IFNγ联合全反式维甲酸对白血病细胞株NB4、MR2增殖和分化的影响

背景与目的:全反式维甲酸(all-transretinoicacid,ATRA)的应用,使90%以上的急性早幼粒细胞白血病(acutepromyelocyticleukemia,APL)患者获得了完全缓解,但维甲酸耐药的快速发生成为ATRA治疗APL的一大缺憾。许多研究表明ATRA耐药与缺乏干扰素合成的某些蛋白质有一定的关系,本研究拟探讨干扰素联合ATRA作用抑制ATRA耐药APL细胞增殖和分化的可能性及其机制。方法:γ干扰素(interferonγ,IFNγ)、ATRA单独或联合作用于ATRA敏感细胞株(NB4)及ATRA耐药细胞株(MR2)后,采用MTT法检测细胞的增殖,用光镜观察和NBT还原实验检测细胞的分化,间接免疫荧光法观察早幼粒细胞白血病(promyelocyticleukemia,PML)蛋白表达的情况。结果:第8天时,IFNγ组、ATRA组和(IFNγ ATRA)组NB4细胞的生长抑制率依次为68.0%、85.0%和95.2%;MR2细胞的生长抑制率依次为24.1%、4.3%和51.5%。联合用药组NB4细胞、MR2细胞的生长抑制率明显高于单独用药组(P<0.05)。第3天时,IFNγ组、ATRA组和(IFNγ ATRA)组NB4细胞的NBT阳性率依次为19.3%、74.7%和93.3%,MR2细胞的NBT阳性率依次为16.8%、5.2%和31.5%,联合用药组NB4细胞、MR2细胞的NBT阳性率明显高于单独用药组(P<0.05)。IFNγ作用后,NB4细胞和MR2细胞核内的荧光颗粒较对照组明显增多。结论:IFNγ与ATRA具有协同作用,二者联合应用不仅能够增强ATRA对NB4细胞和MR2细胞的增殖抑制作用,而且能够部分诱导对ATRA耐药的MR2细胞发生分化。     

细胞因子对HL-60白血病细胞分化作用的研究

目的　研究细胞因子TNF -α、IFN -γ及IL -6对白血病细胞的分化作用的影响。方法　以HL -6 0白血病细胞为模型 ,采用几种细胞因子单一或联合作用于HL -6 0细胞。通过检测细胞表面分化抗原、NBT试验和细胞内酶α -NAE指标 ,观察细胞因子对白血病细胞的单一和联合促分化作用。结果　TNF -α可显著增加NBT还原率和α -NAE阳性细胞数 ,无分化抗原表达的改变 ;IFN-γ能诱导HL -6 0细胞表面分化抗原改变 ,同时显著增加NBT还原率和α -NAE阳性细胞数 ;IL -6无诱导HL -6 0细胞分化作用 ;IFN -γ和TNF -α可协同作用增加NBT还原率和α -NAE阳性细胞数 ,但对细胞表面分化抗原表达无明显协同作用。结论　不同类型的细胞因子对HL -6 0细胞分化作用的影响也不同。     

不同种类干扰素联合维甲酸对HL-60细胞增殖和分化的影响

目的:研究干扰素联合维甲酸(ATRA)对HL-60细胞增殖和分化的影响及其机制.方法:IFNα、IFNγ、ATRA单独或联合作用于HL-60细胞后,采用MTT法检测细胞的增殖,用光镜观察、NBT还原实验和流式细胞仪检测细胞的分化,并用间接免疫荧光法观察PML蛋白表达的情况.结果:两种干扰素分别与ATRA联合应用都能够增强ATRA对HL-60细胞的增殖抑制作用,两种干扰素之间无显著性差别.IFNγ与ATRA联合应用能够增强ATRA对HL-60细胞的诱导分化作用,但IFNα与ATRA联合应用却没有此作用.两种干扰素都能够诱导PML蛋白的表达.结论:两种干扰素都能够通过诱导PML蛋白表达而抑制细胞生长;IFNγ与ATRA联合应用增强ATRA对HL-60细胞的诱导分化作用可能与两种药物的信号传导途径发生交叉激活有关.     

