HCV早期感染者病毒载量与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T淋巴细胞相关性研究

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)早期感染者(抗原阳性、抗体阴性)的HCV病毒载量与CD4+CD25+叉头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3+)调节性T淋巴细胞水平的相关性,分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞在HCV感染中的作用。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ RT-PCR)技术检测22例HCV核心抗原阳性、抗体阴性(即HCV Ag阳性、抗-HCV阴性)的早期感染病例、26例核心抗原阳性、抗体阳性(即HCV Ag阳性、抗-HCV阳性)的慢性HCV感染病例,24例核心抗原阴性、抗体阳性(即HCV Ag阴性、抗-HCV阳性)的既往HCV感染病例及22例健康对照组HCV RNA病毒载量;并用流式细胞技术检测各组外周血有核细胞中的CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平。结果 HCV Ag阳性、抗-HCV阴性组,HCV Ag阳性、抗-HCV阳性组,HCV Ag阴性、抗-HCV阳性组及健康对照组CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞逐级下降,其中抗原阳性、抗体阴性组[(4.86±2.14)%]高于其他组[分别为(3.74±1.67)%、(2.74±1.27)%、(2.56±1.18)%],差异有统计学意义(t值分别为2.023、4.125、4.402,P0.05);HCV Ag阳性、抗-HCV阴性组CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞与HCV RNA病毒载量的对数(copy/mL,Ig)呈正相关(r=0.535,P0.05)。结论 HCV早期感染者CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平与高病毒调定点相关,CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平可能是加速HCV早期感染的影响因素之一。     

探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞在HCV早期感染的作用

目的研究HCV抗原阳性抗体阴性的早期感染者体内的CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平及其与疾病进展相关性,观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞在HCV早期感染的作用。方法20例HCV抗原阳性抗体阴性的早期感染的病例,22例抗原阴性与抗体阳性HCV感染病例及25例抗原阳性与抗体阳性慢性HCV感染病例和21例健康人作对照组。应用流式细胞技术检测比较各组外周血中的有核细胞中的CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞;并同时检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST),分析与其的相关性。结果HCV感染病例的外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞表达率(百分率)较健康对照组高(t值分别为2.231,3.764;P均<0.05);抗原阳性抗体阴性组与抗原阳性抗体阳性组比较差异有统计学意义(t=2.180,P=0.035);抗原阴性抗体阳性组与健康对照组比较差异无统计学意义(t=0.437,P=0.665);抗原阳性抗体阴性组CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞表达率与肝脏炎症指标的ALT和AST有相关性(rALT=0.571,rAST=0.521,P<0.05)。结论CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平及其与疾病进展有重要相关性,可能是早期感染HCV并加速其慢性化的其中重要影响因素之一。     

强化阿托伐他汀对急性冠状动脉综合征行介入治疗患者内皮细胞微粒和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的影响

目的 探讨强化剂量阿托伐他汀治疗对急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)行经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗患者外周血内皮细胞微粒(endothelial microparticles,EMP)水平和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及细胞因子水平的影响。方法 行PCI治疗的ACS患者104例,根据治疗方法分为阿托伐他汀强化治疗组(强化组)和阿托伐他汀常规治疗组(常规组)各52例。常规组PCI术前、术后均口服阿托伐他汀20mg/d,强化组PCI术前口服阿托伐他汀80mg/d,术后40mg/d。分别于术前、术后1周检测2组外周血EMPs水平、CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达水平,分析EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平的相关性。结果 强化组和常规组术后CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率[(4.62±0.51)%、(3.85±0.60)%]、Foxp3 mRNA[(224.2±10.9)%、(173.7±11.6)%]和TGF-β1[(305.2±33.9)、(214.6±36.1)ng/L]均高于术前[(3.19±0.55)%、(3.25±0.49)%,(99.9±8.2)%、(101.2±9.4)%,(159.8±32.8)ng/L、(167.3±38.2)ng/L],EMPs水平[(1 062.2±336.8)个/μL、(1 387.8±353.6)个/μL]低于术前[(1 661.9±346.5)个/μL、(1 647.4±368.2)个/μL](P0.01),且强化组较常规组变化更明显,差异有统计学意义(P0.01);EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平均呈负相关(r=-0.526,P=-0.000;r=-0.487,P=-0.001;r=-0.581,P=0.000)。结论 强化剂量阿托伐他汀治疗可能通过下调EMPs水平,从而上调CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞和TGF-β1水平,进而减轻炎症反应,稳定斑块。     

