小鼠毛发周期中甲状旁腺激素受体mRNA表达的研究

临床上,甲状旁腺功能低下的患者会出现毛发稀少、秃发等症状犤1犦。甲状旁腺激素(PTH)和甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)能作用于相同的受体(PTHPTHrP受体).PTH及PTHrP除具有调节钙、磷代谢的功能外,还参与组织发生细胞增殖、分化的调节犤2犦,过度表达PTHrP的转基因小鼠毛囊发育障碍犤3犦。为进一步探讨PTH对毛发周期的影响我们以C57BL6小鼠为动物模型犤4犦,检测了毛发周期不同时段小鼠皮肤中PTHPTHrP受体mRNA表达的变化。     

甲状旁腺激素相关蛋白与皮肤

甲状旁腺激素相关蛋白是与甲状旁腺激素同源的一种多肽类物质，二者结合于同一种细胞膜受体。甲状旁腺激素相关蛋白及其受体广泛分布于人体的各种组织，通过旁分泌或自分泌方式，对组织器官的发生、生长及分化过程发挥调节作用。甲状旁腺激素相关蛋白及其受体对人表皮的增殖分化、毛囊的发育及毛发的生长也有重要作用，可能成为相关皮肤病的一个新的药物治疗靶点。     

rhPTH(1-34)诱导角质形成细胞蛋白酪氨酸激酶差异表达蛋白的筛选

目的利用蛋白芯片技术,筛选重组人甲状旁腺素(1-34)[rh PTH(1-34)]作用角质形成细胞后,156种蛋白酪氨酸激酶中的差异表达蛋白。方法培养Ha Ca T角质形成细胞株,rh PTH(1-34)诱导细胞,经过总蛋白质提取、BCA蛋白质定量、酪氨酸磷酸化抗体检测、图象和数据采集,筛选出差异蛋白,最后对所得数据进行分析。结果 156种蛋白中,rh PTH(1-34)组与空白对照组比较,20种蛋白表达差异2倍以上,其中16种显著上调,分别为:Csk,Dtk,Eph A4,Eph A5,Eph B2,Eph B3,Erb B4,FAK,Insulin R,LTK,PDGFR-α,ROS,Tie-1,Tie-2,Tyk2,TYRO10;4种显著下调,分别为:EGFR,JAK3,ALK,Eph B1。其中与银屑病相关的EGFR,JAK3,Tyk2,Eph A4主要涉及角质形成细胞增殖、分化,调节T细胞介导的炎症反应。结论 rh PTH(1-34)可影响Ha Ca T细胞内一组蛋白酪氨酸激酶的表达,其中EGFR,JAK3,Tyk2,Eph A4与银屑病的发病机制密切相关,值得进一步深入探讨。     

甲状旁腺激素对小鼠毛发周期和毛发生长的影响

以C57BL6小鼠作为动物模型,观察甲状旁腺激素(PTH)的多肽片段PTH(7～34)和PTH(1～34)对毛发周期和毛发生长的影响。用松香/蜡混合物拔毛法诱导C57BL6小鼠毛发由休止期进入生长期,拔毛同时腹腔注射PTH(7～34),持续19天,观察毛发周期的变化。结果,PTH(7～34)组小鼠在拔毛后第5天毛发进入生长期,比对照组提前24h左右;至第19天,对照组小鼠多数毛发进入退行期或休止期,而PTH(7～34)组仍有大部分毛发维持在生长期。C57BL6乳鼠触须毛囊体外培养结果,加PTH(7～34)10-6mol/L浓度组和10-7mol/L浓度组毛干生长速度显著比对照组加快(P<0.01);而PTH(1～34)10-9mol/L浓度组毛干生长明显慢于对照组(P<0.01)。提示PTH的不同片段对毛发生长有不同影响,PTH(7～34)可延长毛发生长期,促进小鼠毛发生长,而PTH(1～34)则对毛发生长有抑制作用。     

