高效液相紫外法测定胰腺炎患者血浆中维生素C浓度

目的建立一种反相高效液相紫外检测法来测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度。方法将胰腺炎患者血浆样本经预处理后用反相高效液相色谱（HPLC）仪进行浓度测定。色谱条件为KromasilC18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇和5％偏磷酸（15：85）,pH=4．0,检测波长为245nm,流速为1．0mL／min。柱温39℃。结果在上述色谱条件下,血浆中的VC得到良好分离,线性范围2．5～500μg/mL,日内差异和日间差异分别为0．22％和0．97％;回收率为98．64％。测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度平均测定值为11．31μg／mL,明显低于健康人测定值23．67μg／mL。结论该方法能更简单、快速、准确、灵敏测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度。     

LHPC—MS／MS法测定人体血浆中丙泊酚浓度的评价

【目的】建立人血浆中丙泊酚浓度的高效液相色谱串联质谱法（HPLC—MS／MS）测定方法,以评价其效果。【方法】采用LC—MS／MS法测定丙泊酚的浓度,色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18（50mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇及0．1％氨水溶液;流速0．4mL／min;电喷雾离子化电离源（ESI）,质谱采用MRM模式,以负离子检测,检测离子为丙泊酚m／z177．2→m／z161．4、麝香草酚m／Z147．2→m／z106．7。20名健康志愿者静脉注射丙泊酚2mg／kg后,按预定时间点抽取动脉血进行血浆药物浓度的检测。【结果】丙泊酚血药浓度在线性范围分别为0．012～12．06μg／mI。范围内线性关系良好（r=0．9993）,定量下限为0．012μg／mL;低、中、高3个浓度的日内及日间相对精密度（RSD）〈15％;平均提取回收率86．7％,RSDl．87％。【结论】本方法特异性强、灵敏、高效、精密度及准确度好,适用于人体血浆中丙泊酚的检测。     

HPLC—UV法用于人血浆中罗红霉素的浓度测定及药代动力学和生物等效性研究

目的建立HPLC-UV法测定人血浆中罗红霉素的方法,并探讨罗红霉素的药代动力学和生物等效性。方法采用Diamonsil C18柱（150mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈：0．01mool磷酸二氢铵=39：61（v／v）,流速1mL／min;以卡马西平为内标,检测波长为210nm。血浆样品用正己烷（含5％的异丙醇）液-液萃取后经C18分离。结果罗红霉素在0．25～16．0mg／L线性关系良好,r=0．999,最低检测限为0．25mg／L。萃取回收率〉70％,方法回收率99．8％～110．5％,批内、批间精密度均〈15％。结论HPLC—UV方法结果准确、灵敏度高,适用于罗红霉素药代动力学和生物等效性研究。     

愈美缓释片中愈创木酚甘油醚、氢溴酸右美沙芬含量运用HPLC测定分析报告．

目的分析高效液相色谱法（HPLC）测定愈美缓释片中愈创木酚甘油醚和氢溴酸右美沙芬含量的特点。方法高效液相色谱法c18柱固定相,流动相：磷酸三乙胺溶液（3mL三乙胺加入1,000mL蒸馏水中,以磷酸调pH=3．0）：（乙腈：甲醇;4：3）=60：40;双波长检测：0-6min时246nm,6mini,2后218nm。结果愈创木酚甘油醚和氢溴酸右美沙芬线性范厨分别为0．1996-1．1976mg／mL、0．015024-0．09014mg／mL;回收率分别为99．7％、100．9％;RSD分别为1．5％、1．4％。结论临床实践中HPLC可以简单、快速、准确分析愈美缓释片中主要成分含量。     

高效液相色谱法测量患儿血清甲氨蝶呤浓度

目的：建立测定患儿血清中甲氨蝶呤浓度的方法,用于临床患儿血药浓度监测。方法色谱柱采用岛津原装柱（250 mm×4．6 mm,5μm）,流动相为0．025 mol/L 磷酸二氢钠溶液（pH 为5．41）-甲醇（76∶24,V/V）,流速1．0 mL/min,检测波长313 nm,柱温35℃,样品经10％高氯酸沉淀蛋白后,取上清液130μL 加10μL 1 mol/L NaOH 后直接进样。结果血浆中甲氨蝶呤的浓度在0．00～4．84μmol/L 和4．84～10．00μmol/L 范围内与峰面积线性关系良好,r 1＝1,r2＝1,平均回收率分别为61．67％和71．83％,日内及日间精密度的 RSD 小于10％和12％（n＝3）。结论所用方法简便快速、准确可靠、灵敏度高、重现性好、线性范围宽和成本低,适于甲氨蝶呤的血药浓度监测。     

