PET显像在原发性肾细胞癌中的研究进展

PET显像作为一种重要的功能影像学方法引起了人们广泛关注。^18氟-脱氧葡萄糖是目前最常用的正电子显像剂，但它在肾细胞癌诊断中存在一定缺陷。目前，一些新示踪剂：^18氟-氟胸腺嘧啶、^11碳-乙酸盐、”氟-硝基咪唑等已逐渐投入临床使用。     

由海胆肠提取的3′-磺基鸡纳糖-1′-单酰甘油酯的体内抗肿瘤作用

3′-磺基鸡纳糖-1′-单酰甘油酯(3′-sulphono-quinovosyl-1′-monoacylglyceride,A-5)和3′-磺基鸡纳糖-1′,2′-双酰甘油酯(3′-sulphonoquinovosyl-1′,2′-dia-cylglyceride,A-4)等从海胆肠提取的4种糖脂类虽早有报告,但其是否有抗肿瘤作用却一直无人研究。为开发抗肿瘤新药,现对A-4和A-5有无肿瘤生长抑制活性进行探讨。     

NGAL基因5′侧翼区转录调控元件的分段定位鉴定

目的 :对中性粒细胞明胶酶相关脂萼蛋白 (neutrophilgelatinase associatedlipocalin ,NGAL)基因 5′侧翼区的转录调控元件进行分段定位鉴定。方法 :以双荧光素酶报告基因检测系统检测NGAL基因 5′侧翼区 ( -14 3 1～ +84)转录调控元件与转录调控蛋白之间的相互作用。结果 :在NGAL基因 5′端 -945～ -65 8和 -65 7～ -4 172个区段发现了转录增强子元件与转录激活蛋白之间的相互作用 ,而在 -4 16～ -15 2区段则发现了转录沉默子元件与转录抑制蛋白之间的相互作用。结论 :在NGAL基因5′侧翼转录调控区可能至少存在着 2个转录增强子元件和 1个转录沉默子元件     

18F-FLT摄取与肺癌细胞增殖的相关性

背景与目的:近年来,3′-脱氧-3′-18F-氟代胸苷(3′-deoxy-3′-18F-fluoro-thymidine,18F-FLT)被认为是反映肿瘤细胞增殖的新的PET(positronemissiontomography)示踪剂。本实验旨在研究18F-FLT在荷肺癌小鼠的生物分布和PET显像,并探讨18F-FLT摄取与肺癌细胞增殖的相关性。方法:48只荷肺腺癌T739小鼠根据示踪剂不同被随机分为18F-FLT组和18F-氟代脱氧葡萄糖(2-18F-fluoro-2-deoxy-D-glucose,18F-FDG)组两组,各组再分为3组(每组8只):(A)对照组;(B)治疗后1天组;(C)治疗后2天组。治疗组采用顺铂进行治疗。所有小鼠经尾静脉注入18F-FLT或18F-FDG,注药后60min用井型探测仪测量小鼠18F-FLT和18F-FDG的生物分布,并行PET显像。肿瘤增殖判定采用免疫组化测定增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)。结果:在两组对照组中,两种示踪剂的肿瘤PET显像均很清晰。生物分布研究显示肿瘤均有大量放射性摄取,肿瘤在血液、肌肉和肺的T/NT比值均>2.0。18F-FLT组顺铂治疗后肿瘤PCNA阳性率明显减低[A组(90.3±3.9)%ID/g,B组(65.5±9.2)%ID/g,C组(47.7±7.2)%ID/g],18F-FDG组同样明显减低[A组(91.2±3.5)%ID/g,B组(67.8±8.2)%ID/g,C组(45.9±9.1)%ID/g]。治疗后肿瘤18F-FLT摄取快速降低[A组(1.25±0.19)%ID/g,B组(0.82±0.19)%ID/g,C组(0.37±0.17)%ID/g],较18F-FDG摄取变化明显[A组(8.83±1.73)%ID/g,B组(7.88±1.78)%ID/g,C组(7.45±1.67)%ID/g]。PET显像证实B组和C组较A组肿瘤部位18F-FLT放射性浓聚减低。PCNA阳性率与肿瘤18F-FLT摄取呈显著相关性(r=0.930,P<0.001),而与18F-FDG摄取无相关性(r=-0.136,P=0.538)。结论:肺恶性肿瘤组织中18F-FLT摄取高于正常组织,通过PET能清楚显示肺恶性肿瘤;肿瘤18F-FLT摄取与PCNA阳性率的相关性较18F-FDG显著。18F-FLT是一种可反映肺癌细胞增殖的PET示踪剂。     

