健康人群外周血各类血细胞CD55／CD59的表达

目的了解健康人群外周血细胞CD55／CD59表达情况。方法用流式细胞仪检测健康人红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞膜上CD55／CD59表达。结果80名健康人外周血不同类型的血细胞膜上CD55／CD59表达不同。正常红细胞CD55／CD59双阳性的红细胞中位数为85．100％,阵发性血红蛋白尿症（PNH）细胞〈0,200％;正常中性粒细胞双阳性细胞中位数为99．900％,PNH细胞〈0．100％;单核细胞双阳性细胞的中位数为93．000％,PNH细胞〈2．900％。淋巴细胞双阳性细胞中位数为72．600％,PNH细胞〈18．000％。正常淋巴细胞中所含的PNH细胞比例明显高于其他细胞（P〈0．01）,且主要为T淋巴细胞。结论健康人的外周血各种血细胞CD55／CD59表达不同,分析结果有助于对PNH等干细胞疾病的诊断和发病机制进行探讨。     

GPI锚定蛋白抗体CD55、CD59及RET在贫血诊断中的意义探讨

目的检测几类贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜上糖化磷脂酰肌醇（GPI）连接的补体调节蛋白CD55和CD59表达情况,综合分析各类贫血中网织红细胞（RET）的变化特点,探讨他们在贫血中的诊断价值。方法荧光标记的CD55、CD59单克隆抗体,用流式细胞技术及亚甲蓝活体染色检测,30例正常人、25例缺铁性贫血（IDA）、26例巨幼细胞性贫血（MA）、27例自身免疫溶血性贫血（AHA）,27例再生障碍性贫血、21例再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿症（AA-PNH）、30例阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者外周血中CD55^-和CD59^-红细胞和中性粒细胞的百分率及REF值。结果正常人CD55^-、CD59^-红细胞和中性粒细胞的百分率均〈5％,44％的IDA患者CD55^-、CD59^-红细胞百分率在5％-20％之间,中性粒细胞的百分率〈5％,MA及AHA患者CD55^-、CD59^-红细胞和中性粒细胞百分率均〈5％。33％AA患者CD55^-、CD59^-细胞百分率在5％-15％之间。PNH及AA-PNH患者CD55^-、CD59^-细胞百分率均〉11％。与正常对照组比较,各类贫血间REY值差异显著（P〈0．01）。结论IDA、AA、AA—PNH、及PNH外周血中CD55^-、CD59^-百分率较正常对照组有不同程度增加,PNH最为明显,IDA变化最小。联合RET检查有助于各类贫血的诊断、鉴别诊断及愈后判断。     

外周血粒细胞CD55、CD59检测在PNH诊断中的价值

目的研究外周血粒细胞CD55、CD59检测在阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)诊断中的价值。方法选取收治的血液疾病患者86例作为疾病组,其中PNH 31例,再生障碍性贫血(AA)13例,骨髓增生异常综合征(MDS)19例,急性白血病(AL)23例,另选同期健康志愿者45例作为对照组。均行外周血粒细胞CD55、CD59检测,对比检测结果,分析外周血粒细胞CD55、CD59检测在PNH中的诊断价值。结果 PNH患者外周血粒细胞CD55、CD59的表达率明显低于AA、MDS、AL患者及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PNH患者外周血粒细胞的CD55、CD59呈明显低表达状态,外周血粒细胞的CD55、CD59可作为PNH诊断的重要检测指标,可为临床诊断提供主要参考依据。     

健康人群外周血各类血细胞CD55/CD59的表达

目的了解健康人群外周血细胞CD55/CD59表达情况。方法用流式细胞仪检测健康人红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞膜上CD55/CD59表达。结果80名健康人外周血不同类型的血细胞膜上CD55/CD59表达不同。正常红细胞CD55/CD59双阳性的红细胞中位数为85.100%,阵发性血红蛋白尿症(PNH)细胞<0.200%;正常中性粒细胞双阳性细胞中位数为99.900%,PNH细胞<0.100%;单核细胞双阳性细胞的中位数为93.000%,PNH细胞<2.900%。淋巴细胞双阳性细胞中位数为72.600%,PNH细胞<18.000%。正常淋巴细胞中所含的PNH细胞比例明显高于其他细胞(P<0.01),且主要为T淋巴细胞。结论健康人的外周血各种血细胞CD55/CD59表达不同,分析结果有助于对PNH等干细胞疾病的诊断和发病机制进行探讨。     

