特应性皮炎患者血清维生素D检测及其临床意义

目的 检测特应性皮炎（AD）患者血清中维生素D（VitD）、总免疫球蛋白E（tIgE）、白细胞介素4（IL?4）、IL?6水平,评价VitD与AD患者病情严重程度的关系及其在AD发病中炎症与免疫调节中的作用。方法 采集37例AD组和30例对照组外周血,检测血清VitD、tIgE、IL?4、IL?6水平,通过SCORAD评分评估AD患者病情严重程度。采用t检验或U检验分析组间差异,采用χ2检验比较VitD缺乏、不足与充足患者比例,采用Pearson或Spearman相关进行各组间的相关性分析。结果 AD组血清VitD水平［（24.77 ± 9.29） μg/L］低于对照组［（28.98 ± 6.87） μg/L,t = 2.015,P = 0.048］,tIgE水平［137.68（37.59 ~ 414.53） IU/ml］高于对照组［45.16（14.56 ~ 112.12） IU/ml,Z = -3.399,P = 0.001］,IL?4水平［（8.86 ± 4.83） ng/L］高于对照组［（4.78 ± 3.07） ng/L,t = 4.147,P < 0.001］,IL?6水平［6.53（3.99 ~ 15.30） ng/L］高于对照组［4.58（2.85 ~ 8.17） ng/L,Z = -2.173,P = 0.030 ］。AD组SCORAD评分与血清VitD水平负相关（r = -0.505,P = 0.001）,与tIgE、IL?4水平正相关（r值分别为0.531、0.519,P值均为0.001）,与IL?6无相关性（r = -0.139,P = 0.411）。AD组与对照组相比,VitD缺乏、不足与充足患者比例差异有统计学意义,χ2 = 8.762,P = 0.013。VitD缺乏患者血清tIgE［2846.87（319.02 ~ 7300.00） IU/ml］与IL?4水平［（16.37 ± 2.05） ng/L］分别高于VitD不足［110.07（26.20 ~ 501.48） IU/ml,P = 0.045;（8.28 ± 4.48） ng/L,P = 0.011］和VitD充足患者［123.93（91.61 ~ 273.68） IU/ml,P = 0.024;（8.00 ± 4.63） ng/L,P = 0.041］。VitD缺乏患者IL?6水平［15.10（8.49 ~ 30.72） ng/L］高于充足［6.22（4.47 ~ 9.47）ng/L,P = 0.011］。结论 AD患者存在VitD缺乏或不足,VitD缺乏与高水平tIgE、IL?4、IL?6有关,且AD的严重程度与tIgE、IL?6升高及VitD降低关系密切。     

小鼠免疫性接触性荨麻疹动物模型的构建

目的 建立小鼠免疫性接触性荨麻疹动物模型。 方法 将60只BALB/c小鼠随机分5组：抗二硝基苯酚IgE单克隆抗体（抗DNP IgE） + 二硝基氟苯（DNFB）组和抗DNP IgE + 偏苯三酸酐（TMA）组小鼠尾静脉注射抗DNP IgE,24 h后分别在小鼠耳部涂DNFB和TMA;DNFB组、TMA组、生理氯化钠液（NS）组小鼠尾静脉注射NS,24 h后分别在小鼠双耳涂DNFB、TMA、NS,观察小鼠在14 d内的风团、瘙痒情况、肥大细胞脱颗粒数、脾脏指数和皮肤病理。 结果 抗DNP IgE + DNFB组全部（12/12）和抗DNP IgE + TMA组部分小鼠（8/12）产生风团;抗DNP IgE + DNFB组及抗DNP IgE + TMA组小鼠的搔抓次数［30 min时分别为（31.58 ± 3.58）次/h,（22.17 ± 3.81）次/h］、肥大细胞脱颗粒率［（70.21 ± 26.01）%,（54.25 ± 39.57）%］及脾脏指数（7.54 ± 1.56,7.87 ± 1.18）与NS组［（2.00 ± 0.85）次/h,（14.45 ± 6.79）%,5.37 ± 1.16］相比均显著增加（F值分别为437.86、14.41、4.29,均P < 0.01）;DNFB组、TMA组及NS组均无风团产生。 结论 通过抗DNP IgE诱导及DNFB激发后可快速、较稳定地建立小鼠免疫性接触性荨麻疹动物模型。     

