石见穿活性部位的体外抗肿瘤作用研究

目的:考察石见穿不同提取部位的体外抗肿瘤活性,从而确定其体外抗肿瘤作用的活性部位。方法:使用95%工业酒精对石见穿饮片进行提取,然后分别用石油醚、乙酸乙酯、氯仿和正丁醇依次对乙醇提取部位进行分段萃取,采用MTT法（四甲基偶氮唑蓝比色试验）测定各个提取部位对体外培养的5株人肿瘤细胞的增殖抑制作用。结果:在体外,氯仿部位和乙酸乙酯部位对于5株人肿瘤细胞株具有较强的增殖抑制作用。结论:氯仿部位、乙酸乙酯部位是石见穿发挥体外抗肿瘤作用的主要活性部位。     

石见穿有效部位对血管内皮细胞生物学行为的影响

目的:探讨石见穿氯仿及乙酸乙酯部位在体外对血管内皮细胞生物学行为的影响。方法:培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)至3-6代,采用MTT实验、Transwell小室迁移实验、体外小管形成实验观察石见穿氯仿及乙酸乙酯部位对HUVECs体外增殖、迁移、小管形成能力的影响。结果:3.125-25μg/ml的石见穿氯仿部位及乙酸乙酯部位作用于HUVEC 48h,增殖抑制率分别为17.36%-53.08%、9.53%-31.36%,而作用于人肺癌细胞A549增殖抑制率分别为7.10%-31.18%、2.24%-21.69%,两者相比有明显差异细胞毒作用(P=0.001)。3.125-25μg/ml的石见穿氯仿及乙酸乙酯部位作用HUVECs 12h后,迁移抑制率分别为5.39%-57.38%、1.92%-37.37%。3.75-25μg/ml石见穿氯仿部位作用24h时HUVEC小管形成数目减少且管腔不完整,相同浓度石见穿乙酸乙酯部位抑制作用较弱。结论:石见穿氯仿部位抑制内皮细胞增殖、迁移和小管形成作用明显优于乙酸乙酯部位,为石见穿发挥抗血管生成的主要作用部位。     

独活醇提物及其单体蛇床子素体外抗肿瘤活性的实验研究

目的：探讨独活醇提物及其单体蛇床子素在体外对人胃癌细胞株MKN-45、BGC-823、人肺腺癌细胞株A549、人乳腺癌细胞株MCF-7及人结肠癌细胞株LOVO生长的影响.方法：将不同浓度中药独活醇提物及其单体蛇床子素作用于人胃癌细胞株MKN-45、BGC-823、人肺腺癌细胞株A549、人乳腺癌细胞株MCF-7及人结肠癌细胞株LOVO,倒置显微镜下观察细胞形态变化,MTT法测定独活醇提物及其单体蛇床子素对5株肿瘤细胞的增殖抑制率.结果：蛇床子素浓度在3.75μg/ml-120 μg/ml之间对MKN-45、BGC-823、A549、MCF-7及LOVO均有明显的抑制作用,且呈剂量-效应关系,IC50值分别为43.299μg/ml、56.790μg/ml、37.444 μg/ml、38.397μg/ml、36.231 μg/ml;相同条件下,独活醇提物对5株肿瘤细胞的抑制作用都较弱.结论：蛇床子素在体外能够抑制MKN-45、BGC-823、A549、MCF-7和LOVO的增殖,且LOVO细胞对蛇床子素最敏感,蛇床子素对5株肿瘤细胞的抑制作用均强于独活醇提物,说明蛇床子素有可能是独活醇提物中抗肿瘤作用的主要成分.     

中药北豆根抗肿瘤活性的体外实验

背景与目的 :探讨中药北豆根(Rhizomamenispermi)提取物的抗肿瘤作用并分离其活性物质。材料与方法 :采用MTT法测定了北豆根提取物对肿瘤细胞增殖反应的影响 ;用三步法初步分离、纯化了北豆根提取物的抗肿瘤有效部位。结果 :北豆根提取物对多种组织来源的肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用 ,量效关系良好 ,并且对原代培养肿瘤组织细胞增殖反应有抑制作用,IC50 多在9μg/ml以下 ,最低可达0.7μg/ml。并找到了其有效部位。结论 :北豆根水提物和北豆根醇提物体外均有很强的抗肿瘤作用 ;醇提物的作用高于水提物 ;PE2是北豆根醇提物抗肿瘤的有效部位 ;PE2不仅对各肿瘤细胞株有广泛的杀伤作用 ,而且对原代培养肿瘤细胞也有杀伤作用 ;北豆根作为抗肿瘤药物有待进一步开发     

