CEA mRNA、CEA蛋白及细胞学检测胃癌腹腔液中游离癌细胞的初步评价

目的　比较腹腔冲洗液中CEAmRNA、CEA蛋白和细胞学检测游离癌细胞及预测腹膜转移的应用价值。方法　术中收集 43例胃癌和 10例胃良性病变的腹水或腹腔冲洗液 ,分别采用RT PCR方法测定腹腔液中游离癌细胞CEAmRNA表达 ,放射免疫检测上清液中CEA蛋白含量 (p CEA) ,同时做腹腔冲洗细胞学 (peritoneallavagecytology ,PLC)检查。结果　CEAmRNA表达阳性率 (5 6 .3% )明显高于p CEA (38.1% )或PLC (33.0 % ,P <0 .0 5～ 0 .0 1)。CEAmRNA表达量随侵袭深度、病期进展而增加 (P <0 .0 5 ) ,因大体类型、浆膜类型不同 ,其阳性表达级别差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　三种方法均适用于胃癌腹腔脱落癌细胞的诊断或腹膜转移的预测 ,但对微量癌细胞检出的灵敏性 ,以RT PCR方法为优。     

胃癌患者根治术后腹腔灌洗液中CEA mRNA表达的临床意义

目的：探讨胃癌患者根治术后腹腔冲洗液中CEA mRNA表达情况及其临床意义。方法: 回顾性分析了2013 年1 月至2017 年12 月在南京大学医学院附属鼓楼医院接受胃癌根治切除术后进行腹腔灌洗液CEA mRNA检测的139 名患者的病历资料，并进行术后常规随访。用RT-PCR检测139 胃癌患者根治术后腹腔灌洗液中CEA mRNA表达情况。卡方检验分析腹腔灌洗液中CEA mRNA表达与临床基本特征、组织病理学资料、血液学指标及复发方式之间的关系。采用Logistic 单因素及多因素回归分析筛查影响CEA mRNA表达水平的因素。结果：139 名患者中44 名（31.7%）患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性。分析显示，胃癌患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性表达与性别、年龄、病理分级、Lauren 分型和HER2、EGFR、VEGFR等标记物间均没有明显的关联（均P>0.05），与病理类型、脉管是否侵犯、局部浸润深度、淋巴结转移程度和临床AJCC 分期有明显的关联（均P<0.05）。CEA mRNA阳性患者腹膜复发率明显高于阴性患者（P=0.012）。Logistic 单因素回归分析显示，印戒细胞癌（P=0.04，HR=2.810，95% CI: 1.050~7.520）、T 分期（P=0.016，HR=6.329，95% CI: 1.417~28.264）、N 分期（P=0.022，HR=3.068，95% CI: 1.172~8.027）、AJCC分期（P=0.016 ，HR=3.971 ，95% CI: 1.295~12.173 ）、神经侵犯（P=0.002 ，HR=6.738，95% CI: 1.995~22.757）、脉管侵犯（P<0.001，HR=16.36，95% CI: 3.85~69.512）为胃癌患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性表达的危险因素。Logistic 多因素回归分析显示，经过对其他因素的校正，脉管侵犯（P<0.001，HR=21.314，95% CI: 4.21~107.907）为胃癌患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性表达的独立危险因素。结论：胃癌腹腔灌洗CEA mRNA阳性的患者腹膜复发转移风险高且预后不良，应考虑包括腹腔局部治疗在内的更加积极的抗肿瘤治疗。     

胃癌术中腹腔冲洗液Cox-2 mRNA及CEA mRNA检测临床意义的探讨

目的：探讨腹腔冲洗液Cox-2 mRNA及CEA mRNA检测的可行性和临床意义。方法：前瞻性比较胃癌腹腔冲洗液RT-PCR法与常规细胞学法（PLC）检出脱落癌细胞的阳性率。结果：32例胃癌患者腹腔冲洗液中Cox-2 mRNA及CEA mRNA检出阳性率分别为53．1％（17／32）及56．3％（18／32），明显高于PLC检出癌细胞阳性率（21．9％），Х^2分别为5．497及4．433，P〈0．05。17例RT—PCR法检出阳性病例中，COX-2 mRNA法检出16例（94．1％），CEA mRNA法检出15例（88．2％），两种基因腹腔冲洗液脱落癌细胞检测阳性率大致相同，且检测阳性率与浆膜浸润阳性、浆膜浸润面积大、病理组织学类型、淋巴结转移和TNM病期呈正相关。结论：RT—PCR法检测胃癌腹腔冲洗液Cox-2 mRNA与CEA mRNA表达，可显著提高脱落癌细胞的检测阳性率，具有广泛的临床应用价值和意义。     