卵清蛋白联合卡泊三醇诱导构建特应性皮炎小鼠模型

【摘要】 目的 探讨快速建立特应性皮炎（AD）小鼠模型的方法。方法 以C57BL/6小鼠为模式动物,利用简单随机化方法分为3组,卡泊三醇 + 卵清蛋白（OVA）组（6只）两侧耳部外涂卡泊三醇和OVA,卡泊三醇组（6只）耳部外涂卡泊三醇,对照组（3只）耳部外涂75%乙醇,连续12 d。分别在造模前和第14天时拍摄小鼠耳部照片并测量小鼠耳厚度,取小鼠尾静脉血,检测血清总IgE和OVA特异性IgE水平,并在第14天取小鼠耳廓皮肤进行组织病理检查。结果 第14天时卡泊三醇 + OVA组和 卡泊三醇组小鼠耳部皮肤出现红肿、干燥、脱屑,耳厚度较造模前均明显增加（均P < 0.001）,但两组间耳厚度［分别为（0.355 ± 0.03）和（0.370 ± 0.05） mm］差异无统计学意义（q = 0.674,P = 0.231）。耳部皮肤病理检查显示,与卡泊三醇组和对照组相比,卡泊三醇 + OVA组小鼠表皮增生和炎症细胞（包括嗜酸性粒细胞和肥大细胞）浸润更加明显。皮肤免疫组化检查显示,3组间表皮炎症因子胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）和干扰素γ表达差异无统计学意义（均P > 0.05）,但IL-13差异有统计学意义（F = 5.159,P = 0.032）,卡泊三醇 + OVA组IL-13表达水平（77.12 ± 5.46）高于对照组（55.49 ± 9.92,q = 3.170,P = 0.021）。第14天时卡泊三醇 + OVA组和卡泊三醇组小鼠血清总IgE与造模前比较均明显升高,其中卡泊三醇 + OVA组总IgE升高更明显［（8 278.56 ± 3 297.68）比（892.64 ± 82.83） μg/L,t = 4.132,P = 0.026］,且卡泊三醇 + OVA组血清OVA特异性IgE水平（192.846 ± 15.391） μg/L显著高于卡泊三醇组［（8.492 ± 3.879） μg/L,q = 22.476,P < 0.001］。 结论 连续12 d外涂卡泊三醇和OVA可快速建立过敏原诱发的AD小鼠模型,为进行过敏原相关的AD发病机制研究奠定了一定基础。     

异维A酸联合水杨酸治疗中重度痤疮的疗效观察

 目的:探讨口服异维A酸胶囊联合30%超分子水杨酸治疗中重度痤疮的临床疗效。方法：将80例中重度痤疮患者随机分为对照组（40例）和观察组（40例）,对照组给予异维A酸胶囊10 mg口服,一天2次,连续8周;观察组给予异维A酸胶囊的同时联合30%超分子水杨酸治疗,每隔4周治疗一次,共3次。比较两组患者总积分、临床疗效、不良反应发生率及满意度。结果：4周后,观察组总积分［(9.38±8.44)分］明显低于对照组［(15.40±9.84)分］,差异有统计学意义（t=2.94,P=0.002）;有效率(85.00%)明显高于对照组(57.50%),差异有统计学意义(X²=7.38,P=0.007)。8周后,观察组总积分［(7.63±7.82)分］及有效率（90.00%）与对照组总积分［(9.00±8.05)分］及有效率（85.00%）比较,差异均无统计学意义(t=0.77,P=0.221;X²=0.46,P=0.499);但观察组8周总积分较治疗前明显降低,差异有统计学意义（t=19.25,P<0.01）。两组不良反应均可耐受。两组患者满意度分别为87.50%和82.50%,差异无统计学意义( X²=0.39,P=0.531)。结论：口服异维A酸胶囊联合30%超分子水杨酸治疗中重度痤疮起效快,疗效好,值得推广。     

