miR-221/miR-222在人甲状腺乳头状癌中的表达增加

正miR-221/miR-222是近几年发现的一类广泛存在于真核生物中、长度约22个核苷酸、进化上高度保守、具有转录后负性调节作用的小分子非编码RNA~([1]),能够负性调节该基因的蛋白表达,进而参与多种重要的细胞传导途径和生理病理过程~([1])。本研究通过分析不同甲状腺组织miR-221/miR-222的表达,探讨miR-221/miR-222在甲状腺癌发     

硫化氢通过KDR/mTOR/miR-640/HIF1A途径促进血管新生

<正>硫化氢(H2S)是一种能够促进血管新生的气体信号分子。本实验中,我们证实了H2S在整体实验和体外实验中均能够促进血管新生。MicroRNAs是一类小的、保守的非编码RNA,能够在缺血性损伤和肿瘤形成过程中调节血管新生。经NaH S(H2S供体)处理的人脐静脉内皮细胞中,miR-640水平显著下降;过表达miR-640阻断H2S的促血管新生效应。同时,双萤光     

抑制miR-21减轻BALB/c小鼠病毒性心肌炎

目的:探讨抑制mi R-21可否减轻CVB3诱导的BALB/c小鼠心脏微血管损伤,阻断致病因子向靶器官迁移,从而减轻靶器官组织病变。方法:3~4周龄雄性BALB/c小鼠CVB3腹腔注射后饲养1周诱导急性病毒性心肌炎(VMC)模型;BALB/c小鼠每月腹腔注射CVB3 1次共饲养3个月,诱导为慢性VMC模型。注射CVB3同时尾静脉注射抗mi R-21质粒以敲低mi R-21表达。结果:急性VMC小鼠外周血mi R-21表达增加,心肌Bcl-2和CVB3-VP1表达增加。小鼠体内注射anti-mi R-21质粒后,外周血mi R-21表达降低,心肌caspase-3活性和CVB3-VP1表达下降,Bcl-2表达增加,HE染色心肌组织及心脏微血管病变减轻,TUNEL染色心肌细胞凋亡减少。慢性VMC小鼠心肌胶原表达增加,微血管密度减少,心功能下降。敲低mi R-21增加慢性VMC小鼠心肌微血管密度,减少胶原沉积,改善小鼠心功能。体外过表达mi R-21诱导CMVECs凋亡,减少心脏微血管新生。结论:靶向抑制mi R-21可能通过抑制CMVECs凋亡,阻断致病因子向靶器官迁移,降低心肌病毒载量、减轻心肌炎心肌病变。慢性VMC小鼠中,可能是通过减少胶原沉积、减轻心肌纤维化,增加微血管新生,改善心功能。因此,mi R-21可能是治疗病毒性心肌炎的新靶点。     

强直性脊柱炎患者外周血中miR-17、miR-181、miR-106、miR-30和miR-495表达的分析

目的:为了探讨microRNA在强直性脊柱炎患者发病过程中的作用,我们通过检测强直性脊柱炎患者外周血液中miR-17、miR-181、miR-106、miR-30和miR-495的表达情况,从而为研究microRNA在强直性脊柱炎发病机制中的调控作用和临床诊断价值提供新的思路。方法:收集强直性脊柱炎患者及正常人的外周血液,对外周血液中单个核细胞进行分离,并提取PBMC small RNA,用特异性茎环引物反转录成cDNA,并构建成熟的miR-17、miR-181、miR-106、miR-30和miR-495的T载体,制作标准曲线,利用stem-loop法通过Real-time PCR技术,检测miR-17、miR-181、miR-106、miR-30和miR-495的表达量。结果:本实验共收集临床样本92例,其中AS患者61例,正常人31例。通过Real-time PCR检测发现,与正常人相比,在强直性脊柱炎患者外周血中表达上调的有miR-106(P>0.05)与miR-30(P>0.05);表达下调的有miR-181(P<0.05)、miR-495(P<0.05)和miR-17(P>0.05),其中miR-181和miR-495有统计学意义。结论:与正常人相比在强直性脊柱炎患者外周血中miR-181和miR-495的表达量存在差异,它们可以靶向调控TLR-4,HLA-B,DVL和GSK/3β等基因,这一发现可能为强直性脊柱炎发病机制的研究提供新的思路,成为临床诊断中新的标志物。     

