Biglycan在牙周损伤愈合中的免疫化学定位和表达

目的：研究biglycan在牙周组织损伤愈合过程中的免疫化学定位。方法：损伤成年鼠磨牙周围的牙周组织，跟踪28d，对biglycan和Ⅰ型、Ⅲ型胶原在愈合过程中的免疫组织化学分布进行分析。结果：biglycan在结缔组织中的免疫组织化学分布与Ⅰ型胶原相似。在牙周损伤愈合早期，biglycan在损伤区炎性细胞和移行的牙龈上皮细胞有强烈表达。愈合中期，biglycan广泛表达于肉芽组织成纤维细胞及其基质。愈合晚期，biglycan在新骨成骨细胞中表达明显。结论：biglycan在牙周组织损伤区中的细胞内特征性表达，预示其在牙周损伤愈合过程中起着不可忽视的作用。     

Ⅰ、Ⅲ型胶原在牙龈成纤维细胞和牙周韧带细胞中表达的比较研究

目的比较人牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞在胶原基质合成方面的差别,并探讨其意义。方法采用组织块法体外培养人牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞,利用免疫细胞化学技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原在两种细胞中的表达,通过图像分析探讨其表达的差异。结果Ⅰ、Ⅲ型胶原在牙周韧带细胞中表达阳性,在牙龈成纤维细胞中染色较弱。统计学分析显示,Ⅰ、Ⅲ型胶原在牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞的免疫细胞化学染色结果具有显著性差异(P<0.01)。结论牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞胶原基质的合成或分泌存在差异,这种差异可作为鉴别两种细胞的标志之一。     

纤维调节素在人类牙周细胞损伤愈合中的免疫组织化学表达

目的研究纤维调节素在牙周细胞损伤愈合中的表达,探讨纤维调节素在牙周损伤愈合中的作用。方法培养人类牙周细胞（牙龈成纤维细胞、牙周膜成纤维细胞和成骨细胞）;在培养了牙周细胞的载玻片上做损伤细胞的圆形创口,建立牙周细胞损伤模型,跟踪观察7 d;用免疫组织化学染色的方法,观察纤维调节素在牙周细胞损伤愈合过程中的表达。结果牙周细胞损伤后第1天,纤维调节素较强表达于损伤边缘新移行的细胞;随后,纤维调节素对损伤区新近移行的细胞的表达强于创口周围的细胞。结论纤维调节素强烈表达于损伤区新近移行的牙周细胞,可能参与牙周损伤愈合的早期活动。     

人牙周膜细胞和牙龈成纤维细胞生物学活性的研究

目的:体外原代培养人牙周膜细胞和牙龈成纤维细胞,并对其生物学活性作初步探讨.方法:采用组织块法原代培养牙周膜细胞和牙龈成纤维细胞,绘制生长曲线,测定二者碱性磷酸酶活性;流式细胞术和免疫组化染色法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原、骨形成蛋白的表达情况,观察对比两种细胞的生物学特性的异同.结果:牙龈成纤维细胞原代培养成功率及细胞增殖活性明显高于牙周膜细胞.在牙周膜细胞中,Ⅰ、Ⅲ型胶原均为阳性表达,棕黄色颗粒克满整个胞浆内.在牙龈成纤维细胞中Ⅰ型胶原为弱阳性表达,Ⅲ型胶原阳性表达更弱.牙周膜细胞的ALP水平明显高于牙龈成纤维细胞.牙周膜细胞BMP2表达为强阳性,而牙龈成纤维细胞表达弱阳性.结论:牙周膜细胞具有较强的成骨能力,是理想的牙周组织工程的种子细胞.牙龈成纤维细胞易于培养成活,增殖力强,具有牙周膜细胞的一些特点,组织取材方便,也可作为牙周组织工程的种子细胞.     

