DEHP对大鼠睾丸支持细胞间隙连接蛋白43表达和间隙连接通讯功能的影响

目的 通过对原代培养的大鼠睾丸支持细胞进行邻苯二甲酸二乙基己酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)染毒,探讨DEHP体外对大鼠睾丸支持细胞间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达及间隙连接通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)功能的影响.方法 体外分离和原代培养大鼠睾丸支持细胞,应用不同浓度的DEHP(10、50、100nmol/L)作用于支持细胞24h,应用荧光定量PCR法检测Cx43基因mRNA表达,用Weastern blot方法检测Cx43蛋白表达,划痕标记荧光染料示踪方法检测GJIC功能.结果 与对照组相比,DEHP各组支持细胞Cx43基因mRNA和蛋白表达均下降(P＜0.05),呈浓度依赖关系,同时支持细胞GJIC功能降低.结论 DEHP在体外可通过抑制大鼠睾丸支持细胞Cx43基因表达而抑制GJIC功能,进而影响支持细胞功能.     

可吸入颗粒物PM10对细胞间隙连接通讯的抑制作用

[目的] 研究直径≤10 μm的可吸入大气颗粒物(PM10)对细胞间隙连接通讯的影响,探讨PM10的非遗传毒性作用.[方法] 用大流量采样器,采集城区交通干道旁约18 m高度处大气中的PM10.超纯水超声提取、低温真空冷冻干燥制备PM10悬液.采用细胞代谢协同试验和染料划痕试验观察PM10对中国仓鼠肺成纤维V79细胞以及人肺成纤维细胞间隙连接通讯的影响.[结果] PM10抑制V79细胞的代谢协同作用, 使V79-细胞的存活率增高,在1.0～100 mg/L剂量范围内,与对照组比较,克隆形成数明显增高,有剂量-反应关系(r=0.94, P＜0.05).细胞划痕实验结果显示,在PM10 1.0～100 mg/L剂量范围内,在人肺成纤维细胞中荧光染料扩散距离随剂量的增加而减小(7.5～21.61 mm),与对照组(26.56 mm)比较,差异显著.[结论] PM10能抑制细胞间隙连接通讯,提示可能在癌症的发生过程中起促进作用.     

大气细颗粒物对心肌细胞缝隙连接通讯的影响

目的 探讨大气细颗粒物(PM2.5)对原代培养大鼠心肌细胞的急性毒性作用及对缝隙连接通讯的影响.方法 对出生24 h的SPF级SD大鼠乳鼠分离心肌细胞进行原代培养,以不同浓度(0、1、10、100g/μml)的PM2.5染毒24 h,采用划痕染料标记示踪法(SLID)测定细胞缝隙连接通讯(GJIC)水平,采用间接免疫荧光细胞化学方法测定缝隙连接蛋白Cx43分布及密度,采用免疫印迹法测定连接蛋白Cx43的表达.结果 随PM2.5浓度的上升,细胞间荧光扩散面积减少,细胞膜连接处Cx43绿色荧光减弱,Cx43蛋白表达量稍有减少.与对照组比较,10和100μg/ml染毒组细胞间荧光扩散面积减少,差异有统计学意义(P<0.01);10和100 μg/ml染毒组Cx43荧光强度下降,差异有统计学意义(P<0.01).结论 PM2.5可抑制心肌细胞的缝隙连接通讯功能.其机制可能是通过影响心肌细胞的Cx43表达和分布.     

