人乳头状瘤病毒、p16^INK4A在宫颈鳞状上皮病变中的意义

目的 探讨人乳头状瘤病毒的不同亚型及p16INK4A p53、Ki-67、ER在不同程度宫颈鳞状上皮病变中的表达及临床病理意义.方法 采用原位杂交及免疫组化方法,检测人乳头状瘤病毒的不同亚型,p16INK4A、p53、Ki-67及ER在204例不同程度宫颈病变组织中的表达情况.结果 HPV在不同程度宫颈病变中总检出率为64.67%(119/184);在宫颈鳞癌、CIN组中检出最多的感染类型为HPV16/18,尤其在CINⅢ、CINⅡ组中阳性表达率较高;HPV31/33主要在CINI病变中表达;而HPV6/11在尖锐湿疣组检出率最高.随着官颈病变严重程度的增加,p16INK4A、p53和Ki-67的阳性表达率及染色强度呈递增趋势;但ER的阳性表达率及染色强度呈递减趋势.p16INK4A、p53、Ki-67与HPV16/18型感染关系密切;ER与HPV6/11型感染关系密切.结论 HPV16/18型及p16INK4A、p53、Ki-67在官颈鳞癌、CINⅢ、CINⅡ中表达明显升高,可能对宫颈鳞癌的发生发展具有协同作用;p16INK4A可以作为诊断宫颈肿瘤性及非肿瘤性增生的标记物.     

宫颈上皮病变中高危型HPV感染与病变分级及P53、p16INK4a和细胞周期蛋白表达的关系

目的研究宫颈上皮病变(CIN)中高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染与病变分级及P53、p16INK4a和细胞周期蛋白表达的关系。方法回顾性收集首都医科大学附属北京妇产医院2014年3月至2018年3月期间接受宫颈活检、宫颈高频电刀圈环切除、宫颈冷刀锥切的CIN组织。测定HR-HPV的感染类型,并比较HR-HPV感染与否、不同病变分级CIN患者中P53、p16INK4a、细胞周期蛋白的蛋白表达水平。结果 84例CIN患者中,HR-HPV感染率为30. 95%;其中HPV16、HPV18为主要的HR-HPV感染类型,感染率分别为11. 90%、10. 71%。不同病变分级CIN中HR-HPV感染率以及P53、p16INK4a、Cyclin D1、Cyclin B1的蛋白阳性表达率的比较有显著性差异(P <0. 05);随着CIN分级的升高,HR-HPV的感染率以及Cyclin D1、Cyclin B1的蛋白阳性表达率明显升高,P53、p16INK4a的蛋白阳性表达率明显降低;合并HR-HPV感染的CIN中P53、p16INK4a的蛋白阳性表达率明显低于不合并HR-HPV感染的CIN,Cyclin D1、Cyclin B1的蛋白阳性表达率明显高于不合并HR-HPV感染的CIN(P <0. 05)。结论 CIN中HR-HPV感染与病变分级加重及P53、p16INK4a、细胞周期蛋白表达改变有关。     

p16^INK4a和Ki-67免疫细胞化学染色在宫颈液基细胞学中的应用价值

目的 探讨液基细胞学检测(LCT)剩余细胞学标本中p16INK4a、Ki-67的免疫细胞化学染色筛查宫颈鳞状细胞癌和宫颈癌前病变的价值.方法 采用免疫细胞化学和免疫组化法对194例细胞学标本和91例组织活检标本进行p16INK4a、Ki-67检测.结果 p16INK4a、Ki-67表达阳性率随着宫颈病变程度的加重而升高,与病变级别呈正相关.Ki-67的标记指数(LI)在HSIL组最高,与其他各组间均数的差异显著(P＜0.05).LSIL及其以上病变细胞学p16INK4a和Ki-67与组织学诊断符合率分别为87.3％和80.95%.宫颈脱落细胞学Ki-67、p16INK4a的免疫细胞化学染色检出高级别病变及鳞癌病变的敏感度、特异度分别为83.6％、86.7％和87.1％、100％. 结论 利用LCT液基细胞学涂片中p16INK4a、Ki-67的免疫细胞化学染色作为辅助诊断指标应用于宫颈癌高危人群筛查,具有重要意义.     