RP-HPLC法同时测定人血清咪哒唑仑、阿普唑仑与氯硝安定药物浓度

【目的】建立一高效液相色谱法同时测定人血清中咪哒唑仑（MZ）、阿普唑仑（AZ）、氯硝安定（CZ）药物浓度,为临床用药及治疗提供依据。【方法】采用反相高效液相色谱法,色谱柱为依利特Kromasil C18柱（250mm×4．6mm,5μm）;柱温40℃;流动相为甲醇-水（65：35,v／v）,流速1．0mL／min;波长220nm。血液样品采用10％高氯酸沉淀蛋白后,直接进样20μL,测定,采用内标法定量。【结果】MDZ、AZ、CZ在0．025～10．00μg／mL浓度范围内线性关系好,相关系数分别为r=0．9994,0．9993,0．9991,最低检测限均为5．0ng／mL,三种物质的平均方法回收率均大于92．0％,相对标准偏差（RSD）〈4．1％。【结论】本法测定MZ、AZ、CZ的血药浓度方法简便、快速准确,可用于临床的常规监测。     

高效液相色谱法测定银杏总内酯注射液中银杏总内酯的含量

目的：采用HPLC法测定银杏总内酯注射液中总内酯的含量。方法：采用DikmaDiamosil型色谱柱（5gm，4．6×200mm），流动相为甲醇-水（35：65），流速为1．0mL／mim，示差折光检测器，柱温为30C。结果：白果内酯在0．206～2．060mg／mL（r=0．9998，n=5），银杏内酯C在0．056～0．560mg／mL（r=0．9996，n=5），银杏内酯A在0．150～1．500mg／mL（r=0．9994，n=5），银杏内酯B在0．102～1．020mg／mL范围内与峰面积积分值线性关系良好。结论：本方法测定结果准确，操作简便，灵敏度高，重复性好，可用于本品的质量控制。     

乙型肝炎病毒耐药基因变异位点与基因型及病毒载量的关系

目的：研究81例慢乙型肝炎患者乙型肝炎病毒（HBV）耐药基因位点变异状况及其基因型分布特征,并探讨其与HBV-DNA、乙型肝炎 E 抗原（HBeAg）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的关系。方法采用荧光定量PCR 和基因芯片反向斑点杂交技术检测81例慢乙型肝炎患者血清 HBV-DNA 载量、基因型和6种常见耐药位点;用电化学发光法检测 HBeAg 的含量,用酶法检测患者血清中 ALT、AST 的浓度。结果81例慢乙型肝炎患者中,HBV 基因型 B 型38例占46．9％;C 型38例占46．9％;B、C 混合型5例占6．2％;未发现其他基因型。检测出的43例耐药基因位点发生变异：B 基因型26例突变率为60．5％,C 基因型17例突变率为39．5％;其中 rt204V 变异率为9．3％;rt204I 变异率为34．9％;rt180M＋rt204I／rt204V 变异率为41．9％;rt181V 变异率为9．3％;rt236T 变异率为4．7％。在43例出现基因位点变异的患者中,发生 rt204I 变异的 B 基因型占60％,HBV-DNA（U／mL）的对数值为5．73±1．77;C 基因型占40％,HBV-DNA（U／mL）的对数值为6．93±2．12;发生 rt204V 变异的 B 基因型占75％,HBV-DNA（U／mL）的对数值为6．85±2．06;C 基因型占25％,HBV-DNA（U／mL）的对数值为4．17±1．15;发生 rt180M＋rt204I／rt204V 变异的 B 基因型占22．2％,HBV-DNA（U／mL）的对数值为5．89±1．95;C 基因型占77．8％,HBV-DNA（U／mL）的对数值为5．58±1．56;发生 rt181V 变异的全部为 C 基因型。结论HBV 发生变异的位点以rt204I 位点变异和 rt180M＋rt204I／rt204V 混合位点变异为主;在 HBV 发生变异的不同位点中 C 基因型更易发生 rt181V 位点和 rt180M＋rt204I／rt204V 混合位点变异,B 基因型可能更易发生 rt204V 位点和 rt204I 位点变异;在发生 rt204V 位点和 rt236T位点的突变中,HBV-DNA 的载量 B 基因型组明显高于 C 基因型组,在发生 rt204I 位点的突变中 HBV-DNA 的载量 C 基因型组则明显高于 B 基因型组,C 基因型较 B 基因型更易发生耐药位点变异。     