慢性荨麻疹患者血清中Ｄ-二聚体水平和IL-33表达及意义

 目的:探讨慢性荨麻疹（CU）患者血清中D-二聚体水平和 IL-33的水平及其临床意义。方法:将63例CU患者依据自身血清皮肤试验（ASST）结果进行分组，取同期体检健康者作为对照组，采用ELISA法检测三组患者血清中D-二聚体水平和 IL-33水平并进行比较。结果:63例CU患者中，37例ASST阳性（58.73%），26例阴性（41.27%）。相比对照组D-二聚体水平［2.437 ±0.120） mg/L］，ASST（+）组 ［（25.797±7.756） mg/L］和ASST（-）组［（30.605±9.101）mg/L］均明显增加（t值分别为10.25、10.58，P值均<0.05），但ASST（-）组与ASST（+）组两组间无明显差异（t=1.39, P＞0.05）。ASST（+）组血清中IL-33含量 ［（0.237±0.037） pg/mL］明显高于对照组［（0.069±0.001） pg/mL］，t=7.78，P<0.05，而ASST（-）组IL-33水平［（0.112±0.028） pg/mL］无明显变化（t=2.63, P＞0.05），ASST（-）和ASST（+）间有明显差异（t=4.69, P<0.05）。结论:CU患者血清中D-二聚体水平及ASST（+）组IL-33水平升高，可能导致机体免疫系统失衡，在CU的发生与发展中发挥一定作用。     

窄谱中波紫外线对特应性皮炎患者外周血血清胸腺基质淋巴细胞生成素、白细胞介素25及其受体的影响

目的 探讨窄谱中波紫外线（NB-UVB）对特应性皮炎（AD）患者血清胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）、白细胞介素25（IL-25）及外周血单一核细胞（PBMC）TSLP受体（TSLPR）mRNA、IL-25受体（IL-25R）mRNA表达水平的影响。 方法 AD患者40例,采用NB-UVB照射治疗,双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测治疗前后血清中TSLP、IL-25水平;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测治疗前后PBMC TSLPR mRNA、IL-25R mRNA的表达水平。采用欧洲的AD评分标准（SCORAD）评估疾病严重程度,视觉模拟标尺法（VAS）评价瘙痒程度。选取30例健康体检者作为对照。组间比较采用两独立样本t检验,治疗前后比较采用配对t检验。 结果 患者组经NB-UVB照射后总有效率达75%（30/40）,治疗后SCORAD评分（20.36 ± 5.12）及VAS评分（3.05 ± 1.02）均较治疗前（分别为55.26 ± 10.88和8.20 ± 1.37）明显降低,差异均有统计学意义（t值分别为10.29和8.16,P < 0.05）。AD患者组治疗前血清TSLP［（198.24 ± 29.47） ng/L］、IL-25含量（160.54 ± 34.89 ng/L）及TSLPR mRNA（8.57 ± 1.34）、IL-25R mRNA（6.81 ± 0.50）相对表达量均明显高于健康对照组［分别为（120.13 ± 19.65） ng/L、（120.41 ± 43.07） ng/L、1.94 ± 0.39、1.48 ± 0.47］,差异均有统计学意义（t值分别为29.70、14.65、7.07、18.89,P < 0.05）。NB-UVB治疗显著改善病情后,患者血清TSLP［（151.87 ± 14.78） ng/L］、IL-25含量［（130.52 ± 29.65） ng/L］及PBMC TSLPR mRNA（2.89 ± 0.53）、IL-25R mRNA（3.90 ± 0.37）相对表达量较治疗前明显降低,差异均有统计学意义（t值分别为18.56、9.07、5.21、7.35,均P < 0.05）。治疗后血清TSLP、IL-25含量,PBMC TSLPR mRNA、IL-25R mRNA相对表达量与健康对照组相比,差异均无统计学意义（P > 0.05）。 结论 TSLP、IL-25可能在AD的发病中起重要作用,NB-UVB下调TSLP、IL-25及其受体的表达可能是NB-UVB治疗AD的机制之一。     

