微小RNA-21和转化生长因子β1在急性呼吸窘迫综合征大鼠肺纤维化组织中的表达变化

目的检测微小RNA-21（miR-21）和转化生长因子β1（TGF-β1）在脓毒症诱导急性呼吸窘迫综合征（ARDS）大鼠肺纤维化组织中的表达变化。 方法将72只大鼠分为对照组和实验组,每组36只。对照组大鼠仅开腹后关腹处理;实验组大鼠采用盲肠结扎-穿孔法建立ARDS模型。每组大鼠分别于术后12 h、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d时间点各处死6只大鼠。取大鼠左肺组织用于苏木精-伊红（HE）染色,镜下观察肺组织结构变化,免疫组织化学法检测TGF-β1表达。取右肺组织,应用PCR法检测大鼠肺组织miR-21表达情况。 结果各实验组大鼠术后较相应对照组出现活动明显减少,反应迟钝,呼吸急促。显微镜下,对照组大鼠肺组织未见明显炎症细胞浸润和肺实质胶原沉积。实验组大鼠肺组织可见大量炎症细胞及红细胞渗出,成纤维细胞明显增多并可见纤维组织增生。实验组大鼠肺组织miR-21表达水平术后2~5 d与同时间对照组相比均显著增高（t=7.121、5.330、6.513、19.371,P均< 0.05）。对照组各时间点阳性细胞数均为0,实验组大鼠术后1~5 d肺组织TGF-β1表达阳性率分别为22.64%、32.69%、36.20%、38.32%、45.64%。 结论miR-21和TGF-β1在ARDS所致的肺纤维化组织中表达升高,提示miR-21和TGF-β1在ARDS大鼠的肺纤维化形成中起着重要作用。     

整合素β1与β3在非小细胞性肺癌及其淋巴结中的表达

[目的]了解整合素β1与β3在非小细胞性肺癌(NSCLC)及其淋巴结组织中的表达,分析其与临床病例特征之间的关系.[方法]随机抽取42例术前未接受任何辅助治疗NSCLC及其淋巴结和10例癌旁正常肺组织,采用免疫组织化学SABC(链霉素-生物素-酶复合物)法检测的石蜡切片标本中的整合素β1与β3的表达并进行比较.[结果]①整合素β1与β3在NSCLC组织组中阳性率高于癌旁正常肺组织组;在转移性淋巴结组中阳性率表达高于非转移性淋巴结组.②整合素β1及β3在原发病灶的阳性表达率与NSCLC分化程度、淋巴结转移情况及其病理分级等临床病例因素不同而有显著差异.[结论]整合素β1与β3在NSCLC和转移淋巴结中的表达明显强于癌旁正常肺组织和非转移性淋巴结;整合素β1与β3在NSCLC中的表达与NSCLC的组织分化程度和恶性程度有关,并可能参与了NSCLC的发生,发展及淋巴结转移过程.     

Claudin-1蛋白在肺鳞癌中的表达及其意义

[目的]探讨Claudin-1蛋白在肺鳞癌发病过程的表达变化意义.[方法]收集46例石蜡包埋的肺鳞癌及22例癌旁肺标本.免疫组化检测Claudin-1蛋白在肺鳞癌和癌旁肺组织中的表达差异,统计分析Claudin-1蛋白表达变化与肺鳞癌转移之间的关系.[结果]相比于癌旁肺组织,Claudin-1蛋白肺鳞癌组织中表达升高....     

