Wnt通路抑制因子SFRP5在皮肤鳞癌组织的甲基化状态及其作用

目的检测皮肤鳞癌组织中Wnt通路抑制因子SFRP5甲基化状态及其与临床病理的关系,以探讨SFRP5在皮肤鳞癌发生发展中可能的作用机制。方法运用Mass ARRAY质谱仪Epi TYPER甲基化方法检测皮肤鳞癌组织、癌旁组织和正常皮肤组织各40例样本中SFRP5基因启动子甲基化状态。结果对皮肤鳞癌组织、癌旁组织、正常皮肤组织中SFRP5共2个Cp G片段11个Cp G位点1 142个(86.52%)Cp G单位的甲基化率进行非参数秩和检验,在皮肤鳞癌与正常组织相比中检测到6个(6/11,54.54%)Cp G位点甲基化率差异具有统计意义(P<0.05),其甲基化率在皮肤鳞癌高于正常对照组。癌旁组织与正常组织相比,有6个(6/11,54.54%)Cp G位点甲基化率差异具有统计意义(P<0.05),其甲基化率在癌旁组织高于正常对照组织。其中Cp G 1_5位点甲基化率在不同病理级别具有统计学差异(P<0.05),CSCCⅢ级>CSCCⅡ级>CSCCⅠ级。结论 SFRP5在皮肤鳞癌中呈现高甲基化率,可能参与了皮肤鳞癌的发生与发展过程。     

卡波西肉瘤组织中基质交感分子1的表达及意义

目的探讨卡波西肉瘤组织中基质交感分子1(STIM1)蛋白的表达及临床意义。方法用免疫组织化学方法检测34例卡波西肉瘤、22例血管瘤、15例正常皮肤组织石蜡标本中STIM1蛋白的表达水平,并与卡波西肉瘤的临床病理特征进行统计学分析。结果 STIM1蛋白在3种组织均有不同程度的表达,其中卡波西肉瘤中表达阳性率为79.41%,血管瘤中为81.81%,正常皮肤组织中为13.33%。STIM1在卡波西肉瘤组织和血管瘤组织中的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),但两者与正常皮肤组织相比差异均有统计学意义(P<0.05)。STIM1蛋白的表达水平与卡波西肉瘤病理分期呈正相关(rs=0.611,P<0.05),结节期高于斑片期和斑块期(P<0.05)。STIM1的表达水平与民族、性别、年龄、人疱疹病毒8型(HHV-8)感染、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染、皮损面积等无明显相关性(P>0.05)。HIV合并HHV-8双阳性和HIV合并HHV-8双阴性的患者中STIM1蛋白的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 STIM1在卡波西肉瘤组织结节期的表达高于斑片期和斑块期,可能对卡波西肉瘤的病程进展起重要作用。     

宫颈鳞状细胞癌中DLC-1和cyclinD1的表达及其临床意义

目的 观察肝癌缺失基因1(deleted in liver cancer-1,DLC-1)和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈鳞状细胞癌(CSCC)中的表达,并探讨两者与CSCC临床病理因素之间的关系.方法 应用免疫组化SP法检测DLC-1和cyclinD1在正常宫颈组织、CIN及CSCC中的表达.结果 ①DLC-1在正常宫颈组织、CIN和CSCC中的阳性表达率依次降低,与CSCC的肿瘤分级、FIGO分期及淋巴结转移有关,且差异显著(P＜0.05).②cyclinD1在正常宫颈组织、CIN和CSCC中的阳性率依次升高,其表达与CSCC的肿瘤分级、FIGO分期及淋巴结转移有关,且差异显著(P＜0.05).③DLC-1和cyclinD1在CSCC中的表达呈负相关.结论 DLC-1低表达和cyclinD1高表达与CSCC的发生、发展、侵袭、转移相关,二者有望成为CSCC辅助诊断、治疗的新靶点.     