呼和浩特市轻、重污染区空气颗粒物质量浓度及变化特征

目的了解呼和浩特市轻重污染区空气颗粒污染物水平及变化趋势。方法选择呼和浩特市回民区未来城社区设定为重污染区监测点,呼和浩特市赛罕区乌兰察布东路社区设置为轻污染区监测点,分别在两个监测点监测2014—2017每日24 h的空气颗粒物PM_(10)和PM_(2.5)浓度,通过每日颗粒物测量值计算年平均质量浓度,2014—2017年各季度污染物平均质量浓度,从而进行具体分析,运用卡方检验对比分析两监测点历年空气颗粒物质量浓度变化趋势。结果呼和浩特市轻污染区赛罕区不同年份PM_(10)质量浓度差异有统计学意义(H=110.661,P<0.001),2014年最高,2014—2016年逐年降低,2017年有所回升,PM_(2.5)质量浓度差异有统计学意义(H=33.178,P<0.001),2014年平均质量浓度最高,同样2014—2016年逐年降低,2017年有所升高。重污染区回民区不同年份PM_(10)质量浓度差异有统计学意义(H=33.475,P<0.001)2014年最高,2014—2016年逐年降低,2017年相对较高。PM_(2.5)质量浓度差异有统计学意义(H=57.582,P<0.001)2014年最高,2015—2017年呈逐年升高趋势。回民区PM_(10)年平均质量浓度高于赛罕区,差异有统计学意义(Z=-10.644,P<0.001)。回民区PM_(2.5)年平均浓度高于赛罕区,差异有统计学意义(Z=-10.189,P<0.001)。2014—2017年回民区PM_(10)和PM_(2.5)超标天数均多于赛罕区。结论呼和浩特市回民区空气颗粒物PM_(10)和PM_(2.5)年平均质量浓度高于赛罕区,高空气颗粒物质量浓度主要集中在冬季。两地区2014—2017年空气颗粒物PM_(10)和PM_(2.5)质量浓度总体呈下降趋势。     

心肌肥厚大鼠心肌细胞变化与Cx43表达

目的 探讨异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)致心肌肥厚大鼠心肌细胞间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx 43)表达的变化.方法 皮下注射,异丙肾上腺素4 mg/(kg·d),每日2次,连续5 d,建立大鼠心肌肥厚模型(ISO组),观察大鼠体重(mB)、心脏重量(mH)和左心室重量(mLV),心肌细胞横径(transdiameter of cardiomyocyte,TDM)和心肌细胞截面积(cardiomyocyte area,CA),苏木素伊红(HE)染色观察细胞病理学改变,免疫组化染色和蛋白印记(western blotting)方法观察心肌细胞Cx 43的变化.结果 与对照组比较,ISO组大鼠mH/mB、mLV/mB、TDM和CA明显增加(P＜0.05,P＜0.01);心肌细胞病理学显示,ISO组心肌纤维走向紊乱,细胞大小不均,较对照组心肌细胞变大,密度变小;免疫组化结果表明,对照组大鼠心肌细胞Cx43颗粒典型地排列在心肌闰盘处,ISO组心肌细胞Cx43颗粒发生重排,杂乱分布于闰盘、心肌细胞膜各部位和胞浆内;蛋白印记法结果显示,ISO组Cx 43表达量明显低于对照组.结论 异丙肾上腺素致心肌肥厚导致Cx 43蛋白表达改变,加速间隙连接降解和功能异常.     

2013年丰台区PM_(2.5)与居民呼吸系统疾病死亡的关系研究

目的研究2013年北京市丰台区PM_(2.5)对居民呼吸系统疾病死亡水平的影响。方法分析2013年北京市丰台区大气污染物PM_(2.5)的污染情况、居民呼吸系统疾病死亡水平以及气象状况,采用分布滞后非线性模型研究2013年北京市丰台区大气污染物PM_(2.5)对居民呼吸系统疾病死亡水平的影响。结果北京市丰台区2013年大气PM_(2.5)年平均质量浓度为100.92μg/m~3,居民呼吸系统疾病死亡人数为764人。大气PM_(2.5)质量浓度与日平均相对湿度、居民呼吸系统疾病死亡水平、女性居民呼吸系统疾病死亡水平呈正相关关系(P<0.05);大气PM_(2.5)质量浓度与日平均气温、日平均气压、男性居民呼吸系统疾病死亡水平无相关性。在污染当天PM_(2.5)每升高10μg/m~3,相对危险度RR值为1.0252(95%CI:1.0113~1.0393)。结论 2013年北京市丰台区PM_(2.5)年平均质量浓度为100.92μg/m~3,超过国家规定二级标准的34.56%,居民呼吸系统疾病死亡数随着PM_(2.5)质量浓度的升高而升高。     