亚油酸对角质形成细胞屏障相关蛋白表达的影响

目的：检测亚油酸对角质形成细胞屏障相关蛋白Filaggrin、keratin-14和claudin-1表达的影响。方法：选用不同浓度的亚油酸(2 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL)刺激人角质形成细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率,并绘制细胞生存/抑制曲线;qRT-PCR和Western blot分别检测不同浓度亚油酸刺激后角质形成细胞Filaggrin、keratin-14和claudin-1的mRNA及蛋白水平的变化。结果：角质形成细胞生存率随亚油酸样品浓度升高而降低。角质形成细胞中Filaggrin和keratin-14的表达随着亚油酸样品浓度升高表达明显增加。claudin-1表达在2 ng/mL和10 ng/mL亚油酸作用下明显增加,而在20 ng/mL浓度下,claudin-1表达下降。结论：在2 ng/mL和10 ng/mL亚油酸作用下,Filaggrin、keratin-14和claudin-1表达随着亚油酸作用浓度升高而增加。     

CD147在角质形成细胞分化过程中的表达和作用

目的 明确CD147在正常角质形成细胞和鳞状细胞癌细胞分化过程中的表达和作用。方法 运用免疫组化法检测不同分化水平的寻常疣以及良性、癌前和恶性表皮肿瘤中CD147的表达。运用免疫印迹法观察CD147在培养角质形成细胞(HaCaT)和鳞状细胞癌细胞(HSC-5)钙诱导分化过程中的表达变化。并观察高钙培养和CD147抗体对HaCaT和HSC-5细胞分化相关形态学的影响。结果 寻常疣及脂溢性角化病的CD147表达方式与正常表皮相同。光线性角化病及Bowen病中部分病例阳性。鳞状细胞癌中CD147的表达随分化降低而显著升高。HaCaT及HSC-5细胞中CD147的表达均随钙诱导的分化过程而降低。CD147抗体可与高钙培养一样诱导HaCaT及HSC-5细胞的分化。结论 CD147分子是一种新的低分化角质形成细胞标志蛋白,并可能抑制正常角质形成细胞和鳞状细胞癌细胞的分化。     

清热凉血方对血热型银屑病患者甲状旁腺激素(PTH)水平的影响

目的观察清热凉血方对血热型银屑病患者外周血甲状旁腺激素(PTH)水平的影响。方法将40例银屑病患者随机分成两组,治疗组和对照组各20例,治疗组予清热凉血方联合卤米松乳膏、卡泊三醇软膏外用治疗,对照组予卤米松乳膏、卡泊三醇软膏外用治疗。同时选取20例年龄、性别相仿、临床体检健康者作为健康对照。2个月为一个疗程,治疗组、对照组患者治疗前后均抽取患者外周血5m L检测PTH水平,并对患者的病情严重程度进行PASI评分及中医证候评分,同时抽取健康组患者外周血5m L检测PTH水平。结果治疗组总有效率为75%,对照组为50%,治疗组治疗后外周血PTH水平较治疗前明显降低,PASI评分及中医证候评分显著优于对照组(P0.01)。结论清热凉血方可能通过降低外周血PTH水平治疗银屑病。     

银屑病进行期皮损和非皮损部位角蛋白6和角蛋白10表达的变化

角蛋白6(K6)和角蛋白10(K10)分别是角质形成细胞增殖和分化的标志,可在表皮基底层上方的细胞中单独或共同表达。有实验表明银屑病皮损内K6表达增加,K10表达降低。作者进一步研究了在银屑病进行期斑块型皮损中,单独或共同表达K6、K10角质形成细胞的比例。     

CD147在尖锐湿疣皮损中的表达及意义

尖锐湿疣(CA)病理改变特点提示，其皮损中部分角质形成细胞存在增殖和分化状态的异常．CD147是一新的角质形成细胞低分化和高增殖状态的标志物，其在CA中的表达情况少见报道。     

