肝细胞癌组织中肿瘤相关成纤维细胞与血管生成拟态的相关性及临床意义

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中α-SMA+肿瘤相关成纤维细胞（carcinoma-associated fibroblasts,CAFs）与血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的相关性及其临床意义。方法:收集60例临床资料完整的手术切除HCC标本,应用免疫组化法检测HCC间质中Vimentin、α-SMA表达情况,病理学方法计数Vimentin+的间质细胞及α-SMA+的CAFs。CD31联合PAS双重染色检测VM水平。统计学分析间质细胞中α-SMA+ CAFs表达与VM形成的相关性及其临床病理意义。结果:HCC间质细胞中α-SMA+ CAFs高表达率为61.7%（37/60）,VM阳性表达率为35.0%（21/60）;间质细胞α-SMA+ CAFs高表达及VM形成与肿瘤的大小、Edmondson分级、临床分期以及是否伴有肝硬化有关（P<0.05）;HCC中α-SMA+ CAFs表达与VM表达呈正相关(r=0.291,P=0.024)。结论:α-SMA+ CAFs和VM形成在肝细胞癌发展进程中发挥重要促进作用,α-SMA+ CAFs可能参与并促进VM形成。     

癌相关成纤维细胞离体培养中激活性状的研究

摘 要：［目的］ 研究离体培养的癌相关成纤维细胞（CAFs）能否保持激活性状。［方法］ 免疫组织化学和免疫荧光法检测乳腺癌及正常乳腺组织成纤维细胞激活标志物平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达情况。利用免疫细胞化学检测体外培养CAFs及正常乳腺组织来源成纤维细胞内α-SMA表达状态;Western blot检测CAFs和正常乳腺组织来源的成纤维细胞的α-SMA和PDGFR代次表达情况。［结果］ 乳腺癌组织内CAFs呈α-SMA广泛表达。然而免疫荧光检测示只有部分CAFs呈α-SMA阳性表达。体外培养的CAFs免疫细胞化学检测显示只有部分细胞呈α-SMA阳性表达。Western blot检测显示一定代次后CAFs仍能保持PDGFR和α-SMA的表达。［结论］ CAFs是异质性细胞群;CAFs体外有限传代后仍能维持激活性状。     

人肺癌相关成纤维细胞的原代培养及其放射激活初探

摘 要：［目的］ 探讨在体外培养条件下,不同剂量的X线照射对人肺癌相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts,CAFs）表型的影响。［方法］ 用经组织块贴壁法从手术标本中提取人肺癌CAFs并原代培养。使用0Gy、4Gy、8Gy、12Gy、16Gy的不同剂量X线照射CAFs,通过Western blot、qRT-PCR检测其平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、波形蛋白（Vimentin）、成纤维细胞活化蛋白（fibroblast activation protein,FAP）、平足蛋白（podoplanin,PDPN）的蛋白和RNA水平;使用CCK8、划痕实验及流式细胞术检测细胞增殖和迁移及凋亡情况。［结果］ 与其他组比较,8Gy照射组的人肺CAFs中α-SMA、Vimentin、FAP、PDPN在蛋白和RNA水平表达更高。划痕实验提示8Gy照射组在48h首先愈合。CCK8研究提示该组细胞增殖活性明显高于其他照射组;流式细胞术显示照射后该组细胞凋亡率为37%,与0Gy组（36%）接近,明显低于其他照射剂量组。［结论］ 经过一定剂量的X线照射后,人肺CAFs可表达更高水平的标志蛋白、同时表现出更强的生长和迁移能力,而该表型变化在8Gy照射组最为显著,为将来深入探讨CAFs的放射激活机制奠定基础。     

