特发性肺纤维化患者支气管/肺泡上皮细胞凋亡和Fas/FasL基因表达

目的：检测细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白在特发性肺纤维化患者肺泡/支气管上皮细胞的表达,探讨细胞凋亡和促凋亡信号在此疾病中的意义。方法：应用末端原位杂交（TUNEL）、原位杂交、免疫组化技术,对12例特发性肺纤维化患者的肺活检组织（IPF组）及10例正常肺组织（对照组）检测了细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白表达的变化。结果：特发性肺纤维化组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数上调,明显高于对照组（P〈0.01）;IPF组肺泡/支气管上皮细胞中Fas/FasL mRNA及其蛋白表达上调,高于对照组（P〈0.01）;IPF组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数与其Fas/FasL mRNA及蛋白表达之间均无明显相关（P〉0.05）。结论：肺纤维化时肺泡/支气管上皮细胞凋亡上调,Fas/FasL mRNA及其蛋白表达增强,在肺纤维化发生、发展中起重要作用。     

HIF-αl、Caspase-3、Survivin蛋白的表达与食管鳞癌发生关系的研究

目的研究缺氧诱导因子-lα（HIF-lα）,Caspase-3,Survivin在食管癌的发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法检测49例食管鳞癌中HIF-lα、Caspase-3、Survivin蛋白的表达。结果HIF-lα蛋白在食管鳞癌组织中的阳性率为51.0%（25/49）,显著高于正常食管黏膜0（0/32）（P〈0.05）;Caspase-3蛋白在食管鳞癌组织中的阳性率为34.7%（17/49）,显著低于癌旁正常黏膜100%（32/32）（P〈0.05）;Survivin蛋白在食管鳞癌组织中的阳性率为57.1%（28/49）,显著高于癌旁正常黏膜6.3%（2/32）（P〈0.05）。结论HIF-lα蛋白Survivin蛋白的高表达和Caspase-3蛋白的低表达,在食管鳞癌发生、发展中起重要作用,HIF-lα蛋白的阳性表达可能下调下Caspase-3蛋白的表达,使Survivin蛋白的表达增加。联合检测HIF-1α、Caspase-3与Survivin可作为判断食管癌生物学行为的客观指标,对判断食管癌的预后具有重要意义。     

辛伐他汀对老年COPD大鼠肺泡上皮细胞凋亡的干预作用

目的：探讨辛伐他汀对老年COPD大鼠肺泡上皮细胞凋亡干预作用。方法39只老年Wistar大鼠随机分为正常组（A组）、COPD模型组（B组）及辛伐他汀干预组（C组）,每组各13只。B、C组采用熏香烟联合气道内滴入脂多糖法建立大鼠COPD模型,在造模2周后C组给予辛伐他汀（2.5 mg/kg）灌胃6周,A、B组给予同等量生理盐水灌胃。8周后处死大鼠,并观察大鼠肺组织病理变化,检测肺泡上皮细胞凋亡及凋亡相关因子半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS） mRNA表达,并计算凋亡指数。结果与A组相比, B组和C组凋亡指数、Caspase-3及iNOS mRNA表达增加（P均＜0.01）,eNOS mRNA表达降低（P＜0.01）;与B组相比,C组凋亡指数、Caspase-3及iNOS mRNA表达降低（P均＜0.01）,eNOS mRNA表达增加（P＜0.01）。各组间肺泡上皮细胞凋亡指数与Caspase-3及iNOS mRNA表达呈正相关（P＜0.05）,与eNOS mRNA表达呈负相关（P＜0.05）。各组间Caspase-3 mRNA与iNOS mRNA表达呈正相关（P＜0.05）,与eNOS mRNA表达呈负相关（P＜0.01）。结论辛伐他汀通过增加肺组织eNOS基因表达,抑制iNOS及Caspase-3基因表达,抑制了老年COPD大鼠肺泡上皮细胞凋亡。     