外周血miR-21、miR-155与自身免疫性肝病患者Th17/Treg的相关性研究

目的:探讨自身免疫性肝病患者外周血微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)、微小RNA-155(microRNA-155,miR-155)与辅助性T细胞17(Helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的关系.方法:选取我院2018年1月至2019年1月65例自身免疫性肝病患者作为观察组,同时期选取我院65例健康体检者为对照组,采用流式细胞仪测定外周血Th17以及Treg,采用荧光定量PCR检测外周血miR-21、miR-155,分析外周血miR-21、miR-155水平与Th17/Treg间的关系.结果:观察组患者miR-21、miR-155、Treg、Th17含量及Th17/Treg水平均明显高于对照组(P<0.05),相关性分析结果显示,Th17/Treg与miR-21及miR-155均呈正相关(P<0.05).结论:自身免疫性肝病患者miR-155、miR-21及相关T细胞外周血水平显著升高,其中Th17/Treg与miR-155、miR-21含量正相关.     

miR-155/自噬/外泌体对酒精性肝病的影响

目的:研究酒精性肝病(ALD)中酒精持续激活小鼠肝脏巨噬细胞(即Kupffer细胞)并诱发肝脏炎性损伤的机制。方法:使用Gao-binge法制备慢性ALD小鼠模型,观察肝损伤,检测外泌体的浓度和大小分布,Western blot和RT-qPCR检测自噬相关蛋白和微小RNA-155(miR-155)的表达。体外实验中,对小鼠肝细胞系AML-12予以乙醇刺激24 h,制备肝细胞损伤模型,检测相关指标的变化。结果:酒精液体饮食导致小鼠肝细胞空泡变性、肝组织的脂质沉积和炎症细胞浸润,显示ALD疾病动物造模成功。与对照饮食组相比,酒精饮食喂养的小鼠肝脏肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、一氧化氮合酶2(NOS-2)、F4/80和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的mRNA表达升高,同时伴随肝细胞外泌体的生成成倍增加,提示慢性酒精摄入诱导的巨噬细胞过度活化与外泌体分泌增多有关。进一步研究表明,酒精饮食小鼠肝脏溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)和LAMP2的表达降低,细胞自噬通量显著受损,肝脏miR-155的表达明显升高。体外实验显示,酒精可直接诱导AML-12细胞miR-155表达,减少LAMP1和LAMP2表达,抑制细胞自噬通量,促进外泌体分泌。同时,乙醇处理组外泌体与pdTHP-1巨噬细胞共孵育后,细胞内TNF-α和IL-1β的mRNA表达显著增加,说明其外泌体可直接激活巨噬细胞。结论:酒精通过刺激肝脏miR-155介导的自噬和外泌体分泌,诱导肝细胞外泌体及其携带的致炎因子释放显著增加,是ALD中肝脏巨噬细胞持续过度激活的重要因素。     

miR-7抑制剂治疗MRL/lpr小鼠的实验性研究

目的：探讨miR-7抑制剂治疗MRL/lpr小鼠的疗效。方法：选取30只MRL/lpr小鼠,随机分为miR-7抑制剂（miR-7 antagomir）组、环磷酰胺（CTX）组和生理盐水（Saline）对照组,10只/组。MRL/lpr小鼠13周时开始治疗,以上药物分别连续给药5周。每周观察各组小鼠一般状况并称重,留取血清和尿液标本。ELISA检测13～17周三组小鼠血清ANA、抗dsDNA抗体、C3水平,并检测上述各周三组小鼠尿蛋白水平。流式细胞术检测三组小鼠Tfh细胞比例变化。RT-PCR检测三组小鼠脾脏和淋巴结miR-7和PTEN mRNA表达水平。HE、PAS、PASM染色观察光镜下三组小鼠的肾脏病理情况。结果：治疗5周后,形态学方面：与Saline组相比,miR-7 antagomir组和CTX组小鼠一般状况良好,体质量随周龄增加而增加。血清学方面：miR-7 antagomir组和CTX组血清ANA和抗ds-DNA抗体较Saline组明显下降,补体C3水平明显上升,但两治疗组间上述指标差异均无统计学意义。细胞学方面：miR-7 antagomir组小鼠脾脏Tfh细胞比例明显低...     