食管鳞状细胞癌中SFRP1、Wnt-1的表达及临床意义

目的:研究分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)和Wnt-1在食管鳞癌中的表达情况,探讨其在食管鳞状细胞癌发生发展及与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学法(SP法),检测60例食管鳞状细胞癌组织和40例正常食管黏膜中SFRP1和Wnt-1蛋白的表达。结果:食管鳞状细胞癌中SFRP1的阳性表达率为25.0%,显著低于癌旁正常组织黏膜中的92.5%(χ2=43.81),Wnt-1在食管鳞状细胞癌中的阳性表达率为73.3%,显著高于癌旁正常组织中的17.5%(χ2=29.94)。在食管鳞癌组织中,SFRP1的表达与临床病理因素无相关性,Wnt-1的表达与组织分化程度有关。结论:SFRP1和Wnt-1在食管鳞癌的发生、发展中起一定的作用,它们有望成为辅助参考指标应用于临床,并可能为食管鳞癌的生物治疗和预后判断提供部分理论依据。     

胃癌中p27kip1蛋白的表达及意义

目的探讨p27kip1蛋白在胃癌中的表达及与胃癌的关系。方法应用免疫组化检SP法检测p27kip1在59例胃癌及19例正常胃黏膜组织中表达。结果 p27kip1在正常胃黏膜组织阳性率(84.22%),显著高于胃癌组织中阳性率(47.46%)(P<0.05)。胃癌组织中高中分化腺癌p27kip1阳性率(68.42%),显著高于低分化腺癌(37.5%)与胃黏液癌(31.25%)(P<0.05);后两者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌组织中p27kip1表达较正常组织明显降低提示可能与胃癌发生相关。     

HIF-1α与COX-2在银屑病皮损中的表达及相关性研究

目的检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和环氧合酶-2(COX-2)在寻常型银屑病皮损及正常人皮肤组织中的表达水平,探讨HIF-1α和COX-2在银屑病发病机制中的作用。方法收集30例寻常型银屑病和20例正常人的临床资料以及皮损和皮肤组织。(1)用半定量RT-PCR检测银屑病皮损和正常皮肤组织中HIF-1α和COX-2 m RNA表达情况;(2)用Western blot检测银屑病皮损和正常皮肤组织中HIF-1α和COX-2蛋白表达情况。结果 HIF-1α和COX-2 m RNA相对表达量在寻常型银屑病组(1.32±0.04和1.21±0.04)的表达显著高于正常对照组(0.49±0.03和0.31±0.03),两组相比差异有统计学意义(P<0.05);且HIF-1αm RNA相对表达量与COX-2 m RNA相对表达量呈正相关(r=0.664,P<0.05);HIF-1α和COX-2蛋白在寻常型银屑病组(0.76±0.03和0.62±0.03)的表达显著高于正常对照组(0.44±0.05和0.28±0.06),两组相比差异均有统计学意义(P<0.05);且HIF-1α蛋白表达量与COX-2蛋白表达量呈正相关(r=0.601,P<0.05)。结论 HIF-1α和COX-2在银屑病皮损中异常高表达且呈正相关,可能在银屑病的发生发展过程中起着重要作用。     

SFRP1基因甲基化在儿童急性淋巴细胞白血病中的临床意义

目的:探讨SFRP1基因及其甲基化在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的临床意义。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)检测43例新确诊ALL患儿化疗前(初发组)和诱导缓解化疗后d 46骨髓达完全缓解(缓解组)时的骨髓单个核细胞中SFRP1基因甲基化状态，实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SFRP1 mRNA表达，蛋白印迹(Western blot)法检测SFRP1蛋白表达，并收集患儿的临床资料，分析SFRP1基因甲基化在儿童ALL中的临床意义。结果:初发组SFRP1基因启动子甲基化阳性率(44.19%)明显高于缓解组(11.63%)(χ²=11.328,P <0.05)。初发组患儿骨髓单个核细胞中SFRP1 mRNA及蛋白相对表达量均显著低于缓解组(P <0.05)。初发组SFRP1基因启动子甲基化与危险度(χ²=15.613,P=0.000)及患儿生存(χ²=6.561,P=0.010)有关，SFRP1基因高甲基化患儿危险度明显升高、无事件生存时间缩短，而其他临床资料间无明显差异。结论:SFR...     