羟氯喹逆转紫外线诱导的SLE患者CD4+T细胞DNA低甲基化的研究

目的 探讨羟氯喹对紫外线诱导的SLE患者CD4+ T细胞基因组DNA低甲基化的作用。方法 选择SLE患者组30例,正常人对照组10例。 磁珠分选SLE患者组和正常人对照组外周血CD4+ T细胞,311 nm窄谱UVB照射,加入羟氯喹共培养,检测各组间基因组DNA甲基化表达水平。结果 SLE患者组CD4+ T细胞DNA甲基化水平（3.922 ± 2.215）%低于正常人对照组［（10.210 ± 5.573）%,t = 3.450,P = 0.026］;SLE活动组患者CD4+ T细胞经45 mJ/cm2和100 mJ/cm2 UVB照射后DNA甲基化水平为（1.784 ± 1.033）%和（1.932 ± 1.844）%,均显著低于活动期患者未照射组［（3.922 ± 2.215）%,t = 3.000、4.118,P值均 < 0.05］。经100 mJ/cm2 UVB照射后,活动期患者DNA甲基化水平（1.932 ± 1.844）%显著低于稳定期患者照射组 ［（7.235 ± 3.846）%,t = 2.648,P < 0.05］和正常人对照组［（5.472 ± 5.573）%,t = 3.000,P < 0.05］。SLE活动组T细胞经45和100 mJ/cm2 UVB照射后,加用羟氯喹结果DNA甲基化水平为（4.698 ± 1.948）%和（8.698 ± 3.151）%,均比照射未加羟氯喹组显著升高（t = 4.827、3.184,P值均 < 0.05）;经45 mJ/cm2 UVB照射前后均加羟氯喹组DNA甲基化水平（5.404 ± 2.308）%比照射未加羟氯喹组（1.784 ± 1.033）%显著升高,t = 4.827,P < 0.01。结论 羟氯喹可以逆转紫外线诱导的SLE患者CD4+ T细胞DNA低甲基化,羟氯喹对活动期SLE患者更为明显。     

慢性荨麻疹患者血清25羟基维生素D水平检测及意义

目的 检测慢性荨麻疹患者血清25羟基维生素D水平,探讨25羟基维生素D（25HVD）在慢性荨麻疹（CU）发病中的作用。方法 收集50例CU患者及40例健康对照血清,同时应用CU症状评分标准（UAS）对疾病进行评分;用 ELISA测定血清25HVD、干扰素γ（IFN?γ）、白细胞介素4（IL?4）、免疫球蛋白E（IgE）水平。所得数据采用t检验、秩和检验、直线相关回归分析进行统计学分析。结果 CU组血清25HVD水平［（15.20 ± 7.72） μg/L］明显低于对照组［（21.54 ± 8.31） μg/L,t = 3.75,P < 0.05］,且两组25HVD水平分布比较,差异有统计学意义（H = 17.9,P < 0.05）。UAS评分重度组25HVD水平［（15.57 ± 7.38） μg/L］与轻度组［（14.86 ± 6.28） μg/L］差异无统计学意义（t = 0.37,P > 0.05）。CU组血清IFN?γ水平明显低于对照组（t = 15.34, P < 0.05）,但血清IL?4和IgE水平明显高于对照组（t值分别为6.54, 4.88,均P < 0.05）。CU组血清25HVD水平与IFN?γ水平呈正相关（r = 0.738,P < 0.05）,与IL?4水平呈负相关（r = -0.689,P < 0.05）,与IgE水平无相关性（r = -0.271,P > 0.05）。结论 CU患者血清25HVD水平明显降低,可能通过介导Th1细胞/Th2细胞失衡参与CU的发生。     

吡咯喹啉醌对小鼠年龄相关皮肤衰老的延缓作用及机制研究

【摘要】 目的 研究吡咯喹啉醌对小鼠年龄相关皮肤衰老的作用及机制。方法 将昆明种小鼠SPF级喂养,分为3组,每组10只,年轻组用普通饮食喂养8个月,年老组用普通饮食喂养20个月构建小鼠自然衰老模型,吡咯喹啉醌组在每公斤普通饮食饲料中添加吡咯喹啉醌4 mg喂养20个月。喂养结束后,取各组小鼠背部皮肤组织,HE染色检测皮肤表皮和真皮厚度;Masson染色检测皮肤总胶原变化;免疫组化检测增殖蛋白Ki67表达变化;透射电镜检测皮肤自噬体变化;Western印迹检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62表达变化,各组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果 HE和Masson染色显示,年老组表皮厚度［（15.67 ± 0.36） μm］和真皮厚度［（87.95 ± 11.86） μm］以及总胶原阳性百分率［（22.12 ± 1.72）%］均显著低于年轻组［（29.37 ± 0.25） μm、（264.93 ± 10.34） μm、（45.03 ± 1.54）%,均P＜0.05］,而吡咯喹啉醌组表皮厚度［（25.53 ± 0.47） μm］和真皮厚度［（145.01 ± 9.71） μm］以及总胶原阳性百分率［（31.17 ± 1.20）%］较年老组增加（均P＜0.05）。免疫组化结果显示,年老组皮肤增殖蛋白Ki67阳性细胞表达率［（13.74 ± 3.06）%］低于年轻组［（29.07 ± 2.79）%,P＜0.05］和吡咯喹啉醌组 ［（21.20 ± 1.47）%,P＜0.05］。透射电镜观察显示,年老组与年轻组比较,皮肤自噬体数量增加（P＜0.05）,吡咯喹啉醌组自噬体数量较年老组减少（P＜0.05）。Western印迹实验显示,与年轻组比较,年老组Beclin-1表达降低（P＜0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值下降（P＜0.05）,p62表达升高（P＜0.05）;而吡咯喹啉醌组与年老组比较,Beclin1表达升高（P＜0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增加（P＜0.05）,p62表达降低（P＜0.05）。结论 吡咯喹啉醌能够延缓小鼠皮肤衰老,其机制可能与增加小鼠皮肤细胞增殖能力和促进皮肤自噬水平相关。     

