生长激素和谷氨酰胺对脓毒症大鼠细胞因子和氨基酸代谢的影响

目的 探讨谷氨酰胺（Gln）联合生长激素（GH）对脓毒症大鼠肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1（IL-1）、IL-6、皮质醇及三甲基组氨酸（3MH）浓度和氨基酸代谢的影响。方法 79只SD大鼠，随机取其中10只设为对照组，另69只用盲肠结扎穿孔法建立腹腔感染、颈静脉置管肠外营养（PN）模型后，将其中存活超过6d的大鼠30只均分为3组：脓毒症组、Gln组和Gln＋GH组。第6d处死动物，取门静脉血，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清TNFα、IL-1、IL-6和皮质醇浓度；氨基酸自动分析仪检测血清氨基酸浓度；取大鼠趾长伸肌组织，采用高效液相色谱法检测骨骼肌组织中3-MH浓度。结果 血清TNFα、IL-1、IL-6及皮质醇浓度对照组均低于脓毒症组（P〈0．05，P〈0．01），Gln＋GH组及Gln组均低于脓毒症组（P〈0．05，P〈0．01），Gln＋GH组亦低于Gln组。与对照组相比，脓毒症组血清总氨基酸浓度升高（P〈0．05），尤以谷氨酸和支链氨基酸明显（P〈0．05），Gln浓度明显降低（P〈0．05）；Gln组和Gln＋GH组与脓毒症组相比，血清总氨基酸浓度降低（P〈0．05），尤以Gln＋GH组降低明显（P〈0．05），Gln浓度明显升高（P〈0．05）。骨骼肌组织中3-MH浓度以脓毒症组为最高，Gln组又高于Gln＋GH组（P〈0．01）。结论 添加GH和Gln的PN，能降低细胞因子水平，改善氨基酸代谢。     

肝硬化患者体内Gln,GSH,CD4/CD8水平测定

谷氨酰胺（Gln）是体内含量最丰富的氨基酸，在机体免疫应答、氧化应激、稳定内环境，保护细胞和肠屏障等方面有重要作用。肝硬化（Child B、C）患者不同程度存在代谢紊乱，体内的Gln水平下降，手术及其他创伤会加速Gln的消耗。因此我们系统检测肝硬化（Child B、C）患者体内Gln水平，为该类患者术后合理补充Gln，提供理论依据。     

术后应用α-酮戊二酸保护骨骼肌蛋白质合成和游离谷氨酰胺水平

骨骼肌组织是体内最大的游离氨基酸池。创伤后肌细胞内游离氨基酸变化特征为分解代谢。谷氨酸胺(Gln)和基础氨基酸浓度下降,支链氨基酸和芳香氨基酸浓度增加。肌内游离Gln浓度在创伤后12小时开始降低,第3天Gln最明显,给予不含Gln的全静脉营养(TPN)不能改善,TPN中加入α-酮戊二酸(AKG)可减少骨骼肌Gln的丢失,改善氮平衡。AKG可提供碳链骨架,有利于氮平衡和蛋白质合成。作者对21例择期胆囊切除患者,术后给予     

谷氨酰胺对人肺泡Ⅱ型上皮细胞热休克蛋白70表达的影响

目的评价谷氨酰胺对人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞热休克蛋白（HSP）70表达的影响。方法取人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞,在不含谷氨酰胺的DMEM培养液中孵育24h作为空白对照组（C组）,43℃孵育1h、37℃恢复4h作为阳性对照组（PC组）,不同浓度（2、4、8、12和16 mmol/L）谷氨酰胺的DMEM培养液中孵育24h作为不同浓度谷氨酰胺诱导组（Gln2组、Gln4组、Gln8组、Gln（12）组和Gln（16）组）,8mmol/L谷氨酰胺的DMEM培养液中孵育不同时间（1、2、6、12、24和48 h）作为不同时间谷氨酰胺诱导组（T1组、T2组、T3组、T4组、T5组和T6组）。分别采用RT-PCR和Western blot法检测HSP70 mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,PC组和不同浓度谷氨酰胺诱导组人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞HSPTO mRNA和蛋白的表达均升高,Gln8组HSP70 mRNA和蛋白表达水平高于Gln2组、Gln4组、Gln（12）组和Gln（16）组（P＜0．01）,而与PC组相比差异无统计学意义（P＞0．05）。与C组比较,PC组和不同时间谷氨酰胺诱导组HSP70 mRNA和蛋白的表达均升高,T5组HSP70 mRNA和蛋白表达水平高于T1组、T2组、T3组、T4组和T5组（P＜0．01）,而与PC组相比差异无统计学意义（P＞0．05）。结论谷氨酰胺可明显上调体外培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞HSP70 mRNA和蛋白的表达,并呈浓度和时间依赖性。     

