量明显高于单纯子宫内膜异位症患者及正常对照组(P0.05);miRNA-29 c与SGK 1 mRNA的表达呈显著正相关(P0.05);2 miRNA-29 c过表达后,SGK 1 mRNA的表达量明显上升(P0.05)。结论 miRNA-29 c能够正向调控SGK1 mRNA的表达,这可能是导致子宫内膜异位症患者不孕的机制之一。     

早孕蜕膜绒毛基质金属蛋白酶-9和其基质金属蛋白酶抑制物-1的表达特点及作用

目的　研究基质金属蛋白酶 -9(MMP -9)和基质金属蛋白酶抑制物 -1(TIMP -1)在早孕期蜕膜和绒毛中的表达特点。方法　选择 45例正常早孕蜕膜绒毛标本和 3 0例正常妇女分泌中期子宫内膜标本 ,作MMP -9及TIMP -1免疫组化染色 ,测定阳性表达的光密度值 ,比较早孕蜕膜绒毛MMP -9及TIMP -1的表达与分泌中期子宫内膜表达的差异。结果　早孕子宫蜕膜、绒毛MMP -9的光密度值为 0 168± 0 0 5 5 ,TIMP -1的光密度值为 ( 0 15 5± 0 0 46) ,分泌中期子宫内膜MMP的光密度值为 ( 0 13 3±0 0 2 10 ) ,TIMP -1光密度值为 0 113± 0 0 2 5 1。早孕组的表达明显强于分泌中期子宫内膜 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　正常早孕子宫蜕膜、绒毛强表达MMP -9/TIMP -1,二者高水平上的动态平衡 ,对早孕的维持起着重要作用     

MMP-9/TIMP-1在多囊卵巢综合征流产患者子宫内膜的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)与多囊卵巢综合征(PCOS)高流产率的关系。方法:应用免疫组化S-P法,检测MMP-9和TIMP-1在20例多囊卵巢综合征流产患者子宫蜕膜组织和20例早孕蜕膜组织中的表达情况。结果:MMP-9在PCOS胚胎停育患者子宫蜕膜细胞胞浆内的表达高于正常早孕蜕膜组织,但差异无统计学意义(P>0.05),而TIMP-1在PCOS胚胎停育患者子宫蜕膜细胞胞浆内的表达水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:MMP-9和TIMP-1在PCOS流产患者子宫蜕膜组织中呈差异性表达,比例失衡,这可能是导致高流产率的主要原因。     

微小RNA-200家族在子宫内膜癌中的表达及意义

目的研究微小RNA(microRNA,miRNA)-200家族在子宫内膜癌及子宫正常内膜组织中的表达量,分析miRNA-200家族的表达量和子宫内膜癌临床病理特征的关系及其对子宫内膜癌发生发展的意义。方法子宫内膜癌组选取子宫内膜样腺癌组织47例,按国际妇产科联盟(FIGO)手术病理标准进行临床分期;正常对照组为子宫肌瘤患者之正常子宫内膜组织,共11例。所有样本均采用荧光实时定量PCR方法检测miRNA-200家族的表达量。结果在子宫内膜癌组织中miRNA-200b,miRNA-200c,miRNA-205的表达分别为4.83±2.89,11.34±7.51,6.53±3.83,在正常子宫内膜组中其表达分别为0.98±0.77,0.49±0.56,1.04±0.76。子宫内膜癌miRNA-200家族的表达较正常内膜组织明显升高(P<0.01)。子宫内膜癌组中根据组织分型G1、G2、G3分别有11、29、7例,而临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期的分别有35、9、3例;子宫内膜癌miRNA-200家族高表达与患者年龄、组织学分级、临床分期均无相关性(均P>0.05)。结论 miRNA-200家族可能参与了子宫内膜癌的发生、发展...     

转录因子C/EBP-β在人子宫内膜中的表达

目的:探讨转录因子C/EBP-β在人正常子宫内膜及早孕蜕膜中的表达及其变化规律。方法:采用免疫组化进行组织学定位,采用免疫印迹进行蛋白质定量,采用RT-PCR进行mRNA检测,在蛋白质水平和mRNA水平检测人正常月经周期子宫内膜及早孕蜕膜中转录因子C/EBP-β的表达变化。结果:C/EBP-β蛋白主要在人子宫内膜基质细胞核中表达,C/EBP-β蛋白及mRNA在增生期C/EBP-β仅有弱表达,分泌期显著增加(P<0.05),以分泌晚期表达最强,在早孕蜕膜组织中也有较强的表达(P<0.05)。结论:C/EBP-β在人正常子宫内膜分泌晚期及早孕蜕膜组织中呈现较强的表达,可能在胚胎着床及妊娠的维持中发挥着重要的调节作用。     