《中国血液净化》2009年第4期继续医学教育试题

1．以下有关血液透析充分性说法正确的是：A．对于每周3次粗液透析患者（残余肾功能〈2ml／min／1．73m^2）,每次透析最小充分spKt／V应为1．2,或URR：65％。B．对于每周3次血液透析患者（残余肾功能〈2ml／min／1．73m^2）,目标剂量应为spKt／V：1．4,或URR：70％。C．对于残余肾功能≥2ml／min／1．73m^2的患者,目标spKt／V应至少高于最小剂量15％。D．以上均正确。     

高效液相色谱——紫外、荧光双检测器同时测定人尿中犬尿氨酸和犬尿喹啉酸

目的建立高效液相色谱（HPLC）同时测定人尿中犬尿氨酸（KYN）和犬尿喹啉酸（KYNA）方法。用KYNA／KYN比值评价人体犬尿氨酸氨基转移酶（KAT）活性。方法采用HPLC测定KYN、KYNA,分析柱为安捷伦HCC18反相色谱柱;流动相为10mmol／L乙酸钠-乙酸缓冲液：7％乙腈=93：7;流速1mL／min;检测器波长：紫外365nm,荧光344nm（激发）／398nm（发射）。结果KYN和KYNA保留时间分别为6．9和11．5min。水溶液标准与标准加入工作曲线斜率差异无统计学意义（KYN：P=0．4068;KYNA：P=0．6462）。KYN和KYNA的平均回收率分别为98．74％±7．53％、95．17％±8．17％;稳定性试验的变异系数（CV）分别为3．35％和0．88％;精密度CV分别为2．73％和2．79％;最低检测限分别为0．4和0．2μmol／L。30份健康成年人尿样的KYNA／KYN比值为2．45±1．54。尿中KYNA与KYN含量呈正相关关系（r2=0．3758,P〈0．001）。结论测定方法灵敏、准确、稳定。KYNA／KYN比值评测KAT活性具有简便、实用等特点,可用于相关疾病的临床辅助诊断和基础研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中丙戊酸的浓度

目的建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定人血浆中丙戊酸的浓度。方法采用乙腈沉淀蛋白法处理人血浆样本,选用Shimpack VP-ODS色谱柱(150mm×2.0mm I.D,5μm),以甲醇:5mmol/L乙酸铵(55∶45,v/v)为流动相,流速为0.4mL/min,采用API3200型三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,电喷雾离子化源,负离子方式,选择监测离子反应分别为m/z 142.9→m/z 142.9(丙戊酸)和m/z 179.0→m/z 179.0(1-庚烷磺酸)。结果丙戊酸和内标1-庚烷磺酸的保留时间分别为3.03、2.38min;血浆中丙戊酸的线性范围为0.800~80.0μg/mL(r0.99),定量下限为0.800μg/mL;批内、批间精密度(RSD)均小于15%;准确度(RE)均在±15%的范围以内;平均提取回收率为(84.1±2.4)%;平均基质效应因子为(104.3±2.0)%。稳定性试验中,在各种贮存条件下的血浆中,丙戊酸均较稳定。结论该方法适用于人血浆中丙戊酸浓度的测定及丙戊酸半钠缓释片的人体药代动力学研究。     

生物检材中利血平的高效液相色谱／质谱和高效液相色谱的检测

目的：建立生物检材中利血平的高效液相色谱／质谱（HPLC／MS）和高效液相色谱（HPLC）的检测。方法：采用C18（200mm×4．6mm,5mL）色谱柱,乙腈：水（40：60）用盐酸调节pH值至3．00±0．05为流动相,检测波长258nm。结果：HPLc／Ms分析利血平的选择离子m／z为608,195。心血中利血平HPLC检测的回归方程、线性检测范围、相关系数、回收率、最低检出浓度,分别为Y=56．576X＋0．3168（μg／mL）,（0．5～48）μg／mL,0．995,（96．50土3．O）％,0．5μg／mL;肝组织中利血平HPI。C检测的回归方程、线性检测范围、相关系数、回收率、最低检出浓度,分别为Y=38．567X＋0．054（μg／g）,（o．5～48）μg／g,0．984,（97．5±2．5）％,0．5μg／g。染毒大鼠心血、心、肝、脾、肺、肾和脑中利血平的含量依次为：（316．39±6．43）,（284．96±3．03）,（353．82±7．73）,（185．74±4．07）,（221．64±1．38）,（215．94±2．87）,（170．15±7．05）μg／g。结论：生物检材中HPLC／MS检测方法选择性好,定性准确,HPLC检测简便,快速,灵敏,定量结果准确,可用于利血平中毒的临床快速检验诊断和利血平中毒死亡案件的法医学鉴定。     