北豆根抗肿瘤有效成分的分离、纯化和活性分析

背景与目的：提取、纯化和鉴定北豆根抗肿瘤有效成分,并对纯化的成分作进一步的活性研究。材料与方法：常规方法制备北豆根水提液（RMW）和醇提液（RME）,对RME以3%HCl溶解、有机溶剂萃取和水相浓缩得到纯化提取物1、2、3（PE1、PE2、PE3）。用MTT法测定各提取物的抑瘤活性。根据抑瘤实验结果,通过凝胶和硅胶柱层析将PE2进一步分离得到两个单体化合物PF1和PF2。提取RME后的北豆根药渣用水回流提取,去除蛋白和鞣酸,再经乙醇沉淀和冷冻干燥得到多糖成分（RMP）。有效成分采用薄层层析和改良碘化铋钾显色对其进行鉴定分析。用电喷雾质谱ESI-MS检测单体化合物PF1和PF2的分子量。用紫外分光光度计检测RMP的纯度。结果：RMW和RME对K562、BGC823及TE13三种肿瘤细胞的增殖反应均有明显的抑制作用（P<0.01）,并有良好的量效及时效关系,RMP无此作用。进一步将RME应用三步法纯化得到PE1、PE2、PE3 。PE1和PE2对上述3种细胞的增殖反应均有明显的抑制作用（提高了近10倍）（P<0.01）,PE3无此抑制作用。有效成分分析结果显示,PE2主要含一系列生物碱成分。对PE2进一步分离得到两个化合物PF1和PF2,分子量分别为624和610。PF1和PF2对K562、BGC823及TE13细胞均有显著抑制作用（P<0.01）,PF2的抑制作用更强,PF2可导致上述细胞的形态学改变,表现为细胞体积变小,形态不规则等。PF2对肿瘤组织原代培养细胞增殖反应有较强抑制作用（P<0.01）。结论：北豆根水提物和醇提物在体外均有很强的抗肿瘤作用,醇提物的作用高于水提物。PE2是醇提物抗肿瘤的有效部位,其化学成分是生物碱;PF1和PF2均是醇提物抗肿瘤的有效成分,可能为蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱,PF2对肿瘤组织原代培养细胞也有较强的杀伤作用。北豆根多糖成分对K562等3种肿瘤细胞无抑制作用。     

香加皮提取物抗肿瘤活性的研究

背景与目的： 研究中药香加皮提取物的抗肿瘤活性,探讨其抗肿瘤机制。 材料与方法： 采用噻唑蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyltetrazolium bromide, MTT)法观察香加皮醇提物和水提物对MCF-7、TE-13、QG56、SMMC7721、T24、Hela、K562等肿瘤细胞增殖的抑制作用,应用流式细胞术检测肿瘤细胞的周期变化和对凋亡的影响。 结果： 香加皮醇提物和水提物均能明显抑制多种肿瘤细胞的增殖,呈浓度依赖性;醇提物的抑瘤作用(IC50<10 μg/ml)强于水提物(IC50<40 μg/ml),并且差异具有统计学意义(P<0.05)。香加皮醇提物可将MCF-7细胞阻滞于G0/G1期,并呈时间依赖性地诱导MCF-7细胞发生凋亡。10 μg/ml香加皮醇提物作用MCF-7细胞24 h,与对照组相比,G0/G1期细胞显著增多,作用48 h,凋亡率从对照组的0.70％±0.13％升高到13.54％±2.12％,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。 结论： 香加皮提取物对体外肿瘤细胞的增殖具有显著的抑制作用,醇提物强于水提物,其抗瘤机制可能与阻滞肿瘤细胞周期和诱导凋亡有关。     

新疆阿魏蘑菇提取物体外抗肿瘤实验研究

目的:探讨新疆阿魏蘑菇提取物对体外培养的肿瘤细胞生长的抑制作用.方法:不同剂量阿魏蘑菇的水提物和醇提物(10-1 g/ml、10-2 g/ml、10-3 g/ml、10-4 g/ml、10-5 g/ml、10-6 g/ml)与肿瘤细胞共培养24 h后,采用结晶紫染色及Bradford法测定人肝癌细胞株(Q3)、人胃癌细胞株(MGC-803)、人宫颈癌细胞株(Hela)、小鼠肺腺瘤细胞株(SPC-A-1)的细胞存活量及蛋白质合成.以大鼠正常肝细胞(BRL)为正常对照细胞株.结果:阿魏蘑菇水提物、醇提物10-1 g/ml剂量组对各类型肿瘤细胞的生长及蛋白合成均有明显抑制作用;醇提物不同剂量组对肿瘤细胞生长及蛋白合成可产生不同程度的影响,对正常肝细胞的存活量无影响,但可促进肝细胞的蛋白合成.结论:阿魏蘑菇提取物的抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞生长及蛋白合成有关.     