大气PM2.5对自发性高血压大鼠心律的影响及其机制研究

目的 探讨大气细颗粒物(PM2.5)对自发性高血压大鼠(SHR)心律的影响及其机制.方法 将28只自发性高血压大鼠(SHR)随机分为4组,即空白膜对照组、7.5、15和30mg/kg剂量组.颗粒物采用一次性气管滴注染毒,染毒24h后处死动物.染毒30 min、1 h、24 h后测定SHR大鼠心电图,采用间接免疫荧光细胞化学方法测定大鼠心脏缝隙连接蛋白Cx43的分布及表达密度,采用免疫印迹法测定连接蛋白Cx43的表达;采用试剂盒法测定心肌组织MDA和SOD水平.结果 染毒30 min后,各组SHR大鼠均较基础测量时心律失常发生率增加,染毒1 h后对照组恢复正常心律,而染毒组仍显示异常心律,染毒24 h后各组均恢复正常心律Cx43免疫荧光结果显示,染毒24 h后,15和30 mg/kg剂量组SHR大鼠心肌连接蛋白Cx43荧光强度显著降低(P<0.01),其中30mg/kg剂量组心肌细胞闰盘处几乎未见荧光分布;Western blot测定结果显示,随着PM2.5染毒剂量的增加,心肌组织Cx43表达逐渐减少,尤其以15、30 mg/kg剂量组蛋白水平降低最为显著(P<0.01),分别为对照的56%和45%;此外,随着PM2.5染毒剂量的增加,心肌组织丙二醛(MDA)含量有所增加.超氧化物歧化酶(SOD)活力逐渐减少,但与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 大气PM2.5可引起自发性高血压大鼠心律异常的发生,心肌组织Cx43表达的减少可能是其机制之一.     

连接蛋白与肿瘤发生和矽肺纤维化的关系

以细胞间的间隙连接(gap junction,GJ)为途径的细胞间直接的信息交流,称为间隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication,GJIC).GJIC在胚胎发育、细胞分化和生化控制等生物过程中起重要作用.肿瘤是一种增殖失控和分化紊乱的疾病,早在60年代,Stoker和Lowenstein就提出GJIC在肿瘤抑制中起作用.随着对GJIC研究的深入,以及间隙连接蛋白的分离及其基因的克隆,GJIC的分子基础-连接蛋白基因表现出肿瘤抑制基因的特点.本文就连接蛋白的结构与分布,以及所表现出的肿瘤抑制特性进行讨论,并对连接蛋白的正常功能性表达与矽肺纤维化发生的关系作一展望.     

大气细颗粒物染毒致C57BL/6和C3H/He品系小鼠基因表达的差异

[目的]染毒大气细颗粒物(PM_(2.5))后,比较C57BL/6(B6)和C3H/He(C3)品系小鼠肺部基因表达是否存在差异。[方法]采用气管滴注的染毒方法,对C57BL/6(B6)和C3H/He(C3)小鼠均予PM_(2.5)连续染毒2d,末次染毒24h后,处死小鼠,取肺组织并且立即置于液氮中。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析肺部基因的表达情况。[结果]Cxcl2,C4,Hc和Cp是表达上调的基因,图像分析结果表明,基因表达量在B6染毒组肺部分别为:1.03±0.02、1.02±0.01、1.07±0.02和1.05±0.01;在C3染毒组肺部则分别为:0.98±0.02、0.98±0.02、1.05±0.02和1.04±0.01;而基因Igh-6和Capl是表达下调的基因,基因表达量在B6染毒组肺部分别为:0.93±0.03和0.92±0.01;在C3染毒组肺部则分别为:1.35±0.01和1.02±0.02。[结论]暴露于PM_(2.5)后,B6和C3小鼠肺部基因表达存在着差异,可能是导致两种品系小鼠对PM_(2.5)敏感程度不同的原因之一。     