骨肉瘤中WIF-1甲基化及WIF-1、β-catenin蛋白表达的研究

目的检测骨肉瘤中WIF-1基因启动子区甲基化状态及WIF-1蛋白、β-catenin蛋白表达情况,探讨它们之间的相关性及其与骨肉瘤发生发展的关系,为骨肉瘤的分子靶向治疗提供理论依据。方法收集青岛大学2008年1月至2013年6月骨肉瘤组织50例,并取骨软骨瘤组织30例作为对照,应用甲基化PCR和免疫组化两种方法,检测骨肉瘤组及对照组WIF-1基因启动子区甲基化状态及WIF-1蛋白、β-catenin蛋白表达情况。结果骨肉瘤和骨软骨瘤组织的WIF-1启动子甲基化阳性率分别为70.0%和20.0%,差异具有统计学意义(P<0.01)。WIF-1启动子甲基化阳性率随着骨肉瘤分期的增加而升高。骨肉瘤和骨软骨瘤组织中WIF-1蛋白表达率分别为42.0%和70.0%,两者之间差异有统计学意义(P<0.05),且WIF-1启动子甲基化阳性与WIF-1蛋白表达呈明显负相关(P<0.05)。骨肉瘤和骨软骨瘤组织中β-catenin蛋白表达率分别为70.0%和43.3%,两者之间差异有统计学意义(P<0.05),WIF-1启动子甲基化与β-catenin蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论 WIF-1基因甲基化状态可能抑制了WIF-1蛋白的表达,从而引起β-catenin蛋白在在胞质中异常积聚表达,从而使经典Wnt信号转导通路过度激活,参与细胞的生长、增殖,导致骨肉瘤的发生发展。     

Wnt1和DKK1在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的研究Wnt基因家族中Wnt1和Wnt信号通路抑制因子DKK1在宫颈鳞癌中的表达及意义。方法应用免疫组织化学法检测宫颈鳞癌及正常宫颈组织中Wnt1和DKK1蛋白的表达。结果宫颈鳞癌中Wnt1的阳性表达率为71.67%,显著高于正常宫颈组织中的40.00%(P<0.05)。DKK1在宫颈鳞癌中的阳性表达率为43.33%,显著低于正常宫颈组织中的66.67%(P<0.05)。在宫颈鳞癌组织中,Wnt1和DKK1与FIGO分期、组织分化程度、有无淋巴转移及浸润深度有关(P均<0.05)。Wnt1与DKK1在宫颈鳞癌中的表达呈负相关(P<0.01)。结论在宫颈鳞癌中,Wnt1作为Wnt信号通路的始动因子发挥作用,而DKK1作为Wnt信号通路的抑制因子发挥作用。二者有望成为宫颈鳞癌判断预后及指导临床治疗的监测指标。     

胃癌组织中RBMS3及SFRP1的表达水平与临床参数的关系及之间的相关性研究

目的研究单链相互作用蛋白3(RBMS3)及分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)的表达水平与胃癌的临床参数之间的关系及两者表达水平与胃癌患者预后的相关性。方法回顾性收集新鲜人胃癌组织(23例)、对应的癌旁组织(23例),另收集172例胃癌组织及43例癌旁组织制成组织芯片。应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRTPCR)检测23对新鲜组织中RBMS3及SFRP1 mRNA的表达水平,同时应用蛋白免疫印迹(WB)技术检测RBMS1及SFRP1的蛋白表达水平。进一步运用免疫组化(IHC)检测172例胃癌组织及43例癌旁组织中RBMS3及SFRP1蛋白的表达水平。结果胃癌组织、癌旁组织中RBMS3及SFRP1均有表达;RBMS3及SFRP1在胃癌组织中的表达水平明显均低于其在癌旁正常组织(P0.05),RBMS3与SFRP1在胃癌组织中的表达水平(mRNA和蛋白)呈正相关;RBMS3在胃癌中的蛋白表达水平与胃癌的分化程度、浸润深度显著相关,SFRP1在胃癌中的蛋白表达水平与胃癌的分化程度显著相关;RBMS3与SFRP1在胃癌中的蛋白表达水平均与胃癌患者预后相关,且两者共表达水平是胃癌患者的独立预后因素。结论 RBMS3及SFRP1在胃癌组织、癌旁组织中差异表达且呈正相关;RBMS3及SFRP1共表达水平可能是胃癌患者预后的一个有价值的生物学指标。     