纳米金光热作用对ICR小鼠皮肤光老化保护作用的初步研究

目的 探讨纳米金光热作用对雌性ICR小鼠皮肤光老化的保护作用及其可能机制。 方法 32只健康雌性ICR小鼠随机分成正常组、模型组、红光组、纳米金组,每组8只。正常组小鼠不予任何干预,另3组每次照射前背部脱毛,面积约16 cm2。每次照射紫外线前,模型组暂不予以特殊处理。红光组小鼠给予红光照射,纳米金组小鼠先涂抹纳米金球溶液,用黑色塑料薄膜封包30 min后再照射红光。经上述处理后,将模型组、红光组、纳米金组小鼠分笼放入灯箱中进行紫外线照射。实验结束后,肉眼及皮肤镜观察皮肤外观变化;取小鼠背部皮肤,组织切片HE染色和Masson染色观察皮肤组织结构和胶原纤维的改变。ImageJ图像分析软件计算胶原纤维面积。DCFH-DA探针检测皮肤细胞内活性氧簇（ROS）含量。ELISA检测皮肤组织中基质金属蛋白酶13（MMP-13）的含量。采用单因素方差分析进行组间差异分析,并用LSD-t检验进行两两多重比较。用简单线性回归分析ROS变化与MMP-13表达量之间的相关性。 结果 与正常组比较,紫外线照射后,模型组小鼠皮肤出现皮屑、褐黄、粗糙肥厚、深皱纹、缺乏弹性等光老化特征;皮肤镜下小鼠皮肤粗糙,毛细血管断裂出血,结痂,褐色斑点。组织切片显示,模型组小鼠表皮厚度［（81.32 ± 7.09） μm］和真皮厚度［（352.75 ± 40.08） μm］均较正常组［表皮（38.42 ± 13.64） μm,真皮（188.50 ± 27.83） μm］明显增加（P < 0.05）,胶原纤维面积减少（分别为31.94% ± 8.56%和48.63% ± 11.32%,P < 0.05）,异常弹性物质增多;模型组ROS含量（5 124 152.80 ± 754 119.22）DCF荧光强度/mg蛋白和MMP-13表达（3 895.42 ± 136.06） g/L均较正常组（分别为3 502 085.29 ± 135 089.06）DCF荧光强度/mg蛋白和（2 414.73 ± 105.96） g/L明显增高（P < 0.05）。与模型组比较,纳米金组皮肤外观及组织学特点均明显改善,小鼠皮肤厚度明显变薄,表皮（48.70 ± 13.35） μm,真皮（253.74 ± 36.28） μm（P < 0.05）,且其表皮厚度恢复正常（P > 0.05）,胶原纤维面积（41.54% ± 12.10%）增加（P < 0.05）;纳米金组ROS含量（3 516 963.35 ± 67 436.36）DCF荧光强度/mg蛋白和MMP-13表达（2 558.25 ± 102.72） g/L均较模型组明显降低（P < 0.05）,且恢复至正常水平。用简单线性回归分析显示,ROS的产生量与MMP-13的表达量呈正相关（r = 0.864,P = 0.018）。 结论 纳米金的光热作用对小鼠光老化有一定的保护作用,其机制可能与其减少ICR小鼠皮肤组织中ROS产生,从而减少下游MMP-13表达有关。     

