雷公藤红素对IL-1β致软骨终板退变的影响

目的通过IL-1β与雷公藤红素体外刺激小鼠椎间盘软骨终板细胞,探讨雷公藤红素能否抑制IL-1β对软骨终板细胞的影响。方法不同浓度的雷公藤红素刺激软骨终板细胞,CCK-8法检测不同时间点其对软骨终板细胞增殖作用的影响;实验共分3组:空白对照组(无血清DMEM培养基),IL-1β诱导组(IL-1β5 ng/mL共同孵育2 h),雷公藤红素干预组(经IL-1β5ng/mL共同孵育2 h后,再以雷公藤红素共同孵育24 h)。分组处理后,ELISA法检测MMP-1、MMP-3的水平,同时荧光定量PCR检测蛋白多糖及II胶原的mRNA表达水平。结果与空白对照组相比,IL-1β刺激软骨终板细胞2 h后,MMP-1、MMP-3表达水平明显增高,雷公藤红素可抑制细胞中IL-1β介导的MMP-1、MMP-3的表达,同时IL-1β明显抑制软骨终板细胞的蛋白多糖及II胶原mRNA的表达,而雷公藤红素可上调IL-1β诱导的蛋白多糖及II胶原mRNA的表达水平。结论雷公藤红素能够抑制IL-1β介导的软骨终板退变进程,上调蛋白多糖及II胶原mRNA的表达水平,可能在防治椎间盘退变性疾病中发挥重要作用。     

穿山龙总皂苷对大鼠滑膜细胞株VEGF与AP-1的影响

目的观察含穿山龙总皂苷血清对大鼠滑膜细胞株RSC 364血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA和激活蛋白 1（AP 1）活性的影响,探讨其抑制血管新生的作用机制。方法制备含穿山龙总皂苷和雷公藤（阳性对照）血清。将培养好的大鼠滑膜细胞株RSC 364分为空白对照组、模型对照组、含雷公藤多苷血清组和含穿山龙总皂苷血清组,培养1 h,除空白对照组外,其余各组加入IL 17和TNF α（均为10 μg·L－1）共同孵育24 h。采用实时荧光定量PCR方法检测各组细胞VEGF mRNA表达,凝胶电泳迁移率实验法（EMSA）检测各组细胞核蛋白提取物AP 1 的DNA结合活性。结果与空白对照组比较,模型对照组VEGF mRNA表达水平及AP 1 DNA结合活性显著增高（P＜0.05,P＜0.01）;与模型对照组比较,含雷公藤多苷血清组、含穿山龙总皂苷血清组VEGF mRNA表达水平及AP 1 DNA结合活性均降低（P＜0.05）,且两组间比较,差异无统计学意义。结论含穿山龙总皂苷血清可以抑制VEGF mRNA表达水平及AP 1 DNA结合活性,其机制可能是通过抑制转录因子AP 1来调控血管新生关键因子VEGF产生,进而抑制血管新生。     

细胞因子信号转导抑制因子3抑制血小板衍生生长因子-BB诱导的血管平滑肌细胞炎症反应的作用及其机制

目的 探讨细胞因子信号转导抑制因子3( SOCS3)抑制血管平滑肌细胞炎症反应的作用及机制.方法 用携带大鼠SOCS3基因的腺病毒(pYrAd-rSOCS3)转染血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激的大鼠动脉血管平滑肌细胞.实时定量聚合酶链反应(Real time-PCR)检测SOCS3、白细胞介素(IL) -1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表达.Western blot检测SOCS3、信号转导及转录激活因子3(STAT3)、P-STAT3、IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1及ICAM-1的的蛋白表达.结果 PDGF-BB刺激血管平滑肌细胞24h后,SOCS3、STAT3、P-STAT3、IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1及ICAM-1表达均上调;pYrAd-rSOCS3转染血管平滑肌细胞后再用PDGF-BB刺激,其SOCS3表达进一步上调,但STAT3、P-STAT3、IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1及ICAM-1表达明显下调.结论 上调血管平滑肌细胞SOCS3表达通过负反馈调节酪氨酸蛋白激酶(JAK) -STAT3信号通路,抑制STAT3的激活及磷酸化而下调炎性细胞因子表达.     