促黑素细胞激素

促黑素细胞激素(即促黑素)不仅促进黑素生成,调节角质形成细胞增殖和分化,而且还调控内皮细胞和成纤维细胞细胞因子的产生以及成纤维细胞胶原合成。表、真皮细胞在促炎因子或紫外线刺激后合成和释放促黑素。促黑素的作用通过其特异性黑皮素受体介导,免疫抑制活性通过单核细胞、巨噬细胞实现。促黑素下调抗原递呈细胞上促炎因子的产生,上调抑制因子如白介素-10生成。系统应用促黑素抑制鼠接触性过敏的激发和诱导半抗原耐受,提示促黑素具有黑素生成、抗炎和免疫调节作用。     

皮肤屏障中分化蛋白的研究进展

皮肤屏障是抵御外界不良因素侵扰的第一道防线,其功能主要依靠角质层形成。角质层中角质形成细胞分化蛋白包括丝聚合蛋白(filaggrin,FLG)、内披蛋白(involucrin,IVL)、兜甲蛋白(loricrin,LOR)、角质形成细胞转谷氨酰胺酶、角蛋白1(keratin 1,K1)和角蛋白10(keratin 10,K10)等。该文就分化蛋白近年的研究情况做一综述。     

反义寡核苷酸阻遏角蛋白14的表达

目的 研究脂质体介导角蛋白K14反义寡核苷酸(ASODN)阻遏人角质形成细胞K14基因和蛋白的表达及抑制体外增殖活性的效果.方法 人表皮角质形成细胞原代培养,3~10代用于实验,利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导入角质形成细胞,应用流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化(SABC)方法检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的细胞周期、K14基因和蛋白表达的影响.结果 脂质体介导的K14反义寡核苷酸转染角质形成细胞后,能有效地抑制角质形成细胞中K14基因的表达;48h后可阻遏K14蛋白表达;流式细胞仪检测见反义寡核苷酸处理组细胞周期发生明显改变,G₁期细胞百分率上升,S期细胞百分率下降.而正义寡核苷酸1组、错义寡核苷酸组及空白对照组均无此变化.结论 应用反义技术封闭K14基因,可以阻遏角蛋白K14基因和蛋白的表达,并可以抑制体外培养的角质形成细胞的增殖.     

p53蛋白在UVB诱导凋亡的富集表皮干细胞的角质形成细胞中的表达

目的研究p53蛋白在中波紫外线(ultraviolet lightB,UVB)诱导凋亡的富集表皮干细胞的角质形成细胞群中的表达情况。方法分离富集人表皮干细胞的角质形成细胞群和正常角质形成细胞群,使用UVB诱导两种细胞群凋亡,蛋白印迹法比较不同剂量UVB诱导前后两组细胞的p53蛋白表达的差异。结果两种细胞在不同剂量的UVB照射后p53蛋白表达均比照射前显著增加,在20mJ/cm2与40mJ/cm2照射剂量时,富集人表皮干细胞的角质形成细胞群p53蛋白表达高于正常角质形成的细胞群,差异有统计学意义(P<0.05)。结论富集人表皮干细胞的角质形成细胞p53蛋白表达比其它角质形成细胞对中波紫外线的照射易感。     

人乳头瘤病毒感染中细胞生长分化标志分子的表达

角蛋白10(K10)、角蛋白17(K17)、角蛋白16(K16)、角质形成细胞转谷酰胺酶(TG K)、细丝聚集素是表皮细胞增生分化的重要标志分子。在病理情况下伴随着表皮角质形成细胞的生长分化异常,这些分子可有异常表达^[1,2]。我们通过免疫组化LAB法,以银屑病和正常人皮肤为对照,原位检测了K17、K16、TG K、细丝聚集素、K10在扁平疣、寻常疣、尖锐湿疣中的表达情况,现报道如下。     

绿色荧光蛋白基因转染角质形成细胞的瞬时表达检测

近来的研究已发现皮肤角质形成细胞具有许多功能和活性,它不仅符合基因治疗中靶细胞的基本条件,而且还具有许多优点,如取材方便、易于回植、便于观察和调控基因表达情况及副作用,因而,角质形成细胞被认为是一种理想的靶细胞。为了证实角质形成细胞作为基因转染、基因表达及基因治疗中靶细胞的可行性,本实验将ｐＥＧＦＰＮ３质粒转染皮肤角质形成细胞,并对其瞬时表达情况进行了检测。一、材料和方法（一）实验材料:质粒:ｐＥＧＦＰＮ３质粒由本校病理学教研室赵利军博士惠赠（ＣｌｏｎｔｅｃｈＬａｂｏｒａｔｏｎｅｓ，Ｉｎｃ产品）,该质粒在…     

