COX-2介导幽门螺杆菌诱导的人胃癌细胞VEGF表达

背景与目的：血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是重要的促血管生成因子,幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H. pylori）感染诱导胃黏膜VEGF过表达是胃癌生长、转移的重要环节,但其表达机制尚不清楚。环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）是一种快速反应蛋白,与胃癌发生发展关系密切。本研究旨在探讨COX-2对H. pylori诱导胃癌细胞VEGF表达的影响,揭示H. pylori感染促进胃癌生长、转移的部分机制。方法：采用实时荧光定量PCR（RFQ-PCR）法检测标准H. pylori（NCTC 11637细胞株）感染人胃癌MKN45细胞VEGF的表达;Western印迹法检测H. pylori对MKN45细胞中COX-2蛋白表达的影响;运用COX-2特异性抑制剂NS398（50 μmol/L）抑制COX-2后,观察H. pylori对MKN45细胞VEGF mRNA表达的影响。结果：H. pylori感染人胃癌MKN45细胞后VEGF mRNA的表达明显上调。H. pylori感染6、12和24 h后VEGF mRNA的表达量分别为正常值的2.33（P〈0.05）、5.69和5.04倍（P〈0.01）;H. pylori感染MKN45细胞24 h后,COX-2蛋白的表达亦显著增加（P〈0.01）。而采用COX-2特异性抑制剂NS398抑制COX-2的表达后,H. pylori诱导的VEGF mRNA表达明显降低（P〈0.01）。结论：H. pylori感染诱导胃癌细胞COX-2和VEGF表达,通过COX-2途径上调VEGF的表达,这可能是H. pylori感染促进胃癌生长、转移的重要机制之一。     

尼美舒利对胃癌细胞BGC823 COX-2、VEGF表达的影响

目的 研究尼美舒利（Nimesulide）对人胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的干预作用，揭示其抗癌机制。方法 采用MTT法、流式细胞仪等检测细胞增殖、细胞周期和凋亡率以及细胞的形态学改变，同时检测尼美舒利对胃癌细胞COX-2、VEGF表达的影响。结果 尼美舒利抑制胃癌细胞的IC50μM／L。增殖抑制率达到80．31％，流式细胞仪分析发现100-200μM／L的尼美舒利作用48h后，细胞被阻滞于S期，凋亡率分别为5．69％，10．58％；光学显微镜观察到凋亡典型的形态学特征；免疫细胞化学结果显示尼美舒利作用后能降低COX2、VEGF蛋白表达，与对照组比较，具有非常显著性差异（P〈0．01）。结论 尼美舒利能显著抑制人胃癌细胞株BGC-823的生长，此作用可能与降低COX2、VEGF蛋白表达有关。     

NS398对SGC7901胃癌细胞生长及CD44V6、MMP-9基因表达的影响

目的探讨COX-2特异性抑制剂NS398对SGC7901胃癌细胞体外生长及CD44V6、MMP-9基因表达的影响。方法体外培养SGC7901胃癌细胞,应用免疫细胞化学方法,检测SGC7901胃癌细胞中COX-2、CD44V6、MMP-9蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测NS398对胃癌细胞PGE2分泌水平的影响,MTT法检测NS398对SGC7901胃癌细胞体外生长的抑制效应,半定量RT-PCR检测NS398作用后胃癌细胞株中CD44V6、MMP-9基因表达水平的变化。结果 SGC7901胃癌细胞中COX-2、CD44V6、MMP-9呈阳性表达,NS398可显著抑制SGC7901胃癌细胞PGE2的分泌,200μmol/L NS398抑制率达64.3%,NS398对胃癌细胞生长抑制作用呈时间及浓度依赖性;NS398作用24 h后胃癌细胞中CD44V6、MMP-9基因表达水平下降,200μmol/L NS398对CD44V6、MMP-9基因表达抑制率分别为45.7%、43.6%。结论 SGC7901胃癌细胞中COX-2、CD44V6、MMP-9呈阳性表达,NS398可有效抑制SGC7901胃癌细胞PGE2的分泌和胃癌细胞生长,并可抑制与胃癌转移相关的CD44V6、MMP-9基因的表达。     