蒽醌类染料对叙利亚金黄地鼠胚胎细胞的转化作用

1,5一二硝基蒽醌,1-[2,4一二硝基]苯氧基-5-[3,4一二硝基]苯氧基4,8一二硝基蒽醌是蒽醌的两种衍生物。对该两种化学物质进行了叙利亚金黄地鼠胚胎细胞的转化试验。取怀孕13天叙利亚金黄地鼠胚胎,制备细胞悬液,37℃5％CO_2条件下培养原代细胞,经标准细胞转化剂3-甲基胆蒽鉴定,筛选,收获转化敏感的细胞,冻存备作靶细胞。滋养层细胞可以利用原代或次代培养细胞,也可用冻存的细胞。滋养层细胞经5000     

乙基硝基亚硝基胍灌肠对小鼠诱癌作用及大肠腺癌酶组织化学变化的初步观察

近年来,随着一些有效致癌剂的应用,实验性大肠癌的研究发展较快。目前常用的致癌剂有1,2——二甲肼(DMH)、甲基硝基亚硝基胍(MNNG)、甲基硝基脲(MNU)等。八十年代初,Kamano T等用乙基硝基亚硝基胍(N-ethyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine,ENNG)栓剂诱发出狗大肠癌。但所复习的文献中尚未见用ENNG诱发小鼠大肠肿瘤的报道。作者用ENNG液给小鼠灌肠诱发了大肠和肛门肿瘤,并用组化方法对大肠腺癌的酶活性变化进行了观察,现将初步结果报道如下:     

18F-FLT PET显像预测肿瘤增殖的临床研究进展

3′-脱氧-3′-18F-氟代胸苷(18F-FLT)被认为是反映肿瘤细胞增殖的新的正电子发射断层显像(PET)示踪剂.越来越多的临床研究显示,18F-FLT PET显像能够预测肿瘤在治疗过程中的增殖变化,能够早期发现肿瘤再增殖,能够在肿瘤体积缩小前预测残存病灶的位置和活性,并且能够根据治疗过程中肿瘤变化情况预测肿瘤的复...     

NFN对ICR小鼠的致癌作用

5-硝基呋喃衍生物是各国普遍应用的抗菌药物,但最近的实验证明一些硝基呋喃是强有力的致癌物质。本实验报告对假单胞菌的有效药物NFN(1-甲基-7-[2-(5-硝基-2-呋喃基)-乙烯基]-4-氧代-1,4-二     

β-内酰胺抗生素引起癌肿病人凝血异常

免疫受损的癌肿患者对许多病原菌易感,因此,对这些患者需联合应用多种抗生素,研究最多的是氨基糖甙类抗生素加抗假单孢菌属青霉素。近来研究表明,青霉素与先锋霉素联用具有相同的作用,并可避免氨基糖甙类抗生素对肾脏的毒性。本文作者对近年来用β—内酰胺抗生素所致凝血异常和出血的发生率作了回顾。为了便于对不同抗生素联用进行估价而分以下几组:(1)18克苯咪唑青霉素/日和18克甲酰苄唑头孢菌素/日;(2)18克苯咪唑青霉素/日和12克甲酰苄唑     

