消癥抑瘤方对人类顺铂耐药卵巢癌细胞凋亡的影响

 目的　检测中药消癥抑瘤方对顺铂（DDP）耐药卵巢癌OVCAR／DDP细胞多药耐药的逆转活性,并探讨其相关作用机制。方法　OVCAR／DDP细胞接种于40只裸鼠腋下,建立移植瘤模型,按随机数字表分为4组,依据不同的药物组合分为0.9 %氯化钠溶液对照组、DDP单独用药组、低剂量消癥抑瘤方+DDP组、高剂量消癥抑瘤方+DDP组。1个月后处死裸鼠,计算各组抑瘤率,末端转移酶介导脱氧尿苷三磷酸（TUNEL）法检测OVCAR／DDP细胞的凋亡率,RT-PCR检测移植瘤组织中Survivin mRNA的表达。结果　0.9 %氯化钠溶液对照组比较,DDP单独用药组、低剂量消癥抑瘤方+DDP组、高剂量消癥抑瘤方+DDP组对卵巢癌OVCAR／DDP细胞裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为（5.56±1.14）%、（18.42±7.73）%、（31.59±12.58）%,各组间差异有统计学意义（F＝8.64,P＜0.01）。0.9 %氯化钠溶液对照组、DDP单独用药组、低剂量消癥抑瘤方+DDP组、高剂量消癥抑瘤方+顺铂组OVCAR／DDP细胞移植瘤组织细胞凋亡率分别为（2.35±1.04）%、（4.56±1.61）%、（12.42±3.68）%、（21.59±5.17）%,0.9 %氯化钠溶液对照组与DDP单独用药组比较差异无统计学意义（t＝0.84,P＞0.05）,2个消癥抑瘤方组与DDP单独用药组比较差异均有统计学意义（t＝5.89,P＝0.004;t＝9.83,P＝0.001）。2个消癥抑瘤方组以剂量依赖性下调裸鼠移植瘤OVCAR／DDP细胞Survivin mRNA的表达。结论　消癥抑瘤方可以增加DDP对卵巢癌顺铂耐药OVCAR／DDP细胞的抗肿瘤活性,下调Survivin的表达可能是其主要的作用机制。     

膈下逐瘀汤逆转裸鼠移植瘤MDR-1表达的实验

目的 探讨膈下逐瘀汤对HCT-8/5-Fu裸鼠移植瘤多药耐药基因MDR-1表达的影响。方法 MTT法确认人结肠腺癌细胞HCT-8/5-Fu的耐药性及对其他化疗药VCR、VP-16、DDP的交叉耐药性后,将耐药细胞HCT-8/5-Fu接种于BABL/c无胸腺裸鼠右腋下,建立耐药性稳定的裸鼠移植瘤模型。移植瘤裸鼠模型随机分为四组：空白对照组(对照组)、5-Fu组、膈下逐瘀汤组(DSED组)、膈下逐瘀汤+5-Fu组(DSED+5-Fu组)。其中对照组予0.9%氯化钠溶液灌胃给药,其余组予腹腔注射5-Fu和(或)中药灌胃。连续给药14天后颈椎脱臼处死裸鼠。观察各组裸鼠移植瘤生长情况;RT-PCR法检测各瘤组织MDR-1 mRNA表达。结果 膈下逐瘀汤+5-Fu组、膈下逐瘀汤组、5-Fu组对裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为54.9%、32.4%和7.0%（P<0.01）。RT-PCR结果显示膈下逐瘀汤+5-Fu组及膈下逐瘀汤组MDR-1 mRNA的表达量与对照组相比明显下降（P<0.01）,5-Fu组与对照组相比MDR-1 mRNA表达量略有升高,但差异无统计学意义。结论 膈下逐瘀汤对大肠癌多药耐药裸鼠移植瘤生长具有抑制作用,其机制可能与膈下逐瘀汤通过逆转耐药移植瘤多药耐药基因表达,增强肿瘤细胞对药物的敏感度。     