胃癌细胞促进网膜脂肪干细胞分化的机制研究

  目的  本实验主要研究在胃癌条件培养基（conditioned medium,CM）诱导下网膜脂肪干细胞（omental-adipose stromal cells,O-ASCs）是否能分化为癌相关成纤维细胞（carcinoma-associated fibroblasts,CAFs）,及ERK信号通路在其中的作用。  方法  通过诱导分化成骨、成脂及流式细胞鉴定O-ASCs,将O-ASCs与MGC803和SGC7901 CM共培养,通过RT-PCR和Western-blot检测O-ASCs细胞CAFs标志物α-SMA、FSP-1、vimentin,旁分泌因子VEGFA、TGFβ-1、FAP、SDF-1的表达水平。将O-ASCs分为对照组,SGC7901-CM实验组,SGC7901-CM+U0126处理组,12 h后收集细胞。Western blot检测O-ASCs细胞CAFs标志物α-SMA、FSP-1及ERK1/2、p-ERK1/2的表达水平。  结果  经鉴定原代培养出的细胞为O-ASCs,在SGC7901 CM和MGC803 CM作用下,CAFs标志物α-SMA、FSP-1、vimentin及旁分泌因子SDF-1、VEGFA、TGFβ-1、FAP表达均有明显增加（P < 0.05）。与对照组比较SGC7901-CM组α-SMA、FSP-1、p-ERK1/2表达明显增加（P < 0.05）,ERK表达未见明显变化（P > 0.05）。SGC7901-CM+U0126组与SGC7901-CM组比较,α-SMA、FSP-1及p-ERK1/2的蛋白表达水平明显降低（P < 0.05）,ERK表达变化无统计学意义（P > 0.05）。  结论  O-ASCs通过分化为CAFs及旁分泌作用参与胃癌腹膜转移,ERK信号通路在该过程中发挥了重要作用。      

肺癌相关成纤维细胞的研究进展

癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)是肿瘤组织中被癌细胞激活的成纤维细胞,具有成肌纤维细胞的特性。CAFs表型恶性转换与肿瘤演进密切相关,同时CAFs是肿瘤微环境的主要组织成分。本文主要从以下方面结合肺癌进行综述:①CAFs的来源及其形态学特征,CAFs异质性及其表型时、空转换的临床意义;②CAFs的研究现状及临床应用中的问题;③CAFs与肺癌侵袭与转移的关系;④CAFs对肺癌预后及其治疗的影响。     

基质成纤维细胞活化蛋白α在肺腺癌中的表达及其临床意义

目的:通过探讨肺腺癌成纤维细胞活化蛋白α(FAPα)的表达与腺癌中临床病理因素的相关性,评价FAP α在腺癌中的表达意义.方法:选取经病理准确诊断为腺癌的肺癌患者85例,应用免疫组织化学方法检测腺癌组织FAP α的表达,收集腺癌患者的临床病理信息,分析FAPα与肺腺癌临床病理因素表达水平之间的关系.结果:FAPα主要表达在肺腺癌间质中基质成纤维细胞中,正常对照肺组织及腺癌细胞中均未检测到FAP α表达.脉管浸润阳性组FAP α表达阳性率明显高于无脉管浸润组(U=512.500,P=0.004),伴淋巴结转移组FAP α表达阳性率明显高于无淋巴结转移组(U=670.500,P=0.040),FAP α表达与肿瘤长径呈显著正相关(r =0.307,P=0.004),FAPα表达与临床分期呈显著正相关(r=0.232,P=0.033);FAP α的表达与患者年龄(r=-0.139,P=0.204)、性别(P=0.419)、肿瘤位置(U=338.000,P=0.091)无关.结论:FAP α在肺腺癌早期发生、发展、侵袭转移方面起到了重要的作用,可能作为肺腺癌诊断及治疗的潜在靶点.     