肿瘤-睾丸抗原LAGE-1基因的原核表达纯化和抗血清制备

目的:构建人肿瘤-睾丸抗原LAGE-1的原核表达质粒,表达、纯化LAGE-1融合蛋白并制备GST-LAGE-1多克隆抗体。方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增人肝癌组织LAGE-1基因3′端片段,连入原核表达载体pGEX-4T-1( ),构建原核表达质粒pGEX-LAGE-1并测序。将该质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达,经包涵体透析复性和谷胱甘肽巯基转移酶纯化系统分离纯化目的蛋白。用纯化的融合蛋白GST-LAGE-1免疫新西兰大白兔,间接ELISA法测定抗体效价,饱和硫酸铵沉淀法纯化抗体,并采用Western blot检测GST-LAGE-1多克隆抗体特异性。结果:RT-PCR扩增得到LAGE-1基因3′端264bp片段,测序结果与GenBank公布序列一致;成功构建pGEX-LAGE-1原核表达质粒,含有该质粒的大肠埃希菌经IPTG诱导后表达相对分子质量约为36×103的蛋白,经包涵体复性和GST融合蛋白纯化系统纯化,得到重组蛋白GST-LAGE-1,纯度达90%;制备兔抗GST-LAGE-1抗体,纯化的抗体经Western blot证实可与目的蛋白特异性结合。结论:获得了纯化的肿瘤-睾丸抗原LAGE-1重组蛋白及其特异性多克隆抗体,为进一步研究LAGE-1抗原在肿瘤免疫治疗中的作用奠定基础。     

食管癌组织APC基因启动子区5-′CpG岛甲基化模型的研究

目的:探讨原发性食管癌组织中结肠腺瘤性息肉(APC)基因启动子区5-′CpG岛甲基化的状况及其与临床病理特征之间的关系。方法:实时荧光甲基化特异性聚合酶链反应检测182例食管癌及癌旁组织中APC基因启动子区5-′CpG岛甲基化状况。单因素分析采用Kaplan-Meier法,多因素分析采用Cox比例风险模型。结果:在182例食管癌组织中,APC基因启动子区5-′CpG岛甲基化率为54.40%(99/182),在182例相对应的癌旁组织中,甲基化率为9.90%(18/182),差异有统计学意义,P<0.05。APC基因启动子区5-′CpG岛甲基化分别与淋巴结转移、肿瘤远处转移、临床分期及不良预后差异有统计学意义,χ2=76.669,P=0.000。单因素结果提示,远处转移、分期及APC基因启动子区5-′CpG岛甲基化与食管癌患者的生存期相关,P值均<0.05。Cox多因素分析提示,APC基因启动子区5-′CpG岛甲基化是独立的预后因素,P<0.05。结论:APC基因启动子区5-′CpG岛甲基化在食管癌的发生发展中起重要作用,APC基因可能是食管癌新的肿瘤分子标志。     

LCRG1基因5''端调控区域的克隆及活性测定

背景与目的:LCRG1基因的调控机制至今不清楚, 本研究拟克隆LCRG1基因的转录起始区上游序列, 寻找与其表达有关的调控序列.方法:利用生物信息学技术预测LCRG1基因5′端调控区域的启动子活性区域,采用PCR方法从人基因组DNA中扩增LCRG1基因5′端调控区域1.776 kb(-1 191 bp～ 585 bp)片段,并将其构建到荧光素酶报告基因pGL3 basic载体中.与内参照质粒PhRL-SV40共转染COS7细胞,通过双荧光素酶活性检验测定其启动子活性.结果:成功扩增LCRG1基因5′端调控区域1.776 kb(-1 191 bp～ 585 bp)片段,测序正确; pGL3-1776启动子活性大约为阳性对照组pGL3-control的0.16倍,为阴性组pGL3 basic 的35倍.结论:成功克隆LCRG1基因5′端调控区域1.776kb(-1191 bp～ 585 bp),该片段具有启动子活性.     

