成纤维细胞的成骨作用

本文综述了成纤维细胞的起源、分泌特性,成骨作用,以及成纤维细胞参与成骨后的结局及始动因素;提示对于一些较大而又不能自身修复的骨缺损,应可能为其提供一些骨诱导因子,以促进骨外的组织、细胞(含成纤维细胞)参与成骨修复。     

Emdogain对共培养成骨样细胞及内皮细胞成骨及成血管基因表达的影响

目的 评价emdogain对直接与间接共培养条件下成骨样细胞和内皮细胞成骨及成血管基因表达的影响以及其间的相关性。方法 将人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和成骨样细胞（MG63）按2∶1比例于12孔板内进行直接及间接共培养,并使用不同浓度（0、0.1、1、10、50 μg/mL）的emdogain共培养细胞72 h。采用细胞计数仪结合流式细胞仪评价细胞增殖情况,并通过荧光激活流式细胞分选技术分选共培养细胞。对分选后的成骨样细胞及内皮细胞采用实时荧光定量PCR分别检测成骨相关基因碱性磷酸酶（ALP）、I型胶原蛋白（Col-1）及成血管相关基因血管内皮细胞生长因子（VEGF）、VEGF酪氨酸激酶受体1（Flt-1）、VEGF酪氨酸激酶受体2（KDR）、von Willebrand因子（vWF）、内皮细胞C蛋白受体（EPCR）、E选择素（E-Selectin）、促血管生成素2（Ang-2）的表达水平。采用SPSS24.0软件包对数据进行统计学处理。结果 在直接与间接共培养条件下,Emdogain对MG63及HUVEC细胞增殖的作用具有浓度依赖性。随着emdogain浓度增加,细胞增殖率逐渐下降。50 μg/mL浓度的emdogain对MG63及HUVEC细胞增殖抑制作用最为明显。随着emdogain浓度增加,MG63表面ALP和Col-1表达水平逐渐增加;50 μg/mL浓度条件下,表达水平最高且与其他组基因表达水平差异显著（P<0.01）。同一emdogain浓度条件下,直接共培养MG63表面ALP及Col-1表达水平均显著高于间接共培养（P<0.01）。除10 μg/mL组外,直接共培养条件下,VEGF表达水平均显著高于间接共培养（P<0.01）。50 μg/mL组直接共培养的HUVEC表面Flt-1、KDR、vWF、E-selectin基因表达水平显著高于间接共培养及直接共培养的其他各组（P<0.01）。间接共培养条件下,HUVEC表面EPCR及Ang-2基因表达水平显著高于直接共培养（P<0.05）。结论 Emdogain对共培养MG63和HUVEC增殖的作用具有浓度依赖性,50 μg/mL可能是emdogain作用的关键浓度。在直接共培养条件下,50 μg/mL emdogain抑制MG63及HUVEC细胞增殖,但能同时促进MG63及HUVEC细胞相关基因表达;且该条件下emdogain的作用显著强于其他实验条件,细胞间直接交联可能在其中发挥重要作用。     

人脂肪组织来源血管周干细胞成骨、成脂、成软骨分化能力研究

目的    研究从人脂肪组织中提取的血管周干细胞（human perivascular stem cells,hPSCs）的特点,并探讨其成骨、成脂及成软骨分化的能力。方法    采用流式荧光细胞分选技术（FACS）在12例行吸脂手术患者的脂肪标本中分选出人基质血管成分（human stromal vascular fraction,hSVF）和由周皮细胞（CD34-、CD146+、CD45-）与外膜细胞（CD34+、CD146-、CD45-）组成的hPSCs进行培养,比较其克隆增殖能力,然后将2种细胞进行成骨、成脂和成软骨诱导,诱导结束后分别进行茜素红染色、油红O染色和阿尔新蓝染色,并检测成骨诱导后的成骨相关基因mRNA表达。结果    hSVF和hPSCs均以纺锤形成纤维样细胞生长,hPSCs呈现出更快的融合趋势,且细胞形态更均一。hPSCs细胞相比于hSVF具有更强的克隆增殖能力（P < 0.05）。hPSCs细胞在成骨及成软骨方向比hSVF具有更强优势,而hSVF在成脂方向比hPSCs具有更强优势。成骨诱导后,hPSCs的成骨基因碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）和骨钙素（osteocalcin,OCN）的相对表达量要明显高于hSVF（P < 0.05）。结论    hPSCs细胞具有干细胞的多项分化潜能,且其在成骨方向具有很强优势,可成为骨组织工程学中理想的种子细胞来源。     

