载脂蛋白A1试剂的吸收光谱分析

目的探讨载脂蛋白A1不同试剂的吸收光谱.方法选择三种试剂不同主次波长用扫描仪分析其吸收光谱.结果甲试剂在2.60g/L范围内呈线性,乙试剂在2.20g/L范围内呈线性,丙试剂更次.结论通过光谱分析能反应试剂质量的优劣.     

BCG试剂配方对生化分析仪测定血清白蛋白线性的影响

目的探讨BCG试剂配方对生化分析仪测定血清白蛋白线性的影响.方法用不同BCG和Brij-35浓度的七种BCG试剂在生化分析仪上测定白蛋白浓度20.0～60.0g/L五份血清结果,按NCCLS制定的线性评价方案评价线性. 结果 Brij-35:BCG为11.4:1,BCG从0.056g/L增加到0.158g/L,直线回归方程斜率由0.765提高到0.992,截距由8.06下降到0.22,线性由不可接受(F＞Fo.o1)成为良好(F＜F0.05),增加Brij-35:BCG比值,使斜率下降,截距增高,F值增大.结论在生化分析仪上试剂与标本量为100:1测定,建议应用BCG浓度为0.158g/L,Brij-35为1.8g/LBCG试剂.     

BCG试剂配方对生化分析仪测定血清白蛋白线性的影响

目的：探讨BCG试剂配方对生化分析仪测定血清白蛋白线性的影响。方法：用不同BCG和Brij-35浓度的七种BCG试剂在生化分析仪上测定白蛋白浓度20.0-60.0g/L五份血清结束，按NCCLS制定的线性评价方案评价线性。结果：Brij-35:BCG为11.4:1,BCG从0.056g/L增加到0.158g/L，直线回归方程斜率由0．765提高到0．992，截距由8．06下降到0．22，线性由不可接受（F＞F0．01）成为良好（F＜F0．05），增加Brij-35:BCG比值，使斜率下降，截距增高，F值增大。结论：在生化分析仪上试剂与标本量为100：1测定，建议应用BCG浓度为0．158g/L,Brij-35为1.8g/LBCG试剂。     

尿蛋白的溴酚蓝测定法

常用考马斯高蓝法(CBG-250法),测定尿蛋白,此法显色稳定,精密度高,但线性范国窄(0～1g/L)且不同蛋白质呈色不同。我们根据国外有关资料,设计了溴酚蓝法。一、试剂(1)1mmol/L溴酚蓝液:溴酚蓝0.67g溶解于10ml的0.1mol/L NaOH液中,加蒸馏水至1000ml。(2)缓冲液:在0.1mol/L柠檬酸液1000ml中,加入0.2mol/L Na_2HPO_4液20ml,调整     

KX-21N线性范围的评价方法与结果分析

目的 探讨KX-21N血细胞分析仪线性范围的评价方法.方法 依据CLSI的EP6-A文件要求对全血样品进行等比稀释成9个样品,再用KX-21N对9个样品进行双份测定,我们采用了北京中创易达公司开发的MVS软件对测定结果按照EP6-A文件要求进行线性评价.结果 KX-21N检测RBC、Hb、HCT,RBC在0.01～6.14×1012/L、Hb在24～175g/L、HCT在0.071～0.54L/L范围内呈线性关系,在检测WBC时在0.1～5.2×109/L,10.1～86.3×109/L范围内呈线性,血小板在6～863×109/L呈线性而中值样品的研究结果是在51.5～167.5×109/L范围内呈线性.结论 按照EP6-A文件的评价方法进行线性范围的评价,同时采用中创易达公司开发的MVS软件进行数据统计,使得复杂的统计变得简单快捷,方便实用,值得推广应用.     