LIF在米非司酮药物流产蜕膜组织中的表达及意义

目的:通过对比观察米非司酮对早孕蜕膜组织中白血病抑制因子(LIF)表达的影响,探讨米非司酮终止早孕的分子免疫机制。方法:采用免疫组化染色测定蜕膜组织中LIF的表达,其中正常早孕人工流产组20例,米非司酮药物流产组22例。同时采用放射免疫法测定两组孕妇血清孕酮及人绒毛膜促性腺激素(HCG)水平。结果:LIF在正常早孕蜕膜组织中均呈阳性表达,主要在蜕膜组织腺体和内膜细胞染色较明显。LIF在米非司酮药物流产组表达强度较人工流产组明显降低(P<0.01);药物流产组血清孕酮及HCG水平显著低于人工流产组(P<0.01)。结论:米非司酮明显降低LIF在蜕膜组织中的表达,引起HCG及孕酮分泌下降,从而影响胚胎发育引起流产,达到终止早孕的目的。     

血管内皮细胞生长因子及血管生成素Ⅰ和Ⅱ在药物流产宫腔残留蜕膜组织中的表达

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素I（Ang—Ⅰ）和Ang-Ⅱ在药物流产异常子宫出血者子宫内膜组织中的表达,探讨其与异常子宫出血的关系。方法20例药物流产后异常子宫出血者官腔刮出物行病理学检查,另外选取20例药物流产后无异常出血者的宫腔排出物及20例早孕人工流产者的官腔刮出物做对照,应用免疫组织化学方法检测3组子宫内膜组织中VEGF、Ang—Ⅰ、Ang-Ⅱ的阳性表达率和表达强度的差异。结果Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ蛋白在药物流产后的子宫内膜组织的腺上皮及内膜基质细胞和血管壁中均有表达,以在腺体表达为主;异常出血组VEGF、Ang—Ⅰ和Ang-Ⅱ的表达强度较药物流产无异常出血组增高,差异有统计学意义,与早孕手术流产组比较,差异无统计学意义。结论药物流产后绒毛和蜕膜的残留可能是导致患者出血时间延长和出血量多的主要原因;药物流产后异常子宫出血者子宫内膜中Ang的表达增强,可能引起血管生成的异常,从而使绒毛和蜕膜不容易脱落或子宫内膜的修复受影响,导致出血时间延长。     

复发性流产妇女围植入期子宫内膜HIF-1α、VEGF及微血管的表达和意义

目的探讨复发性流产妇女围植入期子宫内膜缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及微血管的表达及意义。方法选择2016年4月-2018年1月邵阳市中心医院妇产科收治的58例不明原因复发性流产妇女作为病例组,生育正常妇女40例为正常组,使用Pipelle取样器获得受试者围植入期子宫内膜活组织样本,RT-PCR检测子宫内膜HIF-1α和VEGF mRNA表达水平,免疫组织化学染色法检测子宫内膜HIF-1α和VEGF蛋白表达水平,并计算微血管密度(MVD),分析病例组子宫内膜HIF-1α和VEGF表达水平及意义。结果病例组子宫内膜HIF-1α、VEGF mRNA均显著高于正常组,MVD显著高于正常组,子宫内膜HIF-1α和VEGF蛋白阳性表达率显著高于正常组,差异均有统计学意义(P0. 05)。HIF-1α蛋白主要在子宫内膜胞质中表达,VEGF蛋白主要在子宫内膜腺上皮中表达。病例组再次流产患者子宫内膜HIF-1α和VEGF表达水平显著高于未流产患者,差异有统计学意义(P0. 05)。病例组子宫内膜HIF-1α、VEGF表达水平与MVD分别呈显著正相关关系(r=0. 687、0. 724,P0. 05)。结论复发性流产妇女围植入期子宫内膜HIF-1α和VEGF表达及MVD异常升高,可能是复发性流产发生的病理机制之一。     

CXCL12与不明原因复发性流产的相关性研究

目的 通过探讨正常早孕妇女和有复发性流产史的早孕妇女之间绒毛及蜕膜组织中趋化因子12(CXCL12)的表达,了解CXCL12在妊娠中的作用.方法 通过免疫组织化学分别检测30例正常早孕妇女和有复发性流产史的早孕妇女绒毛及蜕膜组织中CXCL12的表达情况.结果 正常早孕妇女与有复发性流产史的早孕妇女绒毛组织和蜕膜组织中CXCL12的表达比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 在妊娠早期绒毛及蜕膜组织中CXCL12的表达下降,可能在不明原因复发性流产的发生中起着重要作用.     