p16、Ki-67和CK7在宫颈癌前病变中的表达及临床意义

目的探讨p16蛋白(p16)、Ki-67抗原(Ki-67)及细胞角蛋白7(CK7)在宫颈癌前病变中的表达及临床意义。方法选取2014年1月至2017年3月收治的96例宫颈上皮内瘤样变(CIN)患者的石蜡组织标本,并按病变程度将其分为CINⅠ组(25例)、CINⅡ组(36例)和CINⅢ组(35例),同时选取64例慢性宫颈炎患者的石蜡组织标本为对照组,采用免疫组化SP法检测各组p16、Ki-67和CK7阳性表达率及表达模式,评价其对宫颈癌前病变的诊断效能。结果 CINⅠ组、CINⅡ组和CINⅢ组p16、Ki-67和CK7的阳性表达率均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);p16、Ki-67和CK7表达总评分与宫颈癌前病变程度具有一致性(Kappa值分别为0.546、0.628、0.349);受试者工作特征曲线分析结果显示,p16、Ki-67和CK7联合检测的曲线下面积(0.978)高于各项单独检测(0.930、0.966、0.837),差异有统计学意义(P0.05)。结论 p16、Ki-67和CK7的表达与宫颈病变程度具有相关性,且三者联合检测有利于提高对宫颈癌前病变的诊断效能,可运用于宫颈病变的辅助诊断及高风险进展宫颈癌前病变的预测。     

p16、Ki-67在440例宫颈病变中的表达及其病理诊断价值

目的 研究p16、Ki-67在不同宫颈病变组织中的表达,探讨其在病理诊断中的意义.方法 采用免疫组化SP方法检测宫颈病变组织中p16、Ki-67的表达水平,其中宫颈良性反应性改变193例(老年宫颈萎缩性改变35例,宫颈鳞状上皮化性77例,宫颈鳞状上皮良性增生81例),宫颈上皮内瘤变(CIN) 227例(CIN Ⅰ86例,CINⅡ88例,CINⅢ53例),宫颈鳞状细胞癌16例及宫颈腺上皮病变7例(其中3例来源于CIN组)共计440例.结果 宫颈良性反应性改变组p16、Ki-67的阳性率明显低于CIN组及宫颈鳞状细胞癌组(P＜0.01);在CIN组中阳性强度随着CIN病变级别的增加而增强(P＜0.01);在宫颈鳞状细胞癌病例组中呈强阳性;宫颈腺上皮不典型增生的p16、Ki-67也呈不同程度(+).结论 p16、Ki-67对宫颈良性改变的甄别、CIN级别的判定及宫颈早期浸润癌的诊断具有重要价值.     

惠州龙门地区妇女宫颈病变中p16INK4a蛋白与KGFR的表达及意义

目的探讨p16INK4a蛋白、角质细胞生长因子受体(KGFR)在惠州龙门地区妇女宫颈病变中的表达及意义。方法选取2013年6月至2014年6月于惠州市龙门人民医院就诊的180例妇女,按照病例诊断结果将所有研究对象分为宫颈鳞癌组(40例),宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ/Ⅲ组(45例),CINⅠ组(48例),健康及慢性炎症组(47例)。采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶连结(SP)法对p16INK4a蛋白及KGFR的表达进行检测,并比较分析不同病理分期的表达差异。结果宫颈鳞癌组、CINⅡ/Ⅲ组、CINⅠ组、健康及慢性炎症组的p16INK4a蛋白表达阳性率分别为90.0%、82.2%、29.2%、0.0%,KGFR表达阳性率分别为87.5%、84.4%、52.1%、42.6%。p16INK4a蛋白与KGFR在宫颈组织中的表达随着病理分期的上升而增加,组间p16INK4a蛋白及KGFR表达阳性率比较差异均有统计学意义(P0.01)。结论惠州龙门地区妇女宫颈病变中p16INK4a蛋白、KGFR均有不同程度的表达,且与宫颈病变进展密切相关。     

