问：如何准确检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌？

答：检测mecA基因和其表达的青霉素结合蛋白（PBP2a）是预测葡萄球菌对苯唑西林耐药的最准确方法。罕见非mecA基因介导的苯唑西林耐药机制，纸片法测定苯唑西林为中介或耐药，应加测苯唑西林的MIC，如果MIC≥4ug／ml，即使mecA基因和PBP2a检测阴性，苯唑西林也应报告耐药。在凝固酶阴性葡萄球菌（CONS）中头孢西丁纸片扩散法的结果与检测mecA／PBP2a的一致性好于苯唑西林纸片，     

问题解答

问 :苯唑西林对凝固酶阴性葡萄球菌药敏试验ＮＣＣＬＳ判断标准修改后的含义是什么 ?答 :1999年版ＮＣＣＬＳ药敏标准单独列出了苯唑西林对凝固酶阴性葡萄球菌 (ＣＮＳ)的分界点 ,规定苯唑西林ＭＩＣ≤0 .2 5 μｇ/ｍｌ、抑菌环≥ 18ｍｍ为敏感 ;ＭＩＣ≥ 0 .5 μｇ/ｍｌ、抑菌环直径≤ 17ｍｍ为耐药。此修改纯粹是以检出含ｍｅｃＡ基因ＣＮＳ为目的 ,与苯唑西林药动学无关。问 :为什么说用硝噻吩纸片检测革兰阴性杆菌 β内酰胺酶不可靠 ?答 :革兰阴性杆菌产生的 β内酰胺酶存在于细胞壁和细胞膜、细胞壁和外膜之间的间隙中 ,并不分泌到菌细…     

表型和基因扩增方法在耐甲氧西林葡萄球菌检测中的应用

目的比较研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的试验检测特性。方法按临床和实验室标准协会的标准分别测定和判断1μg苯唑西林纸片和30μg头孢西丁纸片在30℃和35℃时对金黄色葡萄球菌（138株）和凝固酶阴性葡萄球菌（128株）的抑菌环直径。苯唑西林盐平板采用点种法，mecA基因的检测采用PCR。结果苯唑西林和头孢西丁纸片在30℃孵育时对MRSA检测的敏感性均可达到100％，而在35℃孵育时，头孢西丁纸片对MRSA检出敏感性（94．7％）略高于苯唑西林纸片（93．3％）。苯唑西林和头孢西丁纸片在30℃和35℃对MRCNS检测的敏感性为100％。苯唑西林盐平板法对MRSA检测的敏感性和特异性与苯唑西林和头孢西丁纸片在30℃检测的敏感性和特异性相同，但对MRCNS检测的敏感性低于纸片法。结论利用头孢西丁纸片可提高对耐甲氧西林葡萄球菌的检测。     

常用抗感染药物名称对照(二)

表1　常用抗感染药物名称对照通用名别名商品名剂型3青霉素类3.1　抗Ｇ 菌青霉素青霉素(Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ)苄青霉素苄西林盘尼西林配尼西林青霉素Ｇ针剂青霉素Ｖ钾(ＰｅｎｉｃｉｌｌｉｎＶＫ)6-苯氧乙酰胺青霉烷酸钾青霉素Ｖ钾片片剂苯氧甲基青霉素钾片剂美格西片剂苯唑西林(Ｏｘａｃｉｌｌｉｎ)苯甲异口恶唑青霉素苯唑青霉素新青霉素Ⅱ苯唑西林针、胶囊　　　　耐　　酶氯唑西林(Ｃｌｏｘａｃｉｌｌｉｎ)氟氯西林(Ｆｌｕｃｌｏｘａｃｉｌｌｉｎ)邻氯青霉素邻氯苯甲异口恶唑青霉素氯苯唑青霉素邻氯西林氯苯西林氯唑西林钠米沙西林-Ｓ全…     

纸片法、ATB法与苯唑西林琼脂筛选法检测耐甲氧西林葡萄球菌的结果比较

目的 了解我院耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的感染情况及其寻找适合医院检测MRS最简易、准确的方法。方法 通过苯唑西林纸片法、半自动细菌分析系统（ATB）法、苯唑西林琼脂筛选法进行MRS检测以及比较其阳性检出率，并以苯唑西林琼脂筛选法为对照，分别比较纸片法、ATB法与它的符合率。结果 86株金黄色葡萄球菌（SA）中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）占69.7%(60/86)，114株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）中，耐甲氧西林菌株（MRSCoN)占78.1%(89/114)。结论 以苯唑西林琼脂筛选法为对照，纸片法符合率97．9％，ATB仪器检测符合率为91．2％，仪器检测不及纸片法。     