α-促黑素细胞激素与皮肤炎症

α -促黑素细胞激素除由垂体分泌外 ,还可由皮肤中的角质形成细胞、黑素细胞分泌和释放 ,α-促黑素细胞激素可通过多种途径发挥其对皮肤的抗炎和免疫调节作用。大量研究发现中枢给予、静脉注射及局部外用该激素均可有效地抑制皮肤局部的炎症和免疫反应 ,α -促黑素细胞激素可作为抗炎剂治疗炎症性皮肤病     

黄芩甙对成纤维细胞iNOS表达的影响

表皮的组织结构和功能有赖于角质形成细胞增殖分化平衡,失衡是许多皮肤病如银屑病等的特征。研究表明成纤维细胞源性多种因子可调节角质形成细胞增殖分化平衡,银屑病成纤维细胞表型和功能改变参与银屑病的发病机制[1,2]。由一氧化氮合成酶(NOS)介导合成的一氧化氮(NO)参与各种过度增殖和炎症性疾病。在哺乳动物发现3种NOS异构体,两种依赖于细胞内钙离子水平的升高,称原生型(cNOS),包括局限于内皮细胞的内皮型(eNOS)和表达在中枢神经系统的神经型(bNOS)。第三种诱导型(iNOS)不依赖细胞内钙离子水平,正常情况下不表达,但通过炎症细胞…     

DNA结合蛋白A在银屑病皮损中的表达

目的研究DNA结合蛋白A(DBPA)在银屑病皮损中的表达及其与表皮角质形成细胞分化的关系。方法采用免疫组化和原位杂交的方法检测正常皮肤组织、未受累组织和银屑病皮损中DBPA蛋白和mRNA的表达变化。结果 DBPA蛋白和mRNA强表达于正常组织表皮颗粒层,弱表达于棘层上部;在未受累组织中强表达于颗粒层及棘层上部;在银屑病皮损中,DBPA表达于除基底层的表皮全层。结论 DBPA可能参与银屑病角质形成细胞的分化和增生。     

α-促黑素细胞激素与皮肤炎症

α-促黑素细胞激素除由垂体分泌外，还可由皮肤中的角质形成细胞、黑素细胞分泌和释放，α-促黑素细胞激素可通过多种途径发挥其对皮肤的抗炎和免疫调节作用。大量研究发现中枢给予、静脉注射及局部外用该激素均可有效地抑制皮肤局部的炎症和免疫反应，α-促黑素细胞激素可作为抗炎剂治疗炎症性皮肤病。     

重组人甲状旁腺素(1-34)对角质形成细胞分泌IL-6和IL-8的影响

目的研究人甲状旁腺素(PTH)(1-34)对角质形成细胞分泌IL-6和IL-8的影响,探讨其治疗银屑病的分子机理。方法体外培养人角质形成细胞株(HaCaT),研究中设空白对照组、骨化三醇组、骨化三醇和PTH(1-34)联合组以及1.0×10-7mol/L～1.0×10-10mol/L4个不同剂量的PTH(1-34)给药组。48h后收集上清液,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HaCaT细胞分泌至培养液中IL-6和IL-8的含量。结果在1.0×10-7mol/L～1.010-10mol/L四个梯度浓度PTH(1-34)及联合骨化三醇处理48h后,HaCaT细胞分泌IL-6量和空白对照组、骨化三醇组比较,差异无统计学意义,而IL-8的分泌量明显降低(P<0.05),且1.0×10-7mol/LPTH(1-34)处理组IL-8分泌量明显低于其他各组。结论PTH(1-34)治疗银屑病的作用机制可能部分通过调节IL-8的表达和分泌来实现。