癌相关成纤维细胞异质性的研究进展

摘 要：癌相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts，CAFs）是肿瘤微环境主要的间质成分，在肿瘤生长、进展和转移过程中起到关键性的作用。众多研究显示，不同来源的CAFs可表达不同的标志物并具有一定的异质性。对CAFs进行分类以及其所发挥的生物学效应进行研究，有利于深入了解CAFs对肿瘤进展和转移的分子机制，从而为恶性肿瘤的治疗提供新型途径。全文对癌相关成纤维来源、分类和异质性等问题进行概述。     

肿瘤相关成纤维细胞对卵巢癌细胞增殖作用影响的研究

目的：探讨肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblast，CAF）分泌的肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）对卵巢癌SKOV3细胞增殖作用的影响。方法：选取在本院手术的卵巢癌患者及其他妇科疾病同时切除正常卵巢手术患者，收集卵巢癌组织、癌旁组织和正常组织，免疫组化观察卵巢癌组织、癌旁组织和正常组织中CAF标志蛋白α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）和Ｉ型胶原蛋白表达情况；用卵巢癌相关成纤维细胞（human endometrial carcinoma-1A cell，HEC-1A）培养48小时后的培养上清，培养卵巢癌细胞SKOV3行细胞计数试剂盒-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）增殖实验、克隆形成实验和倒置显微镜观察检测使用HEC-1A培养上清后SKOV3细胞增殖能力变化；酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测HEC-1A与SKOV3细胞共培养48小时后的培养上清中HGF的表达。结果：免疫组化结果显示，卵巢癌组织中α-SMA和Ｉ型胶原蛋白的表达要明显高于癌旁组织和正常组织；CCK-8增殖实验和克隆形成实验结果显示HEC-1A培养上清处理后的SKOV3细胞的增殖能力显著增强；细胞形态学和免疫荧光结果提示HEC-1A促进SKOV3上皮样细胞增多；ELISA结果显示HEC-1A与SKOV3细胞共培养48小时后的培养上清中HGF的表达明显升高。结论：肿瘤相关成纤维细胞可能通过分泌HGF诱导因子促进卵巢癌细胞的增殖作用。     

SCRN1在口腔鳞状细胞癌肿瘤相关成纤维细胞中的表达及对HSC3细胞株生物学特性的影响

目的:探究胞吐作用相关蛋白(SCRN1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中的表达及对CAFs分泌MMP2功能的影响,进一步研究CAFs对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。方法:通过免疫组织化学染色(IHC)检测SCRN1在OSCC组织及癌旁组织中的表达。原代培养、分离、纯化、验证正常成纤维细胞(NFs)和CAFs,用免疫细胞化学染色法(ICC)、蛋白免疫印迹(WB)、qRT-PCR检测NFs、CAFs中SCRN1的表达情况。CCK-8、Transwell实验检测NFs、CAFs及CAFs-shSCRN1增殖、迁移及侵袭能力。收集NFs、CAFs上清并用ELISA和明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2(MMP2)水平及活性,然后分别与HSC3细胞株共培养,探究两种上清共培养对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。沉默CAFs的SCRN1基因后,收集CAFs、CAFs-shSCRN1和CAFs-Vector上清并检测MMP2水平及活性,然后分别与HSC3共培养,探究三种上清培养条件对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。结果:SCRN1在OSCC组织中阳性表达率及表达水平...     

重楼皂甙Ⅰ对胃癌肿瘤相关成纤维细胞的作用

摘 要：［目的］ 探讨重楼皂甙Ⅰ对胃癌肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts,CAFs）的作用。［方法］ 以体外原代培养的胃癌CAFs为研究对象,MTT法检测重楼皂甙Ⅰ对CAFs细胞的增殖抑制作用,Western Blot法检测CAFs细胞FAP、SPARC、SDF-1、TNC和HGF蛋白表达改变。［结果］ 不同浓度重楼皂甙Ⅰ能有效抑制CAFs细胞的增殖,且呈浓度依赖性。2μg/ml重楼皂甙Ⅰ作用CAFs细胞24h后,FAP、SDF-1和HGF蛋白表达降低,与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）。SPARC和TNC蛋白表达改变与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。［结论］ 重楼皂甙Ⅰ能抑制胃癌CAFs细胞的体外增殖,通过下调FAP、SDF-1和HGF蛋白表达影响CAFs功能。     