预见性护理对儿童白癜风自体表皮移植患者围术期感染发生率的影响

 目的:研究预见性护理对儿童白癜风自体表皮移植患者围术期感染发生率的影响。方法：将2017年9月-2018年9月在我院进行白癜风自体表皮移植手术患儿(72例)随机分为观察组与对照组,每组各36例,对照组给予常规护理,观察组在对照组基础上实施预见性护理措施。比较两组患儿术后至创口愈合期间的换药次数和创口愈合时间、围术期感染发生率以及患儿家属满意度。结果：对照组术后至创口愈合期间的换药次数为（6.02±0.60）次、创口愈合时间为（9.74±0.91）d,观察组术后至创口愈合期间的换药次数为（5.35±0.48）次、创口愈合时间为（8.78±0.75）d,观察组明显优于对照组,差异有统计学意义（t值分别为5.23、4.89,P值均＜0.05）。对照组围术期感染率为30.56%,观察组围术期感染率为8.33%,观察组低于对照组,差异有统计学意义（ X²=5.68,P＜0.05）。观察组家属对护理服务中护理人员态度、护理技术、护理专业度的满意度评分均高于对照组,差异有统计学意义（t值分别为2.33、2.29、2.45,P值均＜0.05）。结论：儿童白癜风自体表皮移植患者实施预见性护理效果明显,值得临床推广应用。     

天疱疮和大疱性类天疱疮患者外周血滤泡辅助性T细胞水平的研究

目的 探讨滤泡辅助性T细胞（Tfh）在天疱疮和大疱性类天疱疮发病中的作用。 方法 天疱疮和大疱性类天疱疮患者各10例,与天疱疮和大疱性类天疱疮患者年龄、性别相匹配的正常人对照各10例。采用流式细胞仪检测外周血单一核细胞（PBMC）中Tfh水平,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测其血清中白介素21（IL-21）水平,同时检测大疱性类天疱疮患者血清中抗BP180-NC16A抗体滴度,并进行抗体滴度与IL-21、Tfh水平的相关性分析。结果 天疱疮患者组血清中IL-21水平（95.33 ± 33.69 ng/L）显著高于其正常人对照组（54.50 ± 18.13 ng/L）（t = 3.38,P ＜ 0.01）,Tfh水平（12.08% ± 4.74%）亦显著高于其正常人对照组（6.15% ± 1.62%）（t = 3.74,P ＜ 0.01）。大疱性类天疱疮患者组血清中IL-21水平（106.70 ± 44.91 ng/L）显著高于其正常人对照组（55.37 ± 15.89 ng/L）（t = 3.41,P ＜ 0.01）,Tfh水平（11.85% ± 3.14%）亦显著高于其正常人对照组（6.03% ± 1.74%）（t = 5.13,P ＜ 0.01）。大疱性类天疱疮组抗BP180-NC16A抗体滴度与IL-21水平呈正相关（r = 0.77,P ＜ 0.01）,与Tfh水平亦呈正相关（r = 0.67,P ＜ 0.05）。结论 天疱疮和大疱性类天疱疮患者Tfh及其分泌的细胞因子IL-21水平均明显升高,可能在其发病过程中起一定的作用。     

RNA干扰趋化因子受体CXCR7基因对黑素瘤M14细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨靶向沉默趋化因子受体CXCR7基因对黑素瘤细胞株M14侵袭和迁移能力的影响。方法 采用Western印迹实验检测黑素瘤M14和A375细胞CXCR7蛋白的表达,选取高表达CXCR7蛋白的M14细胞作为研究对象。将M14细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组：实验组转染CXCR7-siRNA,阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理。采用实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测CXCR7 mRNA和蛋白在M14细胞中的表达水平, Transwell小室法及细胞划痕法检测干扰前后细胞侵袭及迁移能力的变化。 结果 实验组M14细胞CXCR7 mRNA及蛋白相对表达量分别为0.412 ± 0.023、0.144 ± 0.005,明显低于阴性对照组（1.211 ± 0.117、1）以及空白对照组（1.000 ± 0.102、1.016 ± 0.004）,差异均有统计学意义（F值分别为30.068、11 485.5,P值分别为0.001、0.000）。实验组M14细胞穿过聚碳酸酯膜的细胞数为（20.617 ± 1.503）个,明显少于阴性转染对照组［（42.000 ± 6.018）个］和空白对照组［（43.627 ± 2.152）个］,3组间比较差异有统计学意义（F = 32.416,P = 0.001）。划痕实验中,实验组每高倍视野（× 200）下细胞迁移数为15.00 ± 1.10,明显少于阴性对照组（44.90 ± 2.20）和空白对照组（45.30 ± 2.30）,3组间比较差异有统计学意义（F = 2 411.945,P = 0.000）。 结论 靶向沉默CXCR7能显著抑制黑素瘤M14细胞的侵袭和迁移,有望为皮肤黑素瘤提供潜在的治疗靶点。     