环氧合酶-2特异性siRNA真核表达质粒对HT-29细胞生长的影响

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达质粒对人结肠癌HT-29细胞COX-2表达和生长的影响。方法设计短发夹结构的COX-2 siRNA对应模版DNA序列,构建重组质粒pshCOX-2。将重组质粒转染人结肠癌HT-29细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹分别从mRNA和蛋白水平检测COX-2表达。用四氮唑盐(MTT)法和流式细胞仪观察COX-2表达被抑制后细胞的生长情况,放射免疫法(RIA)和ELISA法分别检测培养上清中PGE2和VEGF的含量变化。结果酶切及测序证实质粒pshCOX-2构建成功。转染重组质粒72h后可以显著抑制HT-29细胞COX-2 mRNA和蛋白表达(P<0.05),细胞生长受抑,凋亡细胞数显著增加(P<0.05),细胞PGE2和VEGF的产生受抑制(P<0.05)。结论成功构建的COX-2 siRNA真核表达质粒pshCOX-2通过抑制人结肠癌HT-29细胞COX-2基因表达,从而抑制细胞生长、PGE2合成和VEGF的产生。     

多不饱和脂肪酸ω-3和ω-6对胃癌侵袭影响的研究

目的:探讨不饱和脂肪酸ω-3、ω-6及中间代谢产物(PEG2、PEG3)对胃癌细胞侵袭势能的影响,分析ω-3和ω-6对胃癌转移的分子生物学机制.方法:RT-PCR检测COX-1和COX-2在胃癌细胞中的表达水平;细胞侵袭实验分别检测ω-3、ω-6、PFG2和PEG3对胃癌细胞侵袭势能.结果:COX-2只表达于MKN74和MKN45细胞株中,而COX-1在4种胃癌细胞株中均有表达.在COX-2阳性表达的胃癌细胞株中,ω-6(AA)及PEG2能明显强化胃癌细胞的侵袭能力;ω-3(EPA)及PEG3能抑制胃癌细胞的侵袭.在COX-2阴性表达的胃癌细胞株中,ω-6(AA)及PEG2则对胃癌的侵袭能力无明显影响;ω-3 (EPA)及PEG3则能明显抑制胃癌细胞的侵袭.COX-2阳性细胞株中抑制COX-2活性后,ω-6 (AA)+ PEG2对胃癌细胞的侵袭能力无明显改变.结论:ω-6不饱和脂肪酸能够强化胃癌细胞的侵袭能力;ω-3不饱和脂肪酸能明显抑制胃癌细胞的侵袭能力;ω-6不饱和脂肪酸与COX-2结合后生成PGE2强化胃癌细胞的侵袭能力;ω-3和COX-1结合后生成PGE3抑制胃癌细胞的侵袭能力.     

COX-2抑制剂(阿司匹林)体外抑制人食管癌细胞的生长及诱导凋亡

目的：探讨COX-2抑制剂阿司匹林对食管癌细胞作用的生物学效应及可能的作用机制。方法：采用MTT法检测阿司匹林对Eea-109和TE-13细胞生长的抑制作用；FCM法检测细胞凋亡及COX-2、bcl-2，Pax基因蛋白的表达；用RIA法检测培养上清中PGE2的含量。结果：阿司匹林可抑制2种细胞的生长，并随药物浓度升高及作用时间延长抑制率逐渐增高，而使这2株细胞产生的PGE2量明显降低。阿司匹林还能使2株细胞的G0／G1期细胞显著增多，S期细胞显著减少（P〈0．01），并引起了明显的细胞凋亡。2株细胞随阿司匹林作用时间的增加，COX-2和bcl-2表达显著减少，而Bax表达显著增高，COX-2、bcl-2和Bax的表达呈显著相关性（P〈0．01）。结论：阿司匹林能抑制食管癌细胞的增殖并可诱导其凋亡，对食管癌进行化学预防或辅助治疗具有可能性。     