脑胶质瘤患者血清miR-21、miR-221、miR-222和miR-10b的相对表达量及临床意义

目的 探讨血清中miR-21、miR-221、miR-222和miR-10b对脑胶质瘤恶性程度的鉴别价值.方法 采用Real-timePCR技术检测34例低级别脑胶质瘤患者和50例高级别脑胶质瘤患者miR-21、miR-221、miR-222和miR-10b的相对表达量,使用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评价其诊断价值.结果 与低级别脑胶质瘤组相比,高级别脑胶质瘤组血清miR-10b、miR-21和miR-221的相对表达量均显著升高,且差异具有统计学意义,miR-222相对表达量的差异无统计学意义.ROC曲线评价血清miR-10b、miR-21和miR-221对于脑胶质瘤恶性程度的诊断价值,miR-10b的曲线下面积(area under curve,AUC)值最大,为0.722(0.694,0.751),对于低级别脑胶质瘤的诊断敏感性和特异性分别为79.41％和78.00％.使用二元Logistic回归分析评价血清miR-10b、miR-21和miR-221联合检测对于脑胶质瘤恶性程度的诊断价值,其曲线下面积为0.915(0.855,0.977),对于低级别脑胶质瘤的诊断敏感性和特异性分别为85.29％和88.00％.与miR-10b、miR-21和miR-221单独检测的诊断价值相比,其曲线下面积均有显著提高(P=0.026、P=0.012、P=0.008).结论 miR-10b、miR-21和miR-221联合诊断可以为临床脑胶质瘤患者的鉴别诊断提供一种潜在的辅助诊断方法.     

miR-155作用于Rho/ROCK参与内毒素血症幼鼠肝损伤

为了研究miR-155在内毒素血症幼鼠肝损伤中的作用,将60只幼年Wistar鼠随机分为内毒素模型组、miR-155抑制组和空白组。模型组幼鼠通过腹腔内一次性注射LPS(20mg/kg)构建内毒素血症模型。miR-155抑制组幼鼠在腹腔内注射LPS后,再经尾静脉注射miR-155抑制剂(80mg/kg)。空白组幼鼠腹腔内注射等量生理盐水。各组建模2d后,进行肝脏生化指标、肝组织病理学、肝细胞凋亡、炎症蛋白、通路蛋白等项目的检测。实验结果表明,模型组幼鼠血液内miR-155的表达量、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平显著高于空白组,miR-155抑制组ALT和AST水平显著低于模型组(P <0.05);模型组幼鼠肝细胞肥大且不规则,细胞排列紊乱,胞浆空泡增多;空白组幼鼠肝细胞排列整齐,仅少量肝细胞颗粒变性;miR-155抑制组肝细胞病理变化较少,细胞结构较完整;模型组细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)、TNF-α和IL-10水平显著高于miR-155抑制组(P <0.05)和空白组(P <0.05);模型组Bcl-2/Bax显著低于空白组(P <0.05)和miR-155抑制组(P <0.05);模型组Ras同源基因A蛋白(Ras homolog gene family member A,RhoA)、Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶1(Rho-associated coiled coil-forming protein kinase 1,ROCK1)和Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶2(Rho-associated coiled coil-forming protein kinase 2,ROCK2)水平明显升高,而miR-155抑制组3种蛋白水平均显著下降。以上发现提示,miR-155可能通过调控Rho/ROCK通路参与内毒素血症幼鼠的肝损伤。     

miR-21通过PTEN/AKT减轻突变亨廷顿蛋白细胞毒性

目的探讨miR-21减轻突变亨廷顿蛋白(mutant huntingtin,mHtt)细胞毒性的机制。方法利用qRT-PCR检测miR-21在亨廷顿病(Huntington’s disease,HD)转基因小鼠脑组织以及HEK293-160Q细胞中的变化;双荧光素酶实验检测PTEN是否为miR-21的靶基因;转染miR-21 mimics后,CCK8检测细胞活力,Caspase-3活性酶标检测Caspase-3活性,Western blotting检测PTEN、Ser-473位点磷酸化的AKT以及AKT。结果qRT-PCR结果显示,与野生型小鼠及HEK293-20Q细胞相比,HD转基因小鼠脑组织及HEK293-160Q细胞中miR-21均显著降低;双荧光素酶实验证实PTEN为miR-21靶基因;在HEK293-160Q细胞中转染miR-21 mimics后PTEN显著降低、p-AKT-Ser 473/AKT显著升高。结论miR-21能通过降低PTEN来提高p-AKT-Ser 473/AKT,减轻mHtt所引起的细胞毒性继而提高细胞活力、抑制细胞凋亡。     

