抗鸡红细胞免疫血清的制备及其检测方法

目的：制备抗鸡红细胞免疫血清,应用试管凝集实验测定其效价,并掌握免疫血清的收集和保存方法。方法：用2．5％～10％CRBC（鸡红细胞）对家兔进行免疫五周,采用心脏法采血或颈动脉放血,离心分离出血清。再与0．5%CRBC用试管凝集实验对其效价进行测定。结果：兔血清中出现了抗体,其效价为1：1600。结论：此测定方法简单易行,效果明显,适用于实验教学和实验研究。     

兔抗伤寒杆菌免疫血清在免疫学检验实验教学中的应用

目的探讨制备高效价兔抗伤寒杆菌免疫血清的方法。方法对家兔分组,采用短程免疫法,用伤寒杆菌"O"和"H"诊断菌液作为抗原,分别小剂量连续多次接种后,收集兔免疫血清,利用玻片凝集实验、试管凝集实验和间接凝集实验,测定血清中抗体的效价。结果家兔在全程免疫后产生了高效价抗体,效价分别达到了阳性,1∶1 280、1∶640。结论用伤寒杆菌免疫家兔,制备的免疫血清在短时间内可以获得高效价的抗血清,适用于免疫学检验本科实验教学。     

不同动物红细胞制备实验教学用溶血素的方法探讨

目的检测绵羊红细胞(SRBC)和猪红细胞(PRBC)分别经2种程序免疫家兔所制得溶血素的效价,并比较几种溶血素在医学免疫学实验中的应用效果,以寻求制备符合免疫学实验及教学需求的高效价溶血素的较好方法。方法 40只雄性家兔分为4组,分别用SRBC和PRBC,间隔2d经不同程序免疫家兔制备溶血素,再用补体溶血试验检测几种溶血素的效价,比较其在免疫学实验教学中的应用,并探讨高效价溶血素的制备方法。结果经补体溶血试验测得几种溶血素效价,A组兔抗-SRBC血清效价为1∶4 800;B组兔抗-PRBC血清效价为1∶1 200;C组兔抗-SRBC血清效价为1∶1 000,D组兔抗-PRBC血清效价为1∶200。结论用SRBC制备的溶血素效价均高于相同方法下用PRBC制备的溶血素;红细胞抗原相同时,采取先皮内全血注射后耳缘静脉接种的免疫方法制备的溶血素效价也要高于单纯采取耳缘静脉注射的免疫方法制备的溶血素;且PRBC可代替SRBC免疫家兔,制备满足实验教学要求的溶血素。     

北京市崇文区从业人员军团菌感染及菌型分布

近年来 ,军团菌病国内一些地区通过血清学调查及病原分离 ,相继发现了人群感染且有局部暴发的报告。为了解我区军团菌感染情况及菌型分布 ,于 1 998年 1～ 1 0月以试管凝集法测定了 30 0人军团菌抗体及菌型 ,并进行了流行病学调查。材料与方法1 检测对象 :本市户口的崇文区农贸市场、加工厂、饮食、服务人员 30 0人。2 方法 :采用试管凝集法 ,血清最大稀释度 为血清效价 ,单份血清抗体效价达 1∶32 0有诊断意义。凝集抗原ＬＰ1～ 14 型及相应阳性血清由中国预防医学科学院流研所提供 ,批号 -980 0 5。3 流行病学调查 :统一登记逐一询问生…     

教学用兔抗人全免疫血清的制备与效价测定

目的探讨制备高效价兔抗人免疫血清的方法。方法将人全血清经弗氏佐剂完全乳化,采用一定的免疫程序免疫家兔,末次加强免疫5d后收集兔免疫血清,利用双向免疫扩散实验、对流免疫电泳和间接酶联免疫吸附法分别测定血清中抗体的效价。结果家兔在全程免疫后产生了高效价抗体,效价分别达到了1∶16、1∶8、1∶64 000。结论用人全血清免疫家兔,可以获得高效价的抗血清,为进一步实验教学和实验研究奠定了基础。     

Rh血型系统新生儿溶血病的实验诊断及特殊反应分析

目的探讨Rh血型系统新生儿溶血病的实验诊断和特殊试验结果分析。方法收集Rh系统新生儿溶血病标本12例,母血标本12例,测定其ABO和Rh血型。新生儿标本行溶血病3项实验,新生儿血清、放散液、母血清行不规则抗体筛选和鉴定实验,并测定相应抗体的效价。结果有1例患儿标本RhD血型放散前定型为阴性,放散后为阳性;患儿标本溶血病3项实验均阳性;引起溶血病的抗体中,IgG抗-D 9例,IgG抗-E检出2例,IgG抗-c合并抗-D1例;母血清中的IgG抗-D效价介于128~2048,IgG抗-E效价介于64~256;患儿血清中游离的IgG抗-D效价介于2~512,IgG抗-E效价介于4~32。结论直接抗人球蛋白实验和放散实验对于诊断Rh系统溶血病具有重要意义;特殊反应要综合分析处理,获取真实结果;临床输血或换血治疗时,要根据患儿体内的抗体情况进行血液选择。     