气温和大气颗粒物对哈尔滨市人群死亡影响的交互作用

目的定量评估哈尔滨市日平均气温和可吸入颗粒物(PM_(10))、细颗粒物(PM_(2.5))对人群死亡影响的交互作用。方法收集2014—2016年哈尔滨市每日死亡资料,大气颗粒物中PM_(10)、PM_(2.5)等污染物浓度资料及气象资料,采用双变量反应平面模型以及温度分层法和分布滞后非线性模型(DLNM)定性和定量评估大气颗粒物中PM_(10)、PM_(2.5)和日平均气温对哈尔滨市人群死亡影响的交互作用。结果双变量反应平面模型结果显示,日平均气温和大气颗粒物中PM_(10)、PM_(2.5)与人群死亡之间的关系存在交互作用,差异有统计学意义(P<0.05)。温度分层分析结果发现,高温时,累积滞后天数越长,PM_(10)和PM_(2.5)对日总死亡数的影响越大,当累积滞后12 d时,PM_(10)和PM_(2.5)每升高10μg/m^(3),日总死亡的累积相对危险度(CRR)分别增加10.4%(95%CI:2.7%~18.8%)和18.2%(95%CI:1.8%~37.1%);低温和中温时,未发现PM_(10)和PM_(2.5)与总死亡之间的关联具有统计学意义。与中温层相比,高温时PM_(10)和PM_(2.5)对死亡的影响更大,且差异有统计学意义(P<0.05)。亚组分析结果显示,高温时,大气颗粒物对男性和65岁以上老年人群死亡的影响更大。结论气温和PM_(10)、PM_(2.5)对哈尔滨市人群死亡的影响具有交互作用,在高温时PM_(10)、PM_(2.5)对死亡的影响更大。     

Effects of Aroclor 1254 on intercellular communication in human keratinocytes.

It has been previously described that Aroclor 1254 can inhibit GJIC in rodent liver cells where it is known to be a tumor promoter, while the possibility that Aroclor 1254 exerts its inhibitory effects on GJIC in human keratinocytes and acts as a human skin tumor promoter, deserves further attention. In the present study the effects of Aroclor 1254 were examined on gap junction channel permeability, on connexin 43 (Cx 43) expression at mRNA and protein level and on ultrastructural modification to add further experimental evidence to its inhibitory effect on GJIC. The results were compared to those induced by 12-O-tetradecanoylphorbol-13 acetate (TPA), a tumor promoter known to be a potent inhibitor of GJIC in human skin cells and to those induced by benzo[a]pyrene (B[a]P) known for its genotoxic activity. Our data show increased Cx 43 protein expression in Aroclor 1254 and TPA-treated cultures compared to controls, decreased Cx 43 protein level in those exposed to B[a]P, while Cx 43 gene expression (Cx 43 mRNA) was unaffected by the treatments. In Aroclor and TPA-treated keratinocytes, the ultrastructural examination showed residues of junctional systems expressed by specular, short tracts of the faced plasma membranes. In contrast, the contacts between plasma membranes of adjacent B[a]P treated keratinocytes were more extended. A clear inhibition of gap junction channel permeability due to Aroclor 1254 and TPA was also manifest by Lucifer yellow dye test compared to B[a]P-treated cultures where dye spreading to the neighbouring cells and to the extracellular space occurred. The present data, in addition to confirming inhibition of GJIC mediated by Aroclor 1254 in human keratinocytes, which were found to be comparable to those induced by TPA, suggest that GJIC inhibition is associated with increased Cx 43 protein expression without significant modification of its gene expression.     

沙尘与非沙尘PM_(2.5)对人肺成纤维细胞存活率及细胞间通讯的影响

目的探讨沙尘与非沙尘PM2.5对人肺成纤维细胞存活率及细胞间通讯的影响。方法使用沙尘与非沙尘PM2.5的全颗粒、无机提取物和有机提取物,按它们在PM2.5中的质量比例,确定各自的染毒浓度。受试物处理细胞24小时后,采用MTT法测定细胞的存活率,并用划痕染料标记示踪法测定细胞缝隙连接通讯(GJIC)水平。结果在按上述确定的染毒浓度范围,沙尘和非沙尘全颗粒、沙尘无机提取物表现出明显的细胞毒性,有剂量-反应关系,且沙尘全颗粒的毒性最大。细胞划痕实验结果显示,沙尘和非沙尘PM2.5的全颗粒及其提取物均可抑制细胞间荧光扩散,抑制作用随剂量增高而增强,且有机提取物的抑制作用最强,其次是全颗粒,再次为无机提取物。结论颗粒物的来源和成分是影响其毒性的重要因素;沙尘与非沙尘PM2.5都能抑制细胞间通讯,GJIC可能为颗粒物的毒性机制之一。     