淫羊藿苷对急性早幼粒白血病细胞体内外效应的研究

目的 :探讨淫羊藿苷 (ICA)对急性早幼粒白血病细胞的诱导分化作用。方法 :采用ICA与全反式维甲酸 (ATRA)对比试验 ,观察ICA在体外及小鼠体内对白血病细胞增殖分化的影响。结果 :ICA在体内外对白血病细胞均有较明显的诱导分化和抑制增殖作用 ,且与ATRA合用可产生明显的协同效应。结论 :ICA具有明显的抗白血病细胞作用     

桂皮酸和全反式维甲酸及维生素C对HL-60细胞的分化研究

目的:探讨桂皮酸、全反式维甲酸(all transretinoicacid,ATRA)和维生素C(V C)对人急性早幼粒白血病(HL60细胞)的分化作用。方法:用2.5mmol/L桂皮酸、1μmol/LATRA和0.5mmol/LV C单独,和联合处理HL60细胞后,观察细胞形态改变,细胞增殖速度、硝基四氮唑蓝(NBT)还原反应和过氧化酶染色反应。结果:ATRA、桂皮素和联合组都能使HL60细胞形态向成熟粒细胞转变,对细胞增殖有明显抑制作用,能使细胞的NBT反应显著增强(P<0.01),过氧化酶染色为弱阳性或阴性;V C对细胞形态和增殖抑制第5天才出现,使NBT反应和染色反应改变不明显(P<0.05)。结论:桂皮酸、ATRA和三者联合对HL60细胞有很强分化诱导效应,V C的分化效应弱,但有增强分化的作用。     

全反式维甲酸联合细胞因了对NB4细胞增殖分化作用的体外研究

目的：探讨新的药物协同ＡＴＲＡ诱导早幼粒白血病细胞分化作用,降低临床ＡＴＲＡ剂量提高ＡＴＲＡ疗效。方法：ＮＢ４细胞株为实验模型,采用细胞生物学研究方法,体外研究ＩＦＮγ、ＴＮＦ和Ｇ－ＣＳＦ各结合ＡＴＲＡ对ＮＢ４分化的作用。结果：在诱导分化和抑制白血病克隆增中,ＩＦＮγ和ＴＮＦ具协同作用,以ＩＦＮγ作用最明显,在ＡＴＲＡ浓度为１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ时,比较各细胞因子联合ＡＴＡ对ＮＢ４细胞作用后ＮＢＴ的     

孕酮对白血病细胞的抑制增殖和诱导分化作用

 目的探讨孕酮对K562和NB4白血病细胞系的抑制增殖和诱导分化作用。方法采用细胞计数,XTT实验观察孕酮对白血病细胞增殖能力的影响,采用Wright-Giemsa染色,联苯胺染色,NBT还原实验和流式细胞术观察孕酮对白血病细胞的诱导分化作用。结果不同浓度孕酮连续作用白血病细胞5天,液体培养显示细胞数明显减少,第5天处理组的XTT值显著低于对照组,并呈剂量依赖关系;液体培养和XTT均显示孕酮对NB4细胞的增殖并无显著影响。K562细胞联苯胺染色 OD值显著升高,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）,NB4细胞NBT还原能力提高（P<0.01）,并呈剂量依赖性。形态学观察孕酮可诱导K562细胞和NB4细胞趋向成熟分化,流式细胞术检测孕酮处理后K562和NB4细胞膜CD71和CD11b分化抗原表达阳性率分别为85.72％和61.28％。结论孕酮可显著抑制K562白血病细胞增殖,诱导K562和NB4白血病细胞向成熟分化。     

淫羊藿甙对急性早幼粒白血病细胞端粒酶活性的影响

目的：探讨淫羊藿甙（ICA）对急性早幼粒白血病细胞端粒酶活性的影响。方法：采用ICA与全反式维甲酸（AT-RA）对比试验。观察ICA对白血病细胞端粒酶活性及增殖分化的影响。结果：ICA可明显抑制端粒酶活性，对白血病细胞均有较明显的诱导分化和抑制增殖作用。且与ATRA合用可产生明显的协同效应。结论：ICA具有抑制急性早幼粒白血病细胞端粒酶活性的作用。     

