大鼠肝微粒体代谢对何首乌水提物肝细胞毒性的影响

目的：研究大鼠肝微粒体代谢对何首乌水提物肝细胞毒性的影响。方法：利用大鼠肝微粒体对何首乌水提物进行体外代谢;将经代谢前后的何首乌水提物溶液冷冻干燥,以不同浓度（相当于生药1.5、3、6、12 mg/mL）分别作用肝L02及HepG2细胞24 h及48 h,MTT法检测其对两种细胞活力的影响;HPLC测定何首乌水提物溶液中3种主要成分（二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素）的含量变化。结果：何首乌水提物代谢后,随着其剂量的增加,对细胞活力的抑制作用逐渐增强,与何首乌水提物未代谢组相比,浓度为12 mg/mL的何首乌水提物代谢组毒性明显降低（P < 0.01）。HPLC测定结果显示,何首乌水提物代谢组上述3种主要成分含量均有所降低。结论：何首乌水提物经大鼠肝微粒体代谢后对肝细胞毒性降低,与其主要成分含量降低之间的关系需要进一步研究。     

补骨脂酚通过MAPK途径诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的研究

目的:研究补骨脂酚对人肝癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:应用噻唑蓝法（MTT法）和倒置显微镜技术考察补骨脂酚对HepG2细胞生长的影响；采用荧光显微镜观察补骨脂酚处理后细胞凋亡；利用蛋白免疫印迹法检测补骨脂酚对HepG2细胞中凋亡相关蛋白及MAPK家族蛋白表达的影响；引入MAPK家族蛋白抑制剂考察生长抑制率和凋亡相关蛋白表达的变化。结果:补骨脂酚可以剂量依赖性地抑制人肝癌HepG2细胞增殖，其生长抑制作用明显强于临床上常用的抗肿瘤药5-氟尿嘧啶，并且补骨脂酚对人正常肝L02细胞具有较低的毒性。进一步研究发现，补骨脂酚可以诱导HepG2细胞发生凋亡。此外，MAPK家族参与到补骨脂酚诱导的HepG2细胞凋亡过程中，补骨脂酚可以剂量依赖性激活JNK的表达发挥促凋亡的作用，同时抑制了ERK促存活通路，然而对p38无明显影响。结论:本研究首次阐明了补骨脂酚诱导人肝癌HepG2细胞生长抑制作用机制，为进一步的临床应用提供了理论依据。     

乙肝病毒X蛋白对不同肝细胞系凋亡的诱导作用

目的:研究乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBX)通过核转录因子NF-κB信号通路对不同肝细胞系凋亡的诱导作用。方法:建立稳定转染PEGFP-N1-HBX质粒的人正常肝细胞系L02(L02/HBX)和人肝癌细胞系HepG2(HepG2/HBX),用特异性NF-κB阻断剂吡咯二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)阻断NF-κB信号通路,流式细胞术检测PEGFP-N1-HBX转染前后及加入PDTC前后L02和HepG2细胞的细胞周期与凋亡,Western blotting检测NF-κB的表达。结果:成功构建了稳定转染PEGFP-N1-HBX的L02/HBX和HepG2/HBX细胞。与对照组L02细胞相比,L02/HBX细胞凋亡率明显增加[(31.31±0.51)%vs(14.05±0.09)%,P<0.05];其G0/G1期细胞比例显著增加,S期和G2/M期细胞比例减少。与对照组HepG2细胞相比,HepG2/HBX细胞凋亡率显著降低[(1.21±0.04)%vs(10.26±0.10)%,P<0.05];其G0/G1期细胞比例显著减少,S期和G2/M期细胞比例增加。PDTC作用后,L02/HBX/PDTC组凋亡率[(40.33±0.07)%]及G0/G1期细胞比例较L02/HBX组显著增加,G2/M期细胞比例明显减少,而HepG2/HBX/PDTC组凋亡率[(5.45±0.07)%]及G0/G1期细胞比例较HepG2/HBX组显著增加,S期和G2/M期细胞比例明显减少,但其凋亡率仍低于对照HepG2细胞。West-ern blotting结果显示,L02/HBX细胞NF-κB表达显著下调,而HepG2/HBX细胞NF-κB表达显著增加,L02/HBX/PDTC和HepG2/HBX/PDTC细胞NF-κB几乎不表达。结论:HBX可下调正常肝细胞L02 NF-κB蛋白的表达,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡;而HBX可增加肝癌细胞系HepG2中NF-κB蛋白的表达,加速细胞周期,抑制肝癌细胞凋亡。     