CD127用于特异性识别调节性T淋巴细胞的方法建立及临床应用评价

目的 建立用膜表面标志CD4+ CD25high CD-/low127界定调节性T淋巴细胞的方法,并评价其临床应用意义.方法 五色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD127-PE/CD4-PerCP/CD25-APC/CD3-PC7抗体组合鉴定调节性T淋巴细胞,分选CD4+CD25highCD-/low127细胞鉴定Foxp3 mRNA和蛋白水平的表达情况,比较CD-/low127与Foxp3+界定调节性T淋巴细胞的相关性.用该膜表面标志分析20名健康对照者外周血及35例胃癌患者不同部位CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)细胞的分布特点及意义.结果 用CD4+CD25highCD-/low127界定调节性T淋巴细胞的Foxp3蛋白表达率为87.1%,Foxp3 mRNA高表达.用膜表面抗原CD4+CD25highCD-/low127界定调节性T淋巴细胞与CD4+CD25highFoxp3+具有相关性(r=0.985,P＜0.01).胃癌患者外周血CD25highCD-/low127调节性T淋巴细胞占CD4+T淋巴细胞的比例为(8.67 ±3.52)%,高于健康对照组[(5.12±2.46)%,t=2.542,P＜0.05].胃癌患者腹腔积液、肿瘤浸润性淋巴细胞、癌旁淋巴结中CD4+CD25highCD-/low127调节性T淋巴细胞占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血(分别为t=2.357,P＜0.05;t=6.174,P＜0.01;t=5.481,P＜0.01).胃癌Ⅰ期+Ⅱ期患者外周血CD25high CD-/low127Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的比例为(6.04±2.31)%,Ⅲ期+Ⅳ期患者为(10.16±2.29)%,其分期差异具有显著统计学意义(t=2.473,P＜0.05).结论 CD4+CD25highCD-/low127抗体组合可用于鉴定调节性T淋巴细胞.胃癌患者CD4+CD25highCD-/low127调节性T淋巴细胞的比例升高,且增高程度与肿瘤临床分期相关.     

紫癜性肾炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的临床意义

目的 研究紫癜性肾炎(HSPN)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量、相关细胞因子的水平及Foxp3的表达,探讨它们在HSPN发病机制中的作用.方法 分别采集40例HSPN患儿及20例健康儿童外周静脉血,通过流式细胞仪分析CD4+CD25+调节性T细胞百分率,ELISA测定血浆IL-10和TGF-β1水平,荧光定量PCR(Real-time PCR)检测T细胞Foxp3mRNA的表达.结果 HSPN患儿外周血CD4+T,CD25+T,CD4+CD25+T/CD4+T均低于对照组(P<0.05);T细胞Foxp3mRNA的表达明显降低,血浆IL-10水平也明显低于对照组(P<0.05),血浆TGF-β1水平较对照组明显升高(P<0.01);CD4+CD25+调节性T细胞百分率随HSPN病理分级加重有降低趋势,二者呈负相关(r＝-0.966,P<0.01).结论 HSPN患儿外周血存在细胞免疫功能失调,CD4+CD25+调节性T细胞数量减少或功能异常,导致免疫抑制效应不足,参与并促进了儿童HSPN的发生发展,其外周血水平与HSPN病理分级有相关性.     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞增龄性变化及其与老年肺癌的关系

目的探讨CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的增龄性变化及其与老年肺癌发生、发展的关系。方法肺癌患者70例和体检健康者60例,分别按年龄(青年18~45岁、中年45~60岁、老年60岁)分为青年肺癌组21例、中年肺癌组25例、老年肺癌组24例和青年健康组20例、中年健康组20例、老年健康组20例。采用流式细胞分析法测定各组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T细胞的百分率,采用实时荧光定量PCR法测定功能基因Foxp3 mRNA的相对表达量;分析肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞百分率与临床特征的关系。结果老年肺癌组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(11.81±2.40)%]及Foxp3 mRNA相对表达量(3.14±1.30)高于中年肺癌组[(11.25±1.84)%、2.53±1.16]和青年肺癌组[(9.05±2.14)%、2.28±1.21],中年肺癌组高于青年肺癌组(P0.05);老年健康组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(9.82±1.19)%]及Foxp3mRNA相对表达量(2.67±0.99)高于中年健康组[(7.81±1.16)%、1.76±0.80]和青年健康组[(6.23±0.91)%、1.17±0.51],中年健康组高于青年健康组(P0.05);相同年龄段,各肺癌组中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量均明显高于各健康组(P0.05);肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率在肺癌分期、有无淋巴结转移上差异有统计学意义(F=28.660,P=0.002;t=21.084,P0.001),在不同性别、病理类型上差异无统计学意义(t=2.330,P=0.120;F=0.020,P=0.980)。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的增龄性变化可能是导致老年肺癌发生、发展的原因之一。     

