CD3单抗诱导的T细胞功能检测法

建立了用特异性刺激原白细胞分化抗原３（ＣＤ３）单克隆抗体（单抗）诱导外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）增殖转化、产生白细胞介素－２（ＩＬ－２）及ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）表达等检测Ｔ细胞功能的方法，并对其实验影响因素进行探讨。结果表明：ＣＤ３单抗诱导ＰＢＬ活化的过程与Ｔ细胞在体内的活化过程相符；ＣＤ３单抗的丝裂原作用所需浓度范围广、用量少；由ＣＤ３单抗诱导的ＰＢＬ转化能力受ＣＤ３单抗的浓度和培养时间的影响；     

CD_3单抗诱导的T细胞功能检测法

建立了用特异性刺激原白细胞分化抗原３（ＣＤ＿３）单克隆抗体（单抗）诱导外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）增殖转化、产生白细胞介素－２（ＩＬ－２）及ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）表达等检测Ｔ细胞功能的方法，并对其实验影响因素进行探讨。结果表明：ＣＤ＿３单抗诱导ＰＢＬ活化的过程与Ｔ细胞在体内的活化过程相符；ＣＤ＿３单抗的丝裂原作用所需浓度范围广、用量少；由ＣＤ＿３单抗诱导的ＰＢＬ转化能力受ＣＤ＿３单抗的浓度和培养时间的影响；ＣＤ＿３单抗与植物血凝素（ＰＨＡ）活化Ｔ细胞的效应，在Ｔ细胞增殖方面二者呈显著正相关，而在ＩＬ－２活性和ＩＬ－２Ｒ表达方面则无相关性。     

多发性骨髓瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和CD_（38）~＋细胞的变化及其意义

为探讨多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者细胞免疫功能和外周血肿瘤前体细胞的变化及其意义，应用间接免疫荧光法对２６例ＭＭ患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群和携带浆细胞相关抗原（ＰＣＡＡ）——ＣＤ３８＋的淋巴细胞进行了检测。结果表明：①ＭＭ患者ＣＤ３＋（总Ｔ）细胞、ＣＤ４＋（ＴＨ）细胞、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值下降（Ｐ＜０．０５），而ＣＤ８＋（ＴＳ／ＴＣ）细胞无明显变化。②ＭＭ患者外周血ＣＤ３８＋细胞明显增高，化疗后ＣＤ３８＋细胞数量明显下降（Ｐ＜０．０５）。结论：①ＭＭ患者体内存在细胞免疫功能紊乱。②ＭＭ患者外周血中存在肿瘤前体细胞，并且与疾病的临床分期和化疗有关。     

B7/CD28分子激发T细胞抗多发性骨髓瘤细胞的作用

目的探讨Ｂ７／ＣＤ２８分子激发Ｔ淋巴细胞抗多发性骨髓瘤（ＭＭ）作用和提高ＭＭ细胞抗原性的机制。方法采用人Ｂ７１基因对人ＭＭ细胞的转导、ＣＤ２８激发型单克隆抗体（单抗）的激发、同种异体混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）、免疫表型分析和白细胞介素２（ＩＬ２）ＥＬＩＳＡ法定量检测。结果ＸＧ细胞转染Ｂ７１ｃＤＮＡ后,能稳定高表达Ｂ７１,转染Ｂ７１ｃＤＮＡ前后细胞表达ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８、ＣＤ４０、ＣＤ５４、ＣＤ５６、ＣＤ５８、Ｂ７２（ＣＤ８６）、ＣＤ４０Ｌ、ＨＬＡⅠ和ＨＬＡⅡ抗原均无明显变化,转染Ｂ７基因后可使肿瘤细胞的抗原性明显增加,在ＭＬＲ中,ＸＧ７１转基因细胞较ＸＧ细胞更能显著介导ＣＤ８＋Ｔ细胞的活化、增殖和ＩＬ２的分泌。ＣＤ２８激发型单抗与Ｂ７１分子相似,能显著介导同种异体Ｔ细胞的混合淋巴细胞反应。结论人ＭＭ细胞不能有效地激发Ｔ细胞抗肿瘤的主要原因之一为其不表达Ｂ７１分子,转染Ｂ７１分子或者加入ＣＤ２８激发型单抗均能有效地提高肿瘤细胞的抗原性和对Ｔ细胞的激发作用,ＣＤ２８激发型单抗临床治疗ＭＭ更具有可行性。     

胃癌细胞冻融液诱导细胞毒T淋巴细胞的实验研究

以胃腺癌患者的癌细胞冻融液作为抗原，合并应用抗ＣＤ３单克隆抗体，基因重组白细胞介素－２，在体外培养自体外周血单个核细胞，诱导产生细胞毒Ｔ淋巴细胞，用ＭＴＴ比色法检测对自体癌细胞及人胃癌细胞的杀伤活性，用流式细胞光度仪测定外周血单个核细胞在培养前，后ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８细胞的数量变化，结果表明用这种方法诱导产生的细胞毒Ｔ淋巴细胞其ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８的百分率明显外周备单个核细胞，对自体癌细胞的杀     