肺癌中miR-21与β-catenin表达的相关性及其对远期生存的预测价值

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中miR-21与β-catenin表达的相关性及其对远期生存的预测价值。方法 回顾性收集2014年8月至2015年8月沈阳医学院附属第二医院病理科明确诊断为NSCLC的石蜡包埋组织50例作为NSCLC组,对应正常癌旁组织50例作为癌旁组。采用荧光定量PCR法测定标本组织中miR-21的表达量,采用Western-blot法测定标本组织中β-catenin的表达量,对比NSCLC组、癌旁组标本中miR-21、β-catenin表达水平的差异,NSCLC组miR-21、β-catenin表达水平的相关性。分析不同病理特征NSCLC患者病灶组织中miR-21、β-catenin表达量的差异,NSCLC病灶组织中miR-21、β-catenin低表达、高表达患者生存时间的差异。结果 NSCLC组标本组织中miR-21、β-catenin的表达量均高于癌旁组标本组织(P 0. 05); NSCLC组标本组织中miR-21的表达量与β-catenin的表达量呈正相关(P 0. 05)。NSCLC患者中,TNMⅢ～Ⅳ期、肿瘤最大直径≥3 cm、中低分化、合并淋巴结转移患者的miR-21、β-catenin表达量分别大于TNMⅠ～Ⅱ期、肿瘤最大直径3 cm、高分化、未合并淋巴结转移的患者(P 0. 05); miR-21、β-catenin高表达组患者的总生存时间分别低于miR-21、β-catenin低表达组(P 0. 05)。结论 NSCLC患者病灶组织中miR-21表达量异常增高,可能通过调控β-catenin表达而促进病情进展并缩短患者生存时间。     

肝细胞癌组织中miR-218的表达及其临床意义

[目的]研究miR-218在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达并探讨其临床意义.[方法]收集HCC手术组织标本54例,30例癌旁正常组织作为对照,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测HCC组织及对照组织中miR-218的表达情况,分析miR-218表达水平与HCC临床病理参数之间的关系.[结果]与癌旁对照组织相比,miR-218在HCC组织表达普遍下调,差异具有统计学意义(P＜0.01),癌旁对照组织中miR-218平均表达量约为HCC的2.90倍;miR-218下调表达程度与HCC恶性程度、肿瘤分化程度、肝内和肝外转移及门静脉癌栓有关,miR-218的表达水平与HCC患者年龄、性别、饮酒史、HBsAg、肿瘤大小、是否合并肝硬化等无关.[结论]miR-218与HCC的发生、临床进展密切相关,其可能成为HCC新的潜在的治疗靶点及诊断和预后的分子标志物.     

大肠癌组织中TGF-β1与P-gp、GST-π的表达与临床关系的研究

[目的]观察TGF-β1和P-gp、GST-π在大肠癌组织和癌旁组织的表达情况,探讨三者表达与大肠癌临床病理特征和复发转移之间的关系,为临床化疗药物的选择和评估病人的预后提供参考依据.[方法]用免疫组化S-P法检测48例大肠癌组织和45例癌旁黏膜组织中TGF-β1和P-gp、GST-π的表达水平,并分析三者与大肠癌临床病理特征和复发转移之间的关系.[结果]TGF-β1和P-gp、GST-π在大肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织;P-gp、GST-π在不同年龄、性别、肿块大小、分化程度、Dukes分期的癌组织中表达均无统计学差异;TGF-β1的表达与肿块大小、Dukes分期有关.复发转移组TGF-β1和P-gp、GST-π的表达高于未复发转移组,两者相比有统计学差异;P-gp与GST-π,P-gp与TGF-β1表达存在相互关联性.[结论]检测大肠癌中TGF-β1和P-gp 、GST-π三种指标似可作为大肠癌预后和化疗方案设计的指标.     