特发性血小板减少性紫癜患者调节性T细胞及Foxp3基因的检测

目的 研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量及Foxp3基因的表达水平,探讨它们在ITP发病机制中的作用.方法 分别收集30例ITP患者及健康对照组外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞.PE标记的抗CD4单抗,FITC标记的抗CD25单抗,作双色流式细胞术,分析ITP患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率,RT-PCR检测T细胞Foxp3 mRNA表达水平.结果 ITP者外周血CD4+T、CD4+CD25+T细胞百分率及T细胞Foxp3 mRNA水平均低于对照组(P﹤0.01),并且CD4+CD25+T细胞百分率与Foxp3mRNA水平呈正相关.结论 ITP患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD4+CD25+调节性T细胞数量与功能状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与ITP的发病机制有关.     

大鼠CD4+CD25-T细胞的Foxp3基因转染及其表达

背景:调节性T细胞在维持机体免疫应答稳态和免疫耐受方面具有非常重要的作用,但外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量极低,且增殖能力较差.目的:以携带Foxp3基因的慢病毒EGFP+载体转染大鼠CD4+CD25- T细胞,观察其在大鼠CD4+CD25- T细胞中的表达.方法:以免疫磁珠两步法分选大鼠CD4+CD25- T细胞,用携带大鼠Foxp3基因的慢病毒载体体外转染分选的细胞,以转染Foxp3基因的CD4+CD25- T细胞为实验组,EGFP空白质粒组及CD4+CD25- T细胞为阴性对照组,CD4+CD25+ T细胞为阳性对照组.荧光显微镜和RT-PCR分别从蛋白和mRNA水平检测Foxp3基因的表达.结果与结论:成功完成了免疫磁珠的分选,获得了纯度较高的CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+ T细胞,细胞存活率为(94±2)%,慢病毒转染的CD4+CD25- T细胞高表达Foxp3基因.表明以携带Foxp3基因的慢病毒载体系统可有效介导Foxp3基因在大鼠CD4+CD25- T细胞中高表达.     

抚州市HIV感染者/艾滋病人CD4~+T淋巴细胞数及病毒载量结果研究

目的了解抚州市HIV感染者/艾滋病人(HIV/AIDS)的HIV感染进程及抗病毒治疗效果,探讨CD4~+T淋巴细胞数与病毒载量的相关性。方法用流式细胞分析系统和RT-PCR法,对抚州市2016年的314例既往及新发现的HIV/AIDS病例血液标本进行CD4~+T淋巴细胞及病毒载量检测。结果 CD4~+T淋巴细胞数﹤200个/μl,占21.66%,200~500个/μl,占53.82%,500个/μl,占24.52%;新发现的HIV/AIDS病例首次CD4~+T淋巴细胞计数结果 200个/μl占22.58%;病毒载量103copy/ml的治疗病人占83.22%,未治疗病人占27.40%,两者有显著差异(χ~2=65.64,P0.001);未治疗病人的CD4~+T淋巴细胞数与病毒载量对数呈负相关(R=-0.79,P0.001)。结论我市HIV/AIDS病例发现较晚,但抗病毒治疗效果较好。不能及时检测病毒载量的未治疗HIV/AIDS,可参考CD4~+T淋巴细胞数判断病程进展情况,选择合适的抗病毒治疗时机;治疗病人疗效观察病毒载量结果更具参考价值。     

宫颈癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞与白细胞介素-17水平及其相关性研究

目的探讨外周血CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞(Tr细胞)和白细胞介素-17(IL-17)水平在宫颈癌患者中的变化及其相关性。方法选取2014年1月至2015年3月该院确诊宫颈癌患者60例(宫颈癌组)和查体的健康女性60例(健康对照组),采用流式细胞仪检测外周血Tr细胞数量及占CD4~+细胞百分比,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-17水平。结果宫颈癌组外周血Foxp3~+Tr、Tr、CD4~+T淋巴细胞百分比,Foxp3~+Tr/Tr、Tr/CD4~+T淋巴细胞比值及血清IL-17水平均较健康对照组明显升高,而IL-17/Tr比值明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。宫颈癌组患者外周血CD4~+CD25~+Tr细胞水平与血清IL-17水平呈正相关(r=0.768,P0.05)。结论宫颈癌患者存在细胞免疫功能紊乱,IL-17与Tr细胞比值失衡可能在宫颈癌发病机制中起一定的作用。     