膀胱肿瘤T24／ADM多药耐药细胞株的建立及耐药机制的研究

目的建立人类膀胱肿瘤多药耐药（MDR）细胞株并研究其耐药机制。方法以人类膀胱肿瘤细胞株T24为研究对象，用多柔比星（ADM）浓度梯度递增诱导法，建立人类膀胱肿瘤细胞多药耐药模型（简称T24／ADM）。用MTT法检测肿瘤细胞的MDR特性；RT—PCR检测膀胱肿瘤耐药细胞株MDR基因的表达情况。流式细胞术检测耐药细胞P-糖蛋白（P—gP）的表达。结果T24／ADM对多种化疗药物产生耐药，对ADM的耐药性提高了16-3倍。RT—PCR检测发现T24／ADM中MDR基因和P—gp的表达明显增强。结论T24／ADM细胞具有MDR特性，其耐药性与MDR基因和P—gP的过表达有关。     

敲减基质金属蛋白酶-10抑制人膀胱癌T24细胞系裸鼠皮下移植瘤生长

目的：探讨敲减MMP-10对人膀胱癌T24细胞系裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法：设计并合成针对人MMP-10的siRNA及阴性对照siRNA,分别注射至裸鼠皮下膀胱癌T24细胞系移植瘤,每周两次监测并比较各组裸鼠体重、瘤体大小,于接种后第5周处死裸鼠,取出皮下移植瘤,并比较各组瘤体重量的差异,并通过免疫组织化学染色检测MMP-10表达水平。结果：皮下注射膀胱癌T24细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤率达100%。瘤体内注射MMP-10 siRNA可以显著抑制膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的生长（P〈0.05）;观察结束时MMP-10 siRNA组所剥离的瘤体重量明显低于对照组（P〈0.05）。各组裸鼠的平均体重并没有明显改变（P〉0.05）,提示瘤体内注射MMP-10 siRNA对裸鼠的一般情况影响不大,并没有明显的毒性或副作用。免疫组织化学染色结果示MMP-10 siRNA组MMP-10的染色强度及阳性细胞数均明显低于普通成瘤组和阴性对照组,提示瘤体内注射siRNA可以在体内有效敲低MMP-10的表达。结论：MMP-10在人膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的生长过程中发挥重要作用;瘤体内注射MMP-10 siRNA可以有效且安全地抑制膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对体外及裸鼠体内前列腺癌细胞PC3生物学特性影响的研究

 目的　探讨血管内皮生长因子（VEGF）反义寡核苷酸对前列腺癌细胞PC3在体外和裸鼠体内生长特性的影响,以及局部注射反义寡核苷酸治疗裸鼠皮下移植肿瘤的疗效。方法　采用Oligofectamine携带VEGF反义寡核苷酸转染前列腺癌细胞PC3,实验分为反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组和对照组。软琼脂糖凝胶实验和细胞侵袭实验检测转染反义寡核苷酸的肿瘤细胞成瘤性和侵袭性。裸鼠成瘤实验观察VEGF反义寡核苷酸对体内PC3细胞增殖的影响。建立裸鼠前列腺癌种植瘤模型,局部注射VEGF反义核酸治疗,测定体内抑瘤率。结果　对照组、正义寡核苷酸组和反义寡核苷酸组的PC3细胞每组阳性克隆数分别为53.67±5.86、52.33±6.43和26±4.58（F＝13.73,P＜0.01）,反义组体外形成克隆数显著减少;三组细胞侵袭至下室的细胞数分别为45.60±5.53、42.35±6.21和18.37±3.52（F＝14.18,P＜0.01）;转染VEGF反义核酸的细胞移植瘤生长较慢,接种28 d后三组的肿瘤体积分别为（1330.32±81.38）、（1267.64±120.26）和（641.83±58.34）mm3（F＝17.26,P＜0.01）;局部注射治疗4周后,三组肿瘤质量分别为（1.25±0.08）g、（1.17±0.06）g和（0.41±0.05）g,与对照组比较,正义组和反义组肿瘤抑制率分别为6.4 %和67.2 %,差异有统计学意义（χ2＝17.72,P＜0.005）。结论　VEGF反义寡核苷酸可以抑制前列腺癌细胞PC3 VEGF的表达,进而促进细胞凋亡,降低其成瘤性,抑制侵袭能力。转染VEGF反义寡核苷酸的前列腺癌细胞PC3移植瘤在裸鼠体内生长受抑制,局部注射反义核酸可显著抑制移植瘤的生长。     