沉默miR-26a减轻缺血/再灌注大鼠心肌损伤

目的探讨微核糖核酸(miR-26a)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(I/R)的影响。方法将大鼠随机分为对照组(n=20)、I/R组(n=20)和siRNA组(n=20)。建立大鼠I/R模型前7 d,尾静脉注射miR-26a siRNA沉默内源性miR-26a。超声心动图检测心脏射血分数(EF%)和缩短分数(FS%);2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色测定心肌梗死面积;HE染色法检测心肌细胞形态;TUNEL法检测心肌细胞凋亡水平;Western blot检测心肌组织中促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)和活性半胱天冬酶-3(caspase-3)和Rho/RhoA信号通路相关蛋白表达。结果 I/R组心肌组织中miR-26a的表达明显高于对照组(P0.05)。siRNA组心功能不全显著改善,大鼠的EF%和FS%均提高(P0.05)。此外,siRNA组I/R所致的心肌梗死程度明显减轻,心肌梗死面积百分比由43.08%±2.43%减小到21.54%±1.82%(P0.05)。siRNA组肌丝排列较整齐,心肌坏死程度较低,细胞水肿较I/R组明显减轻。siRNA组大鼠心肌细胞凋亡水平明显低于I/R组(P0.05),Bax和caspase-3表达水平也明显下降(P0.05)。miR-26a抑制可以显著降低I/R时Rho/RhoA信号通路蛋白表达(P0.05)。结论 miR-26a沉默可能通过降低Rho/RhoA信号通路蛋白表达抑制I/R所致心肌细胞凋亡。     

miR-18a、miR-17和miR-20在结直肠癌组织中表达增高

目的 MicroRNAs(miRNAs)是一类在转录后调控基因表达的非编码RNA,越来越多的证据显示:一些在肿瘤中异常表达的miRNAs,有做为肿瘤诊断分子标记和判断预后的潜在价值.该研究应用miRNAs芯片技术筛选结直肠癌组织中差异表达的miRNAs,探索与结直肠癌相关的miRNAs.方法 从3对手术切除的结直肠癌和相配对的正常结直肠组织中提取总RNA,miRNA芯片检测miRNA表达情况,然后在90例配对的结直肠癌和正常结直肠组织中,用Real-time RT-PCR(Taqman)对部分差异表达miRNA进行验证.结果 与配对的正常结直肠组织相比,有22个miRNAs在结直肠癌中异常表达,其中miR-18a、miR-17和miR-20经Real-time RT-PCR(Taqman)验证,在结直肠癌组织中表达显著增高(P=0.006,0.023,0.034).结论 miR-18a、miR-17和miR-20可能参与了结直肠癌的发生过程.     

血清miR-145、miR-29联合miR-217检测在膀胱癌的表达差异及价值分析

目的探讨血清微小RNA-145(microRNA-145,miR-145)、miR-29与miR-217检测在膀胱癌中的临床价值。方法选取2016年2月至2018年5月在我院经穿刺或术中病理切片确诊的膀胱癌患者80例,同期收取80例膀胱炎患者和80例健康体检者。应用实时荧光定量PCR(quantitative real-timePCR,RT-PCR)仪对血清miR-145、miR-29与miR-217的相对表达量进行检测。结果膀胱癌患者血清miR-145、miR-29和miR-217表达水平(检测结果经负对数转换后呈正态分布)显著低于膀胱炎患者和健康对照者(P<0.05),而膀胱炎患者和健康对照者间血清miR-145、miR-29和miR-217水平差异均无统计学意义(P>0.05)。血清miR-145、miR-29与miR-217表达水平与膀胱癌淋巴结转移及TNM分级呈线性关联(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-145、miR-29和miR-217在区分膀胱癌与膀胱炎患者和健康对照的灵敏度/特异性分别为81.3%/82.9%、82.7%/89.7%和77.2%/83.3%;而联合三者后在区分膀胱癌与膀胱炎患者和健康对照的灵敏度显著提高,达到91.7%。二元Logistic回归分析显示,在校正了年龄、性别、BMI、吸烟、饮酒后,血清低miR-145、低miR-29和低miR-217是膀胱癌的独立危险因素。结论血清低miR-145、低miR-29和低miR-217水平对膀胱癌的诊断以及在评估膀胱癌患者发生肿瘤远处转移中均具有重要的临床意义。     

miR-21的研究进展

小RNA或微RNA（microRNAs，miRNAs)是内源性的小非编码RNA，对基因表达进行转录后的负向调控。目前已发现数以千计的miRNA，其中只有少数miRNA功能得到了确定，而绝大部分还是未知。相对于其它生物，人类miRNA功能的研究更为复杂。miR-21是较早发现的人类miRNA之一，因其较为明确的存在背景，而成为人类miRNA功能研究中的重要工具。对miR-21的研究使人们对miRNA的理解不断深入。     