反相高效液相色谱法测定壳聚糖纳米粒中丙酮酸乙酯的含量简

背景：有关丙酮酸乙酯含量检测方法的研究较少,采用反相高效液相色谱法检测丙酮酸乙酯含量的文献更少。目的：建立测定壳聚糖纳米粒中丙酮酸乙酯含量的反相高效液相色谱法。 方法：采用Agilent1200系列高效液相色谱仪检测丙酮酸乙酯-壳聚糖纳米粒中丙酮酸乙酯的含量。色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6 mm×150 mm,5μm）,柱温25℃,流动相为乙腈-水（体积比为40∶60）,流速1 mL/min,检测波长210 nm,进样量20μL。 结果与结论：丙酮酸乙酯峰与辅料及溶剂峰分离良好,丙酮酸乙酯质量浓度在1-100 mg/L内于峰面积线性关系良好（r =0.9996）,低、中、高浓度丙酮酸乙酯对照品溶液日内、日间精密度的相对标准偏差均小于3%,重复性实验的相对标准偏差为1.25%,稳定性实验的相对标准偏差为1.3%。3批样品的加样回收率分别为（91.5±1.0）%,（93.5±0.2）%,（94.4±0.4）%;包封率分别为（87.20±0.22）%,（90.50±0.15）%,（91.10±0.17）%。不同批次样品丙酮酸乙酯含量检测结果的相对标准偏差分别为0.9%,0.5%,0.3%。说明反相高效液相色谱法灵敏度高、线性范围宽、专属性强、精密度高、加样回收率好、结果精确可靠,可用于壳聚糖纳米粒中丙酮酸乙酯含量的测定。     

柱上样本堆积毛细管电泳法同时检测细胞内氨甲蝶呤及其六种代谢产物

目的 建立柱上堆积高效毛细管电泳法同时检测细胞内氨甲蝶呤(MTX)及其6种代谢产物氨甲蝶呤多聚谷氨酸链( MTXPG)的方法.方法 采用高效毛细管电泳技术,以75 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH值7.40)作为分离介质,用水和乙腈( V/V=1∶1)作溶剂重组残留样本的方法进行柱上样本堆积,0.5 psi压力进样,进样...     

N-末端脑利钠肽前体检测对心源性脑栓塞的早期诊断价值

目的:探讨血浆N-末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)检测对心源性脑栓塞(CE)的早期诊断价值。方法:急诊收治入院的200例急性脑梗死患者,按照TOAST分型标准进行分为大动脉粥样硬化型(n=58)、小动脉闭塞型(n=76)、心源性脑栓塞(n=41)、其他明确病因型(n=15)和不明原因型(n=10),比较各型在急诊检测的NT-proBNP水平。结果:CE组患者血浆NT-proBNP水平显著高于TOAST其他亚型组(P均0.01),其他亚型组间的NT-proBNP无明显差异。当NT-proBNP取值(cut-off值)为412.42 pg/ml时,将CE组与其他TOAST各亚型组筛选出的敏感度为75.0%,特异度为88.7%。结论:急性脑梗死中,CE患者血浆NT-proBNP水平显著升高,急诊检测血浆NT-proBNP水平有助于CE的及早诊断。     

高效液相色谱法测定复方锌铁钙口服溶液中维生素B_2的含量

目的建立以高效液相色谱(HPLC)法测定复方锌铁钙口服溶液中维生素B2含量的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱,Shim-pack VP-ODS色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)。流动相,醋酸钠溶液(用冰醋酸3 mL和40 g/L氢氧化钠18 mL加水至600 mL)-甲醇(66∶34),流速为0.8 mL/min;检测波长为267 nm,柱温为40℃,进样量为10μL。结果维生素B2在6.4~64μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.999 9);维生素B2的平均回收率分别为101.02%(RSD=0.20%),102.28%(RSD=0.52%),98.35%(RSD=1.42%)(n=9)。结论本方法简便、快速、准确,不受其他成分的干扰,可用于测定复方锌铁钙口服溶液中维生素B2的含量。