Rb2／pl30在食管鳞癌中的表达及其意义以及同Survivin相关性分析

目的研究Rb2／p130、Survivin在食管鳞癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组化法检测20例癌旁正常食管组织、62例食管鳞状细胞癌组织中Rb2／p130、Survivin的表达。结果在癌旁正常组织黏膜、食管鳞癌中，Rb2／p130的阳性表达率分别为90％（18／20）、43．5％（27／62）；Survivin分别为0、56．5％（35／62）；在不同分化程度的食管鳞癌中，Rb2／p130（x^2=14．982，P=0．001）、Survivin（x^2=9．685，P=0．006）表达强度的差异均有显著性；在不同临床分期的食管鳞癌中，Rb2／p130（x^2=7．655，P=0．022）、Survivin（0=11．041，P=0．004）表达强度的差异均有显著性；Rb2／p130（x^2=10．162，P=0．001）、Survivin（0=4．659，P=0．031）表达强度在淋巴结有转移组和淋巴结无转移组之间，差异亦均有显著性。癌细胞分化程度越低，临床分期越晚，淋巴结有转移，Survivin，Rb2／p130则表达显著减弱。两者的表达强度与食管鳞癌的肿瘤部位、肿瘤长度均无关；Spearman等级相关分析结果显示：Rb2／p130与Survivin之间的表达强度呈显著负相关（rs=-0．475，P〈0．001）。结论Rb2／p130低表达以及Survivin高表达，在食管癌的发生和发展中起着重要作用。     

Survivin和Caspase-3在人类大肠腺瘤及大肠癌中的表达以及与凋亡的关系

目的 评价大肠腺瘤及大肠癌组织中Survivin和Caspase-3的表达情况以及与细胞凋亡的关系。方法 采用免疫组化二步法，对48例无术前放、化疗史的大肠癌患者的手术标本，20例正常大肠黏膜和25例腺瘤标本。进行Survivin和Caspase-3检测，并用TUNEL法检测凋亡细胞。结果 Survivin在正常大肠黏膜中无表达，在管状腺瘤、绒毛状和混合型腺瘤及腺癌中的阳性表达分别为10％、33．3％、70．8％。Caspase-3在正常粘膜、管状腺熘、绒毛状和混合型腺瘤及腺癌中的阳性表达分别为95％、60％、53．3％、45．8％。正常黏膜组织Caspase-3的表达高于大肠腺瘤和大肠癌（P〈0．05）。Survivin和Caspaso-3在大肠癌中的表达强度随组织分化程度增高而增强；而在不同的Dukes分期间无显著差异（P〉0．05）。大肠癌组织中Survivin与Caspase-3的表达无直线相关关系，Survivin阳性组凋亡指数明显低于阴性组（P〈0．005）。结论 Survivin在大肠癌发生早期过程中表达上调，有望成为大肠癌新的早期诊断标志物。Survivin作为凋亡抑制蛋白显著抑制癌组织的细胞凋亡，但不能完全抑制Caspase-3的表达。     

凋亡调控因子Survivin和Caspase-3蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨宫颈鳞状细胞癌中凋亡凋控因子Survivin和Caspase-3蛋白的表达及其意义.方法采用免疫组织化学技术检测40例宫颈鳞状细胞癌及10例正常宫颈组织中Survivin和Caspase-3的表达水平.结果Survivin蛋白在宫颈鳞状细胞癌 中表达水平高于正常宫颈组织(P＜0.05).Caspase-3表达水平低于正常宫颈组织(P＜0.05).Survivin和Caspase-3蛋白的表达水平在不同分化程度的宫颈癌之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论宫颈鳞状细胞癌的发生、发展与Survivin和Caspase-3蛋白的异常表达有关,可能是细胞异常增殖和凋亡失衡的结果.     

乳腺导管内增生性病变中Survivin的表达及意义

目的 探讨乳腺良性、恶性病变中Survivin的表达及临床病理特征的关系。 方 法应用免疫组织化学SP法检测23例癌旁正常乳腺组织、28 例乳腺增生组织（其中20 例普通型增生,8 例非典型增生）、8 例导管内癌、98 例浸润性癌组织Survivin 的表达。 结果非典型增生上皮和导管内癌的Survivin水平高于正常乳腺腺上皮（P＜0.01）;浸润性导管癌组织中的Survivin表达率为49.0%高于正常乳腺腺上皮（P＜0.05）;与增生的乳腺组织和导管内癌组间差异无显著性。浸润性癌中的Survivin表达与分级、腋淋巴结转移、TNM分期有关,与病人的年龄、肿瘤大小、ER、PR无关。 结论Survivin在乳腺良恶性病变不同表达,提示其在乳腺癌发生、发展中起重要作用,可以为乳腺癌的诊断、治疗和预后提供依据。      