乙肝病毒衣壳运载体甲胎蛋白启动子驱动的白细胞介素-2在肝癌细胞中的靶向表达

目的 利用乙肝病毒衣壳（HBVE）和人甲胎蛋白（AFP）启动子的双重靶向性,观察白细胞介素-2（IL-2）基因是否可以在肝癌细胞中靶向表达.方法 体外培养HepG2、L02、HepG2.2.15细胞,PEG8000浓缩法提取HBVE作为基因运载体,聚合酶链反应（PCR）法制备人AFP启动子-IL-2重组基因,瞬时转染HepG2细胞与L02细胞,反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）观察IL-2 mRNA表达,Western blot观察IL-2蛋白表达情况.结果 以HBVE为基因的运载体,包裹人AFP启动子-IL-2重组基因后转染HepG2细胞和L02细胞,RT-PCR和Westem blot检测到HepG2细胞有IL-2的表达,而对照组L02细胞无IL-2的表达.结论 以HBVE为基因运载体,可以使AFP启动子驱动的IL-2基因在AFP阳性的肝癌细胞靶向表达,从而提高了外源基因导入肝癌细胞的安全性.     

大黄素在体外诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡的初步研究

背景与目的:大黄素(3-甲基-1,6,8-三羟蒽醌)是大黄等多种中药的有效成分之一。研究表明大黄素对于乳腺癌细胞、肺癌细胞的生长具有抑制作用,但目前大黄素抗肿瘤的作用机理尚不明确。本研究拟讨论大黄素在体外对肝癌细胞HepG2的作用及其机理。方法:应用MTT、软琼脂克隆形成、DNAladder凝胶电泳及流式细胞术等方法,研究中药单体大黄素对肝癌细胞HepG2生长增殖的影响以及作用机理。结果:大黄素在较低浓度可抑制肿瘤细胞的生长,MTT实验测得的半数抑制浓度(IC50)为(36±2.6)μg/ml。在软琼脂实验中,大黄素可以浓度依赖的方式抑制细胞克隆的形成。经DNAladder及流式细胞仪检测发现,大黄素能诱导HepG2细胞凋亡,与阴性对照相比,随着药物浓度从10μg/ml增加到20μg/ml,AnnexinV染色细胞显著增多,由27.3%增至59.6%;当药物浓度增至40μg/ml时,培养液中几乎无活细胞,由碘化丙啶和AnnexinV双重标记的凋亡后期以继发性坏死细胞为主。结论:中药单体大黄素在体外能抑制肝癌细胞HepG2的生长增殖,并能诱导该细胞凋亡。     

矢车菊-3-O-葡萄糖苷增强肝癌HepG2细胞的抗肿瘤活性及其机制探讨

目的:探讨矢车菊-3-O-葡萄糖苷（cyanidin-3-glucoside,C3G）增强人肝癌HepG2细胞的抗肿瘤活性及其作用机制。方法:采用MTT法研究C3G对HepG2细胞抑制率的影响;利用激光共聚焦观察Hoechst 33342染色后细胞形态;流式细胞分析仪分别测定C3G对HepG2细胞凋亡、周期和线粒体膜电位的影响;Western blot 法测定C3G对HepG2细胞凋亡相关蛋白表达量的影响。结果:当C3G浓度在12.5~100.0 μmol/L范围内,随C3G浓度增加HepG2细胞的抑制率显著增加,呈浓度依赖性,同时在24、48、72 h对HepG2细胞抑制率的IC50分别为97.16、40.35、39.83 μmol/L。C3G能显著增加HepG2细胞凋亡率和细胞核的荧光强度,并将细胞周期阻滞在G2/M期,同时线粒体膜电位显著降低。C3G可上调Bax、Cytochrome c、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平。结论:C3G可通过激活线粒体介导的凋亡通路和周期阻滞来实现抗肿瘤作用。     