RNA干扰神经突起导向因子 Netrin-1表达下调对鳞状细胞癌SCL-1细胞的影响

目的 探讨神经突起导向因子 Netrin-1表达下调对皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）SCL-1细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 脂质体2000将Netrin-1 siRNA和对照siRNA转染皮肤鳞癌SCL-1细胞。将细胞分为对照1组（未处理组）、对照2组（siRNA对照组）、实验组（Netrin-1 siRNA组）。Western印迹检测转染Netrin-1 siRNA后SCL-1细胞Netrin-1蛋白的表达。人胆囊收缩素/缩胆囊素8肽（CCK-8）ELISA试剂盒分析细胞增殖的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。Western 印迹检测caspase-3、caspase-9及MMP-2的表达。结果 Netrin-1 siRNA明显下调SCL-1细胞中Netrin-1蛋白的表达。Netrin-1表达下调明显抑制SCL-1细胞的增殖和诱导细胞凋亡,增加caspase-3和caspase-9的表达,同时可显著抑制MMP-2的表达。结论 Netrin-1表达下调可介导鳞癌细胞增殖抑制、增高细胞凋亡率和降低细胞迁移能力。     

特应性皮炎患儿外周血Th17细胞与CD4+CD25+ T细胞失衡的研究

【摘要】 目的 探讨Th17细胞和Treg细胞失衡在特应性皮炎（AD）发病机制中的作用。方法 流式细胞仪检测52例AD患者外周血Th17细胞和Treg细胞的频率、酶联免疫吸附方法（ELISA） 检测外周血中细胞因子IL-6、TGF-β1的表达水平。同时以30例性别、年龄匹配的健康体检者作为对照。结果 AD组外周血Th17细胞（CD3+CD8-IL17+）占CD3+T细胞的百分比为（1.20 ± 0.41）%,高于对照组的（0.54 ± 0.28）% （t = 2.58,P < 0.05）;Treg（CD4+ CD25+）细胞的百分比为（2.29 ± 0.67）%,低于对照组（5.95 ± 0.45）%,（t = 15.23,P < 0.01）。关键调控因子测定结果：IL-6水平,AD组（5.12 ± 0.45）ng/L高于对照组（3.89 ± 0.38） ng/L,差异具有统计学意义（t = 2.59,P < 0.05）;而TGF-β1的表达水平AD组（57.65 ± 10.78） ng/L低于对照组的（81.18 ± 7.78） ng/L,（t = 5.41,P < 0.01）。 结论 特应性皮炎患儿外周血Th17、Treg细胞水平及其关键的调控平衡因子IL-6、TGF-β1发生变化,其比例的失平衡可能参与特应性皮炎的发病。     

系统性红斑狼疮患者末梢血液改变的激光散斑成像观察

目的 利用激光散斑衬比分析（LSCA）技术无创性观察分析和评价系统性红斑狼疮（SLE）患者治疗前后末梢血流改变与健康人之间的差异,探讨气温、年龄、性别因素对末梢血流改变的影响。方法 收集47例SLE患者第1次就诊时的天气温度（≥ 20 ℃组和＜20 ℃组）、年龄（< 20岁、20 ~ < 40岁、 ≥ 40岁组）、性别及血尿常规、补体、抗体免疫学检查等临床资料,依据 SLEDAI评分法进行病情评估,与LSCA技术测量的末梢血流改变进行相关性分析,并与30例健康人进行比较。结果 47例SLE患者末梢血流甲下为7.017 ± 0.356,甲周为7.821 ± 0.662,与30例健康人（甲下9.765 ± 0.337,甲周3.129 ± 0.128）相比,差异均有统计学意义（t值分别为5.182、5.414,P < 0.05）。SLEDAI评分与甲下及甲周血流改变程度之间存在正相关性（r分别为0.601、0.260,P < 0.05）。随访的28例患者治疗后甲周血流（5.204 ± 0.476）改善明显,与治疗前（7.967 ± 0.913）比较,t = 4.644,P < 0.05;甲下血流（7.578 ± 0.554）改善不明显,与治疗前（7.039 ± 0.635）比较,t = 2.064,P＞0.05。气温对甲下血流有影响（t = 2.415,P < 0.05）,对甲周无明显影响（t = 0.758,P＞0.05）;性别和年龄对患者甲下及甲周血流的改变影响不明显。结论 SLE患者末梢血流较健康人改变明显,治疗后有一定程度的改善,气温对患者甲下血流改变影响较大。LSCA技术或许可更加便捷、量化地作为SLE患者病情严重程度评价的补充方法。     

