汉防己甲素对成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的影响

目的　探讨汉防己甲素预防和治疗增生性瘢痕的可行性。方法　对增生性瘢痕中的成纤维细胞进行培养 ,然后加入不同浓度的汉防己甲素 ,培养后继续观察成纤维细胞合成胶原蛋白的能力的变化。结果　汉防己甲素可以抑制成纤维细胞合成胶原蛋白。结论　汉防己甲素对成纤维细胞胶原蛋白的合成具有抑制作用 ,因此它可能对增生性瘢痕具有预防和治疗作用     

汉防己甲素对成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的影响

目的探讨汉防己甲素预防和治疗增生性瘢痕的可行性.方法对增生性瘢痕中的成纤维细胞进行培养,然后加入不同浓度的汉防己甲素,培养后继续观察成纤维细胞合成胶原蛋白的能力的变化.结果汉防己甲素可以抑制成纤维细胞合成胶原蛋白.结论汉防己甲素对成纤维细胞胶原蛋白的合成具有抑制作用,因此它可能对增生性瘢痕具有预防和治疗作用.     

汉防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙对人肾成纤维细胞的影响

目的 观察汉防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙３种中药成分对人肾成纤维细胞（ＫＦＢ）的影响。方法 采用ＥＬＩＳＡ法、四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）法、流式细胞仪、免疫组织化学法分别检测汉防己甲素、川芎嗪、苦杏仁甙对人ＫＦＢ分泌的Ｉ型胶原酶活性、人ＫＦＢ增殖、凋亡、Ｉ型胶原表达的影响。结果 汉防己甲素、川芎嗪、苦杏仁甙３种中药提取成分在各自的最佳浓度范围和作用时间内均能提高人胚ＫＦＢ分泌的Ｉ型胶原酶活性、抑制人胎     

培养的正常和瘢痕角质形成细胞上清液对瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的 研究培养的正常角质形成细胞、瘢痕角质形成的细胞的上清液对增生性瘢痕成纤维细胞生物活性和胶原合成的影响。方法 采用MTT、^3H-脯氨酸掺入法、Ⅲ型前胶原放免试剂盒测定不同来源、不同浓茺培养的角度形成细胞上清液，对增生性瘢痕成纤细胞增殖和胶原合成的影响。结果 正常角质形成细胞上清液，可抑制瘢痕成纤维细胞增殖，对细胞内胶原合成有一定的促进作用，但却抑制细胞内胶原向细胞外分泌。瘢痕角质形成细胞上清液，对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的抑制作用不明显，甚至还有促进的趋势，对细胞内外胶原合成、分泌皆有明显的促进作用。结论 正常角质形成细胞与瘢痕角质形成细胞分泌的物质对瘢痕成纤维细胞具有不同作用。     

透明质酸刺激因子对成纤维细胞活性功能和胶原合成的影响

目的 研究透明质酸刺激因子（HASF）对正常皮肤及瘢痕成纤维细胞活性和胶原合成的影响。方法 层析法从兔羊水及胎兔血清中提取HASF并做活性鉴定;用嗜银蛋白（AgNORs)染色法、^3H-脯氨酸掺入法和羟脯氨酸（HYP）测定法观察不同浓度的HASF对细胞增殖活性和胶原蛋白合成的影响。结果 HASF使两类细胞的AgNORs含量减少;两类细胞实验组脯氨酸掺入率与HYP含量均较对照组低,两种胶原测定法相关性好。结论 HASF对正常皮肤及瘢痕成纤维细胞的活性功能及胶原合成有抑制作用,可能影响伤口愈合中瘢痕的形成。     

透明质酸刺激因子对成纤维细胞活性功能和胶原合成的影响

目的研究透明质酸刺激因子(HASF)对正常皮肤及瘢痕成纤维细胞活性和胶原合成的影响。方法层析法从兔羊水及胎兔血清中提取 HASF 并做活性鉴定;用嗜银蛋白(AgNORs)染色法、~3H-脯氨酸掺入法和羟脯氨酸(HYP)测定法观察不同浓度的 HASF 对细胞增殖活性和胶原蛋白合成的影响。结果 HASF 使两类细胞的 AgNORs 含量减少;两类细胞实验组脯氨酸掺入率与HYP 含量均较对照组低,两种胶原测定法相关性好。结论 HASF 对正常皮肤及瘢痕成纤维细胞的活性功能及胶原合成有抑制作用,可能影响伤口愈合中瘢痕的形成。     