胃癌术中腹腔冲洗液CK20mRNA、COX-2 mRNA检测及与腹膜微转移的相关性

目的：运用细胞学及实时荧光定量RT-PCR方法对胃癌术中腹腔冲洗液进行检测,以探讨对预测胃癌腹膜微转移的意义。方法：胃癌50例和胃良性病变10例,收集患者术中腹腔冲洗液,用实时荧光定量RT-PCR方法测定腹腔冲洗液中游离细胞的CK20mRNA、COX-2 mRNA表达,同时作冲洗液细胞学检测（PLC）。结果：50例胃癌患者腹腔冲洗液中CK20mRNA阳性表达为62.0%（31/50）;COX-2 mRNA阳性表达率60.0%（30/50）,CK20mRNA、COX-2 mRNA联合检测阳性率为68.0%（34/50）,皆高于腹腔冲洗液细胞学28.2%（11/50）,CK20mRNA、COX-2 mRNA的阳性率与肿瘤分期、浸润深度、淋巴结转移、浆膜侵犯程度呈正相关。结论：CK20mRNA、COX-2 mRNA实时荧光定量RT-PCR方法检测腹腔微量游离癌细胞较PLC有更高的灵敏度,是一种检测胃癌腹膜微转移的有效方法。     

流式细胞术检测胃癌患者腹腔冲洗液游离癌细胞的变化

目的：探讨胃癌手术对腹腔脱落癌细胞的影响。方法：收集50例行胃癌手术患者胃癌切除前后腹腔冲洗液,以流式细胞学（FCM）方法检测腹腔冲洗液癌胚抗原（CEA）及角蛋白-19（CK-19）,同时采用HE染色进行腹腔冲洗液细胞学（PEG）检查。结果：胃癌手术患者CEA检查手术前后阳性率分别为46％（23／50）和64％（32／50）,CK-19检查手术前后阳性率为48％（24／50）和68％（34／50）,两组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。PLC检查结果手术前后分别为20％（10／50）和36％（18／50）（P〈0．05）。术前、术后PLC阳性者FCM均为阳性。结论：胃癌手术增加腹腔胃癌细胞的脱落。     

实时RT-PCR及电化学技术检测胃癌术中腹腔灌洗液中游离癌细胞的比较

目的建立实时RT-PCR及电化学技术两种较敏感的检测胃癌术中腹腔灌洗液中游离癌细胞的方法,并对这两种检测方法进行比较。方法分别采用实时荧光RT-PCR和电化学发光方法检测65例胃癌术中腹腔灌洗液中CEAmRNA及CEA蛋白,同时进行腹腔冲洗细胞学方法(peritoneallavagecytology,PLC)涂片寻找癌细胞。收集5例良性胃疾病的术中腹腔灌洗液,5例健康志愿者血液为阴性对照。结果(1)RT-PCR方法检测游离癌细胞的阳性率为47.7%,电化学发光法的阳性检出率为35.4%,两者均无假阳性。而PLC的检出率仅12.3%。(2)电化学发光方法具有快速、试剂稳定、无污染和衰变、自动化程度高,且较经济等优点。(3)CEAmRNA、CEA蛋白阳性率在不同的病理分期组( 期和 期)中差异有显著性(P<0.05)。结论实时荧光RT-PCR方法和电化学发光方法检测游离癌细胞各有优势,游离癌细胞的存在与肿瘤病理状态有一定相关性。     

胃癌术中腹腔冲洗液CK20mRNA、COX-2 mRNA检测及与腹膜微转移的相关性

目的:运用细胞学及实时荧光定量RT-PCR方法对胃癌术中腹腔冲洗液进行检测,以探讨对预测胃癌腹膜微转移的意义.方法:胃癌50例和胃良性病变10例,收集患者术中腹腔冲洗液,用实时荧光定量RT-PCR方法测定腹腔冲洗液中游离细胞的CK20mRNA、COX-2 mRNA表达,同时作冲洗液细胞学检测(PLC).结果:50例胃癌患者腹腔冲洗液中CK20mRNA阳性表达为62.0%(31/50);COX-2 mRNA阳性表达率60.0%(30/50),CK20mRNA、COX-2 mRNA联合检测阳性率为68.0%(34/50),皆高于腹腔冲洗液细胞学28.2%(11/50),CK20mRNA、COX-2 mRNA的阳性率与肿瘤分期、浸润深度、淋巴结转移、浆膜侵犯程度呈正相关.结论:CK20mRNA、COX-2 mRNA实时荧光定量RT-PCR方法检测腹腔微量游离癌细胞较PLC有更高的灵敏度,是一种检测胃癌腹膜微转移的有效方法.     