短发夹RNA抑制肝癌细胞HepG2 COX-2基因表达的探讨

目的：研究shRNA对肝癌细胞株HepG2中COX-2基因表达的抑制作用,同时检测对细胞周期和细胞生长的影响。方法：设计、合成一对环氧化酶-2（COX-2）基因编码的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,定向克隆至质粒载体pGenesil-1,构建抑制COX-2基因的短发夹RNA（short hairpin RNA shRNA）的重组表达质粒pshRNA-COX-2,用脂质体Lipofectamine^TM2000转染肝癌细胞HepG2,经RT-PCR和Westernblot分别检测pshRNA-COX-2重组表达质粒对COX-2mRNA和蛋白抑制效应,流式细胞仪检测细胞周期、细胞计数检测细胞生长变化。结果：pshRNA-COX-2重组表达质粒能够抑制COX-2基因表达。与未转染肝癌细胞HepG2相比,pshRNA-COX-2重组表达质粒转染肝癌细胞后,COX-2 mRNA和蛋白表达明显降低,抑制率分别为69.9%和50.3%;G0-G1期细胞由55.4%上升为77.9%,S期细胞由31.1%下降为16.2%;细胞生长明显减慢。结论：构建的pshRNA-COX-2重组表达载体能够显著抑制COX-2基因表达;引起G0-G1期细胞增多,S期细胞减少,从而阻止肝癌细胞生长。     

选择性COX-2 抑制剂对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制作用及分子机制研究

目的:探讨选择性环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂N-[2-(cyclohexyloxy)4-nitrophenyl]-methanesulfonamide(NS398)对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖和凋亡的影响及其相关机制.方法:用不同浓度的选择性COX-2抑制剂NS398处理MCF-7细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测选择性COX-2抑制剂NS398对MCF-7细胞增殖的影响;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法检测人乳腺癌细胞系MCF-7的凋亡情况;Western-blot法测定NS398作用于MCF-7细胞后的COX-2蛋白表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测NS398作用于MCF-7细胞后的细胞培养上清中血管内皮生长因子VEGF和前列腺素E2(PGE2)释放水平.结果:选择性COX-2抑制剂NS398能抑制人乳腺癌细胞系MCF-7细胞生长,NS398药物浓度不同,孵育时间不同时,其对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制效应不同.作用同一时间时,10、20、40、80 μmol/L 4个浓度之间差异有统计学意义(P<0.001);NS398作用于MCF-7细胞后能下调COX-2蛋白表达;NS398能明显抑制MCF-7细胞VEGF和PGE2的释放水平,且MCF-7细胞凋亡抑制率与VEGF和PGE2释放水平呈显著负相关.结论:选择性COX-2抑制剂NS398可抑制人乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖,其机制可能与选择性COX-2抑制剂NS398作用于MCF-7细胞后COX-2蛋白表达下调,VEGF和PGE2释放水平下降有关.     

人COX-2基因反义真核表达载体对胃癌转移的影响

目的：在成功构建人COX-2基因反义真核表达载体的基础上,研究COX-2基因对人胃癌细胞株SGC-7901转移能力的影响。方法：实验分为COX-2基因反义真核表达载体转染的人胃癌细胞株SGC-7901转染组、COX-2抑制剂SC236处理组（SGC-7901细胞培养基内含100μmol/L SC236）和对照组（SGC-7901细胞）,并分别采用细胞体外侵袭实验,内皮细胞体外迁移实验,观察各组细胞体外转移的情况。采用裸鼠皮下移植瘤抑制实验,用转染和未转染的SGC-7901细胞按每毫升5×10~7个的细胞悬液分别注射于BALB/C-nu/nu无胸腺裸鼠背部皮下,SC236处理组按3mg/（kg·d）剂量于接种SCC-7901细胞10min后,由尾静脉注射,隔日1次。各组6周后处死动物,观察皮下移植瘤的生长情况。并用Western blot法检测各组细胞VEGF及MMP-2蛋白的表达。结果：体外侵袭实验、促内皮细胞体外迁移实验结果显示,与对照组相比,转染组和SC236处理组迁移的肿瘤细胞和内皮细胞均减少（P〈0.01）;裸鼠皮下移植抑制实验结果显示,转染组和SC236处理组荷瘤鼠移植瘤的生长受到抑制;Western blot结果显示,转染组和SC236处理组细胞VEGF及MMP-2蛋白的表达下降。结论：反义COX-2基因能抑制SCG-7901细胞的转移能力,其机制可能与其抑制肿瘤的血管生成、减少MMP-2的表达有关。     