离体肝脏常温下保存的实验研究

为了探索常温下（２２℃）保存离体肝脏的可能性，本实验以ＨＴＫ液为基础，氟碳乳剂为氧载体，脂肪乳剂为能量，常温下充氧持续灌注离体猪肝门静脉。定时取灌注液测量肝生化指标，观察肝细胞线粒体大小及密度。发现含氧载体灌注液中氨浓度下降，尿素浓度升高，线粒体损伤较轻；加入脂肪乳剂则能维持葡萄糖的浓度。各项指标与对照组比较差异有显著意义。说明利用氧载体（氟碳乳剂）为离体肝提供足够的氧，同时给予足够的能量（脂肪乳剂）时，离体肝脏就能在较高温度下较长时间（４０小时）地维持它的主要解毒功能——摄取氨合成尿素，同时亦可维持肝细胞线粒体的稳定性。可见常温下保存离体肝脏是可能的。     

川芎嗪改善高渗枸橼酸盐嘌呤溶液保存犬肾的效果

目的探讨一定浓度的川芎嗪对低温保存的犬肾的影响。方法分别以2～4℃加入川芎嗪（终浓度为4mg／L）的新型高渗枸橼酸盐嘌呤溶液（HC-A Ⅱ液，实验组）、HC-A Ⅱ液（HC-AⅡ液组）及UW液（UW液组）灌注肾脏，然后进行组织病理学观察及细胞凋亡测定。将按上述方法保存48、72h的肾脏进行自体移植，术后观察血肌酐浓度、恢复正常的时间以及受者的存活情况。结果体外保存实验中，在保存时间不超过48h时，三个组的组织形态基本相似，但保存72h后，实验组和UW液组肾组织的病理改变明显轻于HC-A Ⅱ液组，细胞凋亡指数也明显低于HC-A Ⅱ液组（P〈0．05），实验组和UW液组的上述指标相比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。经保存的肾脏自体移植后，单纯HC-A Ⅱ液保存72h者有2只犬（2／5）因肾功能衰竭死亡；不论是保存48h还是72h，采用含川芎嗪的HC-AⅡ 液和UW液保存者移植后血肌酐水平明显低于单纯HC-A Ⅱ液保存者（P〈0．05），其肾功能恢复正常的时间也较单纯HC-AⅡ液保存者缩短（P〈0．05）。结论HCA-Ⅱ液中加入一定浓度的川芎嗪能改善肾脏低温灌注保存的效果。     

强化肠外营养治疗对外科重症病人影响的研究

目的 探讨生长激素（GH）联合谷氨酰胺（Gln）的强化肠外营养（PN）治疗对外科重症病人机体组成及血清氨基酸谱变化的影响。方法 对2008年2~8月上海交通大学附属第六人民医院强化PN治疗的资料进行分析。选择30例外科重症病人观察PN前后人体组成：非脂群（FFM）、体脂群（FM）、细胞外水/总体水（ECW/TBW）比率以及血清氨基酸谱的变化。所有数据采用均数±标准差表示,利用SPSS11.5统计软件分析。结果 强化营养治疗较常规PN 的FFM增加, FM减少,且ECW/TBW的比率维持不变;血清中多种氨基酸含量降低,Gln含量升高。 结论 单纯PN支持,短期内较难纠正其骨骼肌的大量降解和体内液体的异常分布。强化营养治疗可以增加细胞对血中游离氨基酸的摄取和利用,改善细胞外液与细胞内液间的液体平衡。     