相关成纤维细胞自噬调控对乳腺癌MCF-7细胞上皮间质转化影响

目的 研究报道,乳腺癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)在乳腺癌的侵袭、转移中起到促进作用,而机制未明.本研究探讨乳腺癌CAFs自噬调控对MCF-7细胞EMT进程的影响.方法 采用胶原酶消化法对CAFs及配对人乳腺癌正常成纤维细胞(NBFs)进行原代培养,采用免疫荧光和蛋白质印迹法进行鉴定;建立CAFs和NBFs与MCF-7条件培养基(CM)共培养及Transwell小室共培养模型,共分为3组进行实验,空白组即MCF-7单独培养组(CON),对照组即正常乳腺癌成纤维细胞与MCF-7共培组(NBFs),实验组即乳腺癌相关成纤维细胞与MCF-7共培养组(CAFs).Transwell侵袭及迁移实验检测各组MCF-7细胞侵袭和迁移能力.蛋白印迹法检测各组MCF-7细胞EMT上皮标志分子E-cadherin蛋白和间质标志分子N-cadherin和Vimentin蛋白表达情况;蛋白质印迹法检测CAFs与NBFs自噬相关蛋白LC3B、Beclin1和p62表达差异;自噬抑制剂3MA处理CAFs后蛋白质印迹法检测CAFs上述自噬相关蛋白表达差异;予以自噬抑制剂3MA预处理CAFs后,收集CM与MCF-7共培养,分3组进行实验,空白组即MCF-7单独培养组(CON);对照组即MCF-7与CAFs-CM共培养组(CAFs-CM);实验组即MCF-7与3MA-CAFs-CM共培养组(3MA-CAFs-CM).蛋白质印迹法检测各组MCF-7细胞EMT上皮标志分子E-cadherin蛋白和间质标志分子N-cadherin和Vimentin蛋白表达情况.结果 通过酶消化法原代培养可获取α-SMA(+)、Vimentin(+)E-cadherin(-)具有CAFs典型特征的肌成纤维细胞;Transwell侵袭、迁移实验证实CAFs可促进MCF-7细胞侵袭、迁移;蛋白质印迹法检测显示,CAFs组MCF-7 E-cadherin蛋白表达量为0.432±0.012,比NBFs组的0.585±0.02及空白组的0.659±0.016表达水平低,F=120.098,P<0.05.而CAFs组间质蛋白标志物Vimentin蛋白表达量为0.309±0.065,比NBFs组的0.103±0.011及空白组的0.062±0.009表达低,F=42.395,P均<0.05.CAFs组N-cadherin蛋白表达量为1.439±0.07比BNFs组的1.3347±0.028及空白组的1.176±0.021表达低,F=22.578,P<0.05,提示CAFs促进MCF-7发生EMT;CAFs细胞的Beclin1蛋白表达量为2.950±1.261,高于NBFs的0.862±0.727,t=-3.21,P<0.05;CAFs细胞的LC3BⅡ/LC3BⅠ灰度值比值为2.937±0.194,高于NBFs的2.314±0.224,t=-3.638,P<0.05;而CAFs p62蛋白表达量为0.342±0.093,低于NBFs的0.750±0.021,t=7.432,P<0.05,提示CAFs自噬水平高于NBFs.予以自噬抑制剂3MA处理CAFs后,处理组CAFs细胞的Beclin1蛋白表达量为0.211±0.008,低于未处理组的0.266±0.009,t=8.094,P<0.05;处理组CAFs细胞的LC3BⅡ/LC3BⅠ灰度值比值为0.496±0.004,低于未处理组的0.618±0.022,t=9.312,P<0.05;而处理组的p62蛋白表达量为0.307±0.043,高于未处理组的0.143±0.008,t=-6.471,P<0.05,说明3MA可以抑制CAFs自噬水平.自噬调控后共培养,各组E-cadherin蛋白表达有统计学意义,F=44.157,P<0.05;与对照组MCF-7细胞E-cadherin蛋白表达量1.209±0.010相比,CAFs-CM组的1.062±0.027表达下调,而3MA-CAFs-CM组MCF-7细胞E-cadherin蛋白表达量为1.104±0.019,较CAFs-CM组表达上调,均P<0.05;3组MCF-7细胞Vimentin和N-cadherin表达差异有统计学意义,P<0.05.结论 CAFs能够促进MCF-7发生EMT并增强其侵袭转移能力,而抑制CAFs自噬后,其诱导的MCF-7发生EMT进程受到抑制.     