lncRNA PTPRG-AS1通过靶向miR-124-3p调控肝癌细胞凋亡和放射敏感性的研究机制

目的:探讨lncRNA PTPRG-AS1对肝癌细胞凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2、SMMC-7721和BEL-7402,qRT-PCR检测细胞中PTPRG-AS1和miR-124-3p表达水平。转染si-PTPRG-AS1、miR-124-3p mimics至HepG2细胞,抑制HepG2细胞中PTPRG-AS1表达或过表达miR-124-3p,流式细胞术检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞放射敏感性,Western Blot法检测Bcl-2和Bax蛋白表达。生物信息学软件预测PTPRG-AS1与miR-124-3p存在互补的核苷酸序列,双荧光素酶报告基因实验验证PTPRG-AS1与miR-124-3p之间的调控关系。结果:与正常肝细胞L02相比,肝癌细胞HepG2、SMMC-7721和BEL-7402中PTPRG-AS1表达显著升高（P＜0.05）,miR-124-3p表达显著降低（P＜0.05）。抑制PTPRG-AS1或过表达miR-124-3p均可促进肝癌HepG2细胞的凋亡,增强肝癌HepG2细胞的放射敏感性,抑制Bcl-2蛋白表达,促进Bax蛋白表达。PTPRG-AS1负调控miR-124-3p表达。抑制miR-124-3p表达可部分逆转抑制PTPRG-AS1表达对肝癌HepG2细胞凋亡的促进作用以及放射敏感性的增强作用。结论:抑制PTPRG-AS1表达可能通过上调miR-124-3p表达促进肝癌细胞的凋亡并提高其放射敏感性,是肝癌治疗的潜在作用靶点。     

艾迪注射液对肝癌HepG2细胞放疗增敏的研究

目的:研究艾迪注射液对人肝癌HepG2细胞放疗增敏作用及相关机制。方法:流式细胞仪检测不同浓度艾迪注射液对HepG2细胞失活率、细胞周期及凋亡的影响;克隆形成法测定细胞存活分数,拟合细胞存活曲线,计算放疗增敏比。结果:艾迪注射液使HepG2细胞失活率明显升高,表现出一定的细胞毒作用,可以诱导其早期凋亡及引起细胞周期的重新分布,增加G1期细胞的比例,减少S期细胞的比例,这些作用与时间和浓度有一定的相关。10mg/ml浓度的艾迪注射液对HepG2细胞有放疗增敏作用,放疗增敏比达1.62。结论:艾迪注射液对HepG2细胞有放疗增敏作用,其机制可能与诱导细胞凋亡、直接的细胞毒作用有关。     

艾迪注射液对肝癌HepG2细胞放疗增敏的研究

目的：研究艾迪注射液对人肝癌HepG2细胞放疗增敏作用及相关机制。方法：流式细胞仪检测不同浓度艾迪注射液对HepG2细胞失活率、细胞周期及凋亡的影响;克隆形成法测定细胞存活分数,拟合细胞存活曲线,计算放疗增敏比。结果：艾迪注射液使HepG2细胞失活率明显升高,表现出一定的细胞毒作用,可以诱导其早期凋亡及引起细胞周期的重新分布,增加G1期细胞的比例,减少S期细胞的比例,这些作用与时间和浓度有一定的相关。10mg/ml浓度的艾迪注射液对HepG2细胞有放疗增敏作用,放疗增敏比达1.62。结论：艾迪注射液对HepG2细胞有放疗增敏作用,其机制可能与诱导细胞凋亡、直接的细胞毒作用有关。     

PNP/fludarabine自杀基因系统对人肝癌细胞HepG2体外杀伤效应

[目的]研究嘌呤核苷酸磷酸化酶(purine nucleoside phosphorylase,PNP)/氟拉达滨(fludarabine)系统对人肝癌细胞HepG2体外杀伤效应.[方法]通过基因克隆技术将E.coli K12菌株来源的PNP基因通过8个甘氨酸的linker克隆至pEGFP-N1载体,在LipofectAMINE2000介导下,转染人肝癌细胞株HepG2,同时进行G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,命名为HepG2/PNP.通过PCR、RT-PCR、Northern blot鉴定PNP基因的表达;采用MTT和Annexin V-FITC观察不同浓度的fludarabine对已转染的HepG2、不同比例转染和非转染混合细胞的杀伤作用.[结果]RT-PCR和Northern印迹证明转染的PNP基因能在HepG2和HepG2/PNP细胞中表达;低浓度fludarabine对转染了PNP基因的HepG2细胞具有显著的细胞毒效应;Anniex Ⅴ凋亡实验结果表明PNP/flndarabine自杀基因系统对HepG2细胞具有显著的诱导凋亡作用;旁观者效应显示当10%～20%的HepG2/PNP细胞与80%～90%HepG2细胞混合在fludarabine浓度为1.0μg/ml时,可出现明显的旁观者效应.[结论]PNP/flu-darabine自杀基因系统在fludarabine浓度为0.5μg/ml～1.0μg/ml时对人原发性肝癌细胞HepG2具有明显的杀伤作用和旁观者效应.     

