磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的：探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（glypican-3）在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理参数的关系。
方法：采用RT-PCR方法检测52例乳腺癌组织及其癌旁组织中glypican-3基因的表达,计算其阳性率;并用Western blot方法检测该基因在乳腺癌组织及其癌旁组织中的蛋白表达。
结果：glypican-3 mRNA在乳腺癌组织中表达率明显低于癌旁组织（P＜0.05）;在有淋巴结转移者中的表达率明显低于无淋巴结转移者（P＜0.05）;癌组织分化程度越低,glypican-3 mRNA的表达率越低（P＜0.05）;但其与患者的年龄、肿瘤的大小无关（P＞0.05）。glypican-3蛋白在乳腺癌组织中表达亦明显低于癌旁正常组织（P＜0.05）,在有淋巴结转移者中的表达量明显低于无淋巴结转移者（P＜0.05）,癌组织分化程度越低,glypican-3蛋白的表达量越低（P＜0.05）。
结论：glypican-3在乳腺癌组织中的低表达可能与乳腺癌的发生发展及侵袭转移有关。

     

LYVE-1在肝细胞癌组织中的表达及其意义

目的：探讨淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(LYVE-l)在肝癌组织中的表达及其临床意义。
方法：采用蛋白质印迹法检测24例低分化肝细胞癌, 6例高分化肝细胞癌和30例正常肝组织中LYVE-1的蛋白表达。
结果：肝癌组织LYVE-l表达阳性。低分化肝癌组织中LYVE-l的表达高于高分化肝癌组织二者均显著高于正常肝组织（P＜0.05）。
结论：LYVE-1可作为肝癌组织的淋巴管特异性标志物,为肝癌的预后提供了一种更有效的研究手段。

     

CCl4增敏的二乙基亚硝胺诱导大鼠原发性肝癌模型的建立

目的：探讨建立死亡率低、诱癌时间短、成功率高、操作方便及与人肝癌的发生过程相似的动物肝癌模型的方法。
方法：取8周龄Wistar大鼠40只,先给予50% CCl4油溶液按0.3 mL/100 g后肢皮下注射,每周2次,共2周;休息2周,然后给予95 μg/mL的二乙基亚硝胺（DEN）自由饮水12周。
结果：整个诱癌过程大鼠无死亡,体质量增加,精神状态好;诱癌第16周所有大鼠诱发出肝细胞性肝癌。
结论：以CCl4增敏的DEN喂养可以方便、简单、稳定地建立大鼠肝癌模型。实验动物死亡率低,成模率高。

     

MAP3K10在胰腺癌中的表达及其意义

目的:探讨丝裂原活化蛋白3激酶10（MAP3K10）在胰腺癌中的表达。
方法:应用免疫组织化学染色技术，Western blot及定量RT-PCR检测MAP3K10在胰腺癌及癌旁组织中的表达。
结果:(1)免疫组化染色阳性细胞计数显示MAP3K10在胰腺癌组织中的阳性细胞数（100%呈强阳性）明显多于癌旁组织（仅25%呈弱阳性）(P＜0.05)；(2)Western blot检测显示，在91.7%的胰腺癌组织中MPA3K10蛋白的表达量高于癌旁组织；(3)qRT-PCR检测显示，MAP3K10mRNA在胰腺癌及癌旁组织中均有表达，但前者的表达水平明显高于后者（P＜0.01）。
结论:MAP3K10在胰腺癌中存在异常激活，可能在胰腺癌的发生发展中起重要作用，有望成为胰腺癌新的治疗靶点

     

精准肝切除与非规则性肝切除治疗肝癌的疗效分析

目的：探讨精准肝切除与非规则性肝切除术治疗肝癌的临床效果。
方法：采用非规则性肝切除(38例)与精准肝切除(21例)治疗肝癌,比较两种术式围手术期和随访情况,包括术中出血量和输血量、术后AST水平、标本切缘阳性率、并发症发生率、术后1年复发率和生存率等进行数据分析,对随访1～2年的临床资料亦进行分析。
结果：全组无围手术期死亡。精准组和非规则组术中失血量无统计学差异［（650±610）mL vs.（1050±910）mL,t=1.628,P＞0.05］;精准组术中输血量较非规则组少［（350±250）mL vs.（750±500）mL,t=2.520,P＜0.05］;精准组术后AST上升幅度较非规则组小［（169±131） U/L vs.（350±293）U/L,t=2.455, P＜0.05］;肿瘤标本切缘阳性率分别为4.8%（1/21）和21.1%（8/38）（P＜0.05）;围手术期并发症的发生率精准组较非规则组低［33.3%（7/21）vs. 71.1%（27/38）,P＜0.05］;术后1年肿瘤复发率精准组较非规则组低［23.8%（5/21）vs.44.7%（17/38）］;术后1年生存率两组无统计学差异［85.7%（18/21）和78.9%（30/38）,P＞0.05］。
结论：精准肝切除较之非规则性肝切除术治疗肝癌,手术损伤小、并发症少、术后恢复快、疗效较好。