Ovarian cancer-associated fibroblasts contribute to epithelial ovarian carcinoma metastasis by promoting angiogenesis, lymphangiogenesis and tumor cell invasion

Cancer-associated fibroblasts (CAFs) are thought to play an essential role in cancer initiation and development. However, little research has been done to evaluate the role of CAFs in epithelial ovarian cancer (EOC) development. To address this issue, ninety-one specimens were immunostained with α-smooth muscle actin (α-SMA) and fibroblast activation protein (FAP) antibodies to quantify CAFs, and antibodies D2-40 and CD34 to evaluate the lymphatic vessel density (LVD) and microvessel density (MVD) of the lesions. We found there were no α-SMA or FAP positive fibroblasts in normal ovary tissues. More CAFs were found in EOC than in borderline tumors and benign tumors (P<0.01). Abundant CAFs in EOC were associated with advanced-stage disease (P=0.002), the occurrence of lymph node metastases (P=0.02) and omentum metastases (P<0.0001), and increased LVD (P=0.002) and MVD (P=0.0004). CAFs isolated from EOC tissues induced more cancer cells to invade (P=0.003) and migrate (P=0.005) compared with normal fibroblasts (NFs) isolated from normal ovary tissues in vitro. Our data indicate that CAFs play a vital role in ovarian cancer progression and metastasis. Targeting CAFs as a therapeutic strategy against ovarian cancer is an intriguing concept that needs further study.     

上皮-间充质转化相关蛋白在食管癌中的表达及其临床意义

目的探讨上皮-间充质转化相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞角蛋白(Cytokeratin)及波形蛋白(Vimentin)在食管癌组织中的表达水平及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法及组织芯片技术,分别检测105例食管癌组织和11例食管正常组织中E-cadherin、Cytokeratin及Vimentin的蛋白表达水平,并分析其与患者临床参数的相关性及相互之间的差异。结果根据免疫组织化学染色评分进行分组,105例食管癌组织中,E-cadherin高表达63例,低表达42例;Cytokeratin高表达51例,低表达54例;Vimentin高表达35例,低表达70例。E-cadherin在正常组织(H-score:172.7±40.7)中的表达水平显著高于肿瘤组织(H-score:31.9±33.1)(P<0.0001);Cytokeratin在正常组织(H-score:272.7±12.0)及肿瘤组织(H-score:250.1±71.1)中的表达水平差异无统计学意义(P=0.4481)。在105例食管癌组织中,肿瘤≥3.5 cm组中的Cytokeratin表达水平显著低于肿瘤<3.5cm组(P=0.0137);Vimentin在正常组织[阳性细胞百分比(3.5±1.4)%]及肿瘤组织[阳性细胞百分比(10.2±22.7)%]的表达水平差异无统计学意义(P=0.1021)。E-cadherin高表达组中Vimentin的表达水平显著低于E-cadherin低表达组(χ2=4.464,P=0.0346)。结论上皮-间充质转化相关蛋白在食管癌发生与发展过程中表达水平的变化表明食管癌组织中存在上皮-间充质转化现象,对其进行深入研究将有助于阐明食管癌浸润及转移的分子机制。     

The relationship between Bmi-1 and the epithelial–mesenchymal transition in lung squamous cell carcinoma