淫羊藿苷对急性早幼粒白血病细胞体内外效应的研究

目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对急性早幼粒白血病细胞的诱导分化作用。方法：采用ICA与全反式维甲酸（ATRA）对比试验,观察ICA在体外及小鼠体内对白血病细胞增殖分化的影响。结果：ICA在体内外对白血病细胞均有较明显的诱导分化和抑制增殖作用。且与ATRA合用可产生明显的协同效应。结论：ICA具有明显的抗白血病细胞作用。     

桂皮酸对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞增殖和分化作用

目的　探讨桂皮酸 (CinnamicacidCINN )对急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞增殖和分化的作用。方法　将APL细胞株NB4细胞与不同浓度CINN在体外共同培养 ,应用台盼蓝拒染试验及MTT比色法观察细胞生长曲线、生长抑制率 ;用光学显微镜观察细胞形态变化 ;以NBT还原试验检测药物作用前后NB4细胞NBT还原能力改变 ;用流式细胞仪测定细胞周期及细胞分化抗原CDlla、CDllb的表达。结果　lmmol/LCINN、3mmol/LCINN和 5mmol/LCINN能明显抑制NB4细胞增殖 ,呈剂量时间依赖性 ;lmmol/L、3mmol/LCINN能诱导NB4分化 ,表现在NBT还原能力显著增强 ,CDlla、CDllb表达升高 ,药物组与对照组之间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,流式细胞术分析发现 ,CINN处理组细胞被阻滞于S期 ,S期细胞数明显增多 ,G2 期细胞数减少。结论　CINN体外能诱导NB4细胞分化 ,增殖能力下降。     

全蝎乙醇粗提取物离体抗突变研究

目的;研究全蝎乙醇提取物是否具有抗突变效应。方法：本文利用沙门氏菌／微粒体致突变性试验,对全蝎和几味中药的乙醇粗提取物（简称全蝎乙醇提取和的,ＳＥＥ）的抗突变作用作了研究。结果：剂量在２５－１００μｌ／Ⅲ时,ＳＥＥ对终致突变物敌克松诱发的ＴＡ９８回复突变无明显影响;     

番匣红素对甲基戊基亚硝胺在大鼠中致癌性的影响篌

目的:观察番茄红素对甲基戊基亚硝胺(MANA)致癌性的影响.方法:随机将Wistar大鼠分为3组:MANA组(M)、MANA+番茄酱组(M+LP)和对照组(C).实验期为26周,观察大鼠食管和胃粘膜病理变化,同时检测血清活性氧单位(ROS unit)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平.结果:M组和M+LP组大鼠食管和前胃均发生癌前病变,而M+LP组大鼠癌前病变发生率低于M组;M+LP组大鼠血中ROS unit、SOD、GSH-Px活性较M组高,MDA含量较M组低.结论:番茄红素具有抑制MANA致癌的作用,其机制可能与抑制脂质过氧化反应有关.     

急性白血病T细胞与免疫球蛋白受体基因重排的临床意义

目的 :探讨急性白血病化疗效应差异及基因受体重排在急性非淋巴细胞白血病中序列交叉存在。方法 :应用聚合酶链反应技术对免疫球蛋白 (Ig H)及 T细胞受体 (TCRγ)基因重排进行测定。结果 :该方法敏感性达10 - 5 ,完全缓解 (CR)后 180 d检测 ,阳性率仍 5 5 .5 % (2 5 /4 5 ) ,2 0例 ANL L中 5例检测到 Ig H受体基因重排 ,观察 6 0 d有复发。结论 :Ig H、TCRγ基因重排是检测残留白血病的敏感指标 ,但在 ANL L中有失真现象。化疗效应的定量评价 ,有助于制定个体化的治疗方案     

食管癌放疗后手术脓胸的预防

目的研究食管癌放疗后手术脓胸的特点及预防。方法术前深静脉高营养，肠道消毒，穿孔病例控制毒血症。术中严格无茵操作，对食管穿孔、破损、残留处以碘伏，洁尔灭酊消毒，高频氩气电刀烧灼。关胸前碘伏，洗必泰，盐水反复冲洗。术后加强呼吸道及胸腔引流管管理，防止胸腔积液，合理使用抗生素。结果121例病人术后脓胸2例，占1．65％。结论食管癌放疗后手术团术前穿孔率高，胸内心肺脏器生理功能发生不同程度改变，术中肿瘤破损及残留机会多，易发生脓胸。本组术前、术中、术后采取严密施治，可有效地预防脓胸的发生。     