     

肝细胞癌中Bcl-2|Fas|Fas-L的表达及相关性研究

目的：探讨肝细胞癌中Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白的表达及意义。
方法：采用免疫组化方法检测40例肝癌组织和10例良性肿瘤组织中Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白的表达,分析它们之间的关系及与肝癌临床病理参数的关系。
结果：40例肝细胞癌中Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白的表达率分别为45%,75%,70%,10例肝良性病变中Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白的表达率分别为0%,30%,30%。Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白在肝细胞癌中的表达率高于肝良性病变,差异有统计学意义（P＜0.05）。其中Bcl-2蛋白的表达与Fas蛋白的表达呈正相关（r=0.390,P＜0.05）。
结论：HCC的Bcl-2表达上调可能通过阻断Fas/Fas-L凋亡通路和其直接抗凋亡作用导致HCC细胞得以免疫逃逸。Fas,Fas-L表达的肿瘤细胞具有更强的浸润转移能力,其极有可能作为判断肿瘤转移能力的参考指标。

     

前入路半肝血流阻断法在巨块型肝癌规则性肝切除术中的应用

目的：探讨前入路半肝血流阻断法在原发性巨块型肝癌行规则性肝切除术的应用价值。
方法： 回顾性分析8年半间笔者应用前入路半肝血流阻断法行规则性肝切除术15例的原发性巨块型肝癌伴肝硬化患者的临床资料。观察术中失血量、输血量、术后3 d总引流量、肝功能及并发症的指标。
结果：术中平均失血量为（820±346）mL;术中输血9例,平均输血量（533±176）mL;术后3 d总引流量平均为（426±285）mL;血清ALT,TBIL,PA及PT各指标值在术后7 d内有10例（10/15）恢复正常或接近正常,术后14 d内有13例（13/15）恢复到正常水平或接近正常。术后发生胸腔积液2例,难治性腹水1例,无肝衰竭和围手术期死亡病例。
结论：前入路半肝血流阻断法能有效控制术中出血,对残余肝功能损害小,术后恢复快,提高了伴有肝硬化巨块型肝癌的手术安全性。

     

生长激素受体靶向siRNA联合5-FU对人结肠癌肝转移的影响

目的：探讨小分子干扰RNA（siRNA）靶向抑制人生长激素受体（hGHR）联合5-FU对人结肠癌细胞肝转移的影响。
方法：建立人结肠癌细胞SW480 BALB/c小鼠肝转移模型,并针对hGHR基因靶点构建siRNA干扰质粒,将荷瘤小鼠随机分成6个不同处理组,分别为生理盐水组、质粒组、生长激素（GH）组、5-氟尿嘧啶（5-FU）组、5-FU+质粒组、5-FU+质粒+GH组,观察各组肿瘤的肝转移情况。
结果：各组小鼠均有肝转移瘤形成,质粒组肝转移瘤数较生理盐水及GH组明显减少（2.67±1.37 vs. 10.17±1.94,10.50±1.38）（P＜0.05）;干扰质粒与5-FU联用后肝转移瘤数略低于两者单独使用（2.33±1.03 vs. 3.17±0.98,2.67±1.37）,但差异无统计学意义（P＞0.05）;在5-FU+质粒的基础上加用GH并不增加肝转移瘤的发生（P＞0.05）,但能改善小鼠由GHR抑制和化疗药物的毒性引起的体质量降低（P＜0.05）。
结论：siRNA靶向抑制hGHR可降低小鼠中人结肠癌细胞SW480肝转移的发生,GHR在肿瘤转移中可能起了重要作用。

     

MsrA在胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨MsrA在胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中的表达及意义。 方法：采用免疫组织化学法和实时荧光定量RT-PCR法检测57例胃癌组织与癌旁正常胃黏膜组织中MsrA的表达。 结果：胃癌组织中MsrA的表达率及表达强度均低于癌旁正常胃黏膜组织（P<0.001）;胃癌组织MsrA mRNA相对量的中位数为3.757,癌旁正常胃黏膜组织中MsrA mRNA相对量的中位数为5.240,胃癌组织中MsrA mRNA的表达水平低于癌旁正常胃黏膜组织（P=0.016）。 结论：胃癌组织中MsrA的表达水平较正常组织下调。