浓度梯度法用于耐甲氧苯西林葡萄球菌的检测

目的尝试用浓度梯度法（如Ｅｔｅｓｔ法）对耐甲氧苯西林葡萄球菌（ＭＲＳ）进行检测，并验证其精确性、连续性、稳定性。方法应用Ｅｔｅｓｔ法苯唑西林和甲氧苯西林试条检测５８株临床分离葡萄球菌的耐药率，并对其中２９株菌采用Ｅｔｅｓｔ法和Ｍｉｃｒｏｓｃａｎ法对青霉素、苯唑西林、万古霉素等６种抗生素进行最低抑菌浓度（ＭＩＣ）结果的比较。结果５８株葡萄球菌中，Ｅｔｅｓｔ法对ＭＲＳ的总检出率为８３％。如果Ｅｔｅｓｔ法作为参考方法，则２９株菌的ＭＩＣ对比中Ｍｉｃｒｏｓｃａｎ法的判别误差为苯唑西林１３．０％，庆大霉素３．４％，氯林可霉素２７．６％；两种方法对青霉素和环丙氟哌酸无明显误差。尽管两法对万古霉素无判别误差，但Ｍｉｃｒｏｓｃａｎ法有较明显的低ＭＩＣ值趋势。结论Ｅｔｅｓｔ法的精确性、连续性和稳定性使其可作为临床实验室检测ＭＲＳ的常规药敏方法的重要补充。     

用纸片扩散和琼脂筛选法检测苯唑西林耐药金葡菌的评价

在美国和欧洲,由苯唑西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）引起的院内感染仍是一个突出问题。目前在细菌学实验室可使用的检测MRSA方法很多,包括琼脂稀释法（每毫升MHA（Mueller－Hin－tonagar）中合6μg苯唑西林）、纸片扩散法（4μg或1μg苯唑西林纸片,MHA或Iso－Sensitest琼脂）、由汤稀释法测MIC、苯唑西林由汤筛选试验、自动化系统（如Vitek）和流式细胞仪测定法等。作者对甘露醇盐琼脂（MSA）用于纸片扩散和琼脂筛选法中检测苯唑西林耐药金黄色葡萄球菌的能力进行了评价。试验金葡菌共136株,其中54株mecA基因阳性,82株mecA…     

聚合酶链反应检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因

建立聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔＳ．ａｕｒｅｕｓ，ＭＲＳＡ）ｍｅｃＡ基因的技术。四种ＤＮＡ提取方法检测灵敏度依次为超声裂解法（５×１０５ＣＦＵ／ｍｌ）、溶菌酶表面活性剂法（５×１０６ＣＦＵ／ｍｌ），表面活性剂法（１×１０７ＣＦＵ／ｍｌ）和直接煮沸法（１×１０８ＣＦＵ／ｍｌ），直接煮沸法具有简便性。引物的正链位于１８１～２００、负链位于３１１～３３０，序列分别为５＇－ＧＡＡＡＴＧＡＣＴＧＡＡＣＧＴＣＣＧＡＴ，５＇－ＧＣＧＡＴＣＡＡＴＧＴＴＡＣＣＧＴＡＧＴ，其扩增产物长度为１５０ｂｐ。五种常见菌证明本法具有较高特异性。苯唑青霉素ＭＩＣ水平与ｍｅｃＡ基因之间具有很好的相关性，ＭＩＣ≥４μｇ／ｍｌ的２２株菌均检出ｍｅｃＡ基因，提示苯唑青霉素常规检测ＭＲＳＡ的可行性。ＰＣＲ方法对于隐匿型耐药株的检出具有重要价值。     

苯唑西林MIC≥0.5ug/ml折点对凝固酶阴性葡萄球菌耐药性高估情况分析

目的：了解使用苯唑西林MIC（最低抑菌浓度）≥0.5ug/ml的折点判断部份凝固酶阴性葡萄球菌为耐甲氧西林葡萄球菌对此类葡萄球菌耐药性高估的情况。方法：对73株苯唑西林MIC法耐药的凝固酶阴性非表皮葡萄球菌同时用头孢西丁纸片法扩散法（K-B法）检测,分析结果。结果：9株表现为敏感（抑菌圈≥25mm）,占12%,其中6株苯唑西林MIC介于0.5-2ug/ml之间,3株苯唑西林MIC≥2ug/ml。头孢西丁敏感与耐药的两组菌对常用抗阳性球菌药物敏感性有明显差别。结论：对于苯唑西林MIC介于0.5-2ug/ml的凝固酶阴性的非表皮葡萄球菌,临床实验室应遵照美国临床和实验室标准化研究所（CLSI）指南,用头孢西丁K-B法或其它方法复核验证其耐药性,苯唑西林MIC≥2ug/ml的菌株,可直接报告为耐甲氧西林的葡萄球菌。     