p16、Ki-67蛋白表达及HPV检测在宫颈上皮内瘤变中的诊断意义

目的 探讨p16、Ki-67联合应用在宫颈上皮内瘤变(CIN)诊断及分级中的意义及人乳头状瘤病毒(HPV)感染与CIN的关系.方法 分别对160例宫颈各类病变采用免疫组化方法检测p16、Ki-67蛋白表达情况,并行人乳头状瘤病毒分型检测.结果 ①宫颈上皮内低度瘤变(CINⅠ)中,p16阳性率为85.7%,Ki-67阳性率为67.8%,较宫颈良性病变的阳性率明显增加(P<0.01);宫颈上皮内高度瘤变(CINⅡ-Ⅲ)中,p16阳性率为100%,Ki-67阳性率为98.3%,两者相比差异极显著(P<0.01).在CINⅡ-Ⅲ中,p16、 Ki-67表达呈正相关.②高危型HPV在宫颈良性病变、CINⅠ和CINⅡ-Ⅲ病变组感染者分别为30.6%、75.7%和93.3%,宫颈CINI和CINⅡ-Ⅲ明显高于良性病变组,差异极显著(P<0.01).随着宫颈上皮内瘤变程度加重,HPV感染与p16表达呈正相关.结论 p16、Ki-67联合应用可作为宫颈良性病变与CINⅠ以及CINⅠ与CINⅡ-Ⅲ鉴别的重要标记物;高危型HPV感染与宫颈上皮内瘤变密切相关,在高危人员筛查与判断预后上有重要意义.     

子宫颈腺癌高危型人乳头状瘤病毒p16INK4A蛋白表达情况

目的探讨子宫颈腺癌高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染检测及p16INK4A蛋白表达的临床意义。方法选取25例宫颈上皮内瘤变CINⅠ、30例CINⅡ、35例CINⅢ、24例浸润性腺癌,同时选取35例正常宫颈组织(慢性炎症)患者。采用免疫组织化学方法检测组织中p16INK4A蛋白表达情况,并应用第二代杂交捕获法(HC-2)对13种HR-HPV DNA进行检测。结果宫颈上皮内瘤变CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ组织、浸润性腺癌HR-HPV感染阳性率和p16INK4A蛋白表达阳性率均显著高于正常宫颈细胞(P0.05);宫颈组织中HR-HPV感染阳性率与p16INK4A蛋白表达为显著正相关性(P0.05)。结论高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)导致的宫颈恶化转化与p16INK4A蛋白表达密切相关,采用p16INK4A与HR-HPV联合诊断有利于提高子宫颈癌及CIN阳性预测值。     

HPV L1壳蛋白与p16INK4a的免疫组化检查在宫颈病变诊断中的应用

目的检测宫颈上皮病变过程中HPV L1壳蛋白和p16INK4a蛋白的表达,探讨二者联合在宫颈病变诊断中的应用价值。方法用免疫细胞化学方法检测169例不同级别的宫颈液基细胞学标本中HPVL1壳蛋白和p16INK4a蛋白的表达,并与组织病理学检查结果比较。结果随着宫颈活检病理分级升高,HPV L1壳蛋白阳性[L1(+)]率降低(P<0.01),p16INK4a阳性[p16(+)]率升高(P<0.01)。HPVL1壳蛋白阳性率与病理分级呈负相关(rs=-0.436,P<0.01);而p16INK4a阳性率与病理分级呈正相关(rs=0.459,P<0.01)。在宫颈上皮内瘤变(CIN)CIN1、CIN2、CIN3及鳞状细胞癌(SCC)中,L1(+)/p16(-)的表达率分别为19.18%、2.44%、0.00%、0.00%,L1(-)/p16(+)表达率分别为30.14%、75.61%、92.86%、100.00%。L1、p16INK4a、L1(-)/p16(+)在CIN1的表达与CIN2、CIN3、SCC比较,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论HPV L1壳蛋白、p16INK4a均可作为诊断宫颈病变程度的生...     