流式细胞术检测胃癌患者腹腔冲洗液游离癌细胞的变化

目的:探讨胃癌手术对腹腔脱落癌细胞的影响. 方法:收集50例行胃癌手术患者胃癌切除前后腹腔冲洗液,以流式细胞学(FCM)方法检测腹腔冲洗液癌胚抗原(CEA)及角蛋白-19(CK-19),同时采用HE染色进行腹腔冲洗液细胞学(PLC)检查.结果:胃癌手术患者CEA检查手术前后阳性率分别为46%(23/50)和64%(32/50),CK-19检查手术前后阳性率为48%(24/50)和68%(34/50),两组之间差异有统计学意义(P＜0.05).PLC检查结果手术前后分别为20%(10/50)和36%(18/50)(P＜0.05).术前、术后PLC阳性者FCM均为阳性.结论:胃癌手术增加腹腔胃癌细胞的脱落.     

胃癌腹腔灌洗液CEA测定的临床意义

检测50例胃癌和10例胃良性病变腹腔灌洗液CEA及脱落细胞，CEA临界值定为115ng/g蛋白。结果：胃癌腹膜种植、侵及装膜、未侵及浆膜，CEA阳性率分别为88．9％、55．8％、13．3％。三者差异显著（P＜0.01）。CEA阳性组2年1存率（29．2％），显著低于阴性组（88．5％）（P＜0．05）。提示腹腔灌洗液CEA检测比脱落细胞检查更准确、敏感，是判断腹膜隐性播散和预后的一种好方法。     

实时荧光定量RT-PCR检测胃癌腹腔冲洗液CK20、CEA mRNA

目的研究实时荧光定量RT-PCR方法定量检测胃癌患者腹腔冲洗液中CK20、CEA mRNA的表达,并探讨其临床意义.方法通过实时定量荧光RT-PCR方法,对56例胃癌患者术中腹腔冲洗液中定量检测CK20、CEA mRNA的表达.结果浆膜受侵患者CEA mRNA的表达率61.5%(16/26),明显高于未及浆膜者30.0%(9/30)(P＜0.05).浆膜受侵患者CK20 mRNA的表达率46.2%(12/26)与未及浆膜者56.7%(17/30)(P>0.05)差异无显著性.结论实时定量荧光RT-PCR检测CEA mRNA可作为胃癌腹腔脱落癌细胞的诊断或腹膜转移的预测,指导术中干预治疗.     

胃癌患者腹腔游离癌细胞的检测及其临床意义

腹腔播散是进展期胃癌常见的转移方式,由于目前尚没有标准的检测胃癌腹腔微转移的方法,故大部分腹腔微转移的胃癌患者难以得到临床诊断。应用腹腔灌洗细胞学(PLC)检测腹腔游离癌细胞(IFCCs)的结果与腹腔镜检查结果相似,但是腹腔镜结合PLC可增加检查的敏感性。应用免疫组化和酶联免疫吸附试验可检测腹腔灌洗液(PLF)中IFCCs肿瘤标志,IFCCs预测胃癌复发的阳性预报值为91%,特异性为97%。应用免疫组化检测IFCCs是一个有效的、独立的预测胃癌生存期的阴性指标。应用酶联免疫吸附试验检测PLF中CEA水平是预测腹腔播散的指标,其诊断腹腔微转移的敏感性和特异性分别是75.8%和90.8%。应用PLF进行分子诊断的敏感性优于PLC、免疫组化和酶联免疫吸附试验。逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)是一种新的诊断腹腔灌洗液中IFCCs的方法,基于靶基因的RTPCR方法可用于检测腹腔微转移的肿瘤分子标志。在IFCCs中表达的这些分子标志还可用于腹腔微转移治疗。存在IFCCs的胃癌患者的预后很差,无论应用哪种方法预测腹腔微转移都是困难的,但术前均应进行IFCCs检查,以明确诊断和指导治疗。     