头孢西丁诱导试验证实一株苯唑西林敏感的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的研究不同浓度的头孢西丁对1株苯唑西林敏感的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）体外抗菌活性的影响和青霉素结合蛋白（PBP）2a的诱导作用。方法利用不同浓度的头孢西丁诱导1株苯唑西林敏感的MRSA,测定诱导前后苯唑西林的药敏直径、最低抑菌浓度（MIC）和出现PBP2a阳性时的菌液浓度。结果在低浓度头孢西丁诱导前后苯唑西林的药敏直径和MIC变化不大,高浓度则出现较大变化,在诱导前后出现PBP2a凝集试验阳性的菌液浓度有明显变化。结论头孢西丁可诱导金黄色葡萄球菌产生PBP2a。     

抗菌药物临床应用指导原则(3)--各类抗菌药物的适应证和注意事项

本类药物可分为：①主要作用于革兰阳性细菌的药物，如青霉素（G）、普鲁卡因青霉素、苄星青霉素、青霉素V（苯氧甲基青霉素）；②耐青霉素酶青霉素，如甲氧西林（现仅用于药敏试验）、苯唑西林、氯唑西林等；③广谱青霉素，抗菌谱除革兰阳性菌外，还包括：a．对部分肠杆菌科细菌有抗菌活性者，如氨苄西林、阿莫西林；b．对多数革兰阴性杆菌包括铜绿假单胞菌具抗菌活性者，如哌拉西林、阿洛西林、美洛西林．     

青霉素 Etest 法评价肺炎链球菌苯唑西林的纸片筛选试验

目的：青霉素 Etest 法评价肺炎链球菌苯唑西林的纸片筛选试验。方法对临床分离的96株肺炎链球菌非脑膜炎株,用 Etest 作为测定青霉素敏感性的标准方法,评价苯唑西林的纸片筛选试验的灵敏度和特异性。结果96株肺炎链球菌非脑膜炎株,用 Etest 测定青霉素敏感株（PSSP）为96．9％（93/96）,青霉素中度敏感株（PISP）为3．1％（3/96）,未发现青霉素耐药株（PRSP）。苯唑西林纸片法初筛出16株 PSSP,灵敏度为17．2％,特异性为100．0％。苯唑西林纸片法与 Etest 方法比较,差异有统计学意义（χ2＝77,P ＜0．01）。结论苯唑西林纸片法作为肺炎链球菌非脑膜炎株青霉素注射剂敏感性的初筛方法灵敏度低,大部分肺炎链球菌必须用 Etest 等 MIC 方法检测。     

简介美国NCCLS药敏试验法规(1999年1月版)的变动部分

１９９９年１月美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）出版的《药敏试验实施标准;第９次信息补充》（Ｍ１００Ｓ９）文件［１］对当前在临床上有重要意义的耐药菌株的检测做了许多的补充和修改。如新版本对于产超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）株的检测、耐苯唑西林的凝固酶阴性的葡萄球菌（ＭＲＳＣｏＮ）的检测,进行了修改;增添幽门螺杆菌的药敏试验的操作规程和判定标准;补充肠球菌药敏试验的注意事项;补充几种新药的判定标准。１关于肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌中ＥＳＢＬ株的检测方法：新版本中修改要点包括…     

克林霉素加鱼腥草治疗耐青霉素金黄色葡萄球菌肺炎疗效观察

【目的】探讨克林霉素与鱼腥草联用治疗耐青霉素金黄色葡萄球菌肺炎的疗效。【方法】耐青霉素金黄色葡萄球菌肺炎60例，随机分为3组，每组各20例，分别用克林霉素加鱼腥草，耐酶青霉素类（苯唑西林）、糖肤类（万古霉素）治疗7～21d。【结果】克林霉素加鱼腥草治疗组治愈率明显高于苯唑西林治疗组，而与万古霉素治疗组疗效差别无显著性。【结论】克林霉素加鱼腥草联用比苯唑西林或万古霉素治疗耐青霉素金黄色葡萄球菌肺炎更具优越性。     

评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧两林金黄色葡萄球菌（MRSA）的临床价值。方法用头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测临床分离的200株金黄色葡葡球菌，以测定PBP2a的MRSA-乳胶凝集试验作为“金标准”。结果92株PBP2a阳性金黄色葡萄球菌巾．头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法分别检出MRSA91株和84株：108株PBP2a阴性中，头孢西丁纸片扩散法全部为阴性，苯唑西林纸片扩散法阴性为103株。以PBP2a检测结果为标准．头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA的特异性分别为100．0％和95．4％．敏感性分别为98．9％和91.3％。5株苯唑西林纸片扩散法检测为中介的菌株。经PBP2a检测结果证实，3株为MRSA，2株为MSSA。结论头孢西丁比苯唑西林更适合检测MRSA．并能提高测定MRSA的可靠性，是临床实验室常规检测MRSA的首选方法。     