This study aimed to investigate the expression of Bmi-1 in lung squamous cell carcinoma tissues and the relationship between Bmi-1 and the epithelial-mesenchymal transition. RT-PCR and western blot analysis were performed to detect the expression of Bmi-1, E-cadherin, and Vimentin in 56 cases of lung squamous cell carcinoma tissues and adjacent normal tissues. The positive rates of Bmi-1, E-cadherin, and Vimentin mRNA expression in lung squamous cell carcinoma tissues were 73.2, 42.9, and 58.9%, respectively; compared to the expression of these genes in adjacent normal tissues (14.3, 75.0, and 28.6%), the differences were significant (P < 0.05). The expression of Bmi-1 in lung squamous cell carcinoma tissues showed a negative correlation with that of E-cadherin (r = -0.372, P = 0.005) and a positive correlation with that of Vimentin (r = 0.315, P = 0.02). The expression of Bmi-1 and Vimentin mRNA and protein in lung squamous cell carcinoma tissues was significantly higher than that in adjacent normal tissues (P < 0.05), and the expression of Bmi-1 and Vimentin in patients with lymph node and distal metastasis was significantly higher than that in patients without lymph node and distal metastasis (P < 0.05). The expression of E-cadherin mRNA and protein in lung squamous cell carcinoma tissues was significantly lower than that in adjacent normal tissues (P < 0.05), and the expression in patients with lymph node and distal metastasis was significantly lower than that in patients without lymph node and distal metastasis (P < 0.05). The expression of Bmi-1, E-cadherin, and Vimentin was not associated with the patient's sex, age, tumor size or degree of tumor differentiation (P > 0.05). The increase in Bmi-1 expression was accompanied by the down-regulation of E-cadherin expression and up-regulation of Vimentin expression. Bmi-1 may be associated with the epithelial-mesenchymal transition in lung squamous cell carcinoma and the occurrence, invasion, and metastasis of lung squamous cell carcinoma.     

miR-194-5p调控LMNB1抑制肺腺癌细胞的生长转移

目的:探究miR-194-5p调控LMNB1对肺腺癌细胞生长转移的作用。方法:实时荧光定量PCR（qRT-PCR）实验检测肺腺癌组织和癌旁组织中miR-194-5p、LMNB1表达水平。体外培养肺腺癌细胞A549,分为对照组、miR-194-5p mimics阴性对照组、miR-194-5p mimics组。转染处理后,CCK-8实验检测各组A549细胞增殖情况,比较各组细胞活力;流式细胞实验检测各组A549细胞凋亡率;细胞划痕及Transwell小室侵袭实验分别检测各组A549细胞迁移、侵袭力,比较各组细胞迁移、侵袭数;免疫印迹实验检测各组A549细胞凋亡蛋白caspase-3、Bax和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白E-cadherin、Vimentin表达;qRT-PCR实验及免疫印迹实验分别检测各组A549细胞miR-194-5p、LMNB1 mRNA表达及LMNB1蛋白表达。结果:相比癌旁组织,肺腺癌组织中miR-194-5p表达水平明显降低（P＜0.05）,LMNB1表达水平明显升高（P＜0.05）。相比对照组,miR-194-5p mimics组A549细胞活力、细胞迁移数、细胞侵袭数、LMNB1 mRNA表达水平、Vimentin和LMNB1蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,细胞凋亡率、miR-194-5p表达、caspase-3、Bax和E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）。miR-194-5p mimics阴性对照组A549细胞上述各指标与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:miR-194-5p可下调LMNB1表达,抑制肺腺癌细胞增殖,促进其凋亡,并降低其迁移及侵袭能力。     

Expression of Connexin 43 and E-cadherin Protein and mRNAin Non-small Cell Lung Cancers in Chinese Patients

Aim: Connexin 43 (Cx43) and E-cadherin are important biomarkers related with cancer. Their expression atprotein and mRNA levels was here investigated in 50 primary lung carcinoma tissues and 20 samples of adjacentnormal tissue of Chinese patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods: Protein and mRNAexpression were evaluated by ABC immunohistochemistry and RT-PCR. Results: (1) The positive expressionrates of Cx43 and E-cadherin protein were higher in the adjacent normal tissues than those in the primary lungcarcinoma tissues; (2) the positive expression rates of Cx43 and E-cadherin protein decreased with NSCLCprogression; (3) the expression of E-cadherin protein was not related with the pathological type of NSCLC; and(4) the relative quantity of the Cx43 or E-cadherin mRNA expression was correlated with the the histologicaltype, clinical stage, cancer cell differentiation and the lymph node metastasis. Conclusion: The data suggestedthat the Cx43 and E-cadherin are reduced with NSCLC progression, and might be important biomarkers forjudging the metastasis and prognosis.     