反义Fas阻断激活T细胞凋亡的研究

目的：探索阻断激活Ｔ细胞凋亡的途径，增加激活的Ｔ细胞数量，提高肿瘤免疫治疗的疗效。方法：应用ＣＤ３诱导Ｊｕｒｋａｔ细胞的凋亡作为激活的Ｔ细胞凋亡模型，应用逆转录病毒载体将反义Ｆａｓ转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，观察反义Ｆａｓ对ＣＤ３及抗Ｆａｓ单克隆抗体（单抗）对Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡的影响。结果：构建一个反义Ｆａｓ的逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ－反义Ｆａｓ，并转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，发现Ｊｕｒｋａｔ细胞Ｆａｓ蛋白表达量下降，并部分阻断ＣＤ３及抗Ｆａｓ单抗诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡。结论：应用反义技术阻断Ｆａｓ基因表达，可部分阻断ＣＤ３及抗Ｆａｓ单抗诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡。     

流式细胞术检测狼疮患者白细胞分化抗原40配体

目的　了解在系统性红斑狼疮（ Ｓ Ｌ Ｅ） 患者血液中辅助性 Ｔ细胞（ Ｔｈ） 与 Ｂ 细胞间的白细胞分化抗原（ Ｃ Ｄ）４０ Ｃ Ｄ４０ 配体（ Ｌ） 的共刺激作用。方法　用抗 Ｃ Ｄ３ 单克隆抗体（ 单抗） 刺激 Ｓ Ｌ Ｅ 活动期和缓解期各１０ 例患者外周血单个核细胞（ Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ） ,采用流式细胞术检测不同时段 Ｃ Ｄ４０ Ｌ 的表达水平,并与正常对照组比较。结果　活动期 Ｓ Ｌ Ｅ 组 Ｃ Ｄ４０ Ｌ 的表达在抗 Ｃ Ｄ３ 单抗刺激前后均显著高于正常对照组,差异均有非常显著意义;而缓解期 Ｓ Ｌ Ｅ 组 Ｔ 细胞在抗 Ｃ Ｄ３ 单抗刺激前的 Ｃ Ｄ４０ Ｌ 表达在正常范围内,在刺激后显著高于正常对照组,差异有非常显著意义。结论　 Ｃ Ｄ４０ Ｌ Ｃ Ｄ４０ 共刺激作用在 Ｓ Ｌ Ｅ发病机制和病程中起着重要作用。     

流式细胞术检测狼疮患者白细胞分化抗原40配体

目的 了解在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血液中辅助性Ｔ细胞与Ｂ细胞间的白细胞分化抗原（ＣＤ）４０－ＣＤ４０配体（Ｌ）的共刺激作用。方法 用抗ＣＤ３单克隆抗体（单抗）刺激ＳＬＥ活动期和缓解期各１０例患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）,采用流式细胞术检测不同时段ＣＤ４０Ｌ的表达水平,并与正常对照组比较。     

多发性骨髓瘤患者外周血T淋巴细胞亚九和CD^＋38细胞的变化及…

为探讨多发性骨髓瘤患者细胞免疫功能和外周血肿瘤前体细胞的变化及意义，应用间妆免疫荧光法对２６例ＭＭ患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群和携带浆细胞相关抗原－ＣＤ＾＋３８的淋巴细胞进行了检测。结果表明：（１）ＭＭ患者ＣＤ＾＋３细胞，ＣＤ＾＋＿４细胞，ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８比值下降，而ＣＤ＾＋８细胞无明显变化。（２）ＭＭ患者外周血ＣＤ＾＋３８细胞明显增高，化疗后ＣＤ＾＋３８细胞数量明显下降。     

特发性血小板减少性紫癜患者白细胞介素2及T淋巴细胞研究

应用小鼠脾细胞法及间接免疫荧光法检测了２６例ＩＴＰ患者外周血淋巴细胞产生白细胞介素２（ＩＬ－２）及其受体（ＩＬ－２Ｒ）能力与Ｔ细胞亚群百分率。结果表明，ＩＴＰ患者外周血淋巴细胞产生ＩＬ－２及ＩＬ－２Ｒ的能力低下，Ｔ辅助细胞（ＣＤ＿４￣＋）百分率降低，Ｔ抑制细胞（ＣＤ＿８￣＋）百分率增高（Ｐ＜０．０１）。ＩＬ－２活性与ＣＤ＿４￣＋／ＣＤ＿８￣＋比值呈正相关。１０例ＩＴＰ患者血清可使正常外周血单个核细胞产生ＩＬ－２减少和ＩＬ－２Ｒ表达能力降低。     