双缩脲法和溴甲酚绿法测定胸腹水总蛋白和白蛋白的检测范围评价

目的:确定双缩脲法测定胸腹水总蛋白和溴甲酚绿法测定胸腹水白蛋白的检测限,并做其检测范围线性评价。方法:制备空白样品,选择近检测限和病理高值的病人样品。在日立7600全自动生化分析仪上分别用双缩脲法测定总蛋白和溴甲酚绿法测定白蛋白,做检测低限和生物检测限分析,采用EP-6P做线性评价和多项式做线性评价。结果:双缩脲法测定胸腹水总蛋白的检测低限为0.47g/L,生物检测限为1.33g/L,2.5～49.7g/L范围内线性符合临床要求。溴甲酚绿法测定白蛋白的检测低限为0.44g/L,生物检测限为0.98g/L,1.2～35.2g/L范围内线性符合临床要求。结论:双缩脲法测定胸腹水总蛋白和溴甲酚绿法测定胸腹水白蛋白能满足临床要求。     

四种物质对两种D-二聚体试剂检测结果的影响分析

目的：探讨三酰甘油（TG）、血红蛋白（HGB）、总胆红素（TBIL）和类风湿因子（RF）等4种物质对 ACL TOP全自动血凝仪两种D-二聚体试剂检测结果的影响。方法分别用脂肪乳、血红蛋白液、胆红素标准品和类风湿因子标准品与对照血浆按不同比例混合,配制TG含量分别为2,4,6,8和10 mmol/L,HGB含量分别为1,2,3,4和5 g/L,TBIL含量分别为20,40,60,80和100μmol/L,以及10个 RF含量在0～150 IU/L之间的系列样本,并用D-dimer和D-dimer HS两种试剂进行检测,每份标本测定两次,结果取均值。结果 TG≤2 mmol/L时不会对 D-dimer试剂产生干扰,≥4 mmol/L时D-dimer试剂因“数据基线 SD超出范围”无法进行检测,≤10 mmol/L时不会对 D-dimer HS试剂产生干扰;HGB≥1 g/L时D-dimer试剂因“数据基线 SD超出范围”无法进行检测,≤4 g/L时不会对D-dimer HS试剂产生干扰,等于5 g/L时D-dimer HS试剂检测结果假性增高约30.4％;随TBIL浓度升高,D-dimer和D-dimer HS试剂检测结果均假性增高,增高幅度与TBIL含量呈乘幂关系,且两种试剂增高一致;D-dimer试剂检测结果假性升高与 RF含量呈线性相关,Y＝59.31X＋50.43,R2＝0.998,RF≤150 IU/L时不会对D-dimer HS试剂产生干扰。结论 TG,HGB,TBIL和 RF会干扰 D-dimer试剂检测过程;TBIL和 HGB会干扰D-dimer HS试剂检测过程;D-dimer HS试剂抗干扰能力优于 D-dimer试剂;D-二聚体测定结果与临床医生判断不符时应考虑干扰物质的影响。     

不同色原物葡萄糖检测试剂性能比较

目的根据照美国临床试验室标准化委员会(NCCLS)文件对3种不同色原物的葡萄糖检测试剂的性能进行初步评价,并对其抗干扰性能进行考察。方法按照NCCLS EP10-A2文件,使用3种不同色原物的葡萄糖检测试剂分别对葡萄糖低、中、高值标本进行检测,计算偏倚、总不精密度及其截距、斜率、携带污染、非线性、漂移性。根据EP7-A2文件,对检测试剂进行干扰评价试验。结果 3种试剂偏倚、总不精密度均在允许范围内,截距、斜率、携带污染、非线性、漂移性差异3均无统计学意义(P0.05);1450浊度乳糜、5g/L血红蛋白和0.03g/L维生素C对3种不同色原物葡萄糖检测试剂的测定均无干扰;342mol/L游离胆红素、342mol/L结合胆红素对含MAOS色原物的葡萄糖试剂的检测无干扰。结论 3种不同色原物的葡萄糖检测试剂准确度和精密度良好,各性能指标基本符合临床要求,含MAOS色原物的试剂的抗干扰性优于其他色原物的试剂。     