HBx蛋白羧基端缺失对肝癌细胞生物学行为的影响

背景与目的:肝癌组织内普遍存在着截短表达的HBx蛋白,这种蛋白可能与肝癌的发生有关,本研究探讨截短表达的HBx蛋白和野生型HBx对人肝癌细胞Huh7生物学行为的影响。方法:脂质体法介导HBx突变体和野生型HBx重组体转染HBV(-)的Huh7细胞。PCR方法扩增Neo基因检测质粒DNA片段插入。通过MTT、平板克隆形成实验、流式细胞仪和裸鼠成瘤实验检测稳定转染细胞的生物学活性。结果:HBx3′-20和HBx3′-40组细胞生长速度较HBx3′-30组明显增快(P<0.05);HBx3′-20组[(17.34±2.77)%]和HBx3′-40组[(18.36±2.61)%]克隆形成率明显较HBx3′-30组[(7.31±1.44)%]和pcDNA3组[(6.87±2.38)%]高(P<0.05)。细胞周期检测结果显示,对比于野生型HBx组,HBx3′-20组和HBx3′-40组蛋白的表达能加速Huh7细胞由G0/G1期到S期的进程[S期:(36.96±1.82)%vs.(46.20±3.23)%,(53.99±4.02)%,P<0.05],相反,HBx3′-10和HBx3′-30组则出现G1期阻滞,而HBx组与pcDNA3空载体组间[(38.60±1.15)%]在S期无明显变化。裸鼠成瘤实验显示,HBx3′-40组[(3.19±0.34)cm3]成瘤体积明显大于HBx3′-30组[(1.58±0.27)cm3]、HBx组[(1.75±0.15)cm3]和pcDNA3组[(1.67±0.12)cm3],各组瘤重存在显著性差异(P<0.01)。结论:对比野生型HBx组,HBx3′-20和HBx3′-40对Huh7细胞的生长具有明显促增殖作用,HBx3′-30组显示出抑制作用。HBx通过缺失突变修饰其生物学功能,在原发性肝癌发生、发展过程中起着重要作用。     

LCRG1基因5′端调控区域的克隆及活性测定

背景与目的:LCRG1基因的调控机制至今不清楚,本研究拟克隆LCRG1基因的转录起始区上游序列,寻找与其表达有关的调控序列。方法:利用生物信息学技术预测LCRG1基因5′端调控区域的启动子活性区域,采用PCR方法从人基因组DNA中扩增LCRG1基因5′端调控区域1.776kb(-1191bp～ 585bp)片段,并将其构建到荧光素酶报告基因pGL3basic载体中。与内参照质粒PhRL-SV40共转染COS7细胞,通过双荧光素酶活性检验测定其启动子活性。结果:成功扩增LCRG1基因5′端调控区域1.776kb(-1191bp～ 585bp)片段,测序正确;pGL3-1776启动子活性大约为阳性对照组pGL3-control的0.16倍,为阴性组pGL3basic的35倍。结论:成功克隆LCRG1基因5′端调控区域1.776kb(-1191bp～ 585bp),该片段具有启动子活性。     

胸苷酸合成酶基因多态性及烟酒茶嗜好与贲门癌易感性的关系

目的 :研究胸苷酸合成酶TS3′ UTR多态性及其和烟酒茶嗜好相互作用与贲门癌易感性的关系。方法 :在上消化道癌高发区淮安市进行了一个病例对照研究 (贲门癌 89例 ,人群对照 2 2 3例 ) ,调查研究对象的生活习惯 ,采用PCR RFLP技术检测研究对象的TS 3′ UTR基因型。结果 :贲门癌组TS 6/ 6bp、 6/-6bp和 -6/-6bp基因型频率分别为7 9%、43 8%和 48 3 % ,与对照组( 8 1%、5 4 3 %和 3 7 7% )相比差异无统计学意义。与携带TS 6bp等位基因且不吸烟、每周饮酒 <2次和饮茶者相比 ,在吸烟、每周饮酒≥ 2次和不饮茶者中 ,携带TS -6/-6bp基因型者发生贲门癌的危险性显著上升 ,调整后的OR分别为 3 99( 95 %CI:1 5 1～ 10 5 0 )、3 2 2 ( 95 %CI :1 2 1～8 5 5 )和 6 14 ( 95 %CI:2 3 9～ 15 77)。结论 :TS 3′ UTR基因多态性影响吸烟、饮酒和饮茶与贲门癌之间的关系     