微丝功能对成纤维细胞胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达的影响

目的 研究微丝功能对正常皮肤及增生性瘢痕成纤维细胞胶原及金属蛋白酶组织抑制因子－1mRNA表达水平的影响。方法 采用细胞培养、Northern blot分析等方法，以α-32P-dCPT标记的胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子－1 cDNA为探针，检测正常皮肤及增生性瘢痕成纤维细胞胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子－1mRNA表达水平的变化。结果 用细胞松弛素B破坏微丝后，正常皮肤及增生性瘢痕成纤维性细胞的胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子－1mRNA含量明显升高。结论 微丝骨架可在基因转录水平参与对成纤维细胞合成细胞外基质的调控。     

血管紧张素Ⅱ和洛沙坦对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ及其Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂洛沙坦(losartan)对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法体外分离培养增生性瘢痕成纤维细胞,在不同浓度的血管紧张素Ⅱ和洛沙坦作用下,采用MTT法和3H-脯氨酸掺入释放法分别检测成纤维细胞增殖和生成胶原的情况。结果血管紧张素Ⅱ在浓度为1×10-7~1×10-4mol/L时,成纤维细胞的增殖和合成胶原明显增多(P<0.05);血管紧张素Ⅱ浓度与胶原量呈正相关。洛沙坦在浓度为1×10-6~1×10-4mol/L时,成纤维细胞增殖和胶原生成量显著减少(P<0.05);且浓度与胶原生成量呈负相关。结论血管紧张素Ⅱ可以促使成纤维细胞增殖并产生大量的胶原;洛沙坦通过拮抗AT1后,抑制细胞增殖、胶原合成量显著减少,提示血管紧张素Ⅱ在促使增生性瘢痕的发展过程中起着重要的作用,AT1的拮抗剂有望在增生性瘢痕防治中发挥重要作用。     

汉防己甲素对肾病综合征大鼠肾小球细胞外基质的作用

目的探讨中药汉防己甲素(Tetrandrine)对单侧肾切除加两次注射阿霉素肾病综合征大鼠肾小球细胞外基质(ECM)的作用.方法将实验动物分为(1)正常对照组、(2)汉防己甲素治疗组、(3)氨氯地平治疗对照组和(4)模型组,于第12周留取尿标本,肾组织病理学检查和图像分析肾小球细胞外基质变化,计算ECM/肾小球面积(GA).结果汉防己甲素治疗组和氨氯地平组肾小球ECM均明显减少(ECM/GA为0.24±0.02、0.29±0.01比(4)组0.39±0.02)(P＜0.05)、球囊粘连减轻.结论汉防己甲素能减少肾病综合征大鼠肾小球ECM沉积,延缓肾小球硬化.     

血管紧张素Ⅱ和洛沙坦对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ及其Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂洛沙坦(losartan)对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响.方法 体外分离培养增生性瘢痕成纤维细胞,在不同浓度的血管紧张素Ⅱ和洛沙坦作用下,采用MTT法和3H-脯氨酸掺入释放法分别检测成纤维细胞增殖和生成胶原的情况.结果 血管紧张素Ⅱ在浓度为1×10-7～1×10-4mol/L时,成纤维细胞的增殖和合成胶原明显增多(P＜0.05);血管紧张素Ⅱ浓度与胶原量呈正相关.洛沙坦在浓度为1×10-6～1×10-4mol/L时,成纤维细胞增殖和胶原生成量显著减少(P＜0.05);且浓度与胶原生成量呈负相关.结论 血管紧张素Ⅱ可以促使成纤维细胞增殖并产生大量的胶原;洛沙坦通过拮抗AT1后,抑制细胞增殖、胶原合成量显著减少,提示血管紧张素Ⅱ在促使增生性瘢痕的发展过程中起着重要的作用,AT1的拮抗剂有望在增生性瘢痕防治中发挥重要作用.     