芪丹颗粒剂对大鼠肺纤维化的干预作用与氢化可的松比较

背景特发性肺纤维化治疗反应性差,首选治疗药物为糖皮质激素,仅对30%的患者有效.中药对肺纤维化的防治作用是研究热点,许多中药已经在临床中试用,并且取得了一定的治疗效果.转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α是致肺纤维化的重要细胞因子,抑制其表达可能对治疗肺纤维化有效.目的探讨芪丹颗粒剂对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化的干预作用及对肺组织转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α蛋白表达的影响,并与糖皮质激素氢化可的松进行比较.设计随机区间分组设计.单位山东大学山东省立医院呼吸内科.对象实验于2003-05/2004-03在山东省医学科学院病理实验室进行.取雄性SD大鼠105只,随机分为4组正常对照组(n=15),模型组、芪丹组和氢化可的松组,每组30只;各组又分为7,14,28 d 3个时间点,正常对照组每个时间点5只,其他3组每个时间点10只.方法[1]造模正常对照组经气管内一次性灌注生理盐水0.25 mL,其他3组经气管内一次性灌注博莱霉素A5 0.25 mL左右(5 mg/kg,4g/L)制备肺纤维化模型.[2]给药造模次日开始,芪丹组每天给于芪丹颗粒剂灌胃(黄芪、丹参、川芎等组成,3 125 mg/kg);氢化可的松组每天给于腹腔注射氢化可的松(25 mg/kg);正常对照组和模型组每天给于生理盐水灌胃(2 mL/只).[3]观察指标各组动物均于给药后第7,14,28天麻醉状态下处死,取肺组织,用苏木素-伊红染色评价肺组织病理学变化、免疫组化测定转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达.主要观察指标各组大鼠不同时间点肺组织病理学观察和转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α表达情况.结果100只大鼠进入结果分析.[1]肺组织病理学观察结果正常对照组结构正常,模型组第7天表现为肺泡炎;14 d肺泡炎加重,28 d广泛纤维化;芪丹组经治疗后肺泡炎和肺纤维化病变明显轻于模型组,有正常肺泡结构存在;氢化可的松组第7,14天肺泡炎较模型组轻,但肺纤维化与模型组比较无差异.[2]肺组织转化生长因子β1蛋白表达模型组第28天表达最多,显著高于正常对照组(3.6±0.4,1.2±0.4,P＜0.01),芪丹组和氢化可的松组均显著低于模型组(1.7±0.5,2.5±0.4,P＜0.01),且芪丹组低于氢化可的松组(P＜0.01).[3]肺组织肿瘤坏死因子α蛋白表达模型组各时间点均持续高表达,芪丹组和氢化可的松组均少于模型组,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01),而且而且芪丹组明显少于氢化可的松组(P＜0.01).结论芪丹颗粒剂可明显减轻博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化的程度,降低肺组织转化生长因β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达,其效果较氢化可的松好.     

白藜芦醇联合厄贝沙坦对大鼠肺纤维化及TGF-β1、NF-κB的影响

目的探讨白藜芦醇联合厄贝沙坦对大鼠肺纤维化及肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、核因子-κB(NF-κB)表达的影响,分析其治疗肺纤维化可能作用机制。方法将105只雄性大鼠随机分成正常对照组、模型对照组、厄贝沙坦组、白藜芦醇组、厄贝沙坦+白藜芦醇组各21只,除正常对照组外,其余各组均注入博莱霉素建立肺纤维化动物模型,造模后第2天给予相应药物干预,观察大鼠肺组织病理变化、肺组织TGF-β1、NF-κB表达。结果厄贝沙坦+白藜芦醇组第14 d肺泡炎评分、肺纤维化评分(1.5±0.4、1.2±0.5)明显低于模型对照组,21 d评分(1.2±0.3、1.0±0.6)明显低于厄贝沙坦组、白藜芦醇组;14 d、21 d TGF-β1、NF-κB(0.43±0.11、0.31±0.09,0.38±0.11、0.44±0.12)ng/ml均低于模型对照组、厄贝沙坦组、白藜芦醇组。结论白藜芦醇联合厄贝沙坦对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化有明显的改善作用,可能与抑制肺纤维化大鼠肺组织内TGF-β1、NF-κB表达有关。     