CD55和CD59检测在阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断中的意义

目的探讨应用流式细胞术检测CD55和CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)诊断中的应用价值。方法应用流式细胞术检测贫血患者及健康对照组外周血红细胞和粒细胞的表面抗原CD55、CD59的表达水平,并同时做Ham试验、糖水试验和尿Rous试验。结果健康对照组红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的测定结果均小于5%。7例PNH患者红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的测定结果均大于5%;20例AA患者中有2例红细胞CD55-、CD59-测定结果大于5%;粒细胞CD55-、CD59-大于5%的有1例;部分IDA患者红细胞CD55-、CD59-大于5%,而粒细胞的结果全部正常;MA和AIHA患者的红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的测定结果均正常。7例PNH患者中,Ham试验2例阴性,尿Rous试验1例阴性,而其红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的测定结果均大于5%。结论利用流式细胞术同时检测外周血中红细胞和粒细胞CD55和CD59的表达对PNH的诊断具有无可比拟的优势,利于PNH的早期发现,是目前诊断PNH最敏感的方法 。     

贫血患者外周血CD55^—和CD59^—细胞检测结果及其意义

目的检测贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜糖化磷脂酰肌醇(GPI)连接的补体调节蛋白CD55和CD59表达情况,探讨其临床意义.方法采用荧光素标记的CD55和CD59单克隆抗体,流式细胞术检测35例正常人、5例阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)、32例再生障碍性贫血、47例小细胞低色素性贫血、10例巨幼细胞性贫血、12例自身免疫溶血性贫血和15例造血系统肿瘤伴有贫血患者外周血中CD55-和CD59-红细胞和中性粒细胞的百分率.结果正常人CD55-、CD59-红细胞和中性粒细胞的百分率均＜5%,PNH患者均＞40%,部分再障病人＞5%(均＜15%).约有50%的小细胞低色素贫血患者CD55-、CD59-红细胞＞5%(均＜15%),但中性粒细胞的结果全部正常.巨幼贫、自身免疫溶血性贫血和造血系统肿瘤伴有贫血患者的阴性红细胞和中性粒细胞比率均正常.结论利用流式细胞术同时检测外周血中CD55-和CD59-红细胞和中性粒细胞是目前诊断PNH的最可靠,最敏感的方法,也可作为判断疗效的手段.本法也是临床鉴别诊断PNH与再障和小细胞低色素性贫血的较好方法.     

CD55和CD59检测对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿的意义

目的：探讨检测患者红细胞和中性粒细胞膜上CD55和CD59表型的缺失对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）的意义。方法：应用流式细胞仪间接免疫荧光标记法检测40例正常人（对照组），29例PNH患者（PNH组），16例自身免疫性溶血性贫血患者（AIHA组），12例缺铁性贫血患者（IDA组）的红细胞和中性粒细胞CD55和CD59表型的缺失情况。结果：PNH组红细胞和中性粒细胞CD55^-、CD59^-的百分率与对照组比较有显著性差异（P〈0．01），AIHA组、IDA组与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：利用流式细胞术同时检测患者红细胞和中性粒细胞膜CD55和CD59表型的缺失是目前诊断PNH最可靠、最敏感的方法。     

CD55、CD59检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症标准方法建立

目的建立流式细胞术(FCM)检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuriaP,NH)的标准方法。方法应用FCM对49例PNH病人,18例自身免疫性溶血性贫血(AIHA),10例缺铁性贫血(IDA),正常对照40例;采用活细胞直接免疫荧光标记法检测红细胞和粒细胞膜表面的CD55和CD59的表达。结果49例PNH病人除2例红细胞CD55-、CD59-的百分率小于5%,其余病例红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均大于5%(5.9%￣79.1%)。18例AIHA病人红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。10例IDA病人有8例红细胞CD55-、CD59-的百分率均大于5%(5.0%￣9.1%),而粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。40例正常对照红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。49例PNH病人蛇毒因子试验5例阴性;糖水试验4例阴性、酸溶血试验5例阴性。而这其中仅2例病人蛇毒因子试验、糖水试验、溶血试验同时阴性。其余病人蛇毒因子试验、糖水试验、酸溶血试验均阳性。结论同时检测红细胞和粒细胞膜的CD55和CD59诊断PNH,该方法的灵敏度与特异性均高达100%。因此,针对国内其他单位在开展此项目时仅检测CD55或CD59,或者只检测红细胞或白细胞的CD55、CD59的情况,作者认为同时检测红细胞和粒细胞膜的CD55和CD59诊断PNH是值得在临床推广的标准方法。     