尿路上皮癌抗原1在子宫内膜异位症患者在位内膜中的表达及意义

目的检测子宫内膜异位症患者在位内膜中lncRNA尿路上皮癌抗原1(UCA1)的表达情况,探讨其在子宫内膜异位症病因学中的意义。方法选取2015年3-11月在中国医科大学附属盛京医院经病理证实为子宫内膜异位症患者的在位内膜标本30例(其中分泌期13例,增生期17例)为实验组,正常子宫内膜标本20例(分泌期7例,增生期13例)为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术检测两组子宫内膜组织中UCA1的表达。结果实验组在位内膜、增生期内膜和分泌期内膜中UCA1相对表达量明显高于相同时期对照组,差异均有统计学意义(均P0.01)。而两组组内增生期与分泌期的子宫内膜中UCA1的相对表达量比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。结论在位内膜中UCA1基因的高表达与子宫内膜异位症密切相关,可能参与子宫内膜异位症的发生发展。UCA1的表达水平可能不受内膜月经周期变化的影响。     

miRNA-497在肿瘤中的研究进展

MicroRNA是一类内源性非编码小RNA,通过与靶mRNA结合而引起靶mRNA降解或翻译抑制而导致靶基因表达受抑。本文主要概述了miRNA-497在肿瘤中的作用及其机制。近年来,研究发现miRNA-497可以通过靶向调节细胞周期、PI3K-AKT-mTOR、MAPK/ERK等信号通路上的一些关键分子而促进细胞凋亡、抑制细胞增生、转移、侵袭等。有文献报道,在乳腺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、肺癌、神经细胞瘤、神经母细胞瘤、恶性星形细胞瘤、恶性黑色素瘤、膀胱癌、骨肉瘤、肾上腺皮质癌、视网膜母细胞瘤、原发性腹膜癌、恶性胸膜间皮瘤中,由于基因缺失、甲基化或组蛋白修饰等使miRNA-497呈低表达,因而miRNA-497对其靶基因的抑制作用减弱,最终导致上述肿瘤的发生发展、转移、侵袭等。由此可见,miRNA-497是一个非常重要的肿瘤抑制性microRNA,不但可以作为诊断肿瘤的标志物,而且还可以作为治疗肿瘤的新靶点,具有非常重要的临床应用前景和价值。     

miRNA-192在乳腺癌组织中的表达

目的 比较乳腺癌组织和癌旁正常组织中miRNA-192的表达是否有差异及其与病理类型和病变进展之间的关系.方法 通过整群抽样的方法选取19例乳腺癌患者手术切除的乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织,采用TRIzol法提取标本组织的总RNA,利用SYBR Green实时荧光定量PCR方法对miRNA-192进行定量检测,比较乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织miRNA-192的表达是否有差异.结果 miRNA-192在乳腺癌组织中表达量(△Ct值)为10.58±3.78,在正常乳腺组织的表达量(△Ct值)为11.16±3.40,差异无统计学意义.经Spearman相关分析,乳腺癌组织中的miRNA-192表达倍数(2-△△Ct值)与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、妊娠次数、肿瘤分期、生产次数、孕激素分泌无相关关系,仅与雌激素分泌呈负相关(P＜0.01);经逐步法线性回归分析,以miRNA-192表达倍数为因变量时,各临床资料变量均未进入回归方程.结论 乳腺癌患者癌组织及癌旁正常乳腺组织中miRNA-192的表达无明显差别.     

前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子、miRNA-15a、miRNA-34b和miRNA-103及CYP1A2基因多态性研究

目的探讨前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子、微小RNA(microRNA,miRNA)-15a、miRNA-34b和miRNA-103及CYP1A2基因多态性相关性。方法选择浙江省医疗健康集团杭州医院于2017年7月-2019年7月收治的前列腺增生症患者112例,均行经尿道前列腺等离子双极电切术(Transurethral plasmakinetics resection of prostate,TUPKRP),根据是否发生术后尿路感染分为感染组(n=27)与非感染组(n=85)。分析两组患者血清炎症因子,外周血miRNA-15a、miRNA-34b和miRNA-103表达,及CYP1A2基因多态性变化。结果感染组血清CRP、TNF-α、IL-6和PCT水平高于非感染组(P<0.05)。感染组外周血miRNA-15a表达低于未感染组,而miRNA34b和miRNA103表达高于未感染组(P<0.05)。感染组CYP1A2基因位点rs2069514-3859等位基因A分布高于非感染组,而G分布低于非感染组(P<0.05)。感染组CYP1A2基因位点rs20695143859基因型AA分布高于非感染组(P<0.05)。结论前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子CRP、TNF-α、IL-6和PCT水平升高,血miRNA-15a低表达及miRNA34b和miRNA103高表达参与了术后尿路感染发生、发展,且CYP1A2基因位点rs20695143859等位基因A可能为术后尿路感染易感基因。     