用Dot-ELISA法检测军团菌抗体

由于直接从病人标本(痰、胸水、血液、支气管灌洗液等)分离军团菌进行诊断最为可靠,然而,进行细菌分离比较困难。因此,检测病人血清中的抗体是临床诊断军团病的主要手段。常用的血清学方法有间接荧光抗体检查法(IFA)、被动血凝试验(PHA)、试管凝集法、微量凝集法(MAgg)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。采用 Dot-ELISA 法检测军团菌抗体在我国尚未见报道。本文首次用 Dot-ELISA 法对一些诊断为军团病病例及部分健康人进行了嗜肺军团菌血清Ⅰ型抗体的检测,以考验本法的特异性和敏感性。材料和方法一、材料(一)载体:硝酸纤维素膜浙江黄岩人民化工厂生产。(二)LP_1家兔免疫血清(试管凝集反应效价1:2560～1:5120)和健康兔血清(效价<1:20)(三)可疑军团病病人血清50份,健康人血清20份,流脑病人血清3份,采自北京市某些医院。     

微柱凝胶法检测孕妇IgG抗-A(B)抗体效价结果的判定

目的 建立微柱凝胶法检测孕妇IgG抗-A(B)抗体效价的结果判定标准.方法 用微柱凝胶法和试管法平行测定126例孕妇IgG抗-A(B)抗体效价,分别统计试管法和微柱凝胶法1+、3+凝集结果;比较两种方法的阳性率,并对结果进行相关性分析,对微柱凝胶法IgG抗-A(B)抗体效价以1+判定、1∶256为决定值和以3+判定、1∶64为决定值结果的评价指标比较.结果 微柱凝胶法1+、3+凝集和传统试管法阳性例数和阳性率分别为90例(71.40%)、26例(21.40%)、24例(19.05%);微柱凝胶法3+凝集报告与试管法阳性率差异无统计学意义(P>0.05).微柱凝胶法以凝集1+、3+报告,与传统试管法结果相关系数分别为0.897、0.919,均高度相关.以微柱凝胶法1+凝集判定结果、效价1∶256为决定值和以3+凝集判定结果、效价1∶64为决定值,两者差异无统计学意义(P>0.05);两者相对于试管法的灵敏度、特异度及准确度分别为0.958、0.961、0.960、0.833、0.960和0.936.结论 以微柱凝胶法3+凝集判定的结果,可以直接报告结果.     

O型血孕妇血清IgG抗体效价与新生儿溶血病的关系探讨

目的通过比较母体血型免疫性抗体IgG效价与新生儿溶血病(HDN)发病率的关系,得出产前孕妇血型血清IgG抗体效价检测是优生优育的一个重要方面。方法选取2008年1～12月316对夫妇血型不合的"O"型血妊娠妇女(下称孕妇)及其新生儿为研究对象,用微柱凝胶反应卡分别检测孕妇血清IgG抗体效价及HDN溶血3项指标。结果316例受检孕妇血清IgG抗体效价在1∶64～1∶256之间有185例;在1∶512～1∶1024之间有100例;效价大于1∶1024有31例;HDN总发病患儿66例。结论孕妇血清中血型免疫性抗体IgG是引起HDN的主要原因,且随着IgG抗体效价的增高,HDN的发病率也增高。     

孕妇ABO血型抗体效价的检测及分析

目的了解血型抗体效价异常在孕妇中所占比率及临床意义。方法用盐水试管凝集法进行IgG抗A或抗B的ABO血型效价检测。结果936例孕妇中，血清效价大于1：64者有95例，异常检出率10．1％。结论在产前保健孕妇中进行ABO血型抗体效价检测，及早发现异常及时治疗，可减少由于母婴血型不合引起的溶血疾病的发生，提高人口素质。     