子宫内膜基质细胞的缝隙连接蛋白43及其作用

子宫内膜基质细胞靠缝隙连接传递信号,在月经周期不同的激素调节下,协调一致地呈现周期性变化。缝隙连接蛋白是子宫内膜基质细胞上缝隙连接的基本单位。缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)参与了细胞生长、分化、肿瘤化、血管重塑、凋亡等过程,Cx43的正常表达是发生蜕膜反应的必要条件,直接影响子宫内膜对胚胎的容受性;同时参与子宫内膜异位症、子宫内膜癌等病理反应。由于目前辅助生殖技术的成功率主要受限于较低的胚胎着床率,能够区别容受性与非容受性子宫内膜的生物学标记尚不明确。因此,阐明如何诱导形成容受性子宫内膜,以及如何维持容受性变得尤为重要。本文综述了Cx43如何参与蜕膜反应,与子宫内膜容受性的关系,Cx43的信号调节通路及其与子宫内膜疾病发生的关系,分析了Cx43参与诱导容受性子宫内膜的可能机制。     

EGCG对人前列腺癌裸鼠移植瘤生长和间隙连接蛋白43表达的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）对前列腺癌裸鼠移植瘤生长和间隙连接蛋白43（Cx43）表达的影响,探讨EGCG防治前列腺癌的作用机制。方法分别采用四甲基偶氮唑蓝法、膜联蛋白／碘化丙锭双标流式细胞术和划痕标记荧光染料传输技术,体外观察不同浓度的EGCG（10、20、40mg/L）对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制率、凋亡率、细胞间间隙连接通讯功能（GJIC）的变化。采用PC-3细胞建立裸鼠皮下移植瘤动物模型,随机分为对照组和不同剂量的EGCG组（10、20、40mg/kg）,14d后称量移植瘤体重并计算抑瘤率,DNA原位缺口末端标记法和免疫组织化学分别检测凋亡指数（AI）和肿瘤微血管密度（MVD）,半定量逆转录聚合酶链反应检测移植瘤组织cx43mRNA的表达水平。结果20mg/L和40mg／L的EGCG均能明显抑制PC-3细胞的生长[（22．33±4．62）％,（38．67±5．67）％VS（3．47±0．31）％,P〈0．01]和诱导细胞凋亡[（7．84±1．37）％,（24．53±2．28）％V8（2．17±0．70）％,P〈0．01],并增强细胞间的GJIC功能。不同剂量的EGCG均能抑制裸鼠前列腺癌移植瘤生长,促进肿瘤细胞凋亡,减少肿瘤血管生成。（20、40mg/kg）EGCG能显著上调移植瘤组织Cx43mRNA的表达（0．58±0．08,0．80±0．07V80．42±0．04,P〈0．01）。EGCG对前列腺移植瘤的抑制作用、诱导细胞凋亡和上调Cx43表达的效应均随剂量的增加而增强,呈剂量依赖性（P〈0．05）。结论EGCG能上调Cx43在裸鼠前列腺癌组织中的表达和增强Cx43介导的间隙连接通讯功能,从而有效抑制前列腺癌移植瘤的生长。     

二氧化硅致肺泡上皮细胞连接蛋白43定位的变化

目的 研究SiO2刺激肺泡巨噬细胞（PAM）上清液对肺泡上皮细胞连接蛋白43（Cx43)定位的影响，以深入探索SiO2抑制肺泡上皮细胞是隙连接通讯（GJIC）的作用水平。方法 不同剂量的SiO2刺激大鼠（SD）PAM培养上清液作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL－64细胞[在体积分数为2％的小牛血清培养基（RPMI 1640）中加体积分数为5％的不同剂量的SiO2刺激PAM的上清液]。采用间接免疫荧光的CCL－64细胞化学法和激光共聚集扫描显微镜（LCSM，Leica TCS SP)进行Cx43定位的测定。结果 正常培养的CCL－64相邻细胞连接处有明亮的斑片状标记， 分布、连接成线；SiO2刺激PAM培养上清液作用的CCL－64细胞连接处标记斑点逐渐减少，Cx43标记斑点出现在胞浆内，呈无特异性定位状态，但随着SiO2剂量的增加，细胞内大多数的Cx43标记斑点向细胞核聚集。结论 SiO2刺激PAM培养上清液可以改变肺泡上皮细胞Cx43的定位。推测SiO2抑制肺泡上皮细胞GJIC功能可能与Cx43的内移有关。     