耐甲氧西林葡萄球菌检测方法评价

目的对耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的检测方法进行评价．寻找适合基层医院实验室检测MRS的方法。方法以聚合酶链反应（PCR）法作为“金标准”，对苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法和青霉素结合蛋白2a（PBP2a）胶乳凝集法检测MRS进行方法学评价。结果3种检测方法与PCR法相比，差异均无统计学意义（P〉0．05），但以PBP2a胶乳凝集法的敏感性和特异性较高（97．6％，100．0％）。其次是头孢西丁纸片扩散法（97．6％，87．5％），而苯唑西林纸片扩散法的敏感性和特异性最低（90．2％，75．0％），并且苯唑西林容易失效。结论临床实验室可根据实际情况使用此3种检测方法进行MRS筛检，但推荐以PBP2a胶乳凝集法和头孢西丁纸片扩散法为更佳。     

头孢西丁纸片评价耐甲氧西林葡萄球菌的探讨

目的 评价头孢西丁纸片法检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的特异性和灵敏度。方法 收集临床分离金黄色葡萄球菌100株、凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）52株，分别进行头孢西丁纸片法、添加4oANaCl的头孢西丁纸片法、添加2％NaCl的苯唑西林纸片法以及苯唑西林-盐琼脂法检测，以苯唑西林-盐琼脂法作为MRS检测标准，按CLSI2006版标准判读结果。结果 头孢西丁纸片、添加4oANaCl的头孢西丁纸片、添加2oANaCl的苯唑西林纸片检测MRS特异性均达100．0％；对于金黄色葡萄球菌3种纸片法的灵敏度分别为82．7％、79．3％、72．4％；对于凝固酶阴性葡萄球菌，3种纸片法的灵敏度分别为97．9％、95．8oA、95．8％。加盐与不加盐头孢西丁纸片法检测MRS的差异无显著性（P〉0．06），耐药株抑菌圈直径（mm）分别为10．68士6．42、13．36士7．37（P〈0．01）。结论 加盐与不加盐头孢西丁纸片法均能可靠检测MRS，前者对耐药株结果更易判读。     

前列腺液中耐甲氧西林金黄色葡菌球菌耐药分析

目的检测前列腺液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对争内酰胺类抗生素、头孢菌素、氨基糖甙类、大环内酯类以及其他抗生素药物的耐药性。方法在前列腺液中分离出99株金黄色葡萄球菌。应用1μg／片苯唑青霉素检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）76株，采用纸片扩散法测定细菌对15种抗生素（包括苯唑青霉素）的敏感性。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRsA）对青霉素、红霉素、苯唑青霉素、庆大霉素、四环素、环丙沙星、氯霉素高度耐药，耐药率分别为100．00％、97．37％、96．05％、84．21％、82．89％、81．58％、81．58％。结论泸州地区前列腺液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）对多种抗生素耐药，对万古霉素的敏感性达100．00％。建议临床医师参照实验室提供的药敏试验结果，合理选用治疗MRSA的抗生素。     

耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌选择培养基的研究

为防止耐药菌株流行，及时，准确地检出耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌，给临床提供可靠的治疗依据。配制ＭＲＳＡ选择性培养基，苯唑青霉素浓度分别为２，４，６μｇ／ｍｌ，ＮａＣｌ浓度分别为４％，６％，８％，并分别测试这些培养基对ＭＲＳＡ的敏感性和特异性及分解甘露醇的情况。     

凝固酶阴性葡萄球菌苯唑西林筛选试验药物浓度的探讨

目的 选择一合适的筛选法检测凝固酶阴性葡萄球菌（ＣＮＳ）和苯唑西林（ＯＸＡ）浓度。方法 通过Ｋ－Ｂ纸片法、琼脂稀释法和β－内酰胺酶抑制试验对１４１株ＣＮＳ进行检测。结果 选择ＯＸＡ０．２５μｇ／ｍｌ时，有８株ＯＸＡ敏感株（ＭＳＳ）被误判为耐药株（ＭＲＳ），误判率为８．３３％；选择ＯＸＡ０．５μｇ／ｍｌ时，１株ＭＳＳ误判为ＭＲＳ，误判率为１．０４％；选择ＯＸＡ０．７５μｇ／ｍｌ时无ＭＳＳ或ＭＲＳ的误