增生性瘢痕胶原降解与形态学的观察

目的　探讨胶原降解和瘢痕形态结构在增生性瘢痕形成中的作用。方法　应用SDS 聚丙烯酰胺凝胶加胶原底物电泳、氨基酸分析法和复合染色法 ,观测增生性瘢痕组织中胶原酶活性、胶原降解和瘢痕的组织形态。　结果　增生性瘢痕组织胶原纤维排列紊乱 ,胶原纤维间有大量的酸性粘多糖 ,紧密包绕胶原纤维 ,胶原酶活性明显下降 ,胶原降解减少。　结论　胶原酶活性降低 ,酸性粘多糖阻止胶原酶对胶原的降解可能是胶原降解减少和瘢痕形成的重要原因     

胶原酶对裸鼠移植肥厚性瘢痕的治疗作用

目的观察胶原酶对肥厚性瘢痕(HTS)胶原降解的影响,探讨它对 HTS 的治疗作用。方法建立 HTS 裸鼠移植模型,局部注射胶原酶于瘢痕组织。治疗后取材行光、电镜观察和分析。结果 HTS 组织胶原纤维被降解,真皮层变薄,瘢痕缩小,质地变软,与对照组差异十分明显。结论胶原酶的局部注射可能是治疗 HTS 的较好方法。     

胶原酶对裸鼠移植肥厚性瘢痕的治疗作用

目的观察胶原酶对肥厚性瘢痕（ＨＴＳ）胶原降解的影响，探讨它对ＨＴＳ的治疗作用。方法建立ＨＴＳ裸鼠移植模型，局部注射胶原酶于瘢痕组织。治疗后取材行光、电镜观察和分析。结果ＨＴＳ组织胶原纤维被降解，真皮层变薄，瘢痕缩小，质地变软，与对照组差异十分明显。结论胶原酶的局部注射可能是治疗ＨＴＳ的较好方法。     

胶原酶对裸鼠移植肥厚性瘢痕的治疗作用

目的 观察胶原地肥厚性瘢痕（ＨＴＳ）胶原降解的影响,探讨它对ＨＴＳ的治疗作用。方法 建立ＨＴＳ裸鼠移植模型,局部注射胶原酶于瘢痕组织。治疗后取材行光、电镜观察和分析。结果 ＨＴＳ组织胶原纤维被降解,真皮层变薄,瘢痕缩小,质地变软,与对照组差异十分明显。结论 胶原酶的局部注射可能是治疗ＨＴＳ的较好方法。     

90Sr治疗增生性瘢痕的基础与临床研究

目的 探讨90Sr防治瘢痕增生的作用机制并观察临床疗效. 方法 用90Sr敷贴器按照0、5、10,15 Gy剂量照射体外培养的人增生性瘢痕Fb.照射后24、48、72 h,流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率变化,ELISA法检测细胞培养上清液中Ⅰ型腔原浓度.评价348例增生性瘢痕患者、40例瘢痕疙瘩患者及114例外科手术后瘢痕预防患者应用90Sr照射治疗的效果,并经HE染色对比正常皮肤组织、增生性瘢痕组织、经90SR照射治疗的增生性瘢痕组织中Fb数目.对数据进行单因素方差分析和q检验. 结果 (1)剂量为10、15 Gy的90Sr照射后24、48 h,细胞凋亡率呈逐渐上升趋势,至照射后72 h两者凋亡率相近.剂量为5 Gy的90Sr照射后48 h细胞凋亡率明显高于照射后24 h,但照射后72 h细胞凋亡率迅速下降,与剂量为10、15 Gy时比较差异均有统计学意义(F值均为916.711,P值均小于0.01).(2)照射后24h,90Sr照射剂量为5、10 Gy时,细胞各周期的百分比相近;90Sr照射剂量为15 Gy时,S期细胞明显增多[(48.1±1.0)％,F值均为200.277,P值均小于0.01].剂量为10 Gy及15 Gy的90Sr照射后72 h,细胞明显阻滞在S期,S期细胞百分比分别为(85.7±5.2)％、(73.0±8.4)％,与照射剂量为0 Gy和5 Gy时比较差异均有统计学意义(F值均为111.105,P值均小于0.01).(3)同一照射时相点下,照射剂量越大,Ⅰ型胶原浓度越低(F值为5044.449～8234.423,P值均小于0.01).同一照射剂量下,随着时间推移,Ⅰ型胶原浓度有不同程度的增加(F值为333.395～2973.730,P值均小于0.01).(4)临床病例观察显示,90Sr照射病理性瘢痕或术后瘢痕预防患者后,显效率及有效率累计88.45％.HE染色显示,90Sr照射治疗的人增生性瘢痕Fb数目[每200倍视野(86±20)个]少于未经照射治疗者[每200倍视野(198±65)个,F=208.405,P＜0.05]. 结论 90Sr抑制瘢痕的生长是其对瘢痕Fb和ECM共同作用的结果,且临床疗效显著.     