健肾片对IgA肾病模型大鼠肾组织TGF-β1含量及其mRNA表达的影响

目的:探讨健肾片治疗IgA肾病的作用机理.方法:采用口服牛血清白蛋白和葡萄球菌肠毒素B感染的复合方法,复制大鼠IgA肾病模型,并分别给予健肾片和雷公藤多甙片治疗,检测各组大鼠肾组织TGF-β1含量及其mRNA表达.结果:健肾片可明显抑制IgA肾病模型肾组织中TGF-β1的分泌及其mRNA表达.结论:健肾片抑制IgA肾病模型肾组织的TGF-β1分泌作用可能是其治疗IgA肾病的作用机理之一.     

外源性白细胞介素-10对梗阻性黄疸大鼠肝再生的作用

目的 探讨外源性白细胞介素-10(IL-10)对梗阻性黄疸大鼠肝再生的作用.方法 雄性Wistar大鼠随机分为假手术(SO)组、梗阻性黄疸(CJ)组和IL-10组.OJ组和IL-10组结扎切断胆总管建立梗阻性黄疽模型,SO组仅游离胆总管.IL-10组术后第1天开始每天腹腔内注射IL-10(4 μg/kg).实时荧光定量PCR法检测肝组织转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA表达,免疫组织化学法检测肝组织增殖细胞核抗原(PCNA)标记指数,并检测血清总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)含量.结果 胆总管结扎术后3d,与SO组相比,OJ组大鼠肝组织TGF-β1 mRNA表达、PCNA标记指数及血清转氨酶均明显升高(P＜0.05).胆总管结扎术后7d,与SO组相比,OJ组大鼠上述各项实验指标均进一步升高(P＜0.05).应用IL-10治疗后,与OJ组相比,IL-10组大鼠肝组织TGF-β1 mRNA表达及血清转氨酶均明显降低,而肝组织PCNA标记指数明显升高(P＜0.05).结论 外源性IL-10可通过抑制肝组织TGF-β1的表达而促进梗阻性黄疽大鼠肝再生并改善受损肝功能.     

中药活性成分抗自身免疫性关节炎作用的研究

目的探讨中药活性成分对胶原诱导的关节炎(collagenⅡ-induced arthritis,CIA)鼠关节滑膜细胞增殖的影响,为自身免疫性关节炎的治疗提供一定的依据。方法采用MTT法检测不同中药活性成份(雷公藤甲素、瑞香素、紫杉醇、紫草素和槲皮素)对CIA鼠关节滑膜细胞增殖的影响。选用抑制效果好的中药活性成份进一步探讨其对关节滑膜细胞的作用机制,并采用Western Blot检测中药活性成份对细胞促凋亡基因Fas L、p53、DR3和PDCD5表达的影响。结果 5种中药活性成分不同浓度时对CIA鼠关节滑膜细胞的增殖均有抑制作用,并均呈现剂量依赖性,其中抑制效果较好的是瑞香素和雷公藤甲素。瑞香素组和雷公藤甲素组DR3、Fas L、p53表达水平均明显高于对照组(P0.05)。瑞香素组中促凋亡基因中p53的表达明显高于雷公藤甲素组(P0.05),但2组DR3、PDCD5、Fas L差异无统计学意义(P0.05)。结论雷公藤甲素、瑞香素、紫杉醇、紫草素和槲皮素对自身免疫性关节炎大鼠关节滑膜细胞的增殖均有抑制作用,并均呈现剂量依赖性,抑制效果较好的是瑞香素和雷公藤甲素。瑞香素和雷公藤甲素均可促进自身免疫性关节炎鼠关节滑膜细胞中促凋亡基因DR3、Fas L和p53的表达,从而促进滑膜细胞凋亡,抑制其增殖。     