CD4+CD25+调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化

目的探讨CD4^＋CD25^＋T细胞在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者发病机制中的作用。方法应用流式细胞术检测ITP患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞、CD4^＋CD25^highT细胞、CD4^＋FOXP3^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞的数量；实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3 mRNA的表达水平。将ITP患者和正常人CD4^＋CD25^highT细胞与自身CD4^＋CD25^-T细胞混合培养，检测CD4^＋CD25^high T细胞免疫抑制功能。结果ITP患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞约占CD4^＋T细胞的（15．64±5．82）％，明显高于正常对照组（9．30±3．95）％（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞比例为（1．53±0．66）％，与对照组[（1．36±0．55）％]比较差异无统计学意义（P〉0．05）；CD4^＋FOXP3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞分别为（1．82±1．42）％和（1．25±0．94）％，均明显低于对照组[（3．90±1．37）％和（2．65±0．92）％]（P值均〈0．01）。ITP患者外周血FOXP3 mRNA表达水平较正常人明显下调（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞的抑制活性较正常人减弱（P〈0．01）。结论ITP患者中CD4^＋CD25^＋T细胞FOXP3表达水平降低，抑制活性减弱。     

载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3GmRNA表达水平与HIV/AIDS患者疾病进展的相关性研究

目的 探讨河南省46例HIV/AIDS患者外周血单个核细胞载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)mRNA表达水平与艾滋病疾病进展的相关性.方法 采用实时定量PCR方法检测HIV感染不同疾病进展期患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA表达水平;采用流式细胞仪进行CD4+T淋巴细胞的绝对和相对计数;采用全自动载量仪检测血浆HIV病毒载量.结果 河南省46例HIV/AIDS患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA水平明显低于健康对照(t=4.887,P<0.01),缓慢进展组APOBEC3G mRNA水平显著高于HIV组和AIDS组(P<0.05).HIV/AIDS患者APOBEC3G mRNA表达水平与CD4+T淋巴细胞数呈正相关(R2=0.190,P=0.002),与病毒载量呈负相关(R2=0.094,P=0.038).结论河南省HIV/AIDS患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA表达水平与HIV感染疾病进程密切相关,APOBEC3G高表达可能是延缓疾病进程的保护性因素之一.     

脓毒症患者自然调节性T细胞及可溶性CD25水平研究

目的 通过前瞻性研究探讨脓毒症患者外周血自然调节性T细胞(Treg)百分比和血浆可溶性CD25分子(IL-2sRa)水平的变化及其临床价值.方法 将2009年2月至2010年2月上海交通大学附属瑞金医院重症医学科所收治的符合ACCP/SCCM于1997年提出的SIRS与脓毒症诊断标准的37例脓毒症患者与15例非感染SIRS患者,以及上海交通大学附属瑞金医院体检中心24例排除感染及免疫系统基础疾病患者,根据诊断标准分为脓毒症组、非感染SIRS组与正常对照组.其中脓毒症组男性26例,女性11例,年龄(61.67±11.87)岁;非感染SIRS组男性8例,女性7例,年龄(67.06±12.57)岁;正常对照组男14例,女10例,年龄(56.54±6.37)岁.脓毒症组肺部感染28例,腹腔感染6例,其他4例;非感染SIRS组为择期清洁手术后24 h内无感染征象者.所有入选对象均排除免疫系统基础疾病和(或)近期(30 d内)曾使用或正在使用强效免疫抑制剂患者.流式细胞分析术检测三组外周血Treg细胞百分比,ELISA检测血浆IL-2sRa,IL-4,IFN-γ水平.所得数据采用方差分析及非参数检验的Kruskal-Wallis H方法.结果 ①Treg细胞在脓毒症组、SIRS组和正常对照组占外周血CD4+CD25+T细胞的比例分别为:(66.82±21.79)%,(51.79±21.79)%、(56.45±10.68)%,脓毒症组Treg细胞显著高于SIRS组和正常对照组(P=0.001).②与SIRS组(381.664±189.83)和对照组(164.132±56.37)相比,脓毒症组可溶性CD25分子(IL-2sRa)水平(425.619±270.12)显著增高(P=0.000).③IL-2sRa浓度与Treg细胞占CD4+CD25+T细胞的比例相关分析示:Spearman相关系数=0.390,P=0.003(P＜0.05),两者存在正相关关系.结论 Treg细胞在脓毒症患者外周血的表达水平特征性增高.而外周血IL-2sRa水平可以反映Treg细胞表达水平,也有助于简化判断脓毒症的免疫状态的方法.