CK17和p16在宫颈鳞状上皮不成熟化生和宫颈上皮内瘤变中的表达及意义

目的 检测CK17、p16、Ki-67和p63在宫颈鳞状上皮不成熟化生(IM)和宫颈上皮内瘤变(CIN)中的表达和意义.方法 应用免疫组化SP法检测宫颈IM 15例和CIN 30例组织标本中的p16、CK17、p63和Ki-67的表达水平,并对其表达和意义进行分析.结果 CK17在宫颈IM中的阳性表达率为100%,明显高于LSIL和HSIL组(10%和15%,P<0.01); p16在LSIL和HSIL中的表达率均为100%,明显高于IM组(13.3%,P<0.01);Ki-67的表达在IM和CIN中差异极显著(P<0.01);p63在宫颈IM和LSIL、HSIL中的阳性表达率均为100%,各组间差别不显著(P<0.01).结论 CK17和p16在宫颈IM和CIN病变中表达具有明显差异,有助于两种病变的鉴别诊断.     

p53 alpha-Helix mimetics antagonize p53/MDM2 interaction and activate p53

Overexpression or hyperactivation of MDM2 contributes to functional inactivation of wild-type p53 in nearly 50% of tumors. Inhibition of p53 by MDM2 depends on binding between an NH(2)-terminal (residues 16-28) p53 alpha-helical peptide and a hydrophobic pocket on MDM2, presenting an attractive target for development of inhibitors against tumors expressing wild-type p53. Here we report that novel p53 alpha-helical peptide mimics based on a terphenyl scaffold can inhibit MDM2-p53 binding in vitro and activate p53 in vivo. Several active compounds have been identified that inhibit MDM2-p53 binding in an ELISA assay with IC(50) of 10 to 20 micromol/L and induce p53 accumulation and activation in cell culture at 15 to 40 micromol/L. These results suggest that p53 alpha-helical mimetics based on the terphenyl scaffold may be developed into potent p53 activators.     

Compensatory mutations at the HIV cleavage sites p7/p1 and p1/p6-gag in therapy-naive and therapy-experienced patients

BACKGROUND: Mutations in the genome of HIV conferring drug resistance are a major reason for the failure of antiretroviral therapy, but they often compromise viral fitness. Protease (PR) cleavage site (CS) mutations could compensate for impaired replication capacity of drug-resistant viruses. PATIENTS AND METHODS: We analysed the cleavage sites p1/p7 and p1/p6-gag of 500 HIV-1 subtype B infected patients. The collective consists of 275 therapy-naive and 225 therapy-experienced patients with at least one primary PR mutation, from whom eight underwent therapy-interruption in different clinical settings. RESULTS: Multiple mutations within the CS p7/p1 and p1/p6-gag accumulated in therapy-experienced isolates (p7/p1: A431V-K436R-I437V and p1/p6-gag: L449F/V-P452S-P453L/A). Further rare CS mutations were totally absent in therapy-naive viruses. Sixty percent of all therapy-experienced viruses exhibited at least one therapy-associated CS mutation, but so did 10% of therapy-naive viruses. The analysis of CS and PR mutations in therapy-experienced viruses revealed several positive correlations--A431V with L24I-M46I/L-I54V-V82A; I437V with I54V-V82F/T/S; L449V with I54M/L/S/T/A; and L449F/R452S/P453L: with D30N-I84V--whereas P453L and V82A were negatively correlated. Mutagenetic trees constructed form this cross-sectional data showed an ordered accumulation of the most prominent CS mutations along two pathways L90M-I84V-P453L and I54-V82-A431V followed by either M46L or L24I. Furthermore, eight viruses with at least one therapy-associated mutation at each CS displayed an outstanding maintenance of major PR mutations during therapy interruption. CONCLUSIONS: These findings emphasize the relevance of CS mutations in the evolution of HIV resistance to PR inhibitors. Therefore, therapy-associated CS mutations should be considered in HIV resistance tests to estimate viral fitness in different clinical settings.     