Y-盒结合蛋白1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的：检测Y-盒结合蛋白1（YB-1）在乳腺癌及癌旁正常乳腺组织中的表达,探讨其与乳腺癌发生、发展的关系。方法收集河北大学附属医院2012年9月至11月期间手术切除的乳腺癌组织（均为术后石蜡病理确诊为浸润性导管癌）标本30例,癌旁正常乳腺组织标本10例。应用免疫组织化学染色的方法检测组织中 YB-1的表达。结果免疫组化结果显示,YB-1在癌旁正常乳腺组织细胞中无表达或低表达;在乳腺癌组织中高表达,阳性表达率为80%,与癌旁正常乳腺组织相比差异有统计学意义（P＜0.05）。YB-1在Ⅰ期乳腺癌组织中的免疫组化评分显著低于Ⅱ期乳腺癌组织（2.6±1.511 vs.4.2±1.182, P＜0.05）。YB-1在无腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中的表达显著低于伴腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织（2.8±1.15 vs.5.1±0.74,P＜0.05）。结论 YB-1乳腺癌中表达上调与乳腺癌临床分期及淋巴结转移有关。     

PTEN在食管鳞状细胞癌中的表达和意义

目的研究人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在食管鳞状细胞癌中的表达与临床病理特点的关系。方法采用免疫组织化学及荧光定量聚合酶链反应(PCR)法分别检测60例胸外科食管鳞状细胞癌手术患者食管鳞状细胞癌组织、癌旁组织和正常食管黏膜组织中PTEN的表达水平。分析PTEN在食管鳞状细胞癌浸润、分化、转移中的作用。结果 PTEN在正常食管组织(2.01±0.07)、癌旁组织(1.50±0.10)、食管鳞状细胞癌组织(0.89±0.08)中的表达逐渐降低(P0.01)。PTEN在有淋巴结转移的食管鳞状细胞癌组织中(0.87±0.08)的表达比在无淋巴结转移(0.94±0.07)的表达低;PTEN在高分化(0.91±0.06)、中分化(0.90±0.07)、低分化(0.85±0.10)的食管鳞状细胞癌组织中的表达逐渐降低,PTEN在浸润深(0.88±0.08)的食管鳞状细胞癌组织中的表达比浸润浅(0.93±0.07)的表达低(P0.05或0.01)。在60岁组与≥60岁组中的阳性表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 PTEN基因的丢失或突变均与食管鳞状细胞癌的生长、分化和浸润转移相关。     

食管鳞癌组织中Fas FasL蛋白的表达及意义

目的 观察食管鳞状细胞癌癌灶、癌旁组织、癌转移及非转移淋巴结中Fas、FasL蛋白的表达情况,探讨它们在食管鳞癌发生发展中的作用及其临床意义.方法收集食管鳞癌患者的癌及癌旁组织,转移及非转移淋巴结,应用免疫组化S-P染色技术测定以上组织Fas、FasL的表达情况.结果 Fas蛋白表达在癌组织中55.6%低于癌旁组织85.19%(P<0.05),高分化癌组织84.2%高于中分化44.4%和低分化25.0%(P<0.05),伴淋巴结转移癌组织38.1%低于无淋巴结转移者66.7%(P<0.05),转移组淋巴结33.3%低于非转移组66.7%(P<0.05);FasL蛋白表达在癌组织中81.5%高于癌旁组织48.2%(P<0.05),高分化57.9%低于中分化92.6%和低分化100%(P<0.05),T2期66.7%低于T3期96.0%和T4期100%(P<0.05),伴淋巴结转移癌组织100%高于无淋巴结转移者69.7%(P<0.05),转移组淋巴结71.4%高于非转移组的42.4%(P<0.05);比较临床TNM分期,Fas及FasL蛋白阳性表达率则未见差异(均P>0.05).结论 食管鳞癌组织中存在Fas表达下调,FasL表达上调,并在食管鳞癌的发生转移中发挥作用.     