溃疡组织中转化生长因子-β异构体与其受体含量的变化及其对创面修复的影响

目的：观察转化生长因子－β的3种异松体（TGF－β1、β2、β3）和其受体－I（TGF－βRI)在溃疡和正常皮肤的表达特征及其对创面修复的影响。方法：24份被测标本中包括不同类型的溃疡中心组织及其对应的溃疡边缘和周围正常皮肤组织各8份，用免疫组织化学方法和常规病理技术规定TGF－β1、β2、β3和TGF－βRI的4种蛋白的溃疡和正常皮肤组织中的定位和表达量的变化规律。结果：在正常皮肤组织中，TGF－β2、β3细胞因子的阳性信号主要见表层细胞、汗腺和毛囊细胞的胞浆和胞外基质中，TGF－βRI蛋白则主要定位于表皮细胞和血管内皮细胞的细胞膜上。在溃疡组织中，TGF－β1因子存在于巨噬细胞和部分成纤维细胞内，TGF－β2、β3分布于肉芽组织中几乎所有类型的细胞内，而TGF－βRI在组织内分布与对照组相比没有明显变化。从正常皮肤到溃疡组织，TGF－β1含量逐渐下降，而TGF－β2、β3的蛋白表达呈升高趋势，而TGF－βRI的含量几乎没有改变。结论：在溃疡组织中，TGF－β1含量下降，TGF－β2、β3蛋白表达增强，这可能与溃疡形成密切相关；而TGF－βRI蛋白有其下游的信号传递蛋白是否参与溃疡的形成，还需深入探讨。     

MiR-99a靶向卷曲蛋白抑制角质形成细胞增殖的分子机制

[目的]探讨miR-99a靶向卷曲蛋白(FZD5/FZD8)抑制角质形成细胞增殖的分子机制.[方法]应用QPCR和WB技术检测临床组织及各组细胞中miR-99a、FZD5/FZD8、β-catenin和CyclinD1的表达水平;MTT及BrdU实验检测细胞的增殖能力;双荧光素酶实验验证miR-99a的靶基因.[结果]miR-99a在银屑病皮损组织中显著低表达;过表达miR-99a可下调FZD5/FZD8、β-catenin和CyclinD1,抑制细胞增殖,抑制miR-99a可上调FZD5/FZD8、β-catenin和CyclinD1,并促进细胞的增殖;miR-99a可靶向调控FZD5和FZD8,过表达FZD5/FZD8可回复miR-99a对β-catenin和CyclinD1蛋白表达水平的抑制;miR-99a与FZD5/FZD8表达呈负相关.[结论]miR-99a可以靶向下调FZD5/FZD8的表达,并通过β-catenin和CyclinD1途径抑制角质形成细胞增殖.     

四氧化二氮染毒小鼠肺组织病理学改变及转化生长因子β1与热休克蛋白70的表达

目的探讨四氧化二氮（N2O4）中毒小鼠肺组织损伤特点，转化生长因子β1（TGF—β1）和热休克蛋白70（HSP-70）在肺组织的表达及意义。方法采用ICR小鼠N2O4吸入性染毒，于3d后活杀，观察肺组织病理变化及用免疫组织化学方法检测TGF—β1和HSP—70的表达。染毒小鼠HE染色结果提示，肺组织有不同程度纤维化，TGF—β1和HSP—70表达明显增强。结论N2O4中毒小鼠肺组织可出现纤维化，TGF—β1和HSP—70在肺纤维化的发生发展过程中可能扮演着重要角色。     