肺癌组织中survivin的表达及其与细胞凋亡和增殖相关性的研究

目的探讨肺癌中survivin蛋白的表达与临床病理特征、肿瘤细胞凋亡和增殖的关系。方法采用SP法对83例肺癌组织和16例肺良性病变组织分别进行survivin及Ki67的免疫组化染色,分析survivin与肿瘤临床分期和肿瘤细胞分级间的关系,同时用原位末端标记法（TUNEL）标记肺癌组织中的凋亡细胞,并对survivin与凋亡指数（apoptosie index,Al）和增殖指数（proliferative index,PI）的相关性进行了研究。结果Survivin蛋白在16例肺良性病变组织仅能有1例表达（6.25%）。83例肺癌组织中survivin蛋白阳性表达率为62.7%（52/83）,两组差异显著（P〈0.05）;survivin在肺癌中的表达与肿瘤的组织学分型、病理分级和淋巴结转移均无明显相关性（P〉0.05）,但与临床分期（TMN）有相关性（P〈0.05）。Survivin阳性组平均AI值显著低于阴性组（P〈0.01）,survivin凋亡指数表达与AI值呈负相关（r=-0.6008,P〈0.01）;Survivin阳性组平均PI值显著高于阴性组（P〈0.05）,survivin表达与PI值呈正相关（r=0.4885,P〈0.01）。结论Survivin在肺癌组织中表达明显上调,可抑制肿瘤细胞凋亡、促进细胞增殖,在肺癌的发生、发展中起到重要作用。     

COX-2和Survivin蛋白在食管鳞癌中的表达和临床意义

目的探讨COX-2和Survivin蛋白在食管鳞癌恶变过程中表达的意义。方法采用免疫组织化学方法检测57例食管鳞癌组织和其癌旁正常食管黏膜的COX-2和Survivin蛋白的表达,探讨其与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。结果COX-2和Survivin蛋白阳性表达主要定位于肿瘤细胞胞质内。COX-2和Survivin在57例食管鳞癌组织中呈明显高表达,在正常食管黏膜呈低表达,差异有统计学意义（P〈0.05）;COX-2和Survivin表达与食管鳞癌的分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有明显相关性（均P〈0.05）;食管鳞癌癌组织中COX-2和Survivin蛋白的表达呈正相关（r=0.387,P〈0.05）。结论COX-2和Survivin的高表达可能共同参与食管鳞癌的发生、发展,对判断食管鳞癌预后可能具有重要价值。     

Caspase-3及P53蛋白在口腔扁平苔藓及口腔鳞癌中表达意义

目的探讨Caspase-3及P53蛋白在口腔扁平苔藓及鳞癌癌变过程中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测45例口腔扁平苔藓（扁平苔藓组）和46例口腔鳞癌（鳞癌组）和15例正常口腔黏膜组织（对照组）中Caspase-3及P53蛋白的表达情况并进行比较。结果Caspase-3蛋白表达在扁平苔藓组（71．11％）高于鳞癌组（47．83％）（P〈0．05）、但低于对照组（93．33％）（P〈0．05）;P53蛋白在鳞癌组中阳性表达率（78．26％）明显高于对照组（0）和扁平苔藓组（28．89％）（P均〈0．05）;Caspase-3蛋白与P53蛋白呈负相关（r=0．339,P=0．021）。结论Caspase-3蛋白可抑制口腔扁平苔藓和鳞癌的发展,P53蛋白则在其发展中起促进作用。     

F-box蛋白4和端粒重复序列结合因子1相互作用核蛋白2mRNA表达与食管鳞癌发生发展关系研究

目的 检测食管鳞癌组织中F-box蛋白4(FBX4)和端粒重复序列结合因子1相互作用核蛋白2(TIN2)mRNA表达,并分析其与食管鳞癌相关临床指标的关系.方法 收集110例明确诊断的食管鳞癌中心组织及其30例癌旁组织,采用SBYR Green实时荧光定量PCR方法检测FBX4和TIN2基因在食管鳞癌中心组织和癌旁组织mRNA水平的表达,并分析FBX4和TIN2 mRNA表达临床相关指标的关系.结果 FBX4 mRNA在食管鳞癌组织中的相对表达量为0.24±0.43(n=110),而在肿瘤旁组织中为0.40±0.27(n=30),两者差异具有统计学意义(P=0.008);食管鳞癌组织中TIN2 mRNA的相对表达量为1.59±1.19(n=101);肿瘤旁为2.54±1.89(n=30),两者差异具有统计学意义(P=0.000).TIN2 mRNA表达在临床各参数不同分组内均未发现有统计学差异(P>0.05),而FBX4 mRNA表达虽在不同性别、年龄、钡餐分型、临床分期和肿瘤长度中均没有统计学差异(P>0.05),但在不同病理分型中存在统计学差异,即相对于高分化鳞癌,低分化和中分化的鳞癌组织中的FBX4 mRNA表达增加,差异具有统计学意义(P<0.05).FBX4和TIN2在肿瘤组织中的表达呈正相关(r=0.671,P=0.000).结论 FBX4和TIN2 mRNA在食管鳞癌组织中均表现表达增高,且存在直线相关关系,提示FBX4和TIN2可能在食管癌的发生发展中具有重要的临床意义;肿瘤分化程度与FBX4表达相关,而与TIN2不相关,表明肿瘤分化还与FBX4介导的泛素化相关.     