敲低F-ATPase促进变形链球菌感染人牙髓成纤维细胞成骨/成牙本质分化的研究

目的:研究敲低耐酸因子F-ATPase促进变形链球菌感染人牙髓成纤维细胞(human dental pulp fibroblasts,HDPFs)成骨/成牙本质分化的作用。方法:培养HDPFs并采用免疫荧光染色、流式细胞术进行鉴定,而后分为对照组、感染组、感染+si-NC组、感染+si-F-ATPase组、感染+si-F-ATPase+NLR家族PYRIN域蛋白3(NLRP3)激动剂(NIG)组。比较各组间白介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1、骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(Runx2)以及成骨诱导分化后茜素红染色OD540nm值、碱性磷酸酶(ALP)活力的差异。结果:感染组HDPFs中IL-1β、IL-18、TNF-α的含量,NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1的表达量均高于对照组,OCN、Runx2表达量及成骨诱导后的OD540nm水平、ALP活力均低于对照组;感染+si-F-ATPase组HDPFs中IL-1β、IL-18、TNF-α的含量,NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1的表达量均低于感染组,OCN、Runx2表达量及成骨诱导后的OD540nm水平、ALP活力均高于感染组;感染+si-F-ATPase+NIG组HDPFs中IL-1β、IL-18、TNF-α的含量,NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1的表达量均高于感染+si-F-ATPase组,OCN、Runx2表达量及成骨诱导后的OD540nm水平、ALP活力均低于感染+si-F-ATPase组。结论:敲低F-ATPase能够促进变形链球菌感染HDPFs的成骨/成牙本质分化,抑制NLRP3炎症小体介导的炎症反应是可能的分子机制。     

胶原海绵在下颌骨牵张成骨早期成骨中的作用

目的建立山羊双侧下颌骨牵张成骨动物模型,研究胶原海绵在山羊下颌骨牵张成骨早期成骨中的作用。方法将6只山羊的下颌骨截断,安置牵张器,延迟4d后以每次0.5mm、每天2次的速率连续牵张10d,随后进入固定期。于固定期2、4、6、8周处死动物,行大体标本、X线观察,骨密度、骨矿物质质量测定,苏木精-伊红染色后的组织形态学观察。结果牵张过程被所有山羊耐受,下颌骨牵张长度达到预期效果。加入胶原海绵的实验侧牵张区新骨早期成骨效果明显好于同期的对照侧。结论山羊是一种良好的牵张成骨动物模型。胶原海绵可加速牵张区新骨早期成骨,缩短牵张成骨的固定期。     

成纤维细胞上清提取物对成纤维细胞增殖迁移的影响

目的：在人皮肤成纤维细胞培养上清液中寻求出有效的生长因子样活性组分。方法：收集超滤成纤维细胞的培养上清液，采用MTT法、划痕试验等检测其对人皮肤成纤维细胞增殖和诱导迁移的影响。结果：上清液组中分子量10～30kD的试验组对成纤维细胞有明显促增殖趋势，而大于30kD组有较强的促进单层细胞伤口愈合的能力，二者与对照组比较均差异显著（P〈0．01）。结论：人成纤维细胞培养上清液的提取物中含有促进成纤维细胞增殖和迁移能力的活性物质。     

小分子RNA在干细胞成骨及成软骨分化中的作用

小分子RNA(microRNA,miRNA)是内源性非编码单链小分子RNA,具有重要的生物学功能,对基因进行转录后调控,从而参与调节细胞增殖和分化,影响个体生长发育和疾病的发生过程。近年来越来越多的研究显示miRNA对间充质干细胞的成骨和成软骨向分化起着重要的调节作用,本文就miRNA在这方面的研究进展做一综述。     

体外培养人牙周膜成纤维细胞及其成骨表型特征检测

目的　探讨牙周膜成纤维细胞作为牙周组织工程种子细胞的可行性。方法　采用酶消化法体外培养人牙周膜成纤维细胞 ,以人胎儿皮肤成纤维细胞为对照检测细胞碱性磷酸酶表达及矿化能力。结果　体外培养人牙周膜成纤维细胞与人胎儿皮肤成纤维细胞相比表达更高水平的碱性磷酸酶 (P <0 .0 5 ) ,矿化诱导液连续培养 30d均可观察到矿化结节形成。结论　采用酶消化法可快速简便地获取原代人牙周膜成纤维细胞。体外培养牙周膜成纤维细胞具有成骨样细胞表型特征 ,与人胎儿皮肤成纤维细胞相比更具分化潜能 ,可作为牙周组织工程种子细胞来源     

成纤维激活蛋白在口腔癌间质成纤维细胞中的表达及意义

目的探讨成纤维激活蛋白在口腔鳞状细胞癌(OSCC)间质成纤维细胞中的表达及其与临床病理特征的关系。方法收集存档的OSCC石蜡组织标本80例,以正常口腔黏膜(5例)、癌前病变(5例)为对照,制作组织切片后,以LsAB法行FAP免疫组化染色。结果成纤维激活蛋白在正常口腔黏膜和癌前期病变的间质成纤维细胞中表达阴性;在口腔鳞状细胞癌间质成纤维细胞中阳性表达,在口腔鳞状细胞癌组,随着细胞分化程度的逐渐降低,成纤维激活蛋白平均染色阳性标本百分率均有逐渐升高的趋势(P<0.01),且与口腔癌颈淋巴结转移的发生呈正相关(P<0.01)。结论FAP在口腔癌间质成纤维细胞中的表达可作为判断口腔鳞状细胞癌恶性程度的指标之一,成纤维激活蛋白可能在促进口腔癌侵袭转移中发挥重要作用。     