RevTet-Off系统调控凋亡素基因在人肝癌细胞表达的研究

目的 应用RevTet-Off系统，于体外观察四环素调节下凋亡素基因的表达及其对人肝癌细胞系HepG2的作用。方法 将RevTet-Off基因调控系统的调节质粒pRevTet-Off和含凋亡素基因的重组表达质粒载体pRevTRE-VP3分别转染PT67细胞，包装出RevTet-Off和RevTRE-VP3重组逆转录病毒，依次将此两种病毒感染HepG2细胞，建立整合了RevTet-Off和RevTRE-VP3重组逆转录病毒的阳性细胞株HepG2／Off-VP3。通过四环素调节凋亡素基因在HepG2／Off-VP3中的表达，Annexin V-FITC／PI双染色后，以流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 经RT-PCR证实凋亡素基因在HepG2／Off-VP3-8细胞得到了表达；HepG2细胞在无四环素环境下的细胞凋亡率明显高于1μg／mL四环素环境下的凋亡率。结论 凋亡素基因经RevTet-Off系统导入HepG2细胞后，可在四环素调控下表达产生凋亡素并诱导细胞凋亡。     

两种人类肝细胞系评价饮水氯化消毒副产物MX致DNA损伤作用的敏感性

背景与目的:研究两种人类来源的肝细胞在评价饮水氯化消毒副产物3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氯)-呋喃酮(MX)DNA损伤作用的敏感性.材料与方法:应用单细胞凝胶电泳试验(彗星试验),研究人肝癌细胞株HepG2和人胚肝细胞L-02在评价饮水氯化消毒副产物MX DNA损伤作用的敏感性.结果:随着MX剂量增加,可引起HepG2(＞ 30 μmol/L)和L-02细胞(＞100μmol/L)DNA迁移度显著增加;中度以上损伤所占百分比在同剂量组中HepG2细胞大于L-02细胞,经比较分析,差异有统计学意义(χ2=20.985;8.0;11.97,P＜0.05).结论:应用单细胞凝胶电泳试验评价MX的DNA损伤作用,人肝癌细胞株HepG2比人胚肝细胞L-02更为敏感.     

奥沙利铂对肝癌HepG2细胞生长及侵袭转移的抑制作用

目的 观察奥沙利铂（L-OHP）对人肝癌HepG2细胞生长、凋亡、黏附及侵袭行为的影响。方法 分别采用MTT法及AnnexinV / PI 双染色流式细胞术检测不同浓度L-OHP对肝癌HepG2细胞生长及凋亡的影响;分别以MTT法及Transwell实验检测L-OHP对HepG2细胞黏附、迁移及侵袭力的影响。结果 在（10.0～40.0）mg/L浓度的L-OHP作用下,HepG2细胞增殖明显降低,抑制作用呈浓度和时间依赖性（P<0.01）;5.0 mg/L以下浓度无明显的细胞毒作用;（2.5～10.0）mg/L的L OHP可使凋亡细胞明显增多(P<0.05);无毒剂量（2.5 mg/L）的L-OHP作用时,HepG2细胞的黏附力明显下降（P<0.05）,30、60、90 和120 min的黏附抑制率分别为29.2%、27.3%、26.6% 和24.8%;HepG2细胞的迁移及侵袭细胞数明显减少（P<0.01）,迁移、侵袭抑制率分别为53.68% 和54.38%。结论 L-OHP既可通过抑制肝癌细胞增殖、诱导凋亡,又可通过抑制肝癌细胞黏附、迁移、侵袭能力发挥抗转移的作用。     