Smad3小分子干扰RNA在乳腺癌细胞中抑制转化生长因子-β诱导的基质金属蛋白激酶-9的表达

目的 观察应用Smad3特异性小分子干扰RNA(siRNA)在乳腺癌MDA-MB-231细胞中对MMP-9表达的影响.方法 化学合成Smad3 siRNA,并将其转染到MDA-MB-231细胞后行转化生长因子(TGF)-β(1μg/L)刺激.24 h后利用萤光素酶报告基因法测定Smad结合转写因子(4xSBE)的活性;48 h后应用Western blot法测定Smad3、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白水平表达;24 h后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法观察MMP-9 mRNA水平表达.结果 与对照组比较,Smad3 siRNA有意义地抑制Smad3蛋白的表达(0.5±0.1比1.0±0.2).Smad3 siRNA有意义地抑制TGF-β诱导的4xSBE活性(5.2±0.3比1.0±0.1;P＜0.05).Smad3蛋白的表达(0.5±0.1比1.0±0.2)与对照组比较TGF-β刺激组明显激活了MMP-9 mRNA和蛋白水平的表达(2.4±0.3比1.0±0.1和1.8±0.4比1.0±0.2),而Smad3 siRNA有意义地抑制了TGF-β激活的MMP-9mRNA和蛋白水平的高表达(1.3±0.2比2.4±0.3和1.1±0.2比1.8±0.4).结论 构建的Smad3siRNA能够抑制MDA-MB-231细胞中TGF-β诱导的MMP-9的表达.     

白细胞介素1β对大鼠肝细胞毒性作用的细胞内信号传导途径

目的研究白细胞介素-1β(IL-1β)对原代培养大鼠肝细胞细胞毒性作用的细胞内信号传导机制. 方法使用雄性Wistar大鼠,原位胶原酶灌注分离肝细胞.应用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,Wes tern Blot方法分析c-Jun N末端激酶(JNK)、p38激酶的表达,凝胶电泳移动抑制实验检测激活物蛋白-1(AP-1)的结合活性. 结果 IL-1 β促进原代培养大鼠肝细胞LDH释放(IL-1β刺激组与对照组LDH活性分别为21.9%±3.6% 和11.0%±1.8%,P＜0.01);IL-1β通过激活JNK途径,激活转录因子AP-1,对原代培养大鼠肝细胞产生细胞毒性作用,而同时激活的p38激酶途径对这一过程起负性调节作用. 结论 IL-1β通过激活JNK途径,激活转录因子AP-1,对原代培养大鼠肝细胞产生细胞毒性作用.     

转化生长因子-β1对人软骨细胞基质金属蛋白酶-1mRNA及其阻滞剂mRNA表达的影响

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对人透明软骨细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其阻滞剂T(IMP-1)mRNA表达的作用及相关意义,更好地理解骨关节炎软骨损伤的相关机制。方法TGF-β1作用于传代培养的人软骨细胞12h,浓度分别为1ng/mL、10ngm/L、100ng/mL;上述不同浓度TGF-β1与白介素-1β(IL-1β)10ng/mL组成联合作用组,继续培养12h。应用逆转录PCRR(TP-CR)方法及实时荧光定量方法(FQP-CR),检测TGF-β1及其与IL-1β联合作用于传代培养的人透明软骨细胞MMP-1、TIMP-1mRNA表达的含量。结果正常对照组透明软骨细胞可见MMP-1、TIMP-1mRNA扩增产物,而实验组TGF-β11ng/mL、10ng/mL、100ngm/L作用于透明软骨细胞12h后,MMP-1mRNA表达逐渐降低,TIMP-1mRNA表达逐渐增高;TGF-β1与IL-1β联合作用后,随着TGF-β1浓度的升高,MMP-1mRNA表达逐渐降低,TIMP-1mRNA表达逐渐增高,各组之间差异有显著性意义(P<0.05)。提示TGF-β1与MMP-1、TIMP-1mRNA表达之间存在剂量依赖关系。结论不同浓度TGF-β1按照剂量依赖方式抑制人软骨细胞MMP-1mRNA基因的表达,刺激人软骨细胞TIMP-1mRNA基因表达;TGF-β1具有对抗IL-1β对人软骨细胞MMP-1、TIMP-1mRNA表达的作用,也呈现剂量依赖关系。研究结果对揭示骨关节炎的发病机理,指导其治疗具有积极意义。     