成釉细胞瘤研究进展

成釉细胞瘤（ameloblastoma，AM）是最常见的良性牙源性肿瘤，具有局部侵袭性，术后容易复发，目前对调节AM细胞增殖和侵袭的机制仍不明确。近年来．AM的基础研究取得了较大进展．体外培养的细胞呈多边形、铺路石样排列，保持二倍体细胞的特征，细胞增殖不活跃，细胞凋亡受到抑制。永生化AM细胞株的建立，为长期观察和进一步深入研究AM的生物学行为提供了良好的条件。研究发现，基质金属蛋白酶-2在AM中高表达，并与AM的侵袭性密切相关。另外，在癌基因、抑癌基因及生长因子等方面也有初步的研究。AM的临床研究进展缓慢，手术仍是治疗AM的主要方法，在选择手术方式时，应考虑患者的年龄、AM的病理类型。随着修复重建外科技术的发展．根治性手术逐渐成为主要的术式选择。     

预成托牙

<正> 我科从1985年起临床应用预成托牙,实践证明这是一种深受患者欢迎的修复方法。本文试作简要介绍。一、适应症:预成托牙适用于各种年龄,适用于全身及局部健康情况良好,一次能够经受拔除多数牙的患者。(1)最适合于因全口假牙修复而前牙需要拔除的患者;(2)前牙全部缺失,残留个别有一定(牙合)关系的磨牙或双尖牙者,包括上述患者中已有托牙修复者;(3)前牙外伤后牙根折断,或残根残冠以至不能修复而需拔除的患者。     

成纤维细胞生长因子对兔下颌牵张成骨的影响

目的 研究局部应用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)对兔下颌牵引张成骨的影响。方法 成年大耳白兔8只，随机分为A、B两组，每组4只。用自行研制的牵张器延长双侧下颌骨6mm，用bFGF（20ng/ml）注入A组动物的牵张区，不注射bFGF的B组动物作为对照。在牵张结束后4周处死所有动物，取双侧下颌骨标本进行X线和组织学检查。结果 组织学分析结果显示，局部给予bFGF的A组动物下颌牵张后新骨生成速度和数量优于B组动物。结论 外源性导入碱性成纤维细胞生长因了可能有促进下颌牵引张成骨的作用。     

成牙骨质细胞的研究进展

牙骨质再生在牙周组织再生中起着重要作用.本文回顾了有关成牙骨质细胞的相关研究,对成牙骨质细胞的来源、功能以及骨形成蛋白、釉基质衍生物、牙骨质蛋白-1和牙本质非胶原蛋白对成牙骨质细胞增殖、分化和矿化的影响作一综述.     

骨膜成骨的研究进展

骨膜是一个结构复杂而有序的器官,是有多种成分的中胚层细胞组成,具有成骨和成软骨的特性。骨膜成骨的理论自多年前被提出后,有很多学者进行相关的实验研究。本文对骨膜成骨理论及应用的研究进展进行综述。     

成牙骨质细胞的研究进展

由成牙骨质细胞形成的牙骨质在牙周病治疗过程中意义重大,但迄今为止,我们对于牙骨质及形成牙骨质的成牙骨质细胞知之甚少.从成牙骨质细胞着手,建立体外培养的成牙骨质细胞系是进行这一领域研究的关键.本文就成牙骨质细胞目前的研究现状对其作一简要综述.     

高浓度葡萄糖对人牙周膜成纤维细胞成骨分化能力的影响

目的：??研究高葡萄糖浓度刺激下牙周膜成纤维细胞（PDLC）的增殖能力和成骨分化能力。方法???体外组织块法培养非糖尿病患者PDLC,分别用0?mg·L-1（C组）、1?100?mg·L-1（L组）、4?500?mg·L-1（H组）浓度葡萄糖刺激PDLC,噻唑蓝（MTT）法检测PDLC增殖能力,矿化诱导后茜素红染色观察矿化结节的形成情况,碱性磷酸酶（ALP）活性检测和实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测成骨相关基因表达。结果???MTT检测结果显示,H组OD值较L组和C组低（P<0.05）;成骨诱导21?d后,H组矿化结节面积较L组和C组少（P<0.05）;成骨诱导期间, H组ALP活性较L组和C组明显偏低（P<0.05）;H组早期成骨基因Runt相关转录因子2、ALP和Ⅰ型胶原诱导前后相对倍增数较L组和C组低（P<0.05）。结论???高浓度葡萄糖能够抑制PDLC增殖能力和成骨分化能力。     

成纤维细胞、肌成纤维细胞与口腔黏膜下纤维性变

口腔黏膜下纤维性变(OSF)是一种慢性、进行性、具有癌变倾向的口腔黏膜疾病。近年来研究发现成纤维细胞(Fb),尤其是肌成纤维细胞(MFb)在OSF的发病中发挥重要作用。本文就Fb和MFb的联系、区别,OSF组织中Fb向MFb表型转化的机制,以及它们的功能与OSF的联系的最新研究进展进行综述,并得出了在OSF的治疗中可以探索以MFb为治疗靶点的治疗新理念。