红细胞膜免疫磁珠检测成分血中抗A/抗B的研究

目的比较应用红细胞膜免疫磁珠法及传统方法进行成分血中抗A/抗B效价检测之间的相关性。建立应用红细胞膜免疫磁珠检测血浆标本中高效价抗体的方法。方法采用新鲜细胞试管法、微柱凝胶法及红细胞膜免疫磁珠法进行血浆样本抗体效价检测。将试管法检测效价≥128的样本10倍、15倍、20倍稀释后,用红细胞膜免疫磁珠检测,测定其凝集强度。结果微柱凝胶法最敏感,其次为试管法,红细胞膜免疫磁珠法低于试管法1个滴度。将试管法检测效价≥128的待检样本15倍稀释后,用红细胞膜免疫磁珠检测,其凝集强度≥2+。结论红细胞膜免疫磁珠可做为标准红细胞抗原应用于抗体效价检测,将样本进行15倍稀释,若凝集强度≥2+,则可视其带有高效价抗体。     

血型标准血清简易干燥保存方法

为了不使血型标准血清受细菌污染变质,我们根据边区农村基层卫生单位的特点,对标准血清的保存方法作了以下改进。其方法是:1.应用常规方法制备标准血清(A 型血清凝集效价1∶64,B 型血清凝集效价1∶128以上)作为制备使用。2.用清洁干燥玻片25×75mm,用蜡笔在玻片的左上角标明“A”,右上角标明“B”。将上述制备好的标准血清各自加一滴在标记     

500例孕妇ABO血型抗体效价检测分析

[目的]了解血型抗体效价异常在孕妇中所占比率及临床意义。[方法]用盐水试管凝集法进行IgG抗A或抗B的ABO血型抗体效价检测。[结果]500例孕妇中,血清效价大于1：64者有48例,异常检出率为9．6％。[结论]在产前保健孕妇中进行ABO血型抗体效价检测,及早发现异常及时治疗,可减少由于母婴血型不合引起的溶血疾病发生,提高人口素质。     

3 463例O型血孕妇产前IgG抗A（B）抗体效价分析

目的探讨微柱凝胶法检测IgG抗A(B)抗体效价的临界值,分析抗体效价水平变化和孕妇年龄与新生儿溶血病发生率的关系。方法根据围产期3 463例孕妇及其丈夫血型,分别用微柱凝胶法和试管法检测IgG抗A、抗B抗体效价。根据不同妊娠次数(1次、2次、≥3次),将1 620例O型孕妇分3组,从22周开始每隔4周检测血清中IgG抗A(B)的效价,分别用微柱凝胶法检测IgG抗A、抗B抗体效价,检测新生儿溶血病相关指标。结果微柱凝胶法抗体效价256作为参考值;3 463例围产期孕妇检测IgG抗A(B),IgG抗A检测共2 257人次,其几何平均效价为169,IgG抗B检测共1 711人次,其几何平均效价为143。连续监测1 620例不同孕次数O型血孕妇,首次妊娠896例中IgG抗A(B)抗体效价≥256的共260例(29.02%),2次妊娠248例IgG抗A(B)抗体效价≥256的共107例(43.15%),≥3次妊娠共476例IgG抗A(B)抗体效价≥256的共220例(46.70%);抗体效价滴度分别升高1、2、3个及以上孕妇的平均年龄分别为26.4、27.8、29.9岁,新生儿溶血病的发生率分别为21.66%、40.94%、84.90%。结论检测O型孕妇产前血清中IgG抗体时,微柱凝胶法的敏感性高于传统试管法,微柱凝胶法检测抗体效价的参考值高于试管法;多次妊娠者IgG抗A(B)抗体效价阳性率高于首次妊娠者;且当抗体效价升高2个及以上滴度时,年龄越高,HDN发病率越高。     

用兔抗人分化抑制因子3抗体建立双抗体夹心ELISA法及初步临床应用

目的 制备兔抗人分化抑制因子3（Id3）多克隆抗体,建立检测血清Id3的双抗体夹心ELISA技术。 方法 用纯化的Id3重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗Id3多克隆抗体,通过多肽亲和层析柱去除非特异性成分,免疫细胞化学染色、免疫双向扩散及间接ELISA法检测抗体特异性和效价。制备辣根过氧化物酶（HRP）标记抗Id3,以纯化Id3重组蛋白为标准抗原制备标准曲线,建立定量检测人Id3的双抗体夹心ELISA法。 结果 免疫细胞化学染色显示,制备的兔抗血清能与人Id3蛋白特异性结合,所得兔抗血清效价分别为1 ∶ 8（琼脂双向扩散）和1 ∶ 8 000（ELISA）。ELISA法的包被抗体和酶标记抗体的工作浓度分别为5 μg/ml和1 ∶ 4 000,标准曲线为Y= 0.079 3+0.018 8X,r=0.997。检测线性范围为2～64 U/ml,平均回收率为98.2%, 批内平均变异系数（CV）为4.4%, 批间平均CV为7.2%。该方法可用于人血清Id3含量的检测。 结论 兔抗人Id3多克隆抗体的制备及夹心ELISA法的建立为今后研究Id3蛋白的功能及其在临床和基础医学中的应用奠定了基础。     