电离辐射诱发人外周血miRNA-150表达水平的改变及意义

目的 通过实时定量PCR技术检测不同剂量照射引起人外周血miRNA-150表达的差异,从而探讨miRNA-150在机体辐射损伤中的意义。方法 将采集的静脉血分别给予0.5、1、2、4、8 Gy剂量照射,并设置对照组。照射后将血样接种于含10%小牛血清的RPMI1640培养瓶中,置于37℃恒温培养箱中培养,利用实时定量PCR技术检测照射8、24 h后miR-150的含量变化;采用tbools软件进行miR-150序列比对,Starbase数据库预测miR-150靶基因。结果 miR-150在0.5、1、2、4、8 Gy照射后8 h后2^-△△Ct值分别为0.66、0.68、0.74、0.75、0.63,与未照射组相比,差异有统计学意义;照射24 h后2^-△△Ct值分别为0.94、0.95、0.71、0.59、0.67,较8 h均出现了不同程度的表达下调,与未照射组相比,差异有统计学意义;人与小鼠miR-150-5p序列一致,miR-150-3p种子序列区存在单一碱基差异,靶基因预测表明BASP1、MAP3K12和ZBTB4基因为人miR-150靶向基因的可能性最高。结论 照射后外周血中miR-150差异表达与辐射损伤有关,可成为预测辐射损伤的潜在生物标志物。     

miRNA-21在新生儿缺氧缺血性脑病患儿血清中表达的意义

目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic brain damage, HIE)患儿血清miRNA-21表达及其对新生儿HIE发生发展的意义,为新生儿HIE的早期诊断和预后提供科学依据。 方法 将2015年3月-2016年11月在新乡医学院第一附属医院出生的新生儿,分为:缺氧缺血组(HIE组)51例并用神经节苷脂对其进行治疗;正常对照组28例,共计79 例。两组于生后24~48 h内及治疗15 d后分别采静脉血5 ml。利用实时荧光定量 PCR 检测血清miRNA-21和低氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达水平。 结果 治疗前HIE组与对照组比较,HIE组血清miRNA-21含量(5.25±2.17)显著高于对照组(1.21±0.10)(P<0.05);血清HIF-1α含量(8.76±3.23)高于对照组(1.28±0.10)(P＜0.05)。治疗15 d后,HIE组血清miRNA-21含量(2.13±1.06)和HIF-1α含量(3.64±3.34)与治疗前(5.25±2.17、8.76±3.23)相比,均显著降低(P＜0.05)。 结论 血清miRNA-21和HIF-1α高表达与新生儿缺氧缺血性脑病相关,有望作为新生儿缺氧缺血性脑病早期诊断和预后的生物学指标。     

循环miRNA-210的表达与胎儿生长受限的相关性分析

目的 分析miRNA-210与胎儿生长受限的相关性,阐明循环中miRNA-210在胎儿生长受限发病机制中的作用,为胎儿生长受限的早期诊断及病理机制提供新的生物学标志物.方法 选择2015年1月至2016年1月在扬州市妇幼保健院分娩的产妇,采取随机原则,选取符合胎儿生长受限孕足月分娩(包括顺产及剖宫产)的30例孕妇为胎儿生长受限组,选取同期足月分娩正常体重新生儿的孕妇30例为对照组,采集两组孕妇外周血,提取RNA采用Trizol法,Real Time-PCR分别测定胎儿生长受限组和对照组循环中miRNA-210的表达水平与选择内参基因U6表达的相对值,分析miRNA-210与胎儿生长受限的相关性.结果 胎儿生长受限组与对照组产妇年龄、孕前体重、孕周比较无明显差异(t值分别为0.84、0.74、0.48,均P>0.05),但胎儿生长受限组新生儿体重明显低于对照组,差异有统计学意义(t=8.56,P<0.01).胎儿生长受限组miRNA-210的表达水平为4.58,与对照组相比,表达明显增加(t=7.43,P<0.01).miRNA-210可作为一个潜在的生物学标志物来区分胎儿生长受限及正常发育儿.结论 胎儿生长受限组循环中miRNA-210的表达水平明显升高,miRNA-210可能参与了胎儿生长受限的发病,循环中miRNA-210可作为胎儿生长受限诊断的生物标志物.     

miRNA-10b在非小细胞肺癌诊断中的价值

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中miRNA-10b表达水平,确定miRNA-10b在肺癌诊断中的临床价值。方法选取2019年2月-2020年2月在吉林市中心医院接受治疗的NSCLC患者80例及同期健康志愿者80例分别作为观察组和对照组,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测两组外周血中miRNA-10b的含量表达情况,描绘ROC曲线,并研究miRNA-10b在肺癌诊断中的临床价值。结果观察组患者外周血中miRNA-10b的表达水平中位数明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miRNA-10b的灵敏度为48.0%,特异度为82.0%,约登指数为0.249。结论 miRNA-10b是针对NSCLC的良好肿瘤标志物,对NSCLC的诊断特异性较高,将成为NSCLC特异性肿瘤标志物。