THBS2在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化的影响

目的:研究血小板反应蛋白2（thrombospondin 2,THBS2）在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞H1299和A549迁移能力、侵袭能力、上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的影响,并探究分子机制。方法:运用TIMER和GEPIA数据库分析THBS2 mRNA在泛肿瘤和肺腺癌组织中的表达,利用UALCAN数据库分析THBS2 mRNA在I-IV期肺腺癌组织中的表达差异,通过HPA数据库检测THBS2蛋白在肺腺癌组织中的表达情况。通过免疫印迹实验（Western blot）检测THBS2在人正常支气管上皮细胞（BEAS-2B）和肺腺癌细胞（H1299、A549）中的表达情况。应用质粒转染技术在肺腺癌细胞H1299和A549中分别过表达和敲低THBS2。细胞划痕实验和侵袭实验（Transwell）检测细胞迁移和侵袭能力。Western blot验证THBS2过表达和敲低效率,同时检测EMT相关蛋白和MMP2的表达水平。结果:TIMER数据库与GEPIA数据库检索结果显示THBS2 mRNA在肺腺癌组织中高表达（P＜0.001）。UALCAN数据库分析证明,与正常肺组织相比,THBS2 mRNA在I-IV期肺腺癌组织中均显著表达（P＜0.001）。HPA数据库结果显示,THBS2蛋白在肺腺癌组织中呈现中高等强度表达。细胞划痕实验、Transwell实验和Western blot结果表明,THBS2在人正常支气管上皮细胞和肺腺癌细胞中的表达有显著差异（P＜0.01）;过表达THBS2可增加肺腺癌细胞H1299和A549迁移与侵袭能力（P＜0.01）,EMT相关蛋白E-cadherin表达水平减少,而N-cadherin和Vimentin表达水平增加（P＜0.01）;相反的,敲低THBS2可抑制肺腺癌细胞H1299和A549迁移与侵袭能力（P＜0.01）,EMT相关蛋白E-cadherin表达水平增加,而N-cadherin和Vimentin表达水平减少（P＜0.01）。结论:THBS2在肺腺癌组织中高表达;THBS2在肺腺癌细胞（H1299、A549）中的表达均显著高于人正常支气管上皮细胞（BEAS-2B）;THBS2在肺腺癌细胞H1299和A549中的过表达和敲低影响迁移、侵袭和EMT的过程,可作为肺腺癌治疗的新型潜在靶点。     

间隙连接蛋白43和E-钙黏素在肺癌组织中的表达及临床意义

  目的 探讨间隙连接蛋白（Cx43）和上皮细胞钙黏素（E-钙黏素）在非小细胞肺癌中的表达特征及其临床意义。方法 应用免疫组化ABC法检测50例原发性肺癌组织中Cx43和E-钙黏素的表达情况，分析其表达与肺癌临床病理的关系。结果 Cx43和E-钙黏素在非小细胞肺癌中的阳性表达率分别为54 %和46 %，20例癌旁组织中均可见E-钙黏素和Cx43阳性表达。随着肿瘤进展，Cx43和E-cadherin表达逐渐降低，在Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌中阳性表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ期；中、高分化的肺癌阳性表达率明显高于低分化的肺癌；肺癌伴淋巴结转移者的E-钙黏素表达水平低于无淋巴结转移者；Cx43表达与肺癌有无淋巴结转移无明显相关性。Cx43在肺腺癌组织中的阳性表达率明显高于鳞癌和大细胞未分化癌（P＜0.05）。E-钙黏素的表达与非小细胞肺癌的组织类型无明显相关性。