     

脾切除门奇静脉断流术对门静脉高压症糖代谢的影响

目的：探讨脾切除门奇静脉断流术对乙肝后肝硬化门静脉高压症患者糖代谢的影响及可能的机制。
方法：选择40例未合并糖尿病的乙肝后肝硬化门静脉高压症住院患者,比较脾切除门奇静脉断流术前后空腹血清胰岛素水平,胰岛素敏感指数（ISI）,胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,血清瘦素,肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平的变化。
结果：术后2周,空腹血清胰岛素平均水平自术前的（13.55±4.55）mU/L降至术后的（9.85±1.35）mU/L（P＜0.01）。术后ISI由术前的-4.1±0.2升至-3.6±0.4,而HOMA-IR由术前的5.5±2.1降低至3.3±0.6,与术前比较差异均有统计学意义（P＜0.01）。血清瘦素自术前（14.0±9.88）μg/L降至术后（10.68±6.04）μg/L（P＜0.05）,血清TNF-α自术前（381.6±69.5）ng/L降至术后（325.3±48.7）ng/L（P＜0.05）。
结论：脾切除门奇静脉断流术能缓解乙肝后肝硬化门静脉高压症患者胰岛素抵抗,改善病肝糖代谢紊乱。

     

结直肠癌患者手术前后循环DNA 水平的变化及其意义

目的：探讨结直肠癌患者手术前后循环DNA水平的变化及其临床意义。方法：检测42例结直肠癌患者术前、术后3,14,30 d循环DNA水平,并检测同期14例健康体检者循环DNA水平作为对照。结果：结直肠癌患者术前循环DNA水平明显高于健康人[（92.25±46.88）ng/mL vs.（22.14± 16.16）ng/mL]（P<0.01）;结直肠癌术前循环DNA水平在不同年龄、性别、肿瘤部位分组间差异无统计学意义（P=0.293,P=0.244,P=0.135）。结直肠癌患者术后3 d循环DNA水平达（114.95±62.41）ng/mL,较术前明显升高（P<0.01）,但在术后14,30 d分别为（38.50± 37.71）ng/mL与（31.69±41.48）ng/mL,明显低于术前（均P<0.01）。结论：循环DNA水平在结直肠癌患者中升高,且术后早期一过性进一步升高,随后明显下降。循环DNA水平有望成为结直肠癌术后监测肿瘤状态和评价疗效的标志物。

     

SELENBP1在结直肠癌中的表达及其与肿瘤分化的关系

目的：通过蛋白质组学技术筛选出结直肠癌（CRC）组织中差异表达最显著的蛋白，并探讨其与CRC疾病特征的关系。方法：收集83例CRC患者手术标本，包括患者的CRC组织，正常大肠黏膜组织，转移的淋巴结以及部分患者同时长有的大肠良性息肉。用二维差异凝胶电泳（2D DIGE）及基质辅助激光解析飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）对新鲜的CRC与正常黏膜组织以行蛋白质组学分析。找出兴趣蛋白后，用Western blot法在新鲜的CRC与正常黏膜组织，以及不同的CRC细胞株中验证；用免疫组化检测石蜡包埋的CRC、正常黏膜、良性息肉和转移淋巴结组织中该蛋白的表达。用Western blot法检测CRC细胞株在丁酸钠（NaB）诱导分化后该蛋白的表达改变。结果：2D-DIGE分析和MALDI-TOF-MS鉴定结果显示，CRC组织中硒结合蛋白1（SELENBP1）表达丰度比正常黏膜组织明显降低2.54倍（P<0.01）。Western blot示，CRC组织中SELENBP1的表达水平明显低于其配对的正常黏膜组织[（0.76±0.37） vs. (1.46±0.56）]（P<0.001），SELENBP1的表达在CRC细胞株中普遍降低。免疫组化示，SELENBP1的表达评分在CRC组织与正常黏膜组织中分别为1.25±0.78和2.02±0.77，组间差异有统计学意义（P<0.001）；在高、中、低分化的CRC组织中分别为1.75±0.53，1.29±0.41，0.89±0.49，组间差异有统计学意义（P<0.05）；在不同分期的CRC组织间、良性息肉与正常黏膜间、转移淋巴结与其配对的原发癌间，差异均无统计学意义（均P>0.05）。各CRC细胞株经NaB分化诱导后，SELENBP1表达均明显增高（均P<0.05）。结论：CRC组织SELENBP1表达降低，SELENBP1表达降低与CRC低分化程度有关，但与疾病进展及淋巴结转移无关。