白介素-1β诱导胃上皮细胞GES-1表达肠道特异性标志物

目的 观察白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养的人胃黏膜上皮GES-1细胞中肠道特异性标志物尾侧型同源转录因子-1(CDX1)和肠道黏蛋白-2(MUC2)表达的诱导作用,探讨其作用机理.方法 通过不同浓度及不同作用时间的IL-1β刺激人胃黏膜上皮GES-1细胞,采用实时定量PCR法检测CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达水平;并使用NF-κB抑制剂PDTC预处理GES-1细胞,检测PDTC对IL-1β诱导的CDX1 mRNA和MUC2 mRNA表达水平的影响.结果 正常情况下人胃黏膜上皮GES-1细胞不表达CDX1 mRNA和MUC2 mRNA,而IL-1β可以诱导GES-1细胞中CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达,该作用在一定浓度范围内呈现剂量依赖性(P＜0.05);IL-1β作用8 h时,CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达达到峰值(P＜0.05),随后表达逐渐降低.经NF-κB抑制剂PDTC预处理后的GES-1细胞,CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达水平明显下降(P＜0.05). 结论 IL-1β可能通过NF-κB信号通路促进人胃黏膜上皮细胞中CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表达,在胃黏膜肠上皮化生中发挥作用.     

慢病毒介导白介素-1β siRNA对脊髓钝挫伤大鼠运动功能的影响

目的 :观察白介素-1β(IL-1β)小干扰RNA(si RNA)对脊髓钝挫伤(spinal cord contusion,SCC)大鼠运动功能的影响,并探讨其相关机制。方法:98只雌性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、单纯SCC组(SCC组)、空载体组(Vector组)和慢病毒干扰组(IL-1βSH组)。IL-1βSH组和空载体组术前48h在拟损伤脊髓节段局部注射IL-1βsi RNA或空载体。Sham组大鼠只剥离椎板不实施SCC,其余3组大鼠均造成T10SCC。每组各取大鼠5只,于术前当天以及术后1d、3d、5d、7d、14d采用Basso BeattieBresnahan(BBB)评分评估大鼠后肢运功功能。Sham组术后28d处死大鼠,取T10段脊髓,用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(qRT-PCR)检测IL-1β和γ-突触核蛋白(SNCG)mRNA相对表达水平。SCC组于术后6h、12h、1d、3d、5d、7d、14d取损伤段脊髓,检测IL-β和SNCG mRNA相对表达水平。Vector组和IL-1βSH组在术后7d取损伤段脊髓检测SNCG mRNA相对表达水平;在术后3d、7d、28d行心脏灌注、固定损伤脊髓,用免疫组织化学染色技术观察SNCG的免疫阳性细胞计数,并测定平均积分光密度(IOD)值。应用GeneMANIA分析IL-1β和SNCG的理论关系。结果:Sham组各时间点BBB评分均为21分,SCC后,SCC组评分各时间点均显著低于Sham组(P0.05),IL-1βSH组评分在3d、5d、7d、14d时均显著高于Vector组(P0.05)。SCC组术后6h、12h、7d时IL-1βmRNA表达量较Sham组显著性上调(P0.05),SNCG mRNA表达量较Sham组显著性下调(P0.05)。术后7d,IL-1βSH组SNCG mRNA表达水平显著高于Vector组(P0.05)。IL-1βSH组损伤脊髓前角SNCG免疫阳性细胞数和IOD值在术后3d、7d、28d均优于Vector组,差异具有统计学意义(P0.05)。GeneMANIA分析发现IL-1β和SNCG通过Cfd存在亚细胞定位关系。结论:IL-1βsi RNA可改善SCC大鼠后肢运动功能,上调SNCG蛋白和mRNA的表达,这可能与调节神经元可塑性、抑制线粒体凋亡途径有关。     

脾切除术对大鼠海马tau表达的影响

目的 评价脾切除术对大鼠海马tau表达的影响.方法 SD大鼠105只,随机分为3组,正常对照组(A组,n=15)不给予任何处理,麻醉组(B组,n=45)仅吸入1.5%异氟醚2 h,手术+麻醉组(C组,n=45)吸入1.5%异氟醚(吸入2 h)麻醉下实施脾切除术.B组和C组分别于麻醉后或术后1、3、7 d时处死15只大鼠,取海马组织,测定海马IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-1β、TNF-α、总tau、苏氨酸第205位点磷酸化tau(pT205 tau)、丝氨酸第396位点磷酸化tau(pS396 tau)、总糖原合成酶-3β(GSK-3β)和磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)的表达水平.结果 与A组比较,B组各时点IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-1β、TNF-α、总tau、pT205 tau、pS396 tau、GSK-3β和p-GSK-3β的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),C组术后IL-1βmRNA、TNF-α mRNA、IL-1β、pT205 tau和pS396 tau的表达上调,p-GSK-3β表达下调(P＜0.05或0.01).结论 手术创伤可导致大鼠海马tau磷酸化,其机制与手术创伤诱发炎性反应,从而激活GSK-3β有关.     