Control of wound contraction. Basic and clinical features

Although a substantial amount of molecular and cellular data have been generated in an effort to understand the process of wound contraction and scar contracture formation, questions remain. What seems apparent is that the myofibroblast is not the only cell that generates contractile forces within wounds, but it does appear to be intrinsically linked to the development of hypertrophic scars. The supposition that the formation of scar contractures is solely the result of a continuation of wound contraction is an oversimplification. Figure 4 provides a model of the possible evolution of contractile forces during the wound healing process and their role in the development of scar contractures. Migration of fibroblasts into and through the extracellular matrix during the initial phase of wound healing, prior to the expression of alpha-SMA, appears to be a fundamental component of wound contraction. During this migration, the pulling of collagen fibrils into a streamlined pattern in their wake, and the associated production of collagenase, may facilitate a more normal arrangement of collagen. Once the wound has been repopulated and the chemotactic gradient that was established by inflammatory cells is decreased, fibroblast migration will cease. It is at this point that myofibroblasts appear and play a key role in the production of hypertrophic scars, given that their prolonged presence and over-representation are hallmarks of this pathology. One of the pivotal differences between wounds that proceed to normal scar compared with those that develop hypertrophic scars and scar contractures may be a lack (or late induction) of myofibroblast apoptotic cell death. The combined contribution of fibroblasts and myofibroblasts to abnormal extracellular matrix protein production results in an excessive and rigid scar. The isometric application of contractile forces by myofibroblasts probably contributes to the formation of the whorls, nodules, and scar contractures characteristic of hypertrophic scars. Because the prolonged presence of myofibroblasts, producing an imbalance in extracellular matrix proteins and proteases, probably exacerbates hypertrophic scars and wound contraction, accelerating the rate of apoptotic cell death to reduce the cell number to that seen in normal scar may be a useful strategy for providing effective and efficient treatment of scar contracture.     

Gelatinase activity in keloids and hypertrophic scars

Keloids and hypertrophic scars are characterized by excessive deposition of collagen, which may result from insufficient protein degradation. Little is known about the levels of two gelatinases, matrix metalloproteinase-2 (72 kD type IV collagenase) and matrix metalloproteinase-9 (matrix metalloproteinase-9; 92 kD type IV collagenase) in these abnormal scars. The purpose of this study was to determine levels of these proteinases in tissue from hypertrophic scars, keloids, and donor skin. Ten hypertrophic scar samples, 9 keloid samples, and 10 donor skin samples were frozen, pulverized, homogenized, clarified by centrifugation, and analyzed for matrix metalloproteinases by quantitative zymography. Identity of matrix metalloproteinases was determined using a conditioned media reference standard, molecular weight ladders, and Western blotting. Levels of matrix metalloproteinase-9 activity were very low or undetectable in all samples. However, matrix metalloproteinase-2 activity was significantly elevated in keloids and hypertrophic scars vs. donor samples: 2.6 and 3.9-fold increases for latent matrix metalloproteinase-2, 7.8 and 6.9-fold increases for active matrix metalloproteinase-2, respectively. We conclude that little matrix metalloproteinase-9 activity (the gelatinase involved in early tissue repair) is present in keloids and hypertrophic scars, while matrix metalloproteinase-2 activity (the gelatinase involved in prolonged tissue remodeling) is present in donor skin and is significantly increased in hypertrophic scars and keloids.     

己基可可碱对成纤维细胞的生物学影响

目的　探讨己基可可碱对成纤维细胞的生物学作用及其意义。方法　通过MTS/PMS法、流式细胞术、3H-胸腺嘧啶摄入法、3H -脯氨酸摄入法的实验 ,观察了己基可可碱对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞的增殖活性和胶原合成的作用。结果　己基可可碱能够抑制瘢痕成纤维细胞的增殖和胶原的合成 ,并且具有明显的时间 -剂量依赖性 ,随着作用时间的延长和作用剂量的增大 ,抑制率逐渐增高。结论　己基可可碱具有抑制瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的作用 ,从而达到抑制瘢痕增生的作用