染料木黄酮抑制多柔比星诱导的多药耐药膀胱肿瘤T24细胞增殖的实验研究

 【摘要】　目的　建立膀胱肿瘤T24细胞多药耐药（MDR）模型并鉴定其耐药特性,观察染料木黄酮对多柔比星（ADM）诱导的多药耐药T24（T24／ADM）细胞增殖的影响。方法　体外培养膀胱肿瘤T24细胞,采用ADM浓度梯度诱导,培养出具有稳定MDR表型的T24／ADM耐药细胞株,光镜观察新建细胞株的形态学特点,MTT法检测多种药物对耐药细胞株的增殖活性以及染料木黄酮对T24／ADM细胞增殖的有效作用浓度。结果　用ADM诱导6个月后的T24／ADM细胞形态无明显改变;T24／ADM细胞对多种化疗药物的耐受能力均明显提高,与亲本细胞株T24相比,耐药细胞株T24／ADM对ADM的耐药指数达15.79,对5-氟尿嘧啶、顺铂、环磷酰胺的耐药指数依次为4.68、3.81、5.53。用染料木黄酮作用于T24／ADM细胞后,对T24／ADM细胞的半数抑制浓度为40 μg／ml,质量浓度为20～100 μg／ml的染料木黄酮具有抑制T24／ADM细胞增殖的作用。结论　建立的T24／ADM细胞具有多药耐药性,达到实验要求。质量浓度为20～100 μg／ml的染料木黄酮可部分抑制人类膀胱肿瘤T24／ADM细胞的增殖。     

人肝癌移植瘤多药耐药模型的建立及耐药机制的探讨

背景与目的肿瘤多药耐药是肿瘤化疗的主要障碍和研究热点,本研究拟建立人肝癌裸小鼠皮下及肝原位移植多药耐药模型,探讨其生物学特性和耐药机制的异同,为研究体内逆转肿瘤多药耐药提供理想的动物模型。方法人肝癌细胞系HepG2裸鼠肝原位、皮下移植后,用阿霉素腹腔注射诱导耐药。MTT法检测耐药细胞对抗肿瘤药的敏感性,流式细胞仪检测癌细胞膜蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)的表达和细胞对罗丹明(R123)的外排作用,逆转录PCR检测耐药细胞中三种膜蛋白mRNA的表达。结果肝原位和皮下移植瘤耐药细胞形态及生物学行为符合人肝癌特征;对多种药物产生较明显的耐药性,其中对阿霉素的耐药倍数分别为26.4和24.6;肝皮下移植和原位移植组耐药细胞膜蛋白P-gp、MRP和LRP的阳性率均增高,分别为(77.3±2.1)%和(78.1±1.9)%,(72.1±4.3)%和(72.7±5.1)%,(31.1±1.0)%和(32.2±1.4)%。多药耐药基因的阳性率也明显增高,细胞对R123的外排作用增强;肝原位移植瘤组与皮下移植瘤组比较,多药耐药性差异没有统计学意义(P>0.05)。结论所建立的裸鼠肝原位及皮下移植瘤多药耐药模型符合人肿瘤多药耐药特征,为研究体内逆转多药耐药提供了理想的动物模型。     