腹腔冲洗液中癌胚抗原、细胞角蛋白20水平预测胃癌患者腹膜微转移和判断预后的临床价值

目的 探讨检测胃癌患者腹腔冲洗液中癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白20（CK-20）水平对胃癌患者预测腹膜微转移和判断预后的价值.方法 收集行D2根治术并达到R0切除的105例胃腺癌患者临床及随访资料.收集患者腹腔冲洗液,常规行HE染色腹腔冲洗细胞学（PLC）检查,采用流式细胞术（FCM）检测患者腹腔冲洗液中CEA和CK-20的表达,以13例需行手术治疗胃良性病变患者作为阴性对照,以人类胃癌细胞株SGC-7901作为阳性对照.结果 105例胃癌患者腹腔冲洗液中CEA的阳性表达率为45.7％（48/105）;CK-20的阳性表达率为63.8％（67/105）;CEA和CK-20的联合检测阳性率为81.0％（85/105）,均高于PLC检查的29.5％（31/105）（P＜0.05）.CEA和CK-20阳性率与肿瘤是否侵犯浆膜、淋巴结转移、pTNM分期有关（P＜0.05）.CEA和CK-20均表达阴性的20例患者中位生存期为52.0个月,长于CEA和CK-20均表达阳性的30例患者（18.0个月）（P＜0.05）.结论 FCM检测,尤其是联合检测胃癌患者腹腔冲洗液中CEA、CK-20的表达可用于预测腹膜微转移,明显优于PLC检测.联合检测胃癌患者腹腔冲洗液CEA、CK-20的表达可有效预测胃癌患者预后.     

Cytoreductive surgery with hyperthermic intraperitoneal chemotherapy for peritoneal malignancy: preliminary results of a multi-disciplinary teamwork model in Asia

Background: Cytoreductive surgery with hyperthermic intraperitoneal chemotherapy (CRS/HIPEC) is an emerging surgical procedure for peritoneal carcinomatosis (PC). CRS/HIPEC is a complicated treatment that requires multi-disciplinary teamwork (MDT), which may be lacking when establishing a CRS/HIPEC programme. Herein, we report our preliminary treatment outcomes with the early implementation of an MDT model for CRS/HIPEC.

Methods: From April 2015 to December 2016, 45 patients with a diagnosis of PC who received CRS/HIPEC were reviewed retrospectively in a single institution in Taiwan.

Results: Among the 45 patients, CRS was mainly performed by laparotomy (n?=?42), and only three patients with limited PC underwent laparoscopic CRS. The first 13 patients received treatment before the MDT had been established (group 1), and the other 32 patients were treated after the MDT had been established (group 2). The highest peri-HIPEC body temperature in group 2 was significantly lower than that in group 1 (36.8?°C vs. 37.5?°C, p?p?=?0.202). Pre-CRS/HIPEC abdominal pain significantly increased the risk of post-operative major complications (p?=?0.017).

Conclusions: Our experience suggests that the early implementation of an MDT model when establishing a CRS/HIPEC programme at a single institution may result in a higher complete cytoreduction rate and lower major complication rate, and also shorten the learning curve of this complicated procedure.     

Current status of cytoreductive surgery with hyperthermic intraperitoneal chemotherapy in patients with peritoneal carcinomatosis from colorectal cancer

Peritoneal carcinomatosis (PC) arising from colorectal cancer (CRC) is generally considered a terminal condition with no treatment options. However novel treatment strategies have emerged combining cytoreductive surgery (CRS), including peritonectomy procedures, with intraperitoneal chemotherapy. The intraoperative application of cytotoxic drugs combined with hyperthermia (hyperthermic intraperitoneal chemotherapy [HIPEC]) has been considered to deliver cytotoxicity most effectively to peritoneal tumor implants. In selected groups of patients with no remaining macroscopic tumor manifestations on peritoneal surfaces after CRS and HIPEC, median survival times may reach 5 years, with a 5 year overall survival rate of 50%. HIPEC has been performed with different cytotoxic drugs, in combination with early postoperative intraperitoneal chemotherapy (EPIC), and embedded into various systemic perioperative and/or postoperative chemotherapeutic regimens. Prognosis largely depends on the intraabdominal tumor burden, which can be assessed by the peritoneal cancer index (PCI), and the completeness of cytoreduction. In this review we discuss the most relevant prognostic parameters, the outcome of patients with PC from CRC treated with CRS and HIPEC, and the impact of different chemotherapeutic variations used during HIPEC. From this analysis it can be concluded that CRS and HIPEC offers a chance for long-term survival in selected patients with PC of colorectal origin.     