胃癌中MCP-1和CD40L的表达及联合作用对PGE2及VEGF产物的生物学影响

目的：探讨在胃癌间质细胞中单核细胞趋化蛋白（MCP-1）和CD40L配体（CD40L）的表达及它们之间的相互作用,以及对前列腺素E2（PGE2）及血管内皮生长因子（VEGF）产物的影响。方法：应用RT—PCR技术测定胃癌组织中CD40L和MCP-1的mRNA水平。在巨噬细胞中,分别用MCP-1、CD40L、MCP-1和CD40L共同刺激后,测定COX-2、PGE2和VEGF产物。结果：在MCP-1和CD40L共同刺激的巨噬细胞中,COX-2表达水平显著升高,同时与PGE2和VEGF产物升高相互关联。在COX-2表达上,MCP-1和CD40L巨噬细胞有协同作用,随之PGE2和VEGF产物也增加。与幽门螺杆菌感染的胃炎患者相比,低分化胃癌患者中CD40L和MCP-1的mRNA表达水平明显升高。结论：胃癌中MCP-1和CD40L在COX-2表达上有协同作用,因此对PGE2及VEGF产物也有协同作用。     

三氧化二砷对胃癌细胞系SGC7901的生长及VEGF表达的影响

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对胃癌细胞株SGC7901的生长及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响.方法：体外培养胃癌细胞株SGC7901,加入不同浓度的As2O3干预,用Western bloting和荧光定量RT-PCR法测定VEGF蛋白和mRNA表达,加入外源性重组人VEGF165,观察VEGF对肿瘤细胞生长的刺激以及As2O3对此作用的抑制.结果：胃癌细胞株SGC7901经As2O3作用后,VEGF的蛋白表达明显减少,但VEGFmRNA拷贝数无差异.在SGC7901细胞培养中加入外源性VEGF165,其细胞活力有所增加,细胞存活率均大于100％;当同时加入VEGF165和As2O3时,其细胞存活率明显减低.结论：As2O3在蛋白水平抑制胃癌细胞株SGC7901的VEGF表达,抑制SGC7901的生长.     

特异性环氧合酶-2抑制剂SC236诱导胃癌细胞株凋亡的实验研究

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)特异性抑制剂SC236诱导胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制. 方法: SC236对人胃癌来源的SGC7901细胞进行凋亡诱导.以吖啶橙染色后荧光显微镜下观察凋亡细胞形态并计算凋亡指数.Western blot法检测凋亡调节蛋白Bcl-2、Bak、Bax与CED-9的表达情况.流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果: SGC7901细胞经SC236作用后,细胞中凋亡促进因子Bak的表达水平明显增高、凋亡抑制因子Bcl-2的表达水平显著下降、而凋亡促进因子Bax和凋亡抑制因子CED-9表达水平无明显变化.细胞凋亡指数或凋亡率则随SC236浓度的增加和作用的时间延长而升高.结论: COX-2特异抑制剂SC236可通过上调凋亡促进因子Bak表达和下调凋亡抑制因子Bcl-2表达而诱导胃癌细胞株SGC7901的凋亡.     

The function and mechanism of COX-2 in angiogenesis of gastric cancer cells

Background

Here we aimed to investigate the effect of COX-2 siRNA on proliferation and angiogenesis of gastric cancer cells.

Methods

The gastric cancer cell line SGC7901 was transfected with COX-2 siRNA, then the growth and angiogenesis of cells were detected by in vitro and in vivo assay. Human microarray, RT-PCR and western blot were used to identify differentially expressed angiogenesis-related molecules in cells with decreased expression of COX-2.

Results

Down-regulation of COX-2 could significantly inhibit the in vitro and in vivo growth of gastric cancer cells, and suppress the migration and tube formation of human umbilical vein endothelial cells. Totally 23 angiogenesis-related molecules were found involved in COX-2-induced angiogenesis suppression. The results of RT-PCR and western blot showed that down-regulation of COX-2 might inhibit VEGF, Flt-1, Flk-1/KDR, angiopoietin-1, tie-2, MMP2 and OPN.

Conclusions

COX-2 might mediate tumor angiogenesis and growth, and could be considered as a target for gastric cancer therapy.     