p14ARF、p73和p53在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的探讨宫颈癌组织p14ARF、p73和p53蛋白的表达及其临床意义.方法应用免疫组化方法检测p14ARF和p73、p53基因在41例宫颈癌及20例正常宫颈组织中的表达.结果p14ARF、p73、p53在宫颈癌中阳性率分别为85.4%(35/41)、73.2%(30/41)和39.0%(16/41),与正常宫颈组织相比,有显著差异.p14ARF和p73阳性率均随病理分级增高而增加,而与其它临床病理参数无关.p53表达与病理分级、临床分期和淋巴结转移有关(P＜0.05).在宫颈癌中,p14ARF与p73表达密切相关(P＜0.01),p14ARF与p53表达不相关(P＞0.05).结论p14ARF与p73在宫颈癌中同时高表达有一定诊断和预测价值,可能是宫颈癌新的肿瘤标志物.p53与宫颈癌的发生发展有关.     

p73、p63和p53蛋白在口腔鳞癌中的表达及其意义

目的　研究口腔鳞癌组织中p73，p63和p53蛋白表达以及与临床生物学特性和细胞增殖的关系。方法　采用免疫组化方法检测48例原发性口腔鳞癌组织及20例正常口腔黏膜组织中p73，p63和p53蛋白的表达水平。结果　p73，p63和p53蛋白在口腔鳞癌中阳性表达率显著高于正常口腔黏膜组织(P<0.05) ；p73、P63、p53蛋白在口腔鳞癌临床Ⅰ、Ⅱ期的过表达明显低于Ⅲ、Ⅳ期(P＜0.05) ；p73蛋白过表达与淋巴结转移有关(P＜0.05) ；p73蛋白与p53蛋白,p63蛋白与p53蛋白之间存在着正相关(r= 0.368,0.342,P＜0.05)。结论　在口腔鳞癌的发生发展过程中，p73，p63和p53的过表达三者可能单独或共同参与。p73和p63之间的交互作用，在口腔鳞癌的发生过程中起重要作用。     

淋巴组织肿瘤中p53、p73基因改变和表达及其意义

目的：探讨淋巴组织肿瘤中p53、p73基因改变和异常表达情况及其意义.方法：采用PCR-SCP法、RT-CR法、REP法、免疫组化法分别检测26例急性淋巴细胞白血病（ALL）、12例多发性骨髓瘤（MM）及12例淋巴瘤（MLs）标本中p53、p73基因改变及异常表达情况.结果：（1）26例ALL中仅有3例检测到p53基因点突变,12例MM标本中2例p53基因突变.未发现p73基因突变;（2）p73mRNA在淋巴组织肿瘤中总的阴性表达率为24%;（3）10例ALL和3例NHL在p73基因外显子1启动子区的CpG岛高甲基化,而正常对照组和12例MM标本均无甲基化存在;（4）对照组p53蛋白均为阴性.26例ALL中,p53蛋白阳性者20例;7例中高度恶性NHL中6例p53蛋白阳性.结论： p53基因在淋巴组织肿瘤中的突变率较低;MLs中p53蛋白表达和恶性程度、临床分期相关;p73mRNA在ALL/NHL中存在较高的阴性表达,,而在MM为阳性表达;p73基因转录失活与p73基因外显子1CpG岛高甲基化有关,不存在基因的突变和缺失;p73基因异常可能在MM的发生、发展中不是一个重要的分子事件.     

p53、p73蛋白在甲状腺乳头状癌中表达的意义

目的:探讨甲状腺乳头状癌(PTC)中p53、p73蛋白的表达情况及其临床意义。方法:选取100例PTC病理标本和31例良性甲状腺病变病理标本,应用免疫组化SP法检测两者中p53和p73蛋白的表达情况,并分析p53、p73蛋白与临床病理特征间的关系及其相互关系。结果:PTC组织中p53的阳性表达率为72.0%,p73的阳性表达率为67.0%,较良性甲状腺病变组织(均为12.9%)中的阳性表达率高,差异均有统计学意义(P均<0.01)。p53在TNM分期Ⅰ和Ⅱ期患者中的表达率较Ⅲ和Ⅳ期患者低(P<0.05)。结论:PTC组织中p53、p73的高表达与肿瘤的发生、发展有一定相关性,可作为PTC发生、发展的客观指标。     