Abstract：

Objective To explore the CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cell percentage and plasma levels of soluble CD25 molecules in peripheral blood of septic patients and their clinical value through prospective study. Method A total of 37 septic patients and 15 non-infectious SIRS patients, who conformed to the criteria of SIRS and sepsis which proposed by American College of Chest Physicians/Society of Critical Care Medicine Consensus Conference ( ACCP/SCCM ) in 1997, were collected in ICU of Ruijin Hospital ( Shanghai Jiaotong University) from February 2009 to February 2010. Twenty-four health people were from Medical Center of Ruijin Hospital, who were excluded infection and (or) autoimmune diseases. There were 26 male and 11 female in sepsis group, average age ( 61.67 ± 11.87 ) years old; 8 male and 7 female in SIRS group, average age (67.06 ± 12.57)years old; 14 male and 10 female in health control, average age (56.54 ± 6.37 )years old. All selected patrents were excluded the autoimmune diseases and (or) patients within recent (30 days) had used or now used immunosuppressive agents. We therefore measured the Treg cell percentage in peripheral blood by Flow Cytometry and the plasma levels of IL-2sRa, IL-4, IFN-γ by ELISA. The data were analyzed by analysis of variance or nonparametric Kruskal-Wallis H test. Results ① The percentage of CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cells among septic patients, SIRS patients, and control group was: ( 66.82 ± 21.79 ) %, ( 51.79 ± 21.79 ) %, ( 56.45 ± 10. 68 ) %, respectively. septic patients showed the highest percentages of CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cell among CD4 + CD25 + T cells(P ＜ 0.05 ). ② The plasma levels of soluble CD25 in septic patients (425. 619 ± 270.12 ) were significantly higher than SIRS patients (381. 664 ± 189.83) and the control group ( 164. 1 32 ± 56.37 ) ( P ＜ 0.05 ). ③ The correlation analysis between the concentration of soluble CD25 molecules in plasma and the ratio of CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cells to CD4 + CD25 + T cells showed Spearman correlation coefficient =0.390, P = 0.003 ( P ＜ 0.05 ). Conclusion: the expression of natural regulatory T cells characteristically increased in septic patients. And the levels of soluble CD25 in peripheral blood were related to the percentages of natural regulatory T cells, which simplified the assessment of the immune status in Septic patients.     

Conversion of CD4+ CD25- cells into CD4+ CD25+ regulatory T cells in vivo requires B7 costimulation, but not the thymus

The CD4+ CD25+ regulatory T cells play a critical role in controlling autoimmunity, but little is known about their development and maintenance. In this study, we investigated whether CD4+ CD25- cells can convert to CD4+ CD25+ regulatory T cells in vivo under natural conditions. CD4+ CD25- cells from CD45.1+ mice were sorted and transferred into congenic CD45.2+ mice. Converted CD4+ CD25+ cells could be detected in lymphoid organs as early as 1 wk after transfer and by 6 wk after transfer, 5-12% of transferred CD4+ cells expressed CD25. Converted CD4+ CD25+ cells themselves failed to proliferate after stimulation, but could suppress proliferation of responder cells in vitro, and also expressed high levels of Foxp3 mRNA. In addition, CD4+ CD25- cells transferred into thymectomized congenic mice converted to CD4+ CD25+ cells that also suppressed responder cell proliferation in vitro, and expressed high levels of Foxp3 mRNA. Finally, CD4+ CD25- cells transferred into B7-/- mice failed to convert into CD4+ CD25+ cells that exhibit the regulatory phenotype. These data indicate that CD4+ CD25- cells convert into CD4+ CD25+ regulatory T cells spontaneously in vivo and suggest that this conversion process could contribute significantly to the maintenance of the peripheral CD4+ CD25+ regulatory T cell population.     

HIV/AIDS患者B7-H1的表达特点及与疾病进展关系研究

目的 研究HIV/AIDS患者外周血mDC及不同亚群T淋巴细胞B7-H1及PD-1的表达水平,分析其与疾病进展的相关性,探讨B7-H1及PD-1信号通路在HIV感染中的作用.方法 采集中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所红丝带门诊36例未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者(无症状HIV组、AIDS组)及20名健康对照组...     