喉鳞癌组织中bFGF蛋白的表达及临床意义

目的探讨喉鳞癌组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白的表达及临床意义。方法选择52例喉鳞癌组织和52例癌旁组织标本,采用免疫组织化学SP法检测其中bFGF蛋白的表达情况,分析bFGF的表达与喉鳞癌临床病理学特征的关系。结果 bFGF在喉鳞癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05);喉鳞癌组织中bFGF蛋白的表达与喉鳞癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);与喉鳞癌组织中临床分型、肿瘤大小、性别、年龄以及吸烟量不相关(P>0.05)。结论 bFGF在喉鳞癌中高表达,在喉鳞癌的发生发展过程中起到重要作用,bFGF的检测将有助于喉癌患者恶性程度及预后的评估。     

康莱特对HepG2细胞凋亡及其Caspase-3和Survivin表达影响

目的观察康莱特注射液对HepG2肝癌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）和存活素（Survivin）表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法分别采用体积分数0.005、0.010、0.015、0.020的康莱特体外培养HepG2细胞。采用MTT法检测HepG2细胞抑制率,流式细胞仪检测HepG2凋亡情况以及Caspase-3和Survivin表达的变化。结果康莱特能明显抑制HepG2肝癌细胞生长,且呈时间和浓度依赖性。康莱特组中Caspase-3、Survivin蛋白的表达与对照组比较,差异有显著性（P〈0.01）。结论康莱特可抑制HepG2肝癌细胞增殖,并可通过提高Caspase-3蛋白表达和降低Survivin蛋白表达诱导HepG2肝癌细胞凋亡。     

Caspase-3蛋白在喉鳞癌组织中表达及与喉癌细胞凋亡的对比研究

目的探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白在喉鳞癌组织中的表达以及与喉癌细胞凋亡的对比关系。方法应用免疫组化SP法分别检测31例喉鳞癌组织和15例声带息肉组织中Caspase-3蛋白表达,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的荧光素末端标记法(TUNEL)检测喉鳞癌细胞凋亡率,计算凋亡指数(AI)值并与Caspase-3喉癌组织中表达阳性率结果对比。结果 Caspase-3在喉鳞癌组织中的表达低于声带息肉组织(P<0.01)。Caspase-3的表达在喉癌组织分化程度、有无淋巴结转移及临床分期的差异具有统计学意义(P<0.05),在临床分型、有无吸烟、性别及年龄方面的差异无统计学意义(P>0.05)。喉癌组中凋亡的表达凋亡指数明显低于癌旁组,在统计学上有显著性差异(P<0.05)。喉鳞癌组织中Caspase-3的表达与TUNEL阳性细胞(凋亡细胞)数呈显著正相关,差异具有统计学意义(r=0.790,P<0.0)。结论 Caspase-3蛋白在喉鳞癌中低表达可促进喉鳞癌的发生、发展,其蛋白检测可作为判断喉癌分化、浸润转移及临床分期的重要指标。     

Notch1受体蛋白在成人肺癌中的表达

【目的】研究Notchl蛋白在成人小细胞肺癌（SCLC）及非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达,探讨Notchl受体在原发性支气管肺癌发生中的作用。【方法】采用免疫组织化学方法分别检测肺鳞癌、腺癌、小细胞癌及阴性组织切缘各组肺组织中Notch1蛋白的表达,并用Image-Pro Plus6．0图像分析系统进行定量分析,比较Notchl蛋白在各组中的表达。【结果】肺鳞癌及腺癌标本中Notchl的表达强于相应的阴性组织切缘标本（P〈0．05及P〈0．01）;肺小细胞癌标本中Notchl的表达弱于相应的阴性组织切缘标本,但组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。在三组肺癌标本中,以肺腺癌中Notch1的表达最强（P〈0．01）;鳞癌组中Notchl的表达亦强于小细胞癌组（P〈0．01）。[结论]Notchl信号在支气管肺癌的发病机制中可能发挥一定作用,且在不同的病理类型中起到的作用有差异。     