乳腺浸润性小叶癌的声像图特征与病理及Id1mRNA、Id2mRNA表达的研究

目的立足超声检查,分析乳腺浸润性小叶癌（ILC）的病理表现,进一步认识其超声特征;探讨ILC的超声表现与Id1mRNA及Id2mRNA表达之间的关系。方法应用实时荧光定量FIT—PCR检测42例ILC样本中Id1mRNA及Id2mRNA的表达,并与ILC的超声表现进行对照分析。结果Id1mRNA在乳腺正常组织中表达低于癌组织（P〈0．05）,ILC WHOⅢ级表达高于WHOⅠ级（P〈0．01）。Id2mRNA在正常组织中表达高于癌组织（P〈0．05）,WHOⅢ级表达低于WHOⅠ级（P〈0．05）;具有毛刺征及周边高回声晕特征的组别,Id1mRNA均呈高表达（P均〈0．01）,Id2mRNA的表达与ILC超声征象之间均无统计学差异（P〉0．05）。结论ILC声像图表现与其病理改变密切相关;ILC的超声征象可在一定程度上反应Id1mRNA的表达水平。     

SFRP4和β-catenin在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义

目的观察分泌型卷曲相关蛋白(SFRP4)及β-连环素(β-catenin)在宫颈鳞癌组织中的表达,并分析其临床病理意义。方法应用免疫组化SP法检测62例宫颈鳞癌组织(SCC组)及23例正常宫颈组织(NC组)中SFRP4和β-catenin的表达。结果①(1)SCC组SFRP4和β-catenin的阳性表达率(66.1%、71.0%)均高于NC组(30.4%、34.8%)(P均<0.05)。②SFRP4和β-catenin在宫颈鳞癌中的表达与临床分期、分化程度、淋巴转移及浸润深度有关(P均<0.05)。③SFRP4和β-catenin的表达呈正相关(r=0.29,P<0.05)。结论 SFRP4可能与β-catenin协同作用促进Wnt/β-catenin信号通路的活化,并且与宫颈鳞癌的恶性临床病理特征相关,提示SFRP4可能成为指导宫颈鳞癌的临床治疗和判断预后的指标。     

细胞周期蛋白E和p53在胆囊癌组织中的表达

目的：研究细胞周期蛋白E（Cyclin E）和p53在胆囊癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化方法,检测Cyclin E和p53在胆囊癌组织中的表达,以慢性胆囊炎组织作为对照。结果 Cyclin E在胆囊癌组织中表达阳性率比胆囊炎组高,在中-低分化胆囊癌组织中表达阳性率比高分化胆囊癌组织中高,在晚期胆囊癌（Nevin III~V期）组织中表达阳性率比早期（NevinⅠ,Ⅱ期）胆囊癌组织中高,差异均有统计学意义（χ2分别=17.76、5.11、6.13,P均＜0.05）。 Cyclin E的表达与胆囊癌有无转移无明显相关性（χ2=0.04,P＞0.05）。 p53在胆囊癌组织中表达阳性率比胆囊炎组高,在中-低分化胆囊癌组织中表达阳性率比高分化胆囊癌组织中高,差异均有统计学意义（χ2分别=43.46、12.77,P均＜0.05）。 p53的表达与胆囊癌Nevin分期及有无转移无明显相关性（χ2分别=0.09、0.18,P均＞0.05）。Cyclin E表达阳性的胆囊癌患者1年生存率比表达阴性者低,差异有统计学意义（χ2=16.63,P＜0.05）。p53的表达与胆囊癌患者1年生存率无明显相关性（χ2=0.11,P＞0.05）。结论结合分析Cyclin E和p53在胆囊组织中的表达,有助于对胆囊癌进行早期诊断和判断预后。     