6-硝基吲哚合并BSO的放射增敏作用初探

6-硝基吲唑对乏氧细胞有较强的增敏作用,但对正常有氧细胞也有一定的毒性。初步研究降低6-硝基吲唑浓度及合并BSO的离体细胞放射增敏效应。结果表明:BSO可增强6-硝基吲唑的放射增敏效应,单纯用6-硝基吲唑的增敏比为1.73(2mM);用BSO合并6-硝基吲唑的增敏比以Do计为l.83;以Dq计则单纯用6-硝基吲唑及合并BSO的增敏比值分别为1.90和2.95。     

人胚纤维母细胞体外诱导恶性转化过程中某些生物学标记的改变

经致癌物N-甲基-N′-硝基-亚硝基胍(MNNG)多次处理体外培养的人胚纤维母细胞诱发了恶性转化,其表现包括形态改变、转化灶形成、生长特性改变、寿命明显延长、染色体非整倍体明显增加和细胞内血卟啉衍生物(H.P.D)掺入量增高,后两种现象出现早且持续于整个观察过程,可能是人类细胞恶性转化过程中较早期出现的生物学标记。     

三硝基甲苯及其代谢产物的Ames试验

本文对三硝基甲苯(TNT）及其代谢产物4—氨基2，6—二硝基甲苯（4A），2—氨基4，6—二硝基甲笨(2A)、2，4—二氨基6—硝基甲苯（2，4—DA)、4，4′—偶氨2，2′，6，6′—四硝基甲苯(4，4′—AZ)、4—羟氨基2,6—二硝基甲苯(4—HA)进行了Ames试验，选用TA97、TA98、TA100、TA102 4种组氨酸缺陷型鼠静伤寒沙门氏菌株，     

甲基丙烯酸环氧丙酯诱导基因突变的序列分析

本文采用双链DNA直接测序法对GMA诱导的质粒PBR322突变体(AP~RTc~s)的部分基因片段进行序列测定,结果表明:①GMA诱导的基因突变类型为缺失型和插入型,缺失的频率(28％)远大于插入频率(18％),C和G的缺失远大A和T的缺失。碱基缺失和插入导致移码突变。②GMA诱导的基因序列的改变,其作用方式并非随机。5′- CNCCN-3′为高度敏感的作用序列(专一性序列)。③GMA在三个富含C和G区域诱导很强的突变作用,尤其在397-418区段,突变频率高达36.3％,可认为该区域为热点区。     

Utilin′s、IFNα和TNFα体外诱生免疫相关细胞因子水平的比较

目的　探讨乌体林斯 (Utilin′s)体外诱导正常人外周血淋巴细胞合成与分泌免疫相关细胞因子的作用。方法　应用ELASA法检测Utilin′s、干扰素α(IFNα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)培养上清中IFNγ、TNFα、IL 2、IL 6、IL 8、IL 12和IL 18的水平。结果　Utilin′s培养上清中IL 8、IL 12和TNFα水平显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。Utilin′s加PHA和Utilin′s加SMMC -772 1细胞抗原培养组 ,培养上清中 7种细胞因子水平显著高于对照组 (P <0 .0 1;P <0 .0 5 )。含有Utilin′s的 3组培养上清中 7种细胞因子与IFNγ、TNFα各培养组比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　Utilin′s与IFNα、TNFα一样 ,均具有诱导和促进淋巴细胞合成与分泌免疫相关细胞因子作用