Effects of 5,14-HEDGE,a 20-HETE mimetic,on lipopolysaccharide-induced changes in MyD88/TAK1/IKKβ/IκB-α/NF-κB pathway and circulating miR-150, miR-223, and miR-297 levels in a rat model of septic shock

Objectives

We have previously demonstrated that a stable synthetic analog of 20-hydroxyeicosatetraenoic acid (20-HETE), N-(20-hydroxyeicosa-5[Z],14[Z]-dienoyl)glycine (5,14-HEDGE), which mimics the effects of endogenously produced 20-HETE, prevents vascular hyporeactivity, hypotension, tachycardia, inflammation, and mortality in a rodent model of septic shock. The present study was performed to determine whether decreased renal and cardiovascular expression and activity of myeloid differentiation factor 88 (MyD88)/transforming growth factor-activated kinase 1 (TAK1)/inhibitor of κB (IκB) kinase β (IKKβ)/IκB-α/nuclear factor-κB (NF-κB) pathway and reduced circulating microRNA (miR)-150, miR-223, and miR-297 expression levels participate in the protective effect of 5,14-HEDGE against hypotension, tachycardia, and inflammation in response to systemic administration of lipopolysaccharide (LPS).

Methods

Conscious male Wistar rats received saline (4 ml/kg) or LPS (10 mg/kg) at time 0. Blood pressure and heart rate were measured using a tail-cuff device. Separate groups of LPS-treated rats were given 5,14-HEDGE (30 mg/kg) 1 h after injection of saline or LPS. The rats were killed 4 h after LPS challenge and blood, kidney, heart, thoracic aorta, and superior mesenteric artery were collected for measurement of the protein expression.

Results

LPS-induced fall in blood pressure and rise in heart rate were associated with increased MyD88 expression and phosphorylation of TAK1 and IκB-α in cytosolic fractions of the tissues. LPS also caused an increase in both unphosphorylated and phosphorylated NF-κB p65 proteins in the cytosolic and nuclear fractions as well as nuclear translocation of NF-κB p65. In addition, serum miR-150, miR-223, and miR-297 expression levels were increased in LPS-treated rats. These effects of LPS were prevented by 5,14-HEDGE.

Conclusions

These results suggest that downregulation of MyD88/TAK1/IKKβ/IκB-α/NF-κB pathway as well as decreased circulating miR-150, miR-223, and miR-297 expression levels participate in the protective effect of 5,14-HEDGE against hypotension, tachycardia, and inflammation in the rat model of septic shock.     

LncRNA MALAT1/miR-30a/SOX4通路调节膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的探讨MALAT1-mir-30a-5p-SOX4轴在膀胱癌中的调控机制,以期阐明膀胱癌的分子机制和潜在的治疗靶点。方法 RT-PCR检测mir-30a-5p、MALAT1及SOX4在膀胱癌细胞中的表达;荧光素酶报告检测验证mir-30a-5p和SOX4之间的生物学关系。通过体外实验研究mir-30a-5p和SOX4在T24细胞中的生物学功能,包括CCK-8法检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞侵袭,划痕法检测细胞迁移;Western blot检测蛋白表达。结果在膀胱癌细胞中,MALAT1的表达上调,mir-30a-5p表达下调(P0.01);而sh-MALAT1抑制T24细胞增殖、侵袭和迁移(P0.01)。进一步的研究表明,MALAT1可以直接与mir-30a-5p相互作用,且SOX4是mir-30a-5p的靶点,SOX4可以被mir-30a-5p过表达下调(P0.01)。结论敲除MALAT1可解除MALAT1对mir-30a-5p的抑制从而抑制SOX4,MALAT1可能通过调节miR-30a/SOX4通路调节膀胱癌的增殖、侵袭和转移。     