改良溴甲酚绿法测定血清清蛋白的建立

目的建立一种改良溴甲酚绿(BCG)法(以下简称改良法)测定血清清蛋白(ALB),能够应用于所有/多数自动生化分析仪,也可手工操作。方法测试吸收峰、最佳读数时间,以试剂:样品为100:1筛选系列浓度的BCG试剂,将线性良好的试剂作为试验试剂,测试其灵敏度、准确度、精密度、干扰试验及试剂有效期。结果吸收峰为627～628nm,最佳读数时间为30s,BCG浓度为0.35mmol/L的试剂的灵敏度为0.1g/L,线性范围为0.1～80.0g/L(Y=0.0232X+0.0055,r=0.9998),回收率为95.6%～105.2%(x=100.4%,s=2.4),不准确度为0.71%,方法学对照试验:回归方程为Y=0.9594X+1.5078,r=0.9948,日内CV=1.42%,日间CV=2.65%,干扰试验:标本中血红蛋白(Hb)≤4.0g/L、三酰甘油(TG)≤5.83mmol/L、胆红素(BIL)≤702μmol/L、维生素C(VC)≤17613μmol/L时对实验无干扰。结论方法学评价试验结果表明,改良法的灵敏度、线性、准确度、精密度均优良,有较强的抗干扰能力,试剂有效期为半年,由于试剂样品比例合适,固能够应用于所有/多数自动生化分析仪,也可手工操作。     

用两种试剂检测血清甘油三酯的线性及偏差比较

目的用临床病人标本分析中生和东欧两种甘油三酯(TG)试剂检测血清TG的线性及编差。方法依据美国国家临床实验室标准化委员会EP9-A文件,每天取新鲜临床标本8份,分别用两种试剂测定TG共测5天,记录检验结果,统计学分析其线性方程和相关系数,进行偏差分析。结果两种试剂测定甘油三酯的相关系数r=0.999在0.23~11.0mmol/L范围内相对偏差为6.57~8.21%。结论两种试剂测定TG时,在0.23~0.407mmol/L范围内东欧试剂测定结果低于中生试剂测定结果。     

酶法测定血清钠离子的评价

目的评价酶法测定钠离子的性能。方法评价血清钠离子酶法试剂的准确性、精密度、开盖稳定性、线性、与电极法的相关性、回收率及抗干扰性。结果酶法测定钠离子的变异系数(CV)<2%,定标周期能够维持5 d,准确度满足朗道质控品要求,线性范围达到100～160 mmol/L,与电极法具有很好的相关性[相关系数(r)=0.989 9],回收率为100.9%,在胆红素≤600μmol/L、甘油三酯≤20 mmol/L、维生素C≤0.5 g/L、血红蛋白≤10 g/L、铵离子≤25 mmol/L、钾离子≤10 mmol/L、镁离子≤5 mmol/L、钙离子≤5 mmol/L、锌离子≤50 mmol/L、铜离子≤50 mmol/L对钠离子测定无明显干扰。结论钠离子酶法试剂有较好的重复性、准确性和稳定性,线性良好,抗干扰能力强,能满足临床使用要求。     

AFP ELISA定量一步法应淘汰改用二步法

目的对目前国内市场上的AFPELISA定量一步法、两步法的"HOOK"效应进行评价。方法用化学发光法定量选取AFP430000μg/L不同浓度稀释后分别用ELISA一步法、二步法测定反应曲线。结果国产一步法在0～350μg/L浓度成线性，350～450μg/L出现平台现象，450～4000μg/L下降到线性范围吸光度，＞4000μg/L降到正常吸光度以下。国产二步法在0～400μl/L浓度成线性可定量，400～10000μg/L出现平台现象，430000μg/L吸光度仍能达到1.87。进口二步法在0～1000μg/L呈线性，1000～100000μg/L出现平台现象，430000μg/L吸光度仍能达到2.50。结论目前国内市场上AFPELISA定量一步法"HOOK"现象严重，漏检难以避免应淘汰。二步法中、低值线性范围较宽可定量，高值筛查后复检，基本满足临床要求。     