紫外线照射自血回输对脑梗塞患者外周血淋巴细胞亚群和血浆纤维连…

对２４例脑梗塞患者紫外线照射自血回输（ＵＢＩＯ）治疗前、后外周血淋巴细胞亚群及血浆纤维连接蛋白（Ｆｎ）含量变化进行了观察。结果ＵＢＩＯ治疗前脑梗塞患者外周血中总Ｔ细胞（ＣＤ３＾＋）、Ｔ抑制细胞（ＣＤ８＾＋）数均较正常人明显减少，ＣＤ４／ＣＤ８比值上升；Ｂ＾＋和人类白细胞抗原（ＨＬＡ－ＤＲ＾＋）细胞数增多；白细胞介素ＩＩ受体（ＩＬ－２Ｒ＾＋）和Ｔ辅助（ＣＤ＾＋）细胞数则与正常人无差异。血浆Ｆｎ含量低     

缺铁性贫血合并反复呼吸道感染患儿细胞免疫功能观察

目的：测定６３例缺铁性贫血（ＩＤＡ）合并反复呼吸道感染（ＲＲＩ）患儿外周血白细胞介素２（ＩＬ－２）活性、血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平和Ｔ淋巴细胞亚群，并分析它们之间的相关性。方法：ＩＬ－２活性和ｓＩＬ－２Ｒ水平测定分别采用ＭＴＴ法和双抗体夹心法，Ｔ淋巴细胞亚群测定采用ＡＰＡＡＰ法。结果：ＩＬ－２活性，ＣＤ３＋、ＣＤ４＋细胞百分率和ＣＤ４＋／ＣＤ８＋细胞比值均显著低于对照组（Ｐ均＜０．０１），而ｓＩＬ－２Ｒ水平显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），ＣＤ８＋细胞百分率无明显变化。结论：ＩＤＡ合并ＲＲＩ患儿细胞免疫功能低下且紊乱。     

CD34+造血祖细胞的定向诱导分化研究

目的：探讨不同细胞因子组合定向诱导ＣＤ３４＋细胞向红系、粒系、巨核系及树突状细胞（ＤＣ）分化的能力。方法：利用免疫磁珠法（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＋细胞，在液体培养体系中经不同细胞因子组合的诱导，检测各系祖细胞及ＤＣ的扩增倍数。结果：干细胞因子、白细胞介素（ＩＬ）３、ＩＬ６、粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、粒细胞集落刺激因子、红细胞生成素、血小板生成素的不同组合，可使红系、粒系或巨核系细胞优势生长，其祖细胞可分别被扩增１４．９７±２．８９，１４．４６±３．１９及３４．６７±４．６２倍，ＣＤ４１ａ＋细胞增加了１７．２９±２．３４倍，ＦＬＴ３配基＋ＧＭＣＳＦ＋ＩＬ４＋肿瘤坏死因子α的组合可诱导ＣＤ３４＋细胞形成大量树突状细胞，ＣＤ１ａ＋细胞的比例增至２４．２８％±２．１４％（对照组为０．３６％±０．２８％）。结论：不同细胞因子组合可定向诱导ＣＤ３４＋细胞向红系、粒系、巨核系及树突状细胞分化，这在造血调控研究、造血细胞支持治疗及肿瘤免疫治疗中具有广阔的应用前景     

紫外线照射充氧自血回输对高血压病患者T淋巴细胞亚群及白细胞介素2受体的影响

采用紫外线照射充氧自血回输法治疗高血压病患者２８例，每周２次，６次为１疗程。测定１疗程前后Ｔ细胞亚群ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８、白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）的变化。结果：治疗后高血压病患者ＣＤ３、ＣＤ４明显降低，ＣＤ８具升高趋势，ＣＤ４／ＣＤ８明显降低（Ｐ＜０．００１），而血清ＩＬ－２Ｒ含量明显下降（Ｐ＜０．００１）。表明该法治疗能有选择地改变和调节机体的免疫功能状态。     

脑出血患者周围血细胞免疫功能的研究

目的：探讨脑出血患的细胞免疫功能及临床意义。方法：对４６例脑出血患及４２例正常外周血Ｔ淋巴细胞亚群及血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓｌＬ－２Ｒ）水平进行检测,并对其中２１例脑出血患恢复期进行复查。结果：脑出血急性期及病情重、预后差外周血ＣＤ３数量、ＣＤ４／ＣＤ８比值明显降低,而ＣＤ８、ｓｌＬ－２Ｒ显升高,而恢复期结果与之相反。结论：脑出血患细胞免疫功能明显低下,检测外周血Ｔ淋巴细胞亚     