利用组织芯片技术观察p53及其同系物p63在恶性肿瘤中的表达

目的探讨p53和p63在部分肿瘤发生中的作用,为其人群大规模筛查、早期诊断及预后评估提供依据。方法选取病理科档案材料中食管鳞癌、胃腺癌、大肠腺癌、膀胱移行细胞癌、肺癌、肝细胞性癌、乳腺浸润导管癌、肾透明细胞癌、卵巢腺样囊腺癌和胰腺癌石蜡包埋组织各6例及相应正常组织各3例。肿瘤标本先观察苏木精-伊红(HE)切片以确定肿瘤部位,采用组织芯片仪及手工法制作180点列阵组织芯片,进行p53和p63抗体免疫组化染色。光镜观察p53、p63阳性细胞在各组的分布,并进行对比分析。结果p53表达类型:(1)正常组织p53阳性细胞数很少;(2)3例食管癌、3例胃癌、2例大肠癌、1例肺癌、1例乳腺癌、2例卵巢癌的绝大多数肿瘤细胞呈强阳性核染色反应,癌旁组织细胞和间质细胞阴性,1例膀胱癌中有少量阳性肿瘤细胞散在分布于阴性肿瘤细胞中。p63表达类型:(1)正常食道复层扁平上皮基底层细胞呈核染色,p63阳性细胞散在分布于棘细胞层;(2)6例食道癌、6例膀胱癌和4例肺鳞癌均为强阳性反应,大多数肿瘤细胞呈强核染色,癌旁组织细胞和间质细胞p63阴性;两例肺腺癌p63阴性;(3)6例胃癌中的4例、6例大肠癌中的3例、6例乳腺浸润导管癌中的2例、6例肝细胞性癌中的1例可见较强的肿瘤细胞胞质染色。其中3例食管癌、3例胃癌、1例大肠癌、1例肺     

p27、p53蛋白在口腔鳞癌中的表达和意义

目的 探讨口腔鳞癌中p27与p53基因表达特征和临床病理意义。方法 对38例口腔鳞癌组织采用免疫组化方法检测p27及p53蛋白表达。结果 38例口腔鳞癌中印蛋白阳性表达22例，阳性率57．9％，p53阳性表达21例，阳性率55．3％。p27在鳞癌Ⅰ级中阳性表达17例（68．0％），Ⅱ级中阳性2例（40．0％），Ⅲ-Ⅳ级中阳性3例（37．5％）。p53在鳞癌Ⅰ级病例中阳性10例（40．0％），Ⅱ级中1例（20．0％），Ⅲ，Ⅳ级中7例（87．5％）。结论 p27蛋白阳性表达率随病理恶性程度增高而降低，但无统计学意义。p53蛋白阳性表达率随病理恶性程度升高而增高，提示D53基因与口腔鳞癌细胞分化有相关性。p27和p53表达在鳞癌中呈负相关。     

子宫内膜腺癌的p21ras,p53的表达及意义

应用免疫组化LSAB法对33例原发性子宫内膜腺癌进行p21ras、p53的检测，结果显示子宫内膜腺癌p21ras表达为51．5％，p53表达为78．8％，p21ras和p53在正常子宫内股无表达，说明p21ras和p53在子宫内膜腺癌的表达较特异。本研究显示p53与子宫内膜腺癌的病理分级有关（P＜0．05），p21ras与转移及临床分期有关（P＜0．05）。在子宫内膜腺癌中，p53的表达与p21ras的表达之间呈显著相关（P＜0．01）。另外发现随着肿瘤分化越差p21ras、p53阳性率增加。本研究提示子宫内膜腺癌的发生、发展，与p21ras、p53有关，p21ras、p53可作为诊断子宫内膜腺癌的参考指标。