125I粒子植入联合放射治疗对A549裸鼠移植瘤生长及HIF-1表达的影响

 【摘要】　目的　研究125I粒子植入联合放射治疗对A549裸鼠移植瘤生长及乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的影响。方法　应用裸鼠建立肺腺癌A549移植瘤模型,待平均瘤体积达到（300±50）mm3时40只裸鼠随机分成4组（每组10只）,对照组 ：不做任何处理;单纯放射治疗组 ：第1天予单次外照射,6 MV-X线,10 Gy;125I粒子植入组 ：肿瘤中心植入1枚活度27.75 MBq的125I粒子;放疗加125I粒子植入组（联合治疗组）：第1天在肿瘤中心植入1枚活度27.75 MBq的125I粒子的同时予单次外照射,6MV-X线,10 Gy。治疗后共观察15 d,绘制肿瘤生长曲线,测量各组肿瘤体积并计算抑瘤率,分别用免疫组织化学及蛋白免疫印迹方法测定HIF-1α的表达。结果　治疗第8天起,瘤体积联合治疗组（209±21）mm3与对照组（322±30）mm3相比差异有统计学意义（t＝46.4,P＝0.000）。第15天后,单纯放射治疗组、125I粒子植入组、联合治疗组抑瘤率依次为45.9 %、44.4 %、69.4 %,联合治疗组与单纯放射治疗组比较差异有统计学意义（t＝52.03,P＝0.000）,联合治疗组与125I粒子植入组比较差异有统计学意义（t＝53.98,P＝0.000）,单纯放射治疗组和125I粒子植入组相比,差异无统计学意义（t＝0.591,P＝0.596）。联合治疗组与其他各组相比HIF-1α改变差异均无统计学意义（P＝0.342）。结论　放射治疗联合125I粒子植入能显著抑制转染人类肺腺癌A549裸鼠移植肿瘤的生长,但未抑制肿瘤细胞HIF-1α的表达。     

敲减基质金属蛋白酶-10抑制人膀胱癌T24细胞系裸鼠皮下移植瘤生长

目的:探讨敲减MMP-10对人膀胱癌T24细胞系裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:设计并合成针对人MMP-10的siRNA及阴性对照siRNA,分别注射至裸鼠皮下膀胱癌T24细胞系移植瘤,每周两次监测并比较各组裸鼠体重、瘤体大小,于接种后第5周处死裸鼠,取出皮下移植瘤,并比较各组瘤体重量的差异,并通过免疫组织化学染色检测MMP-10表达水平。结果:皮下注射膀胱癌T24细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤率达100%。瘤体内注射MMP-10 siRNA可以显著抑制膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0.05);观察结束时MMP-10 siRNA组所剥离的瘤体重量明显低于对照组(P<0.05)。各组裸鼠的平均体重并没有明显改变(P>0.05),提示瘤体内注射MMP-10 siRNA对裸鼠的一般情况影响不大,并没有明显的毒性或副作用。免疫组织化学染色结果示MMP-10 siRNA组MMP-10的染色强度及阳性细胞数均明显低于普通成瘤组和阴性对照组,提示瘤体内注射siRNA可以在体内有效敲低MMP-10的表达。结论:MMP-10在人膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的生长过程中发挥重要作用;瘤体内注射MMP-10 siRNA可以有效且安全地抑制膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。     