孕妇产前血清IgG抗-A(B)效价与新生儿溶血病的关系

目的探讨孕妇产前免疫性IgG抗-A(B)效价与新生儿溶血病(HDN)之间的关系。方法对286例ABO血型抗体效价大于或等于1∶64的产前孕妇IgG抗-A(B)效价检测结果及其产后新生儿的HDN 3项检测结果进行统计和回顾性分析。结果 286例孕妇血型为O型血的占97.2%(278/286),其他血型占2.79%(8/286);孕妇产前血清IgG抗-A(B)效价为1∶64、1∶128、1∶256、1∶512的HDN阳性率分别为25.36%、62.12%、76.51%、80%,HDN阳性比率随着孕妇血清IgG抗-A(B)效价的升高而增高。结论孕妇产前血清IgG抗-A(B)效价检查对ABO溶血病有一定的预警作用,结合新生儿HDN血清学3项检测试验,对及早防治新生儿溶血病有临床意义。     

孕妇血浆IgG抗A(B)抗体效价检测的临床意义

目的探讨孕妇血浆IgG抗A(B)抗体效价检测的临床意义。方法用微柱凝胶方法对IgG抗A(B)的抗体效价进行检测。结果在1 906例IgG抗A(B)孕妇中血清效价大于1∶256者有327例,占17.1%。结论在产前保健孕妇中进行血型抗体效价检测及早发现异常、及时治疗可减少由于母婴血型不合引起的溶血疾病发生,对新生儿溶血病的预防有重要意义。     

微柱凝胶技术测定孕妇IgG抗A(B)效价分析

目的分析抗人球蛋白微柱凝胶技术在测定O型孕妇血清IgG抗A(B)效价的方法学应用。方法应用微柱凝胶技术测定220例O型孕妇血清IgG抗A(B)效价,并对结果进行分析。结果 220例O型孕妇血清IgG抗体效价检测,IgG抗体效价大于或等于1∶64者共77例,其中O-A型夫妇IgG抗A效价大于或等于1∶64者28例,O-B型夫妇IgG抗B效价大于或等于1∶64者39例,O-AB型夫妇IgG抗A(B)效价均大于或等于1∶64者10例。结论微柱凝胶法检测O型孕妇血清IgG抗A(B)效价可有效地预防因母婴ABO血型不合引起的新生儿溶血病的发生,对优生优育具有重要的临床意义。     

动态监测新生儿ABO溶血病患儿其O型母亲孕期IgG抗A(B)效价的研究

目的动态监测O型孕妇不同孕期血清IgG抗A(B)效价,为更加准确地预测新生儿ABO溶血病(HDN)的发生提供诊断依据。方法通过对232例新生儿ABO溶血病的患儿其O型母亲孕早期和孕晚期IgG抗A(B)效价的动态监测,观察这类孕妇抗体效价的分布情况、变化率和变化幅度。结果这类孕妇的孕早期和孕晚期IgG抗A(B)效价大多分布在大于或等于1∶256;这类孕妇中绝大多数(O-A:94.9%,O-B:95.8%)孕晚期的IgG抗A(B)效价较孕早期有不同程度的升高;其中以升高2个滴度为主(O-A:46.3%,O-B:44.8%);这类孕妇中有11例其孕晚期的IgG抗A(B)效价较孕早期无变化甚至发生降低,这11例孕妇孕早期的IgG抗A(B)效价就偏高,主要分布在大于或等于1∶512。结论动态监测O型孕妇不同孕期血清IgG抗A(B)效价十分必要,可以将孕晚期抗体效价较孕早期升高2个滴度或以上作为一项可以更加准确预测ABO溶血病发生的诊断依据。     

天然抗-M引起交叉配血不合1例

无偿献血者 ,女 ,2 1岁 ,无输血史、妊娠史 ,血型为B型Rh阳性 ,与患者吴××进行交叉配血时 ,发现次管凝集 ,做如下血型血清学检查 :1　血型血清学检查　1.1　血型鉴定　正定型其红细胞与抗 B抗 AB标准血清凝集 ,与抗 A不凝集。反定型其血清可凝集标准Ac、Bc、Oc、自身对照不凝集。判断血清中可能存在ABO以外的抗体。1.2　唾液中A、B、H物质测定　存在B及H物质 ,效价为 16和 8,未测出A物质。1.3　抗体筛选及效价测定　反应格局见表 1(谱细胞由上海血液中心提供 ) ,结果显示该血清中存在IgM型抗 M抗体 ,其效价为 8。1.4　抗体性…