CD55、CD59联合嗜水气单胞菌毒素变异体检测对PNH的诊断价值

目的检测各类贫血患者CD55、CD59和嗜水气单胞菌毒素变异体(FLAER)的表达情况,评价CD55、CD59联合FLAER检测对阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的诊断价值。方法选取贫血住院患者157例,其中缺铁性贫血(IDA)38例、巨幼细胞性贫血(MA)23例、骨髓增生异常综合征(MDS)27例、再生障碍性贫血(AA)25例、自身免疫溶血性贫血(AIHA)31例、PNH 13例。另选取体检健康者20名,作为正常对照组。检测所有研究对象红细胞和粒细胞CD55、CD59以及粒细胞和单核细胞FLAER的表达情况。结果 PNH组红细胞和粒细胞CD55~-、CD59~-百分比与正常对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。PNH组粒细胞和单核细胞FLAER-百分比均50%,显著高于红细胞和粒细胞CD55~-、CD59~-百分比(P0.05)。CD55、CD59与FLAER检测对PNH诊断的符合率为100%。有3例AA患者和2例MDS患者FLAER表达缺失,而CD55、CD59表达正常;有2例AIHA患者红细胞CD55、CD59表达部分缺失,粒细胞CD55、CD59表达正常,FLAER表达正常。结论 CD55、CD59表达缺陷是PNH的主要特征,CD55、CD59联合FLAER检测在PNH诊断及鉴别诊断中有着重要的价值。     

CD55/CD59缺陷检测及其在阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断中的意义

目的：应用外周血红细胞CD55和CD59的检测并结合相关检验，建立有效的诊断和鉴别诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的实验体系。方法：运用流式细胞术检测10例PNH患外周血红细胞和粒细胞的CD55和CD59，并分别对缺陷红细胞作激光散射分析(FS)及FS／CD55和FS／CD59双参数分析，结合溶血性贫血(溶贫)相关其他检验，作出PNH诊断。结果：5例PNH发作期患酸溶血试验呈阳性，CD55和CD59缺陷红细胞在流式细胞术检测中具有特征性的改变；5例PNH缓解期酸溶血试验等无明显改变，患外周血CD55和CD59缺陷红细胞的数量较少。运用流式细胞术分别作红细胞FS／CD55和FS／CD59双参数分析，发现CD59缺陷与红细胞FS具有相关性。正常红细胞与缺陷红细胞的FS分布存在明显差异。部分再生障碍性贫血患外周血也存在PNH样细胞，但FS／CD59检测结果与PNH患具有不同特征。结论：流式细胞术检测外周血红细胞CD55和CD59缺陷结合溶血性贫血的常规检验可对PNH作出较明确的诊断和鉴别诊断。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者血细胞表面CD55和CD59的检测及临床意义

目的探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)诊断中的应用。方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法检测25例PNH、20例再生障碍性贫血(AA)、20例健康对照者外周血红细胞和粒细胞膜CD55和CD59抗原的表达,并同时做酸化血清溶血试验(Ham试验)、蔗糖溶血试验和尿含铁血黄素试验(尿Rous试验)。结果与AA组和健康对照组相比,PNH患者外周血红细胞、粒细胞膜CD55、CD59表达缺失率均明显增高(P<0.05);而AA组和健康对照组缺失率均小于5%,且两者之间差异没有统计学意义(P>0.05)。25例PNH患者中,9例Ham试验阴性,6例蔗糖溶血试验阴性,7例尿Rous试验阴性,这些患者的红细胞、粒细胞的CD55、CD59表达缺失率均大于5%。结论利用流式细胞术同时检测患者红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原对PNH的诊断与鉴别诊断具有重要价值。     

贫血患者外周血CD55~-和CD59~-细胞检测结果及其意义

采用流式细胞仪检测外周血红细胞和中性粒细胞表达的Glycophosphatidylinositol(GPI)连接的补体调节蛋白CD5 5和CD5 9是目前大多数实验室用来作为诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)的首选实验[1] 。外周血中只要CD5 5、CD5 9阴性细胞占 3%以上流式细胞术即可检出 ,其灵敏度和特异性优于传统的酸溶血实验[2 ] 。我们的研究也证实 ,PNH病人的外周血中均有比例很高的CD5 5 - 和CD5 9- 红细胞和中性粒细胞出现。同时我们也发现在再生障碍性贫血和小细胞低色素性贫血的病人外周血中也有程度不同的CD5 5 - 和CD5 9- 细胞出现 ,现将结…     