AQT90 FLEX分析仪检测全血肌钙蛋白I的方法学评价

目的对AQT90FLEX分析仪检测全血标本肌钙蛋白I(TnI)进行方法学评价。方法通过测定TnI的精密度、准确度、分析测量范围、携带污染率、功能灵敏度和参考区间来评价其性能。结果中、高值质控品总不精密度分别为5.27%、4.49%,均小于CLIA′88规定的允许误差范围的1/2(15%);国家卫生和计划生育委员会临检中心5个质评物检测结果,有4个在CLIA′88规定的允许误差范围的1/2(15%)内,结果为可接受;在0.011~16.6μg/L范围内线性良好,相关方程为Y=0.996 X-0.524;携带污染率小于10%;功能灵敏度为0.011μg/L,在参考区间(TnI0.023μg/L)范围内;试剂说明书建议参考区间(TnI0.023μg/L)验证通过。结论该系统检测全血标本TnI精密度高,正确度好,并具有良好的线性,参考区间验证合格,分析灵敏度及携带污染率能够达到实验室质量要求,能满足临床需求。     

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的方法学研究

本文研究了甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)的最佳测定条件。最适pH8.6,Km 值为1.91±0.08mmol/L,选用158mmol/L Tris、64mmol/L 双甘氨肽、10 mmol/L 底物。酶促反应速度在70分钟内呈线性,酶活力在600U/L 内呈线性。高、中,低活力标本批内变异1.7～3.1%,批问变异3.8～6.7%,标本置4℃一周,结果无明显变化。168例健康者GPDA 为150.1±49.8(2SD)U/L,同时研究了测定管、底物空白、对硝基苯胺的光学吸收特性,观察了GPA 试剂在不同pH 和不同时间的变化规律。     

改良酶法肌酐测定试剂的研制

目的探讨建立一种改良酶法肌酐(Cr)测定试剂,并考察其与进口Cr测定试剂(日本东洋纺公司酶法Cr试剂)对血清测定的可比性及偏倚。方法采用酶法测定Cr反应前后吸光度的变化,探讨试剂各成分和浓度对检测性能的影响,并在同一台全自动生化分析仪上同时测定两种试剂的空白吸光度(A值)、分析灵敏度,对自主研发试剂的精密度、线性范围及方法学指标进行评价。结果自主研发试剂的空白A值为0.009,分析灵敏度的A值变化率为0.13,优于进口试剂。自主研发试剂高、低值血清测定变异系数分别为1.5%和1.1%;线性范围为0~2 850μmol/L;方法学比对回归方程为Y=0.98 X+1.15,r=0.999;估计偏倚低于允许误差。以相对偏差不小于10%作为有明显干扰的评判指标,结果显示35mmol/L肌酸、3.42mmol/L胆红素、0.03g/L维生素C、5g/L血红蛋白、1 450浊度乳糜对高、低值浓度标本检测结果均无干扰。结论自主研发的Cr测定试剂性能良好,与进口试剂之间具有良好的相关性,符合临床应用基本要求。     

循环酶法测定同型半胱氨酸的临床研究

目的对循环酶法测定同型半胱氨酸方法进行临床评价。方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)评价方案对循环酶法同型半胱氨酸测定方法进行了精密度、线性和抗干扰试验评价。结果批内精密度CV小于3.45%,总精密度小于3.78%。线性范围:在0~50.0 mol/L范围内呈线性。胆红素在700μmol/L、TG在8.0 mmol/L、抗坏血酸在30 mg/dL以内,对试验无明显的干扰,干扰相对偏差小于4%。血红蛋白在150 g/L内,干扰偏差小于5.2%。结论循环酶法同型半胱氨酸检测试剂盒在测定精密度、线性范围、抗干扰等方面的性能可以满足临床检测的需要。     