Human CD4+ CD25hi Foxp3+ regulatory T cells are derived by rapid turnover of memory populations in vivo

While memory T cells are maintained by continuous turnover, it is not clear how human regulatory CD4+ CD45RO+ CD25hi Foxp3+ T lymphocyte populations persist throughout life. We therefore used deuterium labeling of cycling cells in vivo to determine whether these cells could be replenished by proliferation. We found that CD4+ CD45RO+ Foxp3+ CD25hi T lymphocytes were highly proliferative, with a doubling time of 8 days, compared with memory CD4+ CD45RO+ Foxp3- CD25- (24 days) or naive CD4+ CD45RA+ Foxp3- CD25- populations (199 days). However, the regulatory population was susceptible to apoptosis and had critically short telomeres and low telomerase activity. It was therefore unlikely to be self regenerating. These data are consistent with continuous production from another population source. We found extremely close TCR clonal homology between regulatory and memory CD4+ T cells. Furthermore, antigen-related expansions within certain TCR Vbeta families were associated with parallel numerical increases of CD4+ CD45RO+ CD25hi Foxp3+ Tregs with the same Vbeta usage. It is therefore unlikely that all human CD4+ CD25+ Foxp3+ Tregs are generated as a separate functional lineage in the thymus. Instead, our data suggest that a proportion of this regulatory population is generated from rapidly dividing, highly differentiated memory CD4+ T cells; this has considerable implications for the therapeutic manipulation of these cells in vivo.     

新疆100例HIV／AIDS患者机体细胞免疫与合并机会性感染关系的研究

目的探讨人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者和艾滋病（AIDS）患者机体细胞免疫与合并机会性感染的关系。方法总结新疆100例HIV／AIDS患者临床资料,分析CD3^＋、CD4^、CD8^＋细胞水平,及CD4^＋细胞数与发生机会性感染的关系。结果HIV／AIDS患者合并机会感染CD3^＋、CD4^＋细胞数明显低于未合并机会感染组且差异均具有统计学意义（t=-2．073,t=-4．087,P〈0．05）,CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋比值则差异无统计学意义（P〉0．05）。CD3^＋细胞数与CD4^＋细胞数的变化呈正相关（r=0．481,P〈0．05）,与CD8^＋细胞数的变化呈高度正相关（r=0．954,P〈0．05）。CD4^＋细胞含量〈200个／μl时,发生机会性感染高于CD4^＋细胞含量为200—500个／μl时,且差异有统计学意义（r=17．272,P〈0．05）。在CD4^＋细胞含量〈200个μl的HIV／AIDS患者中以PCP的合并感染为最高27．27％,其次弓形虫和结核（22．73％,13．64％）。结论HIV／AIDS患者并发机会性感染与免疫抑制程度有关,CD4^＋的水平是目前监测机会性感染的重要参考依据,不同地区机会性感染疾病谱略有不同,临床可采取相应的预防性治疗措施。     

骨髓增生异常综合征患者CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞特点及环孢素对其的影响

目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastie syndrome,MDS)-难治性贫血(refractory anemia,RA)及难治性血细胞减少伴有多系发育异常(refractory cytopenia with multiple dysplasia,RCMD)患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与白细胞介素(interleukin,IL)-10表达水平,评估环孢素对MDS患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的影响。方法选择2016年1月至2018年1月于新疆维吾尔自治区人民医院25例MDS-RA及RCMD患者(MDS组)和13名健康对照(健康对照组),采用流式细胞术及酶联免疫吸附试验检测外周血标本CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10表达水平,检测MDS-RA及RCMD患者在应用以环孢素为基础的免疫抑制方案治疗前、治疗6个月后及MDS组治疗有效及无效的CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10的表达情况。结果全部25例患者中,13例(52%)有效,12例(48%)无效。MDS组CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T细胞比例显著高于健康对照组[(0.37±0.10)%与(0.12±0.06)%,t=2.02,P<0.001]。MDS组IL-10水平显著高于健康对照组[(7.16±1.27)μg/L与(2.75±1.06)μg/L,t=2.03,P<0.001]。MDS治疗有效组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例低于无效组[(0.15±0.06)%与(0.26±0.08)%,t=1.71,P<0.001],有效组IL-10水平低于无效组[(3.22±1.01)μg/L与(4.25±1.22)μg/L,t=2.06,P=0.030]。25例MDS患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg比例与IL-10表达水平呈正相关关系(r=0.35,P=0.02)。结论MDS患者存在CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与IL-10的表达升高,环孢素治疗后降低。