谷氨酰胺强化TPN对结直肠癌病人术后营养及免疫功能的影响

谷胺酰胺（Gln）是条件性必需氨基酸,占人体内游离氨基酸库的25%～60%,正常血浆中浓度为0.6～0.9 mmol/L.长期标准TPN营养支持由于缺乏Gln,易引起肠黏膜萎缩、通透性升高、肠道免疫功能障碍和肠道细菌异位等并发症,甚至导致肠源性败血症.本研究通过比较术后蛋白质合成、肝脏保护、免疫功能及胃肠道功能恢复影响的差异,探讨Gln强化的TPN在结直肠癌病人根治术后的作用.     

人体大隐静脉移植段内皮细胞保养的研究

目的 研究适用于临床的保护自体静脉移植段内皮细胞的液体，改善血管移植术成功率。方法 用配制的四种不同液体。分别在４℃，２８℃，３７℃条件下，浸泡保存人体大隐静脉移植段１小时，观察血管内皮细胞发生的形态学变化。结果 ４℃时Ｂ液，Ｐ液对内皮细胞损伤小，随着温度升高，Ｎ液，Ｂ液，Ｐ液对内皮细胞脆损伤加重，Ｅ液在３７℃时仍具有保护内皮细胞的作用，Ｎ液组内皮细胞损务重，结论 ４℃ＣＢ液，Ｐ液配制简单，对内皮     

谷氨酰胺治疗肠梗阻的疗效分析

目的：谷氨酰胺（Gln）对肠梗阻肠黏膜通透性及细菌移位的影响。方法：将80例肠梗阻患者随机分为对照组和治疗组。对照组给予禁食、胃肠减压、纠正水电解质和酸碱平衡紊乱,全胃肠外营养以及抗生素等常规治疗;治疗组在常规治疗基础上,全胃肠外营养液中加用Gln。比较两组患者入院时、治疗5 d、治疗10 d的常规指标（体质量、血糖、血清白蛋白、血清前白蛋白、血清转铁蛋白）、免疫学指标（CRP、外周血白细胞计数I、gAI、gMI、gG、TNF-ɑI、L-6）和肠黏膜通透性评价指标[外周血浆Gln浓度、尿乳果糖甘露醇比值（L/M）、外周血细菌DNA阳性率]。结果：治疗后两组血清白蛋白、血清前白蛋白、血清转铁蛋白显著升高（P〈0.05）;血糖明显降低（P〈0.05）。对照组治疗10 d IgA较治疗5 d明显降低（P〈0.05）;治疗组无明显变化。治疗后治疗组血浆Gln浓度高于对照组（P〈0.01）,治疗组治疗10 d尿L/M、外周血细菌DNA阳性率低于对照组（P〈0.01）。结论：肠梗阻患者应用Gln有助于维护肠黏膜屏障功能、减少细菌移位。     

全营养混合液中氨基酸和维生素的稳定性

作者报道了一种全营养混合液（ＴＮＡ）的配方，并将其置于乙烯代醋酸乙烯酯（ＥＶＡ）３升输液袋，在４℃和室温２５℃避光保存２４ｈ后，观察其稳定性其中１７种氨基酸和维生素Ａ、Ｅ、Ｃ、Ｂ１、Ｂ２的浓度无明显改变。、例长期肠外营养患者用这种ＴＮＡ液已８年半余，营养情况良好，无维生素和氨基酸缺乏的临床表现和血生长测定指标异常。４２例用ＴＮＡ行全肠外营养３１－９３天，营养状况明显改善。     