多功能纳米氧化铈量子点对HepG2细胞光疗效应的研究

目的 研究多功能纳米氧化铈量子点（HACQDs-Ce6）对HepG2细胞的光疗效应。方法 溶解氧仪检测HACQDs-Ce6的催化产氧能力，CCK-8法、划痕实验、Calcein AM/PI活死细胞染色检测HACQDs-Ce6对HepG2细胞的增殖、迁移和凋亡的影响。重组小鼠巨噬细胞-粒细胞集落刺激因子（rm GM-CSF）和白细胞介素-4（rm IL-4）体外诱导树突状细胞（DC）探究HACQDs-Ce6对DC细胞的影响。结果 HACQDs-Ce6具有过氧化氢酶催化产氧能力; HACQDs-Ce6浓度>0.125 μg/ml时，光照组细胞增殖活力显著低于黑暗组（P=0.018）；划痕结果显示：光照后HACQDs-Ce6组HepG2细胞迁移能力显著低于PBS组（P<0.01）；HACQDs-Ce6对正常细胞HFF-1/L Wnt-3A和DC几乎无影响；Calcein AM/PI活死细胞染色显示HACQDs-Ce6和PDT联合作用下，几乎能杀死所有HepG2细胞。结论 HACQDs-Ce6对HepG2细胞的光疗效应明显，对正常细胞HFF-1/L Wnt-3A/DC无毒性。     

苯丁酸钠体外对人肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响

[目的]探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠（PB）体外对人肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响。[方法]不同浓度苯丁酸钠处理HepG2,应用MTT比色法观察苯丁酸钠对HepG2的生长抑制作用,落射荧光显微镜、DNA电泳和流式细胞仪观察HepG2的凋亡,West-ernblot检测苯丁酸钠处理前后HepG2细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达水平的变化。[结果]苯丁酸钠2mmol/L、4mmol/L、8mmol/L作用48h对细胞的抑制率分别为19.41%、39.03%、42.19%,作用72h对细胞的抑制率分别为27.42%、57.11%、70.31%,并诱导细胞凋亡;4mmol/L苯丁酸钠作用HepG248h细胞凋亡率明显高于对照组。落射荧光显微镜和DNA电泳均观察到苯丁酸钠作用后HepG2细胞出现凋亡细胞的特征性变化。苯丁酸钠处理HepG2后Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加。[结论]苯丁酸钠体外抑制HepG2增殖并促进其凋亡,其作用机制可能是通过降低细胞内的Bcl-2蛋白,增加细胞内Bax蛋白而实现的。     

氨基葡萄糖对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究氨基葡萄糖对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其分子机制。方法:CCK-8法检测人肝癌HepG2细胞的增殖情况。流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。Western blot检测ERK及P-ERK蛋白的表达水平。结果:氨基葡萄糖可以抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,且该作用随着药物浓度的增加而逐渐增强。1.0mmol/L氨基葡萄糖作用72h可以使G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低。同时,2.0mmol/L及4.0mmol/L氨基葡萄糖处理72h可以使人肝癌HepG2细胞发生凋亡。另外,随着药物浓度的增加,人肝癌HepG2细胞中ERK蛋白的磷酸化水平逐渐降低。结论:氨基葡萄糖可能是通过降低ERK1/2蛋白的磷酸化水平影响细胞周期,从而抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并诱导其发生凋亡。     

lncRNA PVT1调控肝癌细胞放射敏感性的分子机制

目的:探讨lncRNA PVT1调控肝癌细胞对放射照射增殖、凋亡的敏感性及机制。方法:运用qRT-PCR检测人肝癌细胞HepG2、人正常肝细胞L02中PVT1的表达。si-NC组（转染si-NC）、si-PVT1组（转染si-PVT1）、IR+si-NC组（转染si-NC后放射照射）、IR+si-PVT1组（转染si-PVT1后放射照射）均用脂质体法转染至HepG2细胞。MTT法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Western blot检测各组细胞中p-ATM、p-p53、p-Chk2、Bcl-2、Bax的蛋白表达。结果:与人正常肝细胞L02相比,人肝癌细胞HepG2中PVT1的表达显著升高（P<0.05）;敲减PVT1联合放射照射可明显抑制HepG2细胞增殖,促进凋亡且可下调p-ATM、p-p53、p-Chk2、Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达。结论:敲减lncRNA PVT1可通过抑制HepG2细胞增殖,促进凋亡,增强其对放射照射的敏感性,为提高肝癌的治疗效率提供新靶点。     