Prognostic significance of tumor markers in peritoneal lavage in advanced gastric cancer

OBJECTIVE: Predicting peritoneal dissemination of cancer is very difficult whatever method of examination is used. Recently, a cytological examination of peritoneal lavage has been shown to be a feasible measure to predict an early state of peritoneal seeding. The predictive value of the levels of tumor markers in peritoneal lavage for peritoneal metastasis from gastric carcinoma was thus studied. METHODS: In 229 patients gastric cancer tumor markers, CEA, CA 125, and CA 19-9, in peritoneal lavage were intraoperatively evaluated using a chemiluminescent enzyme immunoassay. RESULTS: CEA in peritoneal lavage at a cutoff level of 0.5 ng/ml showed overall a higher sensitivity of 75.8% at a specificity of 90.8% for a diagnosis of peritoneal dissemination including cytologically positive peritoneal lavage [CY(+)] than CA 125 or CA 19-9 in peritoneal lavage. The CEA level in peritoneal lavage as well as both serosal invasion and the CA 125 level in peritoneal lavage were significant factors for the prediction of peritoneal dissemination including CY(+) with a relative risk of 6.6, 14.1 and 9.4. In patients undergoing curative operations, the recurrence rate for peritoneal dissemination and liver metastasis in cases with CEA levels in peritoneal lavage of > or = 0.5 ng/ml was significantly higher than that in cases with CEA levels of < 0.5 ng/ml (p < 0.0001, p < 0.002). CONCLUSIONS: These finding suggest that the CEA level in peritoneal lavage is thus considered to be a predictor of peritoneal dissemination including CY(+).     

细胞减灭术加腹腔热灌注化疗治疗结直肠癌腹膜转移癌病例对照研究

  目的  分析细胞减灭术（CRS）加术中腹腔热灌注化疗术（HIPEC）对结直肠癌腹膜转移癌的疗效及安全性。  方法  课题设计为回顾性病例对照研究, 收集结直肠癌腹膜转移癌（CRC PC）患者资料, 按临床病理参数匹配原则, 分为CRS组（CRS+术后全身化疗）29例, HIPEC组（CRS+HIPEC+术后全身化疗）33例。分析两组的总体生存期（OS）及严重不良事件（SAE）。  结果  两组患者临床病理学特征均衡可比, 术中PCI评分及器官/腹膜切除情况相似。两组中位随访时间分别为41.9个月（6.5~110.0个月）和32.0个月（10.5~95.9个月）, OS分别为8.5个月（95% CI: 4.9~12.1个月）和14.5个月（95% CI: 11.9~17.1月）（P=0.007）。术后30天内CRS组3例发生SAE, HIPEC组9例（P=0.126）。多因素分析显示, HIPEC、CC 0~1分、术后化疗周期≥6个周期为改善生存的独立预后因素。  结论  CRS+HIPEC可改善CRCPC患者生存期, SAE无显著增加, 安全性可接受。      

检测胃癌患者腹腔冲洗液中癌胚抗原mRNA和细胞角蛋白20 mRNA的临床意义

目的探讨采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌患者腹腔冲洗液中癌胚抗原(CEA)mRNA和细胞角蛋白20(CK-20)mRNA的临床价值。方法收集80例胃癌患者和10例胃良性病变患者的腹腔冲洗液或腹水,常规行HE染色细胞学检查,采用巢式RT-PCR方法检测腹腔冲洗液中CEA mRNA和CK-20 mRNA的表达,并以人胃癌细胞株SGC-7901作为阳性对照。结果80例胃癌患者腹腔冲洗液中CEA mRNA的阳性表达率为52.5%(42/80),CK-20 mRNA的阳性表达率为57.5%(46/80),CEA mRNA和CK-20 mRNA的联合检测阳性率为70.0%(56/80),皆高于腹腔冲洗液细胞学(PLC)检查的27.5%(22/80,P<0.05),且22例PLC检查阳性患者的CEA mRNA和CK-20 mRNA检测结果均为阳性。CEA mRNA和CK-20 mRNA的阳性率与淋巴结转移和TNM分期明显相关(P<0.05)。结论巢式RT-PCR检测胃癌患者腹腔冲洗液中CEA和CK-20基因,可以提高腹腔内游离癌细胞(IFCCs)的检测灵敏度和特异度,对于早期诊断胃癌腹膜微转移有一定的临床价值,可为手术方式选择及术中、术后化疗提供依据。