芪丹颗粒剂对大鼠肺纤维化的干预作用与氢化可的松比较

背景：特发性肺纤维化治疗反应性差,首选治疗药物为糖皮质激素,仅对30%的患者有效.中药对肺纤维化的防治作用是研究热点,许多中药已经在临床中试用,并且取得了一定的治疗效果.转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α是致肺纤维化的重要细胞因子,抑制其表达可能对治疗肺纤维化有效.目的：探讨芪丹颗粒剂对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化的干预作用及对肺组织转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α蛋白表达的影响,并与糖皮质激素氢化可的松进行比较.设计：随机区间分组设计.单位：山东大学山东省立医院呼吸内科.对象：实验于2003-05/2004-03在山东省医学科学院病理实验室进行.取雄性SD大鼠105只,随机分为4组：正常对照组（n=15）,模型组、芪丹组和氢化可的松组,每组30只;各组又分为7,14,28 d 3个时间点,正常对照组每个时间点5只,其他3组每个时间点10只.方法：[1]造模：正常对照组经气管内一次性灌注生理盐水0.25 mL,其他3组经气管内一次性灌注博莱霉素A5 0.25 mL左右（5 mg/kg,4g/L）制备肺纤维化模型.[2]给药：造模次日开始,芪丹组每天给于芪丹颗粒剂灌胃（黄芪、丹参、川芎等组成,3 125 mg/kg）;氢化可的松组每天给于腹腔注射氢化可的松（25 mg/kg）;正常对照组和模型组每天给于生理盐水灌胃（2 mL/只）.[3]观察指标：各组动物均于给药后第7,14,28天麻醉状态下处死,取肺组织,用苏木素-伊红染色评价肺组织病理学变化、免疫组化测定转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达.主要观察指标：各组大鼠不同时间点肺组织病理学观察和转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α表达情况.结果：100只大鼠进入结果分析.[1]肺组织病理学观察结果：正常对照组结构正常,模型组第7天表现为肺泡炎;14 d肺泡炎加重,28 d广泛纤维化;芪丹组经治疗后肺泡炎和肺纤维化病变明显轻于模型组,有正常肺泡结构存在;氢化可的松组第7,14天肺泡炎较模型组轻,但肺纤维化与模型组比较无差异.[2]肺组织转化生长因子β1蛋白表达：模型组第28天表达最多,显著高于正常对照组（3.6&;#177;0.4,1.2&;#177;0.4,P＜0.01）,芪丹组和氢化可的松组均显著低于模型组（1.7&;#177;0.5,2.5&;#177;0.4,P＜0.01）,且芪丹组低于氢化可的松组（P＜0.01）.[3]肺组织肿瘤坏死因子α蛋白表达：模型组各时间点均持续高表达,芪丹组和氢化可的松组均少于模型组,差异有显著性（P＜0.05或P＜0.01）,而且而且芪丹组明显少于氢化可的松组（P＜0.01）.结论：芪丹颗粒剂可明显减轻博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化的程度,降低肺组织转化生长因β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达,其效果较氢化可的松好.     

两种细胞因子与特发性肺纤维化的关系

目的：观察转化生长因子(TGF—β)及血小板衍生生长因子(PDGF)在特发性肺纤维化(IPF)经纤维支气管镜(纤支镜)肺活检标本中的表达，探索其在IPF发病中的作用。方法：用免疫组织化学技术检测IPF患者纤支镜活检肺组织中TGF—β及PDGF的表达。结果：IPF组TGF—β主要分布在细支气管上皮细胞、Ⅱ型肺泡上皮细胞及肺泡巨噬细胞，与对照组比较，P＜0．01。IPF组PDGF主要位于血管周围成纤维样细胞、间质细胞及细支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞及Ⅱ型肺泡上皮细胞，与对照组比较，P＜0．01。结论：TGF—β、PDGF通过与肺组织细胞相互作用，参与肺纤维化形成。     

靶向转化生长因子β1的siRNA真核表达载体的构建及鉴定

[目的]构建靶向转化生长因子β1（TGFβ1）小干扰RNA（siRNA）的真核表达载体.[方法]设计二个siRNA作用靶点,体外合成的相应双链DNA被插入pSilencer-2.1质粒中,对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序.采用脂质体转入HSC-T6细胞中,利用RT-PCR法和western-blot分别检测TGFβ1 mRNA和蛋白的表达.[结果]靶向TGFβ1 的siRNA-a和siRNA-b二个表达质粒是成功构建; 与无关对照组相比,siRNA-b组对TGFβ1mRNA和蛋白表达均明显下调（ P 〈0.01）,siRNA-a组无明显下调（ P 〉0.05）.[结论]成功构建了靶向TGFβ1 基因的siRNA表达质粒,为进一步研究其阻断肝纤维化打下基础.     