生酮饮食对人肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的： 建立人肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型，观察生酮饮食对裸鼠皮下移植瘤生长的影响并对其作用机制进行研究。方法： 10只雌性BALB/c裸鼠右下肢皮下注射人肺癌A549细胞，建立肺癌细胞裸鼠移植瘤模型后，随机分为标准饮食组（SD组）和生酮饮食组（KD组），分组当天测量裸鼠体质量、移植瘤体积、血糖及血酮浓度，以后每5 d测量1次。接种肿瘤细胞后第30天，摘眼球取血处死裸鼠，取血后进行血脂四项检测。剥离移植瘤组织，分别采用Western blot及免疫组织化学方法检测裸鼠移植瘤组织中4-HNE蛋白的表达水平。结果： 接种肿瘤细胞后第15天起，KD组裸鼠血酮浓度较SD组升高，血糖浓度较SD组降低，差异均有统计学意义（P < 0.05）。接种肿瘤细胞后第20天起，KD组裸鼠体质量及移植瘤体积小于SD组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。接种肿瘤细胞后第30天，KD组裸鼠的总胆固醇（CHOL）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）浓度高于SD组，甘油三酯（TG）浓度低于SD组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。Western blot法分析结果显示KD组裸鼠移植瘤组织中4-HNE蛋白相对表达水平（1.45±0.10）高于SD组（1.00±0.03），差异有统计学意义（P < 0.05）。免疫组化法检测结果显示KD组裸鼠移植瘤组织中4-HNE表达水平（4.40±0.89）高于SD组（2.40±0.89），差异有统计学意义（P < 0.05）。结论： 生酮饮食可以抑制人肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤的生长，其作用机制可能与肿瘤细胞氧化应激的增强有关。     

逆转录病毒转染法建立耐药性人膀胱癌细胞系

目的 建立高效、稳定的人膀胱癌多药耐药性细胞模型。方法 应用逆转录病毒转染法建立人膀胱癌耐药性细胞模型;ＭＴＴ法检测细胞系在不同化疗药物作用下的生存率。免疫组化检测肿瘤的Ｐ－ＧＰ表达,原位杂交检测肿瘤细胞ｍｄｒ１ ｍＲＮＡ的表达量,ＰＣＲ检测ｍｄｒ１基因转移至细胞基因组片段。结果 转基因细胞系对阿霉素、秋水仙素的耐药性分别提高８倍和２１倍,免疫组化示转基因细胞系Ｐ－ＧＰ表达量增强,原位杂交结果示肿     

p53和c—myc异常表达与膀胱癌多药耐药性

为探讨ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ基因异常表达与膀胱癌多药耐药性（ＭＤＲ）的关系，应用ＡＢＣ免疫组织化学方法检测６７例膀胱癌癌细胞中ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ的表达产物及多药耐药基因（ｍｄｒ－１）产物Ｐ－ｇｐ。结果显示ｐ５３突变蛋白蓄积的膀胱癌中Ｐ－ｇｐ阳性表达率９２．３％；ｐ５３阴性者Ｐ－ｇｐ阳性率为３６．６％。Ｐ－ｇｐ表达与ｐ５３突变蛋白蓄积呈显著正相关（ｒ＝０．６４，Ｐ＜０．０５）；而ｃ－ｍｙｃ和ｍｄｒ－１的表达无明显相关。提示：ｐ５３异常表达可增加ｍｄｒ－１基因的表达，使膀胱癌细胞获得ＭＤＲ表型     

Intrinsic drug resistance in human kidney cancer is associated with expression of a human multidrug-resistance gene

The cloning of the cDNA for the mdr1 gene, whose expression is associated with the development of multidrug-resistance in cultured cells, has made it possible to explore the mechanism of multidrug resistance in human tumors. We have found that normal human kidney, six of eight adenocarcinomas of the kidney, and four cell lines derived from kidney adenocarcinomas express high levels of mdr1 mRNA. Two criteria suggest that primary multidrug resistance in human adenocarcinomas of the kidney results, at least in part, from expression of the mdr1 gene: (1) mdr1 mRNA levels are elevated in four unselected kidney adenocarcinoma cell lines that show a multidrug-resistant phenotype; and (2) multidrug resistance in these kidney cancer cell lines is reversed by verapamil and quinidine, agents known to reverse mdr1-associated drug resistance in cell lines selected for multidrug resistance in vitro. These results suggest that appropriate pharmacological intervention to reverse multidrug resistance might make adenocarcinomas of the kidney more sensitive to chemotherapy with agents such as Adriamycin (Adria Laboratories, Columbus, OH) and the vinca alkaloids.     