神农33对急性肺损伤大鼠白介素-1 β基因表达的影响

目的:观察白介素-1 β(IL-1 β)在内毒素(LPS)所致急性肺损伤(ALI)发病过程中的作用及神农33(SN33)注射液对ALI大鼠的保护作用.方法:Wistar大鼠尾静脉注射LPS,建立ALI模型.分别采用ELISA和Northern Blotting方法检测不同时相血清中IL-1 β含量及肺组织IL-1 β mRNA水平的变化;同时以地塞米松为对照,观察SN33对IL-1 β基因表达的影响.光镜、电镜观察大鼠肺病理形态学变化.结果:LPS诱发大鼠ALI过程中血清IL-1β水平显著高于正常对照组(P＜0.01),峰值为LPS攻击后2 h;肺组织IL-1 β mRNA表达明显增高,峰值为LPS攻击后1 h;以SN33保护的大鼠,IL-1 β含量和mRNA表达均明显低于相应时相LPS攻击组;且肺损伤程度减轻.结论:IL-1 β在LPS诱导的ALI过程中起着重要作用;SN33注射液可以抑制IL-1β的释放和表达,对肺脏有一定的保护作用.     

补肾强骨方含药血清对滑膜成纤维细胞增殖及PCNA和Bcl-2表达的影响

目的:探讨补肾强骨方是否可以抑制类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞增殖及PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA表达。方法:制作补肾强骨方含药血清,体外分离培养类风湿关节炎患者的滑膜细胞,并鉴定、传代。实验分组:含20%空白血清组、20%补肾强骨方高剂量含药血清组、20%补肾强骨方低剂量含药血清组、20%雷公藤多苷片含药血清组。以雷公藤多苷片含药血清组含药血清作为阳性对照,将20%浓度的含药血清加入培养传代的第3代滑膜细胞,继续培养。观察药物对滑膜细胞增殖及PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA表达的影响。结果:与空白对照组相比,补肾强骨方含药血清具有抑制滑膜成纤维细胞增殖的作用(P<0.0001),且高剂量更显著。与空白对照血清相比,补肾强骨方含药血清均能显著抑制滑膜成纤维细胞PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA表达(P<0.0001)。结论:补肾强骨方含药血清能够显著抑制滑膜成纤维细胞增殖,可能是通过调节PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA表达来实现的。     

桃核承气汤对LPS诱导血管内皮细胞炎症因子及TLR4、TRIB3表达的影响

目的:观察桃核承气汤对脂多糖(LPS)致体外培养血管内皮细胞炎症因子及TLR4、TRIB3表达的影响。方法:SD大鼠桃核承气汤灌胃制备含药血清。LPS诱导主动脉血管内皮细胞损伤制备损伤模型,分为正常组(生理盐水灌胃血清)、正常加药组(桃核承气汤含药血清)、模型组(LPS+生理盐水灌胃血清)、模型加药组(LPS+桃核承气汤含药血清),ELISA检测比较各组IL-1β、IL-6、TGF-β蛋白表达水平,qPCR检测各组IL-1β、IL-6、TGF-β、TLR4、TRIB3的mRNA相对表达量。结果:与正常组比较,模型加药组IL-1β表达显著升高、IL-6、TGF-β表达升高,与模型组比较,其余三组IL-1β、IL-6蛋白明显抑制,模型加药组TGF-β蛋白表达显著上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,模型加药组IL-1βmRNA表达抑制,其余三组IL-6、TLR4的mRNA表达下降,而TGF-βmRNA表达升高,正常组和正常加药组TGF-βmRNA的降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:桃核承气汤可抑制炎症因子IL-1β、IL-6表达,促进抗炎因子TGF-β表达,发挥对血管内皮细胞的保护作用,TLR4信号通路可能参与其中。     