红细胞CD55、CD59流式细胞术检测方法的若干影响因素探讨

目的探讨流式细胞仪测定红细胞表面CD55、CD59试验过程中影响检测的若干因素,建立此项目的标准操作程序。方法利用流式细胞仪对15例非血液病、11例阵发性血红蛋白尿症（PNH）的乙二胺四乙酸（EDTA）外周抗凝血进行红细胞CD55、CD59检测,观察单克隆抗体（mAb）用量、荧光素种类及反应时间对测定结果的影响。结果在未饱和抗原的情况下（〈9μL）,平均荧光强度（MFI）随抗体量的增加而升高。CD55-异硫氰酸荧光素（FITC）的阳性率和MFI均低于CD55-藻红蛋白（PE）,CD59的FITC和PE 2种荧光标记的阳性率间差异无统计学意义,但在MFI方面前者明显高于后者。反应时间对CD55-PE阳性率、CD59-FITC和CD55-PE的MFI有明显影响（P〈0.05）;3 h内2组CD59-FITC的阳性率无明显变化。结论抗体用量、荧光素种类及标记模式和温育时间对流式细胞仪检测红细胞CD55、CD59有明显的影响。本实验室在3个影响因素上分别选择12μL抗体标记1.6×105～2.8×105个红细胞、荧光素组合模式为CD59-FITC、CD55-PE双色标记和40 min的温育时间,这样既确保了反应充分又提高了结果的稳定性。     

PNH患者骨髓CD34^＋CD59^＋细胞体外扩增及植入体内重建造血的活性研究

本研究应用BALB／c裸鼠为移植模型探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（paroxysmal nocturnal hemoglobin—uria，PNH）患者CD34^＋CD59^＋的增殖和重建造血的能力，为实现PNH患者自体骨髓移植或自体外周血造血干细胞移植提供实验依据。利用免疫磁珠双阳性分选法，从正常人及PNH患者骨髓中分离出两组CD34^＋CD59^＋细胞，分别进行体外扩增，并将体外扩增的正常人和PNH患者骨髓CD34^＋CD59^＋细胞分别输注给接受亚致死剂量照射的BALB／c裸鼠。应用流式细胞技术和DNA检测技术检测受鼠骨髓、脾脏和外周血中人CD45^＋细胞。结果表明：PNH组的CD34^＋CD59^＋细胞在体外生存、扩增能力似弱于正常人对照组。但CD34^＋CD59^＋细胞输注给受鼠后6周，在受鼠骨髓、脾脏和外周血中可检测到人CD45^＋细胞，PNH组受鼠CD45^＋细胞水平与正常人对照组相比，无统计学差异。结论：PNH患者CD34^＋CD59^＋细胞仍具有同正常人CD34^＋CD59^＋细胞相同的生物特性，能体外扩增并能保持正常干／祖细胞的特性。     

从再生障碍性贫血患者检出阵发性睡眠性血红蛋白尿症异常细胞的观察

目的：探讨在再生障碍性贫血（再障）患者中检出阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）异常细胞的发生率。方法：用荧光标记的抗ＣＤ５９抗体，以流式细胞仪检测缺失ＣＤ５９的异常细胞。结果：１０名正常人骨髓单个核细胞及外周血红细胞和中性粒细胞的ＣＤ５９标记率均＞９５％。２３例再障患者中约２／３标记率正常，另外１／３患者的标记率有不同程度的减低。结论：该法是从再障患者检出少量ＰＮＨ异常细胞的良好手段，可用以早期发现再障－阵发性睡眠性血红蛋白尿症综合征。     

PNH患者淋巴细胞CD59和CD45的表达

目的分析阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者淋巴细胞及其亚群上糖化肌醇磷脂结合蛋白(CD59)的表达和功能转化.方法采用流式细胞术多色分析法,配合多种细胞特异性抗体,对PNH患者不同类型的淋巴细胞及其亚群上CD59的表达进行分析,并通过细胞刺激实验对CD59表达阴性和部分阳性的异常淋巴细胞(即病态细胞)表面分化抗原CD45异构表型的功能转化进行研究.结果14例PNH患者病态淋巴细胞的百分率较病态的中性粒细胞和红细胞低;所有PNH患者均可检测到病态B淋巴细胞的存在,B淋巴细胞病态比例高于NK细胞和T细胞;在T细胞亚群中,抑制性T细胞病态比例高于辅助性T细胞(P＜0.001);病态T细胞上HLA-DR和CD45RO的表达率明显低于正常T细胞(CD59表达完全阳性的细胞)(P＜0.01),而其CD45RA的表达率明显高于正常T细胞(P＜0.01);病态T细胞经植物血凝素刺激后培养7 d,其CD45RA的表达率明显下降(中位数从82.7%降至26.6%),而CD45RO表达率明显升高(中位数由19.6%升至64.3%).结论PNH患者各种淋巴细胞及其亚群均存在病态细胞,B淋巴细胞上CD59的表达情况可作为诊断PNH的指标,病态的T淋巴细胞以无活性的初始细胞(CD45RA+HLA-DR-)为主,受到抗原刺激后,可获得有活性的记忆细胞表型(CD45RA+HLA-DR+).