环氧合酶-2选择性抑制剂塞莱昔布调节胃癌细胞多药耐药性的实验研究

 目的 观测环氧合酶-2（COX-2）抑制剂塞莱昔布（Celecoxib）对多药耐药细胞株SGC7901／VCR多药耐药（MDR）的逆转及P-糖蛋白（P-gp）的调变作用，探讨COX-2对胃癌细胞MDR调节作用。方法 以长春新碱（VCR）诱导的人胃癌多药耐药细胞SGC7901／VCR为研究对象，应用流式细胞术、MTT法及免疫细胞化学方法研究COX-2抑制剂塞莱昔布对耐药性的逆转作用及对P-gp的调变作用。结果 MTT显示塞莱昔布明显抑制SGC7901、SGC7901／VCR细胞的生长，并呈时间、剂量依赖性。经非细胞毒剂量（2.5 μmol／L）的塞莱昔布作用后，SGC7901／VCR细胞的多药耐药性得到部分逆转，表现为靶细胞对多种化疗药物的敏感性显著增加，逆转倍数为1.09 ~ 6.28；流式细胞仪分析发现，塞莱昔布介导的SGC7901／VCR细胞耐药性的逆转伴有胞内多柔比星浓度的升高；免疫细胞化学研究显示，经塞莱昔布作用后耐药株SGC7901／VCR表达P-gp强度下降。结论 塞莱昔布能有效地抑制肿瘤细胞的生长，且部分逆转SGC7901／VCR细胞的多药耐药性，其可能主要通过影响P-gp的药物泵功能实现。     

Expression of 15-PGDH is downregulated by COX-2 in gastric cancer

To explore the proteins regulated by cyclooxygenase-2 (COX-2) in gastric cancer, the expression plasmid of COX-2siRNA was constructed and transfected into gastric cancer cell line SGC7901. Then, two-dimensional electrophoresis and the PDQuest software analysis were applied to discover the differentially expressed proteins. The differential protein spots were analyzed by matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry. Fourteen differentially expressed proteins between the two cell lines were identified. 15-Hydroxyprostaglandin dehydrogenase [NAD(+)] (15-PGDH), a key enzyme in prostaglandin degradation, was identified as an upregulated protein in SGC7901 cells transfected with the COX-2siRNA plasmid. To further explore whether the 15-PGDH is regulated by COX-2, western blotting and immunocytochemical assay were performed to detect the expression of 15-PGDH in different cell lines with different expression level of COX-2. The results showed that the expression of 15-PGDH was upregulated (128.57%) as COX-2 was suppressed by small interfering RNA and downregulated (51.72%) as COX-2 was enhanced by COX-2 cDNA transfection in gastric cancer cells. In tissue specimens with gastric cancer, there was a decreased expression of 15-PGDH and an increased expression of COX-2 simultaneously. A significantly negative correlation of 15-PGDH expression was found to COX-2 level, tumor differentiation, tumor, lymph node, metastasis (TNM) staging and lymph node metastasis of gastric cancer. All the results suggest that 15-PGDH is downregulated by COX-2 in human gastric cancer and may contribute to the carcinogenesis and development of human gastric cancer in combination with COX-2.     

二氢青蒿素对胃癌细胞血管生成及相关基因表达的影响

  目的  检测二氢青蒿素（DHA）对胃癌SGC7901细胞中血管生成及相关基因表达的影响及意义。  方法  不同浓度（5、10、20、40、80 μmol/L）DHA作用SGC7901细胞24、48和72 h后,通过MTT法检测DHA对SGC7901细胞增殖的抑制作用。利用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中人表皮生长因子（VEGF-C）、环氧合酶-2（COX-2）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）和PTEN的mRNA的表达量;利用Western blot方法检测其蛋白表达量。  结果  SGC7901细胞经过不同浓度DHA处理24 h以及50 μmol/L DHA处理24、48和72 h后,SGC7901细胞增殖受到明显抑制,细胞中VEGF-C、COX-2、VCAM-1和PTEN的mRNA及蛋白的表达水平均都受到抑制;PTEN的mRNA及蛋白的表达水平则呈升高趋势。  结论  DHA通过减少胃癌SGC7901细胞中VEGF-C、COX-2和VCAM-1基因的表达,促进PTEN的表达,抑制了肿瘤细胞的生长。      

Mechanism of P-glycoprotein expression in the SGC7901 human gastric adenocarcinoma cell line induced by cyclooxygenase-2

Objective: To investigate possible signal pathway involvement in multi-drug resistant P-glycoprotein (P-gp)expression induced by cyclooxygenase-2 (COX-2) in a human gastric adenocarcinoma cell line stimulated withpacliaxel (TAX). Methods: The effects of TAX on SGC7901 cell growth with different doses was assessed byMTT assay, along with the effects of the COX-2 selective inhibitor NS-398 and the nuclear factor-ΚB (NF-ΚB)pathway inhibitor pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC). Influence on COX-2, NF-ΚB p65 and P-gp expressionwas determined by Western blotting. Results: TAX, NS-398 and PDTC all reduced SGC7901 growth, with dosedependence.With increasing dose of TAX, the expression of COX-2, p65 and P-gp showed rising trends, thisbeing reversed by NS-398. PDTC also caused decrease in expression of p65 and P-gp over time. Conclusion:COX-2 may induce the expression of P-gp in SGC7901 cell line via the NF-kappa B pathway with pacliaxelstimulation.     