二氧化硅致肺泡上皮细胞连接蛋白43磷酸化改变的研究

目的 探讨矽肺发病过程中SiO2诱导的肺上皮细胞间隙连接通讯（GJIC）功能下调与连接蛋白43（Cx43)磷酸化状态的关系。方法 运用Western-blot方法对Cx43的磷酸化状态进行分析。结果 SiO2刺激肺泡巨噬细胞（PAM）上清液及佛波酯（TPA）作用于CCL－64细胞，其总蛋白、膜蛋白均显示与对照组相同的磷酸化条带。细胞核内无Cx43存在。结论 SiO2诱导的CCL－64细胞中GJIC功能下调不是通过改变Cx43磷酸化形式而实现的。     

番茄红素对大气可吸入颗粒物致人肺成纤维细胞DNA损伤的保护作用

[目的]探讨大气粗颗粒物(PM10)、细颗粒物(PM2.5)对人肺成纤维细胞(HLF)增殖作用的影响和DNA链的损伤作用以及番茄红素的保护作用.[方法]采用细胞增殖试验(MTT)测定PM10、PM25以及番茄红素对HLF增殖作用.单细胞凝胶电泳法(SCGE)检测PM10、PM25对HLF DNA的损伤程度以及番茄红素对DNA损伤的保护作用.[结果]PM10、PM25均能抑制HLF的增殖,当颗粒物质量浓度为50μg/mL时,HLF的细胞存活率下降约10%,随着染毒剂量的增大细胞存活率进一步下降,具有明显的剂量一效应关系(P<0.01).同样质量浓度下比较,PM25对细胞增殖的抑制作用大干PM10;PM10和PM25均具有明显的DNA损伤作用,当PMs质量浓度仅为50μg/mL时,即能够引起细胞DNA损伤(P<0.01).且具有明显的剂量-反应关系(P<0.01),但PM25的损伤程度小于PM10;番茄红素可以有效地阻止由PM10、PM25导致的DNA损伤,浓度为25μmol/L的番茄红素即可明显减轻PMs对HLF造成的DNA损伤.[结论]PMs能抑制HLF的增殖、诱导HLF的DNA链断裂,番茄红素可以有效地减小PMs对HLF DNA造成的损伤.     

上海市大气PM2.5中有害化学物质组成分析

[目的]研究上海大气微小颗粒物中的金属元素、可溶性离子、有机碳(OC)、无机碳(EC)的化学组成特征. [方法]对上海市5个采样点的PM2.5样品进行了化学成分分析,用离子色谱法分析可溶性离子,用能量色散X荧光(EDXRF)法分析16种金属元素,用热碳分解法分析有机碳和无机碳,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)定性分析可溶性有机物. [结果]各监测点PM2.5样品中可溶性离子含量约占35%,总碳约占40%,金属元素所占份额不到10%,其余为未知物的质量,约占15%. [结论]初步得到上海市PM2.5的化学组成特征.     

工频磁场辐照导致细胞连接蛋白Cx43的异常移位

目的　研究 5 0Hz正弦磁场对细胞连接蛋白Cx4 3移位的影响 ,以探索极低频磁场 (ELFMF)抑制细胞间隙连接通讯 (GJIC)的机制。方法　用 5 0Hz、0 .8mT的正弦磁场和 (或 )十四酰基咐哌醇酯 (TPA ,5ng/ml)对培养的中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)处理 2 4h(其中TPA处理 1h)。采用间接免疫荧光细胞化学法和激光共聚焦显微镜进行连接蛋白Cx4 3定位的测定 ;采用Westernblot方法检测胞浆和核内Cx4 3蛋白的含量。结果　正常组细胞间连接处有明亮的点状标记 ,连接成线 ;TPA处理组、0 .8mT正弦磁场单独作用组及 0 .8mT正弦磁场联合TPA处理组细胞的连接处标记斑点均较正常组减少 ,大量Cx4 3蛋白标记斑点出现在胞浆内 ,且在核附近聚集。各组核内Cx4 3蛋白条带很淡 ,而胞浆内Cx4 3蛋白含量ELF组 (2 .0 3± 0 .89)和TPA组 (2 .4 3± 0 .82 )明显增加 ,与正常组 (1.0 4± 0 .17)相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　 5 0Hz正弦磁场直接和 (或 )协同TPA抑制体外培养细胞GJIC功能与细胞连接蛋白Cx4 3内移至胞浆有关