     

microRNA 在肝细胞癌发生发展和诊治中的作用

microRNA（miRNA）是一类高度保守的内源性非编码小分子单链RNA,通过与靶mRNA完全或部分互补结合,导致其裂解或转录后翻译抑制,调控基因表达,参与细胞增殖、分化、凋亡等多个重要生物学过程,同时具有癌基因和抑癌基因的作用。近年来研究发现,miRNA在肝细胞癌（HCC）的发生发展和诊治中起重要作用。笔者就该领域的研究现状作一综述。

     

二氢杨梅素对肝癌细胞黏附、侵袭及迁移的抑制作用及机制

目的：研究二氢杨梅素（DHM）对肝癌细胞黏附、侵袭和迁移能力的影响及其可能机制。 方法：用不同浓度DHM处理肝癌MHCC97L细胞后,分别检测细胞的黏附能力、迁移与侵袭能力,以及E-cadherin、MMP-2、MMP-9和VEGF蛋白表达。 结果：与空白对照细胞比较,DHM处理后的MHCC97L细胞黏附力明显降低、侵袭与迁移力明显减弱（均P<0.05）;E-cadherin表达明显上调,而MMP-9、VEGF蛋白表达明显下调的水平（均P<0.05）,但MMP-2蛋白的表达无明显改变（均P>0.05）。 结论：DHM可能通过调控E-cadherin、MMP-9和VEGF蛋白的表达抑制肝癌细胞的黏附、迁移和侵袭。     

miRNA-639在乳腺癌中表达及其意义

目的：探讨miRNA-639（miR-639）在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌生长、侵袭及转移的关系。 方法：采用荧光定量PCR方法检测miR-639在60例乳腺癌组织（转移性乳腺癌30例,非转移性30例）与30例癌旁组织、以及人乳腺癌MD231细胞与MCF-7细胞中的表达;分析miR-639表达水平与乳腺癌患者临床病理特征关系;分别通过CCK-8实验、细胞划痕实验、Boyden小室实验检测miR-639在乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。 结果：miR-639的表达水平在乳腺癌组织中明显高于癌旁组织、在转移性乳腺癌组织中明显高于非转移性乳腺癌组织、在高侵袭性MD231细胞中明显高于低侵袭性MCF-7细胞,差异均有统计学意义（均P<0.05）。在各项临床病理因素中,miR-639的表达与仅乳腺癌患者的M分期有关（P<0.01）。转染miR-639抑制物后,MD231细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显降低,而转染miR-639后,MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显升高（均P<0.05）。 结论：miR-639在乳腺癌中表达升高,且乳腺癌的增殖、迁移和侵袭能力随miR-639的表达水平升高而增加。

     

肝细胞肝癌中uPA及vimentin蛋白的表达及意义

目的：探讨uPA及vimentin在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及其临床病理意义。方法：应用免疫组化法检测HCC及其癌旁组织（88例）与正常肝组织（8例）中uPA及vimentin的表达情况,并分析两者与临床病理特征的关系及两者表达的相关性。结果：在HCC组织中uPA及vimentin蛋白阳性表达率分别为63.6%（56/88）和72.7%（64/88）,两者均明显高于癌旁组织（27.3%和15.9%）和正常肝组织（12.5%和12.5%）（均P<0.0125）;uPA和vimentin在HCC中的表达与门静脉癌栓及肝被膜浸润有关（P<0.05）,且两者在HCC中的表达互呈正相关（r=0.227,P=0.034）。结论：在HCC中,uPA和vimentin的表达呈正相关,且两者的阳性表达与患者不良临床特征有关。

     

胰腺血管活性肠肽瘤1例报告并国内文献复习

目的：探讨胰腺血管活性肠肽瘤（VIP瘤，VIPoma）诊断和治疗方法。方法：报告2013年1月遵义医学院附属医院收治的1例VIPoma，并检索1979—2013年国内文献，取其中资料相对完整的34例，对35例VIPoma临床表现、实验室检查、影像学检查、肿瘤位置、大小及有无转移、手术方式、病理学检查和随访资料进行临床分析。结果：周期性发作的分泌性腹泻、低钾血症、低胃酸或无胃酸分泌是本病的主要临床表现，血浆VIP水平增高具有诊断价值，经生长抑素或手术治疗后，水泻缓解或停止，血钾恢复正常，血浆VIP 明显下降。采用手术切除、射频消融、化疗、肝移植等治疗方法对于肝转移者均有效果。结论：VIPoma 诊断依赖于典型的临床症状和血浆VIP测定；B 超及CT检查是胰腺VIPoma定位诊断的可靠方法。生长抑素可缓解腹泻，手术切除为胰腺VIPoma有效治疗手段，姑息性切除亦可改善患者生活质量，延长存活时间。