microRNA-21和microRNA-34a在新疆维吾尔族寻常型银屑病患者皮肤组织中的表达及意义

目的探讨维吾尔族寻常型银屑病患者microRNA(miR)-21与miR-34a的表达及意义。方法新疆维吾尔族寻常型银屑病患者10例为银屑病组,健康维吾尔族人群10例为正常组,采用实时荧光定量PCR法分别检测miR-21和miR-34a在银屑病组皮损组织、皮损旁组织及正常组中表达水平。结果miR-21在银屑病组皮损组织表达(0.134±0.106)、皮损旁组织(0.116±0.094)表达水平均高于正常组(0.044±0.024),差异有统计学意义(P0.05),皮损组织和皮损旁组织miR-21表达水平比较差异无统计学意义(P0.05);银屑病组皮损组织miR-34a的表达水平(0.178±0.193)高于正常组(0.030±0.029)(P0.05),皮损旁组织miR-34a表达水平(0.069±0.065)与皮损组织、正常组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 miR-21和miR-34a高表达在新疆维吾尔族寻常型银屑病发病中起重要作用。     

GAS5和miR-21在前列腺癌中表达的关系及临床意义

目的:分析GAS5和mi R-21在前列腺癌中的表达关系,并探讨其临床意义。方法:收集2011年1月至2013年6月在本院行手术切除治疗的80例前列腺癌患者的肿瘤组织和癌旁非肿瘤组织,采用qRT-PCR检测组织中GA S5和miR-21相对表达量,分析肿瘤组织中GA S5和miR-21表达的关系及两者与临床病理特征的关系,采用K-M生存函数分析肿瘤组织中GAS5和miR-21表达与患者预后的关系。结果:肿瘤组织中GAS5相对表达量低于癌旁非肿瘤组织(P0.05),miR-21相对表达量高于癌旁非肿瘤组织(P0.05);肿瘤组织中GAS5和miR-21表达水平呈负相关(r=-0.702,P0.001);肿瘤组织中GAS5和miR-21表达水平与患者TNM分期、Gleason评分和淋巴结未转移有关,与血清PSA水平及前腺体体积无关;80例患者5年总生存率86.25%(69/80),GAS5高表达组无瘤生存期和总生存率均高于GAS5低表达组(P0.05),miR-21高表达组无瘤生存期和总生存率均低于miR-21低表达组(P0.05);TNM分期、Gleason评分、淋巴结转移、血清PSA水平及GAS5表达水平、miR-21表达水平是影响前列腺癌患者预后的独立危险因素。结论:前列腺癌中GAS5表达降低,miR-21表达升高,与患者不良预后有关,提示GAS5和miR-21可作为前列腺癌的预后标志物。同时GAS5和miR-21呈负相关,提示两者可能在调控前列腺癌进展及不良预后中存在相互作用。     

瘦素在肺纤维化大鼠肺组织中的表达及意义

[目的]探讨肺纤维化大鼠肺组织中瘦素的表达及意义.[方法]选择Sprague-Dawley雄性大鼠36只,随机分为实验组和对照组,每组18只,实验组应用博莱霉素气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,对照组注入生理盐水,采用HE染色、Masson三联染色检测肺组织病理变化,免疫组织化学染色、RT-PCR等方法检测其肺组织中瘦素蛋白和mRNA表达水平.[结果]实验组大鼠d7呈现典型的肺泡炎、d14纤维组织增生、d28稳定的肺纤维化;瘦素蛋白和瘦素mRNA在对照组肺组织表达较弱,在实验组d7表达增强,d14进一步增强,d28减弱,但仍强于对照组（P〈0.05）.[结论]肺组织内瘦素表达的上调可能参与肺纤维化的发生和发展.     