膀胱癌组织GPR48表达及其临床意义

目的 G蛋白偶联受体48(G protein coupled receptor 48,GPR48)在人类细胞信号传导过程中起重要作用,并且与人类肿瘤的发生相关.本研究旨在探讨膀胱癌组织GPR48的表达水平,分析其与膀胱癌恶性程度的相关性.方法 选取2014 01-01 2016 05 20郑州大学附属郑州中心医院泌尿外科住院行手术切除治疗的膀胱癌组织标本60例和癌旁组织(距肿瘤组织＞2 cm)标本8例,BIU-87、5637和T24 3种膀胱癌细胞系作为研究对象,通过RT-PCR和蛋白质印迹法检测GPR48的表达量,收集60例患者性别、年龄、病理分级等临床病理资料,并检测其与GPR48表达的相关性.结果 GPR48在膀胱癌旁组织及癌旁组织中均有表达,膀胱癌组织和癌旁组织GPR48 mRNA表达量分别为0.080±0.048和0.041±0.032,差异有统计学意义,t=-3.047,P=0.005.膀胱癌组织和癌旁组织GPR48蛋白表达量分别为0.533±0.307和0.144±0.086,差异有统计学意义,t=-3.541,P=0.001.分析患者临床病理资料发现,GPR48的表达与患者性别无关,P＞0.05;而与患者年龄、病理分级和临床分期呈正相关,均P＜0.01.BIU-87、5637和T24细胞系中GPR48 mRNA的表达量分别为0.021±0.002、0.054±0.006和0.145±0.003,GPR48蛋白的表达量分别为0.718±0.076、0.905±0.121和1.205±0.08.T24细胞系GPR48 mRNA及蛋白表达量显著高于5637细胞系,均P＜0.05;5637细胞系GPR48 mRNA及蛋白表达量显著高于BIU-87细胞系,均P＜0.05.结论 GPR48表达与膀胱癌的恶性程度密切相关,有望成为一种潜在的生物标志物来预测膀胱癌的预后.     

Expression of multidrug resistance-associated protein (MRP), MDR1 and DNA topoisomerase II in human multidrug-resistant bladder cancer cell lines.

The acquisition of the multidrug resistance phenotype in human tumours is associated with an overexpression of the 170 kDa P-glycoprotein encoded by the multidrug resistance 1 (MDR1) gene, and also with a 190 kDa membrane ATP-binding protein encoded by a multidrug resistance-associated protein (MRP) gene. Human bladder cancer is a highly malignant neoplasm which is refractory to anti-cancer chemotherapy. In order to understand the mechanism underlying multidrug resistance in bladder cancer, we established three doxorubicin-resistant cell lines, T24/ADM-1, T24/ADM-2 and KK47/ADM, and one vincristine-resistant cell line, T24/VCR, from human bladder cancer T24 and KK47 cells respectively. Both T24/ADM-1 and T24/ADM-2 cells which had elevated MRP mRNA levels showed both a cross-resistance to etoposide and a decreased intracellular accumulation of etoposide. T24/VCR cells which had elevated levels of MDR1 mRNA and P-glycoprotein but not of MRP mRNA, showed cross-resistance to doxorubicin. On the other hand, KK47/ADM cells, which had elevated levels of both MRP and MDR1 mRNA and a decreased level of topoisomerase II mRNA, were found to be cross-resistant to etoposide, vincristine and a camptothecin derivative, CPT-11. Our present study demonstrates a concomitant induction of increased levels of MRP mRNA, decreased levels of topoisomerase II mRNA and decreased drug accumulation during development of multidrug resistance in human bladder cancer cells. The enhanced expression of the MRP gene is herein discussed in a possible correlation with the decreased expression of the topoisomerase II gene.     