     

microRNA-200c在胰腺癌干细胞中的表达及作用

目的：探讨microRNA-200c（miRNA-200c）在胰腺癌干细胞中的表达及作用。方法：应用流式细胞术在人胰腺癌PANC-1细胞中以CD24+CD44+ESA+为标记物分选胰腺癌干细胞,并通过NOD/SCID小鼠移植瘤实验验证其肿瘤干细胞特性;分别用RFQ-PCR法Transwell试验检测PANC-1细胞、胰腺癌干细胞以及转染miRNA-200c前体片段或阴性对照序列的胰腺癌干细胞的miRNA-200c表达与侵袭能力。结果：PANC-1细胞中分选出CD24+CD44+ESA+细胞（占0.8%）具有肿瘤干细胞特性,其在小鼠皮下移植后的移植瘤体积明显大于同期移植的PANC-1细胞[（1 725.14±261.29）mm3 vs.（479.65± 99.67）mm3,P<0.05];胰腺癌干细胞中miRNA-200c的表达量明显低于PANC-1细胞（0.15±0.01 vs. 1.00±0.09,P<0.05）,平均穿膜细胞数明显多于PANC-1细胞[（321±7.62）个vs.（70±16.47）个,P<0.05],但转染miRNA-200c前体片段后,胰腺癌干细胞中miRNA-200c表达量明显升高,平均穿膜细胞数明显减少（P<0.05）。结论：胰腺癌干细胞中miRNA-200c的表达降低,miRNA-200c具有抑制胰腺癌干细胞生长及侵袭力的作用。

     

奥曲肽诱导人结肠癌细胞凋亡与细胞周期的影响及机制

目的:探讨奥曲肽诱导人结肠癌细胞凋亡与细胞周期的影响及机制。方法:奥曲肽、GSK-3β抑制剂Li Cl单独或联合作用于人结肠癌SW480细胞后,用流式细胞术检测SW480细胞的凋亡与细胞周期,以及用DNA凝胶电泳实验进一步验证细胞凋亡;Western blot检测SW480细胞中GSK-3β、p-GSK3-β(Tyr216)及p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达。结果:与未处理的空白对照组SW480比较,奥曲肽处理SW480细胞后,细胞凋亡率与G0/G1细胞明显升高,凝胶电泳出现典型的"梯形"DNA条带,总GSK-3β蛋白与p-GSK3β(Tyr216)表达明显上调,而p-GSK3β(Ser9)蛋白表达明显下降(均P<0.05);Li Cl单独作用对SW480细胞的凋亡与细胞周期无明显影响(均P>0.05),但与奥曲肽联合作用能明显削弱奥曲肽对SW480的促凋亡与细胞周期阻滞作用(均P<0.05)。结论:奥曲肽能有效诱导SW480细胞凋亡与细胞周期阻滞,该作用可能与其上调GSK-3β蛋白的表达,并调节GSK-3β蛋白的磷酸化水平有关。     

倾向得分匹配法对两种方法治疗胆总管结石的疗效再评价

目的：再评价腹腔镜胆总管探查术与开腹手术治疗胆总管结石的疗效。 方法：收集我院2012年1月—2014年1月手术治疗的92例胆总管结石患者临床资料,其中34例行腹腔镜胆总管探（腹腔镜组）,58例行开腹手术（开腹组）,采用倾向得分匹配法（PSM）均衡组间混杂因素的影响,比较匹配后两组患者的临床指标。 结果：经PSM法成功匹配30对患者,所有基线资料在组间分布均衡。两组患者的手术时间差异无统计学意义（P=0.190）,腹腔镜组术中出血量明显少于开腹组,且胃肠功能恢复时间及住院时间也明显短于开腹组,差异均有统计学意义（均P<0.05）;两组患者术后并发症发生率差异无统计学意义（P>0.05）。 结论：腹腔镜胆总管探查术治疗胆总管结石较开腹手术具有微创,术中失血少,术后恢复快,住院时间短,再评价结果与以往研究一致。