人胎胸腺CD3AK细胞临床抗肿瘤应用可行性研究

本实验通过人胎胸腺细胞对ＣＤ３单抗和ＩＬ－２反应性的了解，探讨了胸腺细胞诱导ＣＤ３ＡＫ细胞的可行性，结果表明，ＣＤ３单抗或小剂量外源性ＩＬ－２仅能诱导胸腺细胞轻微增殖，ＣＤ３单抗诱导胸腺细胞增殖不存在剂量相关效应ＩＬ－２对胸腺细胞增呈现剂量梯度的诱导过程，二者联合应用不仅能够使胸腺细胞活化增殖，而且可诱导胸腺细胞之活化成为对Ｋ５６２细胞具有细胞毒作用的杀伤（ＣＤ３ＡＫ）细胞。     

紫外线照射自血回输对脑梗塞患者外周血淋巴细胞亚群和血浆纤维连接蛋白的影响

对２４例脑梗塞患者紫外线照射自血回输（ＵＢＩＯ）治疗前、后外周血淋巴细胞亚群及血浆纤维连接蛋白（Ｆｎ）含量变化进行了观察．结果ＵＢＩＯ治疗前脑梗塞患者外周血中总Ｔ细胞（ＣＤ）、Ｔ抑制细胞（ＣＤ）数均较正常人明显减少，ＣＤ４／ＣＤ８比值上升；Ｂ＋和人类白细胞抗原（ＨＬＡ－ＤＲ＋）细胞数增多；白细胞介素Ⅱ受体（ＩＬ－２Ｒ＋）和Ｔ辅助（ＣＤ＋）细胞数则与正常人无差异。血浆Ｆｎ含量低于正常人。提示脑梗塞患者存在免疫功能紊乱．ＵＢＩＯ治疗后，外周血中ＣＤ、ＣＤ细胞和Ｆｎ水平上升，ＣＤ４／ＣＤ８比值下降，Ｂ细胞数下降，ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞数无明显变化．提示ＵＢＩＯ具有免疫调节作用．     

紫外线照射充氧自血回输对高血压病患者T淋巴细胞亚群及白细胞介…

采用紫外线照射充氧自血回输法治疗高血压病患者２８例，每周２次，６次为１疗程。测定１疗程前后Ｔ细胞亚群ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８、白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）的变化。结果：治疗后高血压病患者ＣＤ３、ＣＤ４明显降低；ＣＤ８具长高趋势；ＣＤ４／ＣＤ８明显降低，而血清ＩＬ－２Ｒ含量明显下降。表明该法治疗能有选择地改变和调节机体的免疫功能状态。     

类风湿关节炎患者辅助性T2细胞的激活现象

目的 探讨辅助性Ｔ细胞（Ｔｂ）２在类风湿关节炎（ＲＡ）发病中的作用。方法 采用流式细胞术分析ＲＡ患者在淋巴细胞表面分化抗原（ＣＤ）,同时用酶免疫法检测血浆白细胞介素（ＩＬ）－４、ＩＬ－６水平的变化。结果 与对照组相比,ＲＡ患者Ｄ２５和ＣＤ１９水平升高,其差异有显著意义;ＣＤ８／ＣＤ２８细胞减少,其差异有非常显著意义;ＣＤ３和ＣＤ４细胞水平与对照组比较,差异无显著意义;ＩＬ－４和ＩＬ－６增高,差异有     

SLE病人T淋巴细胞亚群及体液免疫功能分析

为探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）病人Ｔ淋巴细胞亚群的改变及免疫球蛋白含量的变化，为临床诊治提供理论依据，应用流式细胞仪和酶联检测仪，分析ＳＬＥ患者Ｔ细胞亚群及免疫球蛋白。结果显示与正常对照组比较， ＳＬＥ患者外周血中 ＣＤ_２~＋、 ＣＤ_２~＋、 ＣＤ_２~＋细胞显著增加（ Ｐ ＜０． ０１）， Ｔ细胞表面 ＴＩＡ－１含量增加（ Ｐ＜０． ０５），血清中 ＩｇＧ、 ＩｇＭ、 ＩｇＡ含量也都显著升高（ Ｐ＜０．０１），但外周血中ＣＤＪ_３~＋、 ＣＤ_４~＋、 ＣＤ_４５ＲＡ~＋细胞显著降低（Ｐ＜０．０１）， ＣＤ_４~＋／ＣＤ_８~＋明显倒置（Ｐ＜０． ０１）， Ｔ细胞表面 Ｔ细胞抗原受体（ＴＣＲ）含量及血清中 Ｃ_３、 Ｃ_４也明显降低（ Ｐ ＜０．０１）。提示ＳＬＥ患者存在Ｔ细胞亚群紊乱，体液免疫功能亢进，抗感染能力下降。