Growth stimulation of COX-2-negative pancreatic cancer by a selective COX-2 inhibitor

Cyclooxygenase 2 (COX-2) inhibitors are promising antiangiogenic agents in several preclinical models. The aim of the present study was to evaluate the effect of selective COX-2 inhibitors on vascular endothelial growth factor (VEGF) production in vitro and angiogenesis and growth of pancreatic cancer in vivo, focusing on putative differences between COX-2-negative and COX-2-positive tumors. VEGF production and angiogenesis in vitro were determined by ELISA and endothelial cell migration assay. To determine whether the effect of COX-2 inhibitors was mediated by peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPAR-gamma), we used a dominant-negative PPAR-gamma and a pharmacologic inhibitor. In vitro findings were validated in a pancreatic cancer animal model. Microvessel density was assessed by CD31 immunostaining. Intratumoral prostaglandin and VEGF levels were measured by mass spectroscopy and ELISA. Selective COX-2 inhibitors had a concentration-dependent effect on VEGF production in vitro. Higher concentrations increased VEGF levels and stimulated angiogenesis by activating PPAR-gamma. In vivo, nimesulide increased VEGF production by cancer cells in COX-2-positive and COX-2-negative pancreatic tumors. In COX-2-negative pancreatic cancer, this effect was associated with an increase in angiogenesis and growth. In COX-2-positive pancreatic cancer, the nimesulide-induced increase of VEGF production by the cancer cells was offset by a decrease in VEGF production by the nonmalignant cell types leading to reduced tumor angiogenesis and growth. Selective COX-2 inhibitors had opposite effects on growth and angiogenesis in pancreatic cancer depending on COX-2 expression. These findings imply that assessing the COX-2 profile of the pancreatic tumor is mandatory before initiating therapy with a selective COX-2 inhibitor.     

Src酪氨酸激酶在人胃癌细胞转移中的作用和机制

背景与目的:Src酪氨酸激酶的活化在胃癌浸润和转移中发挥了重要的作用。本研究旨在探讨Src酪氨酸激酶对人胃癌细胞E-钙黏着蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、9表达、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)分泌、转录因子NF-κB和AP-1表达以及胃癌细胞体外侵袭能力的影响。方法:使用Src酪氨酸激酶抑制剂4-苯胺喹唑啉(3和10μmol/L)后,应用Western blot法检测人胃癌SGC7901细胞中E-cadherin、MMP-2和MMP-9蛋白表达变化;应用实时PCR(real-time PCR)检测细胞中E-cadherin、MMP-2和MMP-9的mRNA表达变化;应用ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF表达变化;应用双荧光报告基因法检测NF-κB和AP-1转录活性;应用Transwell法检测肿瘤细胞侵袭能力变化。结果:当Src酪氨酸激酶抑制剂4-苯胺喹唑啉浓度为3和10μmol/L时,SGC7901细胞中E-cadherin蛋白表达量显著增加,E-cadherin的mRNA表达是对照组的263.8%(P<0.05)和403.3%(P<0.05);MMP-2和MMP-9的蛋白表达显著降低,MMP-2的mRNA表达是对照组的28.3%(P<0.05)和16.7%(P<0.05),MMP-9的mRNA表达是对照组的23.6%(P<0.05)和13.3%(P<0.05);VEGF含量是对照组的62.6%(P<0.05)和38.7%(P<0.05);AP-1转录活性是对照组的54.4%(P<0.05)和18%(P<0.05),NF-κB转录活性是对照组的38.3%(P<0.05)和11.5%(P<0.05);胃癌细胞侵袭能力是对照组的43.3%(P<0.05)和28.2%(P<0.05),呈现明显的剂量依赖性抑制作用。结论:Src酪氨酸激酶活化与人胃癌SGC7901细胞体外转移能力密切相关,其机制可能与肿瘤转移相关基因表达有关。