糖基化终产物对牙龈成纤维细胞增殖和Ⅰ型胶原合成的影响

目的 观察糖基化终产物对牙龈成纤维细胞增殖能力和Ⅰ型胶原合成的影响,探讨糖基化终产物对牙周组织修复功能的作用及在伴有糖尿病牙周炎中的致病机制.方法 采用组织块法培养牙龈成纤维细胞,培养基中加入体外合成的不同浓度的糖基化终产物,甲基噻唑基四唑(MTT)法检测在不同时间段下牙龈成纤维细胞增殖水平的变化,酶联免疫吸附测定法和实时定量反转录聚合酶链法(RT-PCR)分别测定牙龈成纤维细胞合成Ⅰ型胶原的量和表达Ⅰ型胶原mRNA的水平.结果 200 mg/L糖基化终产物作用于牙龈成纤维细胞48、74 h的A值分别为0.016±0.023、0.035±0.008,比其他组A值低(P＜0.05),并且细胞形态发生了改变,细胞由均一的梭形变成圆形、椭圆形、细长不规则条状等,胞质浓缩,细胞间隙增大;糖基化终产物作用72 h后,牙龈成纤维细胞上清液中和胞内Ⅰ型胶原的含量减少(P＜0.05),Ⅰ型胶原mRNA表达下调(P＜0.05).结论 糖基化终产物能抑制牙龈成纤维细胞的增殖、降低其合成Ⅰ型胶原蛋白和表达Ⅰ型胶原mRNA,从而可能削弱了牙周组织的愈合能力.     

正畸牙齿移动时牙周膜Ⅰ、Ⅲ型胶原变化的实验研究

目的 :观察大鼠牙齿移动过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原在上颌第一磨牙牙周组织中的变化。方法 :建立大鼠磨牙移动模型 ,分为对照组和术后 1、3、5、7、10、14d组 ,用苦味酸天狼猩红染色观察各组中Ⅰ、Ⅲ型胶原的分布和构成 ,以图像分析系统分析Ⅰ、Ⅲ型胶原相对含量的变化 ,并进行统计学分析。结果 :正常牙周组织主要由Ⅰ型胶原构成 ,牙齿受力后 ,张力侧牙周组织中Ⅲ型胶原含量相对增加 ,且有时间依赖性。结论 :牙周组织在正畸力的作用下Ⅰ、Ⅲ型胶原的分布和构成发生了变化 ,Ⅲ型胶原在牙周组织改建中发挥了重要的作用     

Ⅲ型胶原和基质金属蛋白酶-1在大鼠移动牙齿牙周组织中的表达

目的观察正畸移动大鼠牙齿过程中Ⅲ型胶原和基质金属蛋白酶(MMP)-1在上颌第一磨牙牙周组织中的表达和变化。方法建立大鼠磨牙移动模型,分为对照组和术后13、、57、、101、4 d组,用免疫组化方法观察各组中Ⅲ型胶原和MMP-1表达的变化。结果Ⅲ型胶原和MMP-1在移动牙牙周组织中的阳性表达强于对照组,且有时间依赖性。结论MMP-1参与了正畸牙周组织细胞外基质的代谢过程;Ⅲ型胶原在牙周组织改建中有重要作用。     

体外培养人牙囊细胞Ⅰ型胶原与纤维粘连蛋白的表达

目的：通过体外培养人牙囊细胞，研究Ⅰ型胶原与纤维粘连蛋白在细胞中的表达，探讨其在牙齿萌出过程中转化为牙周膜细胞的机制。方法：取12岁患者因正畸需要拔除埋藏阻生牙齿的牙囊，组织块法进行人牙囊细胞的培养，通过免疫组织化学染色技术观察Ⅰ型胶原及纤维粘连蛋白在牙囊细胞中的表达及定位。结果：培养的人牙囊细胞呈梭形、卵圆形及多角形，形似成纤维细胞。在牙囊细胞中Ⅰ型胶原和纤维粘连蛋白的表达呈阳性，定位于细胞的胞质中，围绕细胞核周围染色较强，细胞核内染色阴性。结论：体外培养人牙囊细胞具有成纤维细胞的特性，具有合成与分泌Ⅰ型胶原与纤维粘连蛋白的能力。     

碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜成纤维细胞内核心蛋白多糖基因表达的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人牙周膜成纤维细胞内核心蛋白多糖（decorin）的影响,探讨bFGF在牙周再生中的意义。方法体外原代培养人牙周膜成纤维细胞,用外源性bFGF刺激细胞,半定量RTPCR法检测牙周膜成纤维细胞内decorin基因表达的变化。结果电泳结果表明,bFGF抑制人牙周膜成纤维细胞内decorin的mRNA合成,并且随着质量浓度的增加抑制作用减弱。结论decorin具有很多生物学功能,bFGF对decorin的抑制作用很可能是牙周炎损伤修复过程中一个重要的调节因素,为bFGF在牙周组织再生中的作用提供理论基础。     