重铬酸钾对人精子染色体畸变率的影响

本文介绍了人精子经重铬酸钾体外染毒后，与去透明带金黄地鼠卵受精、体外培养制备人精子染色体进行核型分析。结果表明各染毒组（１０Ｙｍｇ／Ｌ、２０ｍｇ／Ｌ、４０ｍｇ／Ｌ）染色体断裂均数分别为０．１３２０、０．２５００、０．３６７６，与阴性对照组比较，中、高剂量组均具有显著差异（Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０１）．而且具有剂量效应关系。     

骨重建过程"四环素活体标记"骨组织形态计量学指标在骨质疏松中的应用

扼要结合骨组织形态计量学指标与实验动物数据介绍影响骨质疏松中骨重建过程的动态指标变化及意义,讨论各指标间的关系及变化所代表的实验意义,还介绍了一系列骨计量学观测指标的标准名称,以及利用体视学和图像分析方法进行测量的公式、单位,并扼要介绍一组实验数据与骨计量学指标的相关分析意义,便于今后分析例样的应用查阅。     

二硫化碳对人精子染色体畸变率的影响

本文介绍了人精子在体外经二硫化碳染毒后，与去透明带金黄地鼠卵受精，体外培养，然后制备人精子染色体进行核型分析，结果表明染毒组（２５０ｍｇ／Ｌ）染色体断裂均数为０．１４００，与阴性对照组（０．０５３０）比较虽有升高，但无显著性差异（Ｐ＜Ｏ．０５）。     

交链孢酚单甲醚对人淋巴细胞增殖反应的影响

本实验运用PHA诱导的淋巴细胞增殖~3H—TdR掺入法,对食管癌高发区河南省林县粮食中分离的优势污染菌互隔交链孢霉(亦称链格孢菌)的毒素之一——交链孢酚单甲醚(AME)的免疫抑制作用进行了研究。实验结果表明:AME能明显抑制淋巴细胞对~3H—TdR的摄取,在浓度为25、50、75和100μg/ml,其抑制率分别是76.9％、89.2％、91.3％和94.9％,与对照组相比有显著性意义(P<0.01),且存在一定的剂量—效应关系。结果提示AME可能抑制细胞免疫功能。     

新药轻灵-盐酸西部曲明的致畸试验

目的为保证新药轻灵-盐酸西布曲明(Ql-sibutramine)的临床用药安全,评价其生殖毒性,进行了大鼠致畸试验.方法:设3个剂量组:0.50 mg/(kg*d),3.16 mg/(kg*d)和20 mg/(kg*d),最高剂量相当于临床拟用量的14.8倍,另设溶剂对照组和阳性对照组.于孕期6～15 d经口给予受试物,检查对孕鼠和胎鼠的毒性和致畸性.结果:3个轻灵-盐酸西布曲明剂量组均未诱发畸形,也不影响受精卵着床和胚胎存活,但中、高剂量组孕鼠呈现一定的毒性反应(摄食量减少和体重增长缓慢),胎鼠平均体重和身长也降低.结论:轻灵-盐酸西布曲明无致畸性,但有一定的母体毒性及发育毒性.     

纤维蛋白胶对体外培养小鼠胚胎发育的影响

目的: 研究纤维蛋白胶对体外培养小鼠胚胎发育的影响。方法:超排获取昆明小鼠2 细胞期受精卵,常规配制纤维蛋白 胶,比较小鼠胚胎常规培养与在纤维蛋白胶上培养的囊胚发育率及孵化率,以及内细胞团染色体数目变化。结果:小鼠胚胎在 纤维蛋白胶上培养与常规培养,囊胚发育率及孵化率分别为:67. 5 %和66. 7 %( P = 0. 837 , Yetes corrected) , 38. 5 %和34. 0 %( P = 0. 159 , Yetes corrected) 。内细胞团染色体数目绝大部分为2n = 40 ,基本保持核型稳定。结论:纤维蛋白胶对体外培养 的小鼠胚胎无不良影响,可以作为研究胚胎营养因子对胚胎影响的载体基质。