辣椒素通过氧化应激诱导HepG2肝癌细胞凋亡的研究

摘 要：［目的］ 观察辣椒素对HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。［方法］采用CCK8法观察辣椒素对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞术和JC-1探针检测辣椒素对HepG2细胞凋亡率和线粒体膜电位的影响,采用DCFH-DA探针联合高内涵分析仪检测氧化应激表达水平的变化。［结果］ 辣椒素可剂量依赖性抑制HepG2细胞增殖、诱导细胞凋亡。200μmol/L辣椒素作用24h可引起HepG2 细胞明显坏死、脱落和漂浮。相比对照组,200μmol/L辣椒素明显降低HepG2细胞线粒体膜电位红绿荧光表达量比值（8.39±0.12 vs 4.23±0.04）。200μmol/L辣椒素可引起HepG2细胞内氧化应激水平上调1.78倍。使用还原剂维生素C抗氧化可恢复细胞活力,减轻凋亡。［结论］ 辣椒素剂量依赖性诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,其机制与氧化应激水平过激活相关。     

舒林酸抑制肝癌HepG2细胞增殖的实验研究

目的:观察舒林酸对肝癌HepG2细胞增殖的影响,探讨其作用机制。方法:采用MTT比色法观察舒林酸抑制肝癌HepG2细胞增殖;采用流式细胞仪检测舒林酸对HepG2细胞周期分布的影响,同时结合透射电子显微镜及DNA凝胶电泳观察舒林酸诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用。结果:舒林酸可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,其作用具有时间和浓度依赖性(n=24),r24h=0·914,P=0·037;r48h=0·921,P=0·041;r72h=0·907,P=0·028;诱导其凋亡,作用24h,对照组凋亡率为(1·5±0·3)%,3×10-4组凋亡率为(8·6±1·3)%,9×10-4组凋亡率为(27·0±1·7)%,P值分别为0·018和0·000;作用48h,对照组凋亡率为(2·8±0·7)%,3×10-4组凋亡率为(13·2±2·3)%,9×10-4组凋亡率为(37·1±2·9)%,P值分别为0·012和0·000。舒林酸改变细胞周期分布,使G0/G1期细胞比例增高,S期比例降低。作用24h与对照比较,3×10-4处理组P=0·048,9×10-4处理组P=0·037,两组间比较P=0·041;作用48h与对照比,3×10-4处理组P=0·040,9×10-4处理组P=0·032,两组间比较P=0·044。结论:舒林酸可诱导肝癌HepG2细胞凋亡,改变细胞周期分布,从而抑制细胞增殖。     

何首乌、虎杖、大黄水提物中游离蒽醌含量的测定及对人正常肝细胞的毒性作用

目的:测定何首乌、虎杖、大黄3种中药水提物中游离蒽醌含量,比较3种中药水提物对人肝祖细胞Hepa RG的体外细胞毒作用,探讨何首乌、虎杖、大黄中游离蒽醌含量与肝细胞毒性的关系。方法:煎煮法制备何首乌、虎杖、大黄3种受试饮片水提物,采用高效液相色谱色谱法分别同步测定3种水提物中5种主要游离蒽醌大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚的含量;分别以浓度为1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mg/m L的3种中药水提物溶液处理Hepa RG细胞48 h后,加入噻唑兰检测其活力;分别以1.5、2.0、2.5 mg/m L的3种中药水提物溶液处理Hepa RG细胞48 h后,AnnexinⅤ/PI双染后流式细胞术检测凋亡细胞比例。结果:何首乌水提物中主要游离蒽醌含量为0.229%,虎杖水提物中为0.545%,大黄水提物中为2.593%;何首乌水提物(2.0、2.5、3.0 mg/m L)、虎杖水提物(1.5、2.0、2.5、3.0 mg/m L)、大黄水提物(1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mg/m L)均可抑制Hepa RG细胞活力,且抑制程度与主要游离蒽醌含量呈正相关;细胞凋亡实验结果表明,3种中药水提物(1.5、2.0、2.5 mg/m L)均明显诱导Hepa RG细胞凋亡,且凋亡率与主要游离蒽醌含量呈正相关。结论:3种中药水提物中主要游离蒽醌含量由低到高依次为何首乌、虎杖、大黄,该含量与其体外肝细胞毒性作用成正相关,提示游离蒽醌可能是3种中药产生肝细胞毒性的重要成分。