Study of multidrug resistance (mdr1) gene in non-small-cell lung cancer.

Non-small-cell lung cancer (NSCLC) is one of the tumors that shows intrinsic drug resistance to various chemotherapeutic agents. We investigated a possible role of the multidrug resistance (mdr1) gene amplification using a DNA slot blot analysis in 23 untreated non-small-cell lung cancer tissues and 14 corresponding adjacent normal lung tissue samples. In all instances, whether tumors or adjacent normal tissue samples, DNA amplification was not detected except in 1 adenocarcinoma and 2 squamous cell carcinomas that had a low level of amplification of mdr1 gene. In addition, 6 untreated tumors and 7 normal tissue samples were examined for mdr1 RNA expression using RNA slot blot analysis. Only low levels of mdr1 expression were observed in all cases. We conclude that mechanisms other than mdr1 amplification or expression account for the intrisic drug resistance of non-small-cell lung cancers.     

赖氨酸甲基转移酶2D在膀胱癌中的表达水平及对细胞增殖和侵袭的影响

目的:检测赖氨酸甲基转移酶2D（KMT2D）在膀胱癌中的表达水平与临床病理特征的关系及KMT2D对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:免疫组化实验和qRT-PCR实验分别检测膀胱癌组织和癌旁组织中KMT2D蛋白和mRNA表达水平。根据免疫组化评分将患者分为KMT2D低表达组和KMT2D高表达组,比较两组患者的临床病理特征。蛋白免疫印迹实验检测SV-HUC-1、5637、T24和TCCSUP细胞中KMT2D蛋白表达水平。将miR-NC质粒和miR-KMT2D质粒转染至5637、T24和TCCSUP细胞中,蛋白免疫印记实验检测转染效率。MTT实验和Transwell实验检测细胞的增殖和侵袭情况。结果:膀胱癌组织中KMT2D蛋白免疫组化评分低于癌旁组织（t=17.371,P<0.001）。膀胱癌组织中KMT2D mRNA相对表达水平为（0.8±0.2）低于癌旁组织（2.6±0.4）,t=7.606,P=0.002;KMT2D低表达组与高表达组的年龄、肿瘤分化程度、淋巴结转移和浸润深度之间差异有统计学意义（P<0.05）;KMT2D蛋白在膀胱癌细胞5637、T24和TCCSUP中的表达水平分别为（0.38±0.03）、（0.42±0.03）、（0.36±0.05）均低于SV-HUC-1的表达水平（0.92±0.06）,q=21.131、19.584、21.647,均P<0.001;miR-KMT2D质粒转染至5637、T24和TCCSUP细胞后,KMT2D蛋白水平明显增加;细胞培养72 h时,5637-KMT2D组细胞OD值（0.73±0.05）低于5637-NC组（1.34±0.07）（t=8.241,P<0.001）,T24-KMT2D组细胞OD值（0.67±0.06）低于T24-NC组（1.12±0.06）（t=9.524,P<0.001）,TCCSUP-KMT2D组细胞OD值（0.62±0.07）低于TCCSUP-NC组（1.32±0.06）（t=8.941,P<0.001）;5637-KMT2D组细胞发生侵袭细胞数（34.5±4.7）低于5637-NC组（56.0±5.2）（t=3.524,P=0.008）,T24-KMT2D组细胞发生侵袭细胞数（36.4±4.5）低于T24-NC组（68.5±6.7）（t=7.302,P<0.001）,TCCSUP-KMT2D组细胞发生侵袭细胞数（30.1±3.4）低于TCCSUP-NC组（74.2±6.5）（t=8.206,P<0.001）。结论:KMT2D在膀胱癌组织中表达水平降低与患者的年龄、肿瘤分化程度、淋巴结转移和浸润深度有关,增加KMT2D的表达水平后可减弱细胞增殖和侵袭能力,KMT2D有望成为治疗膀胱癌的有效靶点。