种植体周Ⅰ、Ⅲ型胶原的分布及与骨整合的关系研究

目的了解种植体周骨整合形成后在骨质改建过程中胶原的作用.方法通过动物实验的方法,苦味酸-天狼星红染色及偏振光显微镜的观察,考察了天然牙周、种植体周及拔牙窝的颈、中、底不同部位Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的数量及其比例关系及与骨整合之间的联系.结果发现种植体周的Ⅰ和Ⅲ型胶原纤维具有和天然牙、拔牙窝不同的分布特点.在牙种植体周牙槽窝的中部和底部Ⅰ、Ⅲ型的胶原纤维的数量及其比值高过天然牙和拔牙窝;而在同一牙窝内的分布较均匀.结论提示二者对骨整合具生物学及力学意义.     

fibromodulin在牙周组织中的作用

摘要fibromodulin是富含亮氨酸的小蛋白多糖的成员之一,与其同家族的decorin和lumican一样,与胶原密切相关。fibromodulin在牙周组织中的特异性分布,以及粘结胶原和转化生长因子β的特性,使其有可能在牙周组织自身稳定、发育、损伤愈合中起着重要作用。本文就fibromodulin在牙周组织中的可能作用作一综述。     

正畸应力作用下牙龈肌成纤维细胞表达的初步研究

目的 初步探讨正畸应力加载后牙龈肌成纤维细胞的表达情况。方法 选取8例正畸应力加载后需要拔除牙牙龈组织,以应力加载前拔除牙牙龈组织为对照,进行α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原免疫组织化学染色。然后进行测量和统计分析。结果 正畸应力加载前牙龈组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原免疫组化染色阳性,α-SMA除血管上皮外,其余为阴性表达。正畸应力加载后,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达明显上升,差异有统计学意义（P<0.05）;α-SMA在牙龈组织内出现阳性表达,与加力前差异有统计学意义（P<0.05）。结论 正畸应力加载后,牙龈组织内肌成纤维细胞出现表达,其可能在正畸牙术后复发中发挥一定作用。     

正畸应力作用下牙龈肌成纤维细胞表达的初步研究

目的 初步探讨正畸应力加载后牙龈肌成纤维细胞的表达情况。方法 选取8例正畸应力加载后需要拔除牙牙龈组织,以应力加载前拔除牙牙龈组织为对照,进行α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原免疫组织化学染色。然后进行测量和统计分析。结果 正畸应力加载前牙龈组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原免疫组化染色阳性,α-SMA除血管上皮外,其余为阴性表达。正畸应力加载后,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达明显上升,差异有统计学意义（P<0.05）;α-SMA在牙龈组织内出现阳性表达,与加力前差异有统计学意义（P<0.05）。结论 正畸应力加载后,牙龈组织内肌成纤维细胞出现表达,其可能在正畸牙术后复发中发挥一定作用。     

富含亮氨酸的间质蛋白多糖及其在牙和牙周组织中作用的研究

富含亮氨酸的间质蛋白多糖是细胞外基质蛋白多糖的一个亚类,主要包括biglycan、decorin、fibromodulin和lumican等,在牙和牙周组织中有特殊的分布。因它们具有粘结胶原纤维和转化生长因子β的特性,从而推测它们可能在牙和牙周组织自身稳定、发育、损伤愈合中起重要作用。本文就这类蛋白多糖在牙和牙周组织中的研究概况作一综述。     

细胞外基质磷酸糖蛋白在大鼠牙周组织缺损愈合过程中的表达

目的:观察细胞外基质磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)在大鼠牙周组织缺损愈合过程中的表达,初步探讨MEPE在牙周组织再生中可能发生的作用。方法:24只成年健康雄性Wistar大鼠随机分2组:术后14 d组和术后28 d组各12只,行左侧下颌骨开窗术,制备牙周组织缺损模型,HE染色观察牙周组织缺损愈合情况,免疫组织化学染色法观察MEPE在牙周组织缺损愈合过程中各组织的表达。结果:术后14 d,术区有部分新生牙槽骨形成,部分牙周纤维附着于根面牙本质上;术后28 d,术区完全被新生牙槽骨覆盖,在新生牙槽骨和牙本质之间可见牙周膜和部分牙骨质生成,牙周膜大部分附着于根面上;牙周组织缺损愈合过程中,MEPE在健康对照侧仅呈弱阳性表达,而在缺损区牙槽骨和牙周膜相关细胞中均呈阳性表达。结论:在牙周组织缺损愈合过程中,细胞外基质磷酸糖蛋白参与牙槽骨以及牙周膜的再生。     