miR-183在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

[目的]探讨miR-183在结直肠癌组织中的表达及其临床意义.[方法]采用Real-time PCR检测47例结直肠癌组织和相应癌旁组织中的miR-183的相对表达量,分析其与结直肠癌临床病理参数的相关性.[结果]结直肠癌组织中miR-183的相对表达量为2.461±0.351,明显高于癌旁组织1.000±0.000,其差异有统计学意义(t=2.419,P=0.021).miR-183表达与结直肠癌的浸润深度(P=0.041)、淋巴结转移(P=0.032)和TNM分期(P=0.015)明显相关.[结论] miR-183在结直肠癌组织中高表达,其参与结直肠癌侵袭和转移的过程.     

PD-1、PD-L1在喉癌组织中的表达及其临床意义

[目的]探讨程序性死亡蛋白-1(PD-1)和其配体(PD-L1)在喉癌组织中的表达及其临床意义.[方法]采用免疫组化SP法检测60例喉鳞状细胞癌组织和33例癌旁组织标本中PD-1和PD-L1的表达情况,并分析其表达与喉癌患者临床病理特征及预后的关系.[结果]喉癌组织中PD-1、PD-L1的阳性表达率均显著高于癌旁组织(...     

MiR-101靶向调控CREB1抑制肺癌的发展

目的:观察miR-101在肺癌细胞或组织中的表达变化情况,分析miR-101通过靶向调控环磷腺苷反应元件结合蛋白1(cyclic adenosine monophosphate responsive element binding protein 1,CREB1)对肺癌发生发展的影响。方法:实时聚合酶链反应检测肺癌组织,癌旁正常组织,直径≤5 cm,5 cm,转移,无转移肺癌组织中的miR-101表达量以及各株肺癌细胞中miR-101与mRNA的表达量。MicroRNA靶基因数据库与荧光素酶报告基因检验CREB1为miR-101的潜在靶基因。实时聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测miR-101 mimics对CREB1 mRNA及蛋白表达的影响。实时聚合酶链反应检测肿瘤组织与癌旁正常组织CREB1 mRNA的表达量;免疫组织化学检测肿瘤组织和癌旁正常组织中CREB1的表达量。CCK-8检测各转染组的光密度(optical density,OD)值;流式细胞术检测细胞比值。Tranwell迁移实验和细胞划痕实验检测细胞迁移能力。观察21 d裸鼠肿瘤体积及质量;检测miR-101在miR-101 mimics转染组裸鼠肿瘤组织中的表达量;增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclearantigen,PCNA)染色检测裸鼠肿瘤细胞增殖情况。结果:与癌旁正常组织相比,肺癌组织中miR-101的表达量显著降低;转移的肺癌组织中miR-101的表达量显著低于无转移肿瘤组织;直径≤5 cm的肿瘤中miR-101的表达量显著高于直径5 cm的肿瘤;各株肺癌细胞的miR-101表达量均显著低于正常肺细胞,而CREB1 mRNA表达量相反。miR-101可通过结合CREB1的3'-非翻译区(3'-untranslatedregion,3'-U TR)抑制CREB1的表达。miR-101能够抑制CREB1的mRNA翻译及其蛋白表达。肺癌组织中CREB1 mRNA表达量显著升高。miR-101可抑制肺癌细胞A549的增殖,迁移并使其细胞周期在S期聚集,CREB1补回该抑制作用。miR-101 mimics转染组裸鼠肿瘤体积及质量均显著低于对照组;miR-101过表达能够抑制A549细胞的增殖,抑制肿瘤发展。结论:miR-101通过抑制CREB1表达抑制肺癌的发展,可能成为肺癌诊断及治疗的新靶标。