应用免疫比浊法在离心式分析仪上测定转铁蛋白的实验探讨

本文建立了在ENCORE离心式分析仪上按仪器原编程序用国产自配试剂测定Tf的免疫比浊方法。随后应用于IgG、IgA、IgM等测定亦获得满意结果。作者发现,除市售抗血清的纯度和效价直接影响测定灵敏度。必要时须作纯化处理外,缓冲稀释液以含有PEG 6000 48g/L,NaCl 9g/L的0.01mol/L pH7.2PB较为适宜。抗血清应用液的稀释度应按每批抗血清的实际效价滴定结果来选定。用本法测定Tf的线性范围至少可达9.0g/L,回收率为101.3%。批间CV<5%。与国外同类进口试剂平行检测40份不同Tf含量(0.467～7.75g/L)标本结果无差异(t=1.129,P>0.05)相关良好(r=0.998,回归方程(?)=0.995x 0.044)。     

AST试剂中NADH含量变化对线性范围影响的研究

目的 评估天门冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂中还原型辅酶(NADH)含量变化对试剂盒线性范围的影响。方法 对两个具有不同NADH含量的同一品牌AST试剂的线性范围、精密度、灵敏度、试剂空白等性能指标分别进行验证,利用己糖激酶法测定葡萄糖浓度的方法测定NADH的摩尔消光系数,进而评估NADH浓度变化对分析性能的影响。结果 较高及较低NADH浓度AST试剂的R1试剂中NADH浓度分别为0.21 mmol/L(基础吸光度为1.187 6)和0.13 mmol/L(基础吸光度为0.7567),NADH浓度降低可造成试剂盒的线性范围减小,检测上限由1 629 U/L降至1 263 U/L。NADH浓度变化对两种试剂的精密度、灵敏度、试剂空白等性能指标无明显影响。结论 AST试剂盒的R1试剂中NADH浓度降低(基础吸光度减小)可造成样品检测线性范围减小,因此实验室通过合适的线性评估方案定义其AST试剂能够满足线性范围的基础吸光度标准,对于判断试剂质量、保证高值结果准确是很重要的。     

不同国产人血尿素氮诊断试剂的性能评估

目的 评估3种国产人血尿素氮诊断试剂的性能.方法 评价的性能指标包括精密度、线性范围、抗干扰性、稳定性及检测结果相关性.结果 3种国产试剂检测结果批内、批间变异系数均小于5%,批间差的相对偏差均符合厂商声明;试剂在各自的线性范围内线性良好;血红蛋白浓度小于或等于0.5 mg/mL,游离胆红素小于或等于200 mg/L,结合胆红素小于或等于400 mg/L,乳糜福尔马肼浊度(FTU)达到10 000时,对3种尿素氮检测试剂均无显著干扰;各系统检测结果具有良好相关性(r2>0.99).结论 3种国产尿素氮诊断试剂精密度、线性范围、抗干扰性、稳定性均符合临床使用要求,与进口原装试剂相关性较好.     

临床检验定量项目线性性能验证方法的比较

摘要:目的观察4 种不同标准对检测系统进行线性性能验证时的差异,为临床实验室选择合适的线性验证标准提供参考。方法以直接胆红素(D-Bil)为例 ，收集接近线性范围的高值(H)、低值(L)混合血清2份,按L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+ 4H、H的比例混匀,得到6份样品作为验证样品组。每个样品重复检测3次，分别用CISI EP06-Ed2、CISI EP06-A. WS/T408一2012、WS/T420-2013标准对检测数据进行统计分析并作出评价。结果A.B2种D-Bil试剂的线性数据均无离群值。 A试剂的检测结果为( 1.40+0. 10) .( 89.00+0.66) .( 167.63士1.25) .(237.07士1.80) .( 297.00+0.92).( 363.27+2.63) μmo/L;B试剂的检测结果为(1.13+0.15)、( 88.67+0.35) .( 174. 20+0.50). (255.97+ 1.74) .(327.23+2.50) .( 396.50+2.01) μmol/L。EP06-Ed2判定A试剂线性验证未通过,B试剂通过;EP06-A和WS/T 420- -2013 判定2种试剂的线性验证均未通过; WS/T408- -2012判定2种试剂的线性验证均通过。结论按4 种不同标准对检测系统进行线性性能验证时存在差异,实验室可根据实际用途选择合适的标准进行线性验证。