大鼠实验性牙移动牙周组织Ⅰ型胶原的表达变化

目的 研究正畸力作用下大鼠牙周膜中Ⅰ型胶原的表达变化,探讨正畸牙移动过程中牙周组织的改建机理.方法 将56只SD大鼠一侧上颌第一磨牙和前牙间用结扎丝拴结正畸用Ni-Ti螺旋弹簧,按正畸力大小分成施加50 g正畸力的轻力组28只、施加 150 g正畸力的重力组28只.对侧未做处理的磨牙作为对照组.分别于加力后3 、 6、 12、 24 h和3、 7、 14 d分7次处死,每次每组处死4只.采用免疫组织化学染色技术分别观察大鼠牙周膜中Ⅰ型胶原在机械力刺激下的免疫阳性表达变化及相互关系.结果 加力侧与对照侧牵张区之间的染色强度差异有统计学意义(P＜0.05),轻力组与重力组压缩区与牵张区染色强度差异有统计学意义(P＜0.05),牵张区染色强度明显高于压缩区.牵张区1～3 d开始强表达,一直持续到14 d;压缩区1 d后开始表达减弱, 7 d后开始回升.另外发现50～150 g正畸力对大鼠牙周组织无明显破坏.结论 机械力作用下,大鼠牙周膜Ⅰ型胶原代谢发生变化,牵张区表达增强,压缩区表达减弱;机械力作用下Ⅰ型胶原表达变化与时间密切相关; 50～150 g的机械力范围是实验鼠正畸用力的安全范围.     

富含亮氨酸的间质蛋白多糖及其在牙和牙周组织中作用的研究

富含亮氨酸的间质蛋白多糖是细胞外基质蛋白多糖的一个亚类，主要包括bidycan、decorin、fibromodulin和lumican等，在牙和牙周组织中有特殊的分布。因它们具有粘结胶原纤维和转化生长因子β的特性，从而推测它们可能在牙和牙周组织自身稳定、发育、损伤愈合中起重要作用。本文就这类蛋白多糖在牙和牙周组织中的研究概况作一综述。     

胶原膜引导牙周组织再生的研究——Ⅱ.牙周新附着超微结构观察及能谱分析

采用扫描电镜及X线能谱分析对胶原膜引导牙周组织再生术后标本进行观察.结果表明引导牙周组织再生术后,PDL 细胞分化为成牙骨质细胞、成纤维细胞、成骨细胞;并产生相应组织,引导牙周组织再生术后的愈合为再生附着,翻瓣术后的牙周修复不能恢复原有的牙周组织结构;牙槽骨的再生也是在胶原基质上钙盐沉积。胶原对骨的再生有促进作用。     

碱性成纤维细胞生长因子和骨形成蛋白2在牙源性细胞分化中的表达及意义

目的研究人牙髓细胞(DPCs)和牙周韧带细胞(PDLCs)矿化过程中碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)和骨形成蛋白2(BMP2)的表达变化,以及FGF2和BMP2在牙髓牙周损伤修复动物模型中的分布,探讨FGF和BMP信号通路在DPCs和PDLCs向成牙本质/成骨样细胞分化及牙髓牙周组织损伤修复中的调控作用。方法酶消化法分离培养DPCs和PDLCs,取诱导前及矿化诱导14d的DPCs和PDLCs,实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测FGF2和BMP2的表达变化并进行统计学分析。建立大鼠牙髓牙周联合损伤动物模型,HE染色观察4周后牙髓牙本质复合体及牙周组织修复情况,免疫荧光检测FGF2和BMP2在新生牙髓及牙周组织的表达和分布。结果 DPCs和PDLCs经矿化诱导,FGF2mRNA表达下调,BMP2mRNA表达上调,与对照组间差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光示FGF2在新生的牙周韧带组织强表达,在新生牙髓及正常牙髓牙周组织弱表达,BMP2蛋白在损伤处的新生牙髓及牙周韧带组织细胞浆强表达,FGF2和BMP2在正常牙髓及牙周韧带组织均无表达。结论 FGF2和BMP2在DPCs和PDLCs体外成牙本质/成骨分化中可能具备独立的生物学功能,在体内牙齿损伤修复过程中可能存在协同调控作用。     

基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶-2在非负荷期种植体周围骨组织改建过程中的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶-9、2(MMP-9, MMP-2)在种植体与骨组织界面愈合过程中的作用。方法　在不同时间将种植体植入英国小猎兔犬的前牙及前磨牙区,取得种植不同时间段的标本,用免疫组织化学染色法观察不同时间段种植体周围骨组织中MMP-9、2表达的变化。结果　MMP-9主要表达在破骨细胞、巨噬细胞、衬细胞及成纤维细胞的细胞质中;MMP-2主要表达在成骨细胞、成纤维细胞的细胞质及部分破骨细胞中。结论　MMP-9、2 在种植体植入后周围损伤骨组织的吸收、愈合和骨重建中起重要作用。