白头翁醇提物抑制血管生成的体外实验研究

目的 探讨白头翁醇提物对体外血管生成的抑制作用及其可能机制。方法 采用MTT法观察白头翁醇提物对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）和人肠癌LoVo细胞增殖的影响;通过Transwell小室趋化实验、体外小管形成实验观察白头翁醇提物对HUVEC迁移、形成血管能力的影响;采用流式细胞仪检测白头翁醇提物对HUVEC的凋亡率及细胞周期的影响。结果 2～8μg／ml的白头翁醇提物作用48h对HUVEC的增殖抑制率为21.6％～72.0％,对LoVo细胞的增殖抑制率为13.2％～22.9％;体外小管形成实验发现,2～8μg／ml白头翁醇提物作用24h,HUVEC小管形成数目减少,且管腔不完整,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0001）。经2～8μg／ml白头翁醇提物处理12h,HUVEC迁移数明显少于对照组（P＜0001）。2、4、8μg／ml白头翁醇提物作用于HUVEC细胞48h后,其凋亡率分别为952％、1864％和2007％,对照组为6.25％。8μg／ml白头翁醇提物作用于HUVEC细胞24h后,细胞周期停滞在G2／M期。结论 白头翁醇提物在体外能有效抑制血管生成,其机制可能与抑制HUVEC增殖、迁移和小管形成,诱导HUVEC凋亡,抑制HUVEC有丝分裂有关。     

连翘提取物体外抗肿瘤活性的初步研究

目的:观察连翘根、叶和果3个部位各自的醇提物和水提物对食管癌细胞体外增殖和凋亡的影响,探讨连翘根醇提物(ethanol extract of Forsythia suspensa root,FSEER)的抗肿瘤机制。方法:分别制备连翘根、叶和果3个部位的醇提物和水提物,用MTT法检测6种连翘提取物对食管癌细胞TE-1、TE-13、Yes-2、Eca-109的增殖抑制作用;然后用不同浓度FSEER处理食管癌细胞24 h后用倒置相差显微镜和瑞氏-吉姆萨染色观察细胞的形态学变化,再分别用不同浓度FSEER处理TE-13细胞不同时间后,以Annexin V/PI双染法通过流式细胞仪检测TE-13细胞凋亡率的变化,Western blot检测PARP蛋白表达变化。结果:6种连翘提取物对食管癌TE-13细胞均有增殖抑制作用(P0.05),其中FSEER效果最明显。经FSEER处理后,TE-13细胞显示典型的凋亡形态变化,与对照组相比凋亡率明显增高(P0.05),PARP蛋白出现了裂解片段的表达,且呈现一定的剂量和时间依赖性。结论:FSEER体外对人食管癌细胞的增殖有明显的抑制作用,其抗肿瘤机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

In vitro anti-tumor activity of Forsythiasuspensa extract

目的:观察连翘根、叶和果3个部位各自的醇提物和水提物对食管癌细胞体外增殖和凋亡的影响,探讨连翘根醇提物(ethanol extract of Forsythia suspensa root,FSEER)的抗肿瘤机制.方法:分别制备连翘根、叶和果3个部位的醇提物和水提物,用MTF法检测6种连翘提取物对食管癌细胞TE-1、TE-13、Yes-2、Eca-109的增殖抑制作用;然后用不同浓度FSEER处理食管癌细胞24 h后用倒置相差显微镜和瑞氏-吉姆萨染色观察细胞的形态学变化,再分别用不同浓度FSEER处理TE-13细胞不同时间后,以Annexin V/PI双染法通过流式细胞仪检测TE-13细胞凋亡率的变化,Western blot检测PARP蛋白表达变化.结果:6种连翘提取物对食管癌TE-13细胞均有增殖抑制作用(P＜0.05),其中FSEER效果最明显.经FSEER处理后,TE-13细胞显示典型的凋亡形态变化,与对照组相比凋亡率明显增高(P＜0.05),PARP蛋白出现了裂解片段的表达,且呈现一定的剂量和时间依赖性.结论:FSEER体外对人食管癌细胞的增殖有明显的抑制作用,其抗肿瘤机制可能与诱导细胞凋亡有关.