FK506对大鼠离体肾细胞凋亡及bcl-2蛋白、bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察在含FK506的肾保存液保存的大鼠离体肾脏中bcl-2蛋白、bcl-2mRNA表达及肾细胞凋亡。探讨FK506对离体肾的保护的作用。方法建立离体大鼠肾脏模型，试验组以含FK506的4℃uw保存液保存大鼠离体肾脏，采用免疫组织化学、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和细胞凋亡原位末端标记技术，分别检测肾脏保存2、4、8、16h组bcl-2蛋白、bcl-2-mRNA表达。肾细胞凋亡，对照组以不含FK506的4℃ UW保存液保存离体肾脏。结果FK506保存组4、8、16h组bcl-2蛋白、bcl-2mRNA表达明显高于对照组（P〈0．05）；FK506保存组8、16h组肾细胞凋亡指数明显低于对照组（P〈0．05）。结论含FK506肾保存液保存的离体肾脏中bcl-2蛋白、bcl-2mRNA表达增强。肾细胞凋亡指数降低。FK506对肾脏保存过程中的损伤具有保护作用。     

甘氨酰谷氨酰胺二肽对猪自体移植小肠的营养作用

目的 观察甘氨酰谷氨酰胺（Ｇｌｙ－Ｇｌｎ）二肽对猪自体移植小肠的作用。方法 杂种猪１０只,自体小肠移植术后随机分为两组：标准ＴＰＮ组（ＳＴＰＮ组）５只,接受标准ＴＰＮ支持２８天;Ｇｌｙ－Ｇｌｎ二肽组（ＧＴＰＮ组）５只,接受含Ｇｌｙ－Ｇｌｎ的ＴＰＮ支持２８天。分别于术或术后１天和术后２８天测定血浆谷氨酰胺（Ｇｌｎ）,移植小肠粘膜Ｇｌｎ、蛋白质,绒毛ＤＮＡ、ＲＮＡ,肠粘膜绒毛高度、表表面、隐窝深度和肠     

化疗后肠屏障功能损害及谷氨酰胺和生长激素对肠粘膜屏障的作用

目的　研究谷氨酰胺双肽（Gln）和生长激素（rHGH）对肠粘膜屏障的协同保护作用。方法　将大鼠分为4组正常饮食组（Chow组）予正常饮食;传统肠外营养组（STD组）予传统肠外营养;Gln组传统肠外营养＋Gln;Gln＋rHGH组传统肠外营养＋Gln＋rHGH。4组均予腹腔化疗。检测体重,血氨基酸谱、肠粘膜形态学、细菌移位率和肠粘膜通透性。结果　Gln＋rHGH组的空肠绒毛高度显著优于其他3组［（626.5±23.5)比(403.2±19.5)μm、(548.3±17.8)和(561.6±16.3)μm,P＜0.05］。Gln＋rHGH组和Chow组细菌移位率均为20％,Gln组为30％,均显著低于STD组（80％,P＜0.05）。第8天时STD组肠通透性(0.0441±0.0065)显著高于其他3组（Chow组0.0261±0.0032、Gln组0.0279±0.0044、Gln+rHGH组0.0275±0.0032）。结论　Gln具有保护肠粘膜屏障的作用,而Gln和rHGH联合支持肠粘膜屏障的作用更显著。     

尼可地尔对改善冠状动脉内皮细胞低温保存的作用

目的：探讨冷缺血期高钾溶液中尼可地尔（nicorandil)对改善猪冠状动脉内皮细胞低温保存的作用。方法：将新鲜猪心外膜下冠状动脉前降支切成3段，长3mm，共49条血管环，随机分为7组，每组7条，分别用不同成分的保存液，在4℃条件下保存4h。对照组：用重碳酸盐缓冲液（KH液）；A组：20mmol/L高钾溶液；B组：50mmol/L高钾溶液；C组：KH液＋尼可地尔0．1mmol/L；D组：20mmol/L高钾溶液＋尼可地尔0．1mmol/L；E组：50mmol/L高钾溶液＋尼可地尔0．1mmol/L。采用器官槽法，检测在37℃有氧条件下，经N－硝基－L－精氨酸（7μmol/L）和消炎痛（300μmol/L）作用后，前列腺素F2α（30mmol/L）及非受体介导钙离子载体（10^-10-10^-6mol/L)引发的收缩舒张反应。结果：与对照组比较，血管的收缩反应，各组无明显差异；血管的舒张反应，A、B、E组明显减低，C、D组差异无显著性。结论：低温下尼可地尔对冠状动脉内皮源性超极化因子介导的血管舒张功能有保护作用。当溶液的钾离子浓度在20mmol/L以下时，其保护效果显著，升至50mmol/l时，效果消失。     