沐舒坦联合肺灌洗治疗重型颅脑损伤患者气管切开术后肺部感染的疗效

目的：探讨沐舒坦联合肺灌洗在重型颅脑损伤患者气管切开术后肺部感染的预防与治疗中的价值。方法将90例患者随机分为观察组和对照组,每组45例。对照组给予纤维支气管镜下肺灌洗,观察组给予沐舒坦联合纤维支气管镜下肺灌洗。比较两组患者气管切开术第1、3、5、7天支气管肺泡灌洗液细胞分类和计数,以及两组患者气管切开后30 d内气管套管拔除例数。记录两组患者气管切开30 d后肺部感染例数、控制例数、控制天数和二次感染病例。结果两组气管切开7 d后的白细胞数和多形核细胞数较第1天均明显减少（P﹤0.05）。观察组分别从第5天和第3天白细胞数和多形核细胞数显著低于对照组,差异有统计学意义（P﹤0.05）。观察组肺部感染率为66.67%（30/45）,控制率为86.67%（26/30）,与对照组比较差异有统计学意义（P﹤0.05）。气管切开30 d后,观察组和对照组气管套管拔除率分别为60.0%和26.7%,差异有统计学意义（P﹤0.05）。结论沐舒坦联合肺灌洗可以有效预防重型颅脑损伤患者气管切开术后肺部感染的发生,并能更好地控制肺部感染,促进气管修复,具有良好的临床疗效,值得在实践中推广使用。     

Survivin siRNA沉默对非小细胞肺癌细胞生物学的影响

目的探讨凋亡抑制蛋白(Survivin)对非小细胞肺癌(NSCLC)H1299细胞株的生物学影响。方法通过脂质体介导将Survivin基因siRNA瞬时转染H1299细胞。采用RT-PCR及Western blot检测转染后H1299细胞内Survivin基因的表达水平。MTT比色法、流式细胞术(FCM)及Western blot观察细胞增殖、凋亡、周期及Caspase-9蛋白表达变化情况。结果 RT-PCR及Western blot证实,siRNA沉默的H1299细胞中Survivin mRNA、蛋白的表达水平较未转染组明显降低(t=10.970,P=0.000;t=9.192,P=0.003)。MTT、细胞凋亡及周期结果表明,siRNA沉默的H1299细胞其增殖能力明显减弱、细胞凋亡明显升高,G2/M期阻滞,Caspase-9蛋白表达增加(t=8.162,P=0.001;t=10.800,P=0.000;t=9.192,P=0.003)。结论 Survivin参与NSCLC细胞增殖、凋亡、周期这一生物学过程。     

组织芯片技术在研究肿瘤组织中抗原表达的应用

目的：研究多种肿瘤组织芯片、肿瘤进展组织芯片以及肿瘤预后相关组织芯片中多种抗原的表达,明确组织芯片技术在肿瘤研究中的应用。方法：运用组织芯片技术和免疫组织化学法检测多种肿瘤组织中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的表达、肺癌进展组织中P53的表达及肺鳞癌组织中P16的表达。结果：手工制作的组织芯片阵列排列整齐,仅有1个组织缺失（1／625—0．16％）,3个组织有折叠（3／625=0．48％）,其余组织形态均好;ER、PR在乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、肺癌、食管癌、胃癌等多种肿瘤中均有强弱不等的表达;P53在肺癌及不典型增生组织中阳性表达率（70％,40％）明显高于在正常支气管黏膜中的表达（0％）（P〈0．05）;P16蛋白在肺鳞癌中失表达率为57．9％,其中有转移组（8／13—61．5％）高于无转移组（7／17—41．2％）（P〈0．05）。结论：组织芯片技术能快速、高效地对大量肿瘤组织样本进行各种检测分析,低消耗、可比性强,手工制作简单又经济,可以广泛地应用于肿瘤病理研究的各个方面;应用组织芯片技术,检测到ER,PR在多种肿瘤中均有表达,提示两者与多种肿瘤的发生有关;证明了P53基因的突变是肺癌发生的早期事件,参与了肺癌的发生与发展;P16基因在肺鳞癌中有一定的失表达率,而且与肿瘤预后相关因素中是否转移有一定相关性。