药疹患者血清Th22细胞相关细胞因子和补体蛋白水平变化研究

目的 了解药疹患者治疗前后血清中Th22细胞相关因子及补体相关指标表达水平的变化,探索其在药疹发生发展中的可能作用。方法 35例药疹患者,以1∶1的比例匹配性别、年龄一致的健康对照者,分别采集药疹患者治疗前后及对照组外周血5 ml。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和流式液相多重蛋白定量技术（CBA）检测血清中白细胞介素22（IL?22）、IL?13、肿瘤坏死因子α（TNF?α）及补体蛋白C3a、C4a、C5a。结果 治疗前,药疹患者血清中IL?22［（40.85 ± 14.56） ng/L］、IL?13［（869.94 ± 463.39） ng/L］、TNF?α［（1.03 ± 0.64） ng/L］及补体C3a［（55.21 ± 32.98） ng/L］、C4a［（285.11 ± 123.91） ng/L］、C5a表达水平［（279.68 ± 127.72） ng/L］明显高于对照组（分别为29.09 ± 8.66、372.92 ± 151.75、0.44 ± 0.31、42.44 ± 14.26、237.00 ± 63.57和215.98 ± 65.38 ng/L）,差异均有统计学意义（t值分别为5.549、6.071、4.321、2.832、2.257、2.495,均P < 0.05）。治疗后,药疹患者血清IL?22［（32.72 ± 11.77） ng/L］、IL?13［（456.21 ± 123.22） ng/L］、TNF?α［（0.64 ± 0.39） ng/L］、C3a［（45.47 ± 21.11） ng/L］、C4a［（241.86 ± 84.12） ng/L］、C5a表达水平［（239.61 ± 103.51） ng/L］均低于治疗前,差异均有统计学意义（t值分别为4.443、5.197、3.572、3.213、2.728、4.772,均P ≤ 0.01）,且除IL?22、IL?13水平仍高于对照组外（P < 0.05）,TNF?α及补体C3a、C4a、C5a水平与对照组差异无统计学意义（均P > 0.05）。相关性分析显示,药疹患者治疗前血清补体C3a与C4a（r = 0.660）、C5a（r = 0.404）,C4a与C5a（r = 0.501）表达水平呈正相关,均P < 0.05,IL?22表达水平与补体C3a水平呈负相关（r = -0.490,P = 0.005）,与TNF?α表达水平呈正相关（r = 0.573,P = 0.005）。结论 Th22细胞相关细胞因子及补体活化在药疹发生发展过程中可能起重要作用,且IL?22可能参与补体蛋白的调控。     

慢性荨麻疹患者外周血白细胞介素9和转录因子PU.1的表达及意义

目的 探讨白细胞介素9（IL-9）和Th9细胞与慢性荨麻疹的关系。 方法 收集门诊慢性荨麻疹患者30例,另30例健康志愿者作为对照组。用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血IgE水平,流式细胞仪检测外周血CD4+ IL-9+细胞比例,实时荧光定量PCR检测外周血单一核细胞（PBMC）IL-9、PU.1 mRNA的表达。两组间定量资料比较采用独立样本t检验,相关性检验采用Pearson分析。 结果 慢性荨麻疹患者PBMC IL-9及PU.1 mRNA的表达水平均显著高于健康对照组（4.44 ± 1.90比3.20 ± 1.78,3.26 ± 1.59比2.34 ± 1.47,t = 2.60,2.34,均P < 0.05）。慢性荨麻疹患者外周血CD4+IL-9+细胞比例［（0.63 ± 0.44）%］、IgE水平［（82.04 ± 31.72） IU/ml］与健康对照组［（0.22 ± 0.12）%、（60.74 ± 28.26） IU/ml］比较均明显升高（t = 5.04,2.75,均P < 0.01）。慢性荨麻疹患者外周血CD4+IL-9+细胞比例、IL-9及PU.1 mRNA与IgE水平均呈正相关（R = 0.596,0.767,0.746,均P < 0.01）。 结论 Th9细胞和IL-9可能参与慢性荨麻疹的发病。