亚低温下肾保存的实验研究

为了进一步提高肾移植的水平，了解肾脏在低温保存下的病理改变及生化指标的变化，利用低温可控冰箱，以ＨＣＡ液作为灌洗及保存液，对兔肾进行不同温度（４℃、０℃，－２℃、－４℃）及不同时间（７２、９６、１２０小时）的保存，经对保存肾脏进行形态及功能方面观察，认为灌洗后静脉流出液ＬＤＨ浓度及光、电镜观察是肾保存质量观察的可靠指标。同时，在－２℃以下温度保存的肾皮质细胞在镜下可见有冰晶形成引起的空泡，它对肾脏细胞及结构产生严重的损害。     

富含谷氨酰胺二肽的新型氨基酸对全肠外营养短肠综合征大？…

目的 观察富含谷氨酰胺二肽的新型氨基酸对Ｗｉｓｔａｒ大鼠短肠模型血清蛋白和肝功能的影响及探讨其减轻脂肪乳剂引起肝损害的作用机制。方法 ３０只Ｗｉｓｔａｒ雄性在鼠随机分为富含谷氨酰胺二肽新型氨基酸组（２０ＡＡ组）、标准组（１７ＡＡ组）、无氮组,观察不同组动物之间血清总蛋白、白蛋白、前白蛋白（ｐｒｅ－ａｌｂｕｍｉｎ,ＰＡ）、纤维结合蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ,ＦＮ）以及丙氨酸转氮酶和胆红素的变化。结     

能量合剂灌注对离休肢体骨胳肌超微结构和Na~＋－K~＋－ATP酶Ca~（2＋）

大鼠离体肢体，分别用能量合剂和林格氏溶液灌注保存于０～４℃，经不同时间（２，４，８，１６，２４，４８，７２小时）取小腿三头肌进行Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ醇和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性检测，并对此骨骼肌和股动脉平滑肌进行超微结构观察。发现能量合剂灌注对酶活性以及超微结构的保存都有较好的作用。文内还分析了能量合剂的主要成份在保存肢体中的可能作用机理。     

谷氨酰胺临床研究进展

正谷氨酰胺(glutamine,Gln)是人体细胞内外丰富的游离氨基酸,在蛋白质和能量代谢中起着核心作用,在临床应用上已有较长的历史。Gln主要合成于肌肉和肝脏,在肠道及肾脏中被利用[1]。它是一种非必需氨基酸,在正常生理情况下,谷氨酸和氨基可以在谷氨酰胺合成酶的作用下自行合成Gln;然而在创伤、烧伤等高代谢状态,自身合成的Gln不足以提供足够的储备以维持血中的浓度,所以它又是一种条件性必需氨基酸。外源性补充足量的Gln,可     

头部重点低温脱水综合疗法脑复苏机制的研究(对激动性氨基酸变化的影响)

为检测头部重点低温脱水综合疗法（ＳＨＣＤＣＴ）能否消除激动性氨基酸神经毒性，观察了完 全性脑缺血（四血管式，３０分钟）后再灌注 ３０、１８０和 ３６０分钟（ｎ＝８）时颞叶组织中谷氨酸（Ｇｌｕ）、门冬氨 酸（Ａｓｐ）含水量和葡萄糖等的变化，比较了头部重点低温（ＳＨＣ，２８℃，体表降温法）、甘露醇脱水和 ＳＨＣＤＣＴ三种治疗对这些变化的影响。发现与未缺血动物相比，再灌注后Ａｓｐ、Ｇｌｕ和含水量升高（Ｐ＜ ０．０１ ），葡萄糖减少（Ｐ＜０． ０１），ＳＨＣ和 ＳＨＣＤＣＴ显著抑制这些变化（Ｐ＜０． ０１），促进它们尽快恢复到未 缺血水平。结果提示：再灌注后尽早实施ＳＨＣＤＣＴ仍能有效缓解激动性氨基酸神经毒性，这可能是 ＳＨＣＤＣＴ脑复苏机制之一。