雷公藤多甙对克罗恩病大鼠模型治疗作用的机制研究

目的：探讨雷公藤多甙对实验性克罗恩病（CD）大鼠模型的治疗作用及其可能的作用机制。方法：2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇灌肠制备CD模型。将27只大鼠随机分为模型组、雷公藤多甙治疗组、强的松治疗组。观察大鼠一般情况、体质量变化、以及结肠大体和组织学病理。RT-PCR检测结肠组织TGF-β1，Smad3，Smad4和Smad7 mRNA的表达，Western blot检测TGF-β1及磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）蛋白的表达。结果：两个治疗组大鼠的疾病症状及体质量变化幅度均明显轻于模型组，结肠大体及组织病理学评分均明显低于模型组（均P<0.05）。与模型组比较，雷公藤多甙治疗组和强的松治疗组结肠组织Smad3与Smad4的mRNA表达明显降低，而Smad7的mRNA表达明显升高（均P<0.05）；TGF-β1和p-Smad2/3蛋白的表达均明显降低（均P<0.05），且以上变化雷公藤多甙治疗组均较强的松治疗组明显。结论：雷公藤多甙对善CD有治疗的作用，其机制可能干预TGF-β1/Smad信号通路有关。

     

钩藤碱通过Nrf2/HO-1信号通路抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤

目的 探讨钩藤碱对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡、氧化应激和炎症等损伤的影响及其分子机制。方法 将大鼠软骨细胞分为对照组、IL-1β(10 ng/mL)组、IL-1β+钩藤碱(5、25、50μmol/L)组;MTT实验检测钩藤碱对细胞活性的影响;Western blot方法检测Bcl2、Bax、MMP3、MMP13、CollagenⅡ、Nrf2和HO-1蛋白水平;ELISA方法检测炎性因子PGE2、COX-1、TNF-α和ROS水平;试剂盒检测MDA水平。结果 与对照组相比,IL-1β组细胞活性明显抑制(P<0.05);与IL-1β组相比,钩藤碱25μmol/L组和50μmol/L组细胞活性增强(P<0.05)。与对照组相比,IL-1β组Bcl2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加(P<0.05);与IL-1β组相比,钩藤碱25μmol/L组和50μmol/L组Bcl2蛋白表达增加,钩藤碱50μmol/L组Bax蛋白表达减少(P<0.05)。与对照组相比,IL-1β组MMP13和MMP3蛋白表达上调,CollagenⅡ蛋白表达下调(P<0.05);与IL-1β组...     

雷公藤内酯醇对AngⅡ介导的肾小球系膜细胞核因子-κB活化及MCP-1表达的影响

目的：观察不同剂量雷公藤内酯醇对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）介导的肾小球系膜细胞（GMC）核因子-κB（NF-κB）活化及单核细胞趋化因子-1（MCP-1）表达的影响，探讨雷公藤内酯醇抑制肾小球系膜细胞炎症因子表达的可能机制。方法：分离培养大鼠GMC，用10^-6mol／L AngⅡ刺激GMC，将培养的大鼠GMC随机分为5组：正常培养对照组、AngⅡ刺激组、AngⅡ和3种不同浓度的雷公藤内酯醇共孵育组。分别采用酶联免疫激光扫描共聚焦显微镜、ELISA、RT—PCR法、Western Blot法，检测GMC内NF-κB p65核易位阳性率、细胞培养上清液中MCP-1水平、GMC内MCP-1 mRNA表达及ⅠκBα蛋白表达水平。结果：雷公藤内酯醇呈剂量依赖性下调AngⅡ介导的大鼠GMC内NF-κB p65水平，抑制AngⅡ诱导的大鼠GMC MCP-1及MCP-1 mRNA的表达，抑制AngⅡ诱导的大鼠GMC内ⅠκBα蛋白表达下调。结论：雷公藤内酯醇能够抑制AngⅡ诱导的大鼠GMC ⅠκB的磷酸化降解及NF—κB活化；抑制AngⅡ诱导的大鼠GMCMCP-1 mRNA表达MCP-1分泌。     

大鼠脊髓损伤后白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α基因表达的变化

目的 探讨大鼠脊髓损伤后白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的变化规律。方法 SD大鼠42只，随机分为7组，采用改良Allen's脊髓损伤打击模型，以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定伤段脊髓组织IL-1β、TNF-α mRNA的表达情况。结果 正常脊髓组织内存在IL-1β、TN-αmRNA的表达，脊髓损伤后IL-1β、TNF-αmRNA表达迅速增强，在伤后1h达到高峰。结论 IL-1β、TNF-α存在于正常的脊髓组织内，脊髓损伤后IL-1β、TNF-α表达迅速增强，提示协同参与了继发性脊髓损伤过程，并可能是损伤性因素。