HPV感染及Fas／FasL基因表达与阴茎鳞癌免疫逃逸关系的研究

目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）感染对阴茎鳞癌组织Fas／FasL基因表达的影响。方法用原位杂交法及免疫组化法分别检测40例阴茎鳞癌和10例阴茎包皮组织中HPV及Fas、FasL蛋白的表达。结果在阴茎鳞癌和阴茎包皮组织中,HPV感染率分别为70．0％和25．0％（P〈0．05）,Fas表达阳性率分别为40．0％和85．0％（P〈0．05）,FasL分别为65．0％和25．0％（P〈0．05）。在阴茎鳞癌HPV感染组和未感染组,Fas表达阳性率分别为28．6％和66．7％（P〈0．05）;FasL分别为75．0％和41．7％（P〈0．05）。结论HPV感染可能会使阴茎鳞癌细胞Fas基因表达下调,FasL表达上调,使癌细胞发生免疫逃避,从而促进阴茎鳞癌的发生。     

初步探讨口腔鳞状细胞癌中的p33/ING1表达的意义

目的 观察口腔鳞状细胞癌中的p33/ING1基因表达情况,探讨其临床意义.方法 分别选取口腔黏膜正常组织30例、异常口腔黏膜增生组织30例、口腔鳞状细胞癌黏膜组织30例,观察p33/ING1在人正常口腔黏膜上皮角化细胞（Normal Oral Keratinocyte,NOK）、人口腔黏膜上皮异常增生细胞（ Dysplastic Oral Keratinocyte,DOK）和人口腔鳞状细胞癌细胞（Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC）中的表达情况.结果 ING在NOK细胞中的表达要远远高于在OSCC细胞中的表达,有显著性差异和统计学意义（P＜0.05）.结论 p33/ING1蛋白的表达在OSCC细胞中的表达显著下降,p33/ING1表达在口腔鳞状细胞癌的发展中具有重要意义.     

CyclinD1,P16,在皮肤鳞状细胞癌中的表达和意义

目的：观察CyclinD1,P16在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达,探讨CyclinD1,P16在皮肤鳞状细胞癌发生发展中的作用。方法：用免疫组织化学技术检测40例皮肤鳞癌石蜡包埋组织和10例正常皮肤组织的CyclinD1,P16表达。结果：CyclinD1在皮肤鳞癌组织中表达高于皮肤正常对照组,两者差异有显著统计学意义（P〈0.01）;P16在皮肤鳞癌组织中表达低于皮肤正常对照组,但两者差异无显著统计学意义（P〉0.05）;CyclinD1,P16在皮肤鳞癌中表达呈正相关性（r=0.782,P〈0.01）。结论：CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌组织中阳性表达上调,P16在皮肤鳞状细胞癌组织中阳性表达下调,CyclinD1,P16在皮肤鳞癌中表达呈正相关。     

喉鳞癌组织中bFGF蛋白的表达及临床意义

目的探讨喉鳞癌组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白的表达及临床意义。方法选择52例喉鳞癌组织和52例癌旁组织标本,采用免疫组织化学SP法检测其中bFGF蛋白的表达情况,分析bFGF的表达与喉鳞癌临床病理学特征的关系。结果 bFGF在喉鳞癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05);喉鳞癌组织中bFGF蛋白的表达与喉鳞癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);与喉鳞癌组织中临床分型、肿瘤大小、性别、年龄以及吸烟量不相关(P>0.05)。结论 bFGF在喉鳞癌中高表达,在喉鳞癌的发生发展过程中起到重要作用,bFGF的检测将有助于喉癌患者恶性程度及预后的评估。