p53/miR-502-5p/TRAF2通路对骨关节炎软骨细胞损伤的影响

目的:探究微小RNA-502-5p(miR-502-5p)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的骨关节炎(OA)软骨细胞损伤的影响。方法:Western blot和RT-q PCR检测骨关节炎患者软骨组织和IL-1β诱导的软骨细胞中p53和miR-502-5p的表达;分离培养软骨,并分组处理细胞,分别用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测炎性因子和细胞外基质(ECM)相关蛋白的表达,另外,萤光素酶报告实验检测miR-502-5p对p53及肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)的调控作用。结果:与正常软骨组织相比,OA患者软骨组织中miR-502-5p的水平显著降低,p53和TRAF2水平则明显升高(P0.05)。IL-1β处理软骨细胞后,细胞活力下降、细胞凋亡率增加、IL-6、IL-8和TNF-α的蛋白表达水平显著上升;Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的蛋白表达显著下调,基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9和MMP-13等的蛋白表达显著上调,miR-502-5p mimic转染反转了IL-1β对软骨细胞的这些作用。此外,p53与miR-502-5p之间存在负反馈调节,同时miR-502-5p能够靶向抑制TRAF2的水平。TRAF2沉默同样反转了IL-1β对软骨细胞增殖、凋亡、炎症反应以及ECM相关蛋白表达的影响。结论:调节p53/miR-502-5p/TRAF2通路能够减轻IL-1β诱导的骨关节软骨细胞损伤。     

CASC2/miR-18a/BTG3信号抑制非小细胞肺癌迁移和侵袭

目的:研究长链非编码RNA CASC2在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭中的作用及调控机制。方法:RT-qPCR和Western blot法检测正常人支气管上皮细胞系16-HBE及NSCLC细胞系A549和H1299中CASC2、微小RNA-18a (miR-18a)和BTG3的表达;生物信息学预测CASC2和miR-18a及miR-18a和BTG3的靶向关系,并利用双萤光素酶报告基因实验加以验证;Transwell小室法检测NSCLC细胞的迁移和侵袭能力;RT-qPCR和Western blot测定CASC2对miR-18a和BTG3表达的调控。结果:与16-HBE细胞相比,CASC2和BTG3在NSCLC细胞系中表达量明显下调,而miR-18a出现明显的高表达(P0.05);CASC2能够靶向吸附miR-18a,且BTG3被证实是miR-18a的一个靶基因;CASC2过表达抑制NSCLC细胞的迁移和侵袭能力,但外源回补miR-18a可促进细胞的迁移和侵袭;外源回补miR-181a可逆转CASC2对BTG3蛋白表达的促进作用。结论:CASC2通过负调控miR-18a促进BTG3表达,进而抑制NSCLC细胞的迁移和侵袭。     

皮肤恶性黑色素瘤组织miR-205、miR-367表达及其临床意义

目的 探讨皮肤恶性黑色素瘤（CMM）组织中miR-205、miR-367的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法选取2013年5月至2019年12月我院收治的85例CMM患者术中切除的肿瘤组织作为CMM组,另选取同期于本院治疗的80例皮肤良性色素痣患者的痣组织标本作为对照组。采用qRT-PCR法检测miR-205、miR-367的表达水平。收集CMM患者的临床病理资料,分析miR-205、miR-367表达与临床病理特征的关系。Kaplan-Meier法绘制患者术后3年的生存曲线,采用Log-rank检验分析患者生存率。COX比例风险回归模型分析预后的影响因素。结果 CMM组患者miR-205表达水平低于对照组（P<0.05）,miR-367表达水平高于对照组（P<0.05）。miR-205低表达组患者溃疡、临床分期高、肿瘤侵袭、KPS评分低、原发灶厚、Clark分级高、淋巴结转移的比例高于miR-205高表达组（P<0.05）,miR-367高表达组患者以上指标比例高于miR-367低表达组（P<0.05）。随访3年,中位时间为28.3个月,失访1例。Kapl...     

联合靶向阻断miR-29b/92b/106b抑制胃癌细胞生长及迁移

目的:本研究旨在寻找胃癌转移相关微小RNA(microRNA,miRNA,miR),揭示其对胃癌细胞生物学功能的影响,并探讨联合阻断候选miRNA在胃癌治疗中的临床应用价值。方法:收集发生淋巴结转移及无转移患者的胃癌标本各3例,采用miRNA表达芯片筛选转移相关的候选miRNA;将锁核酸修饰的候选miRNA的反义寡核苷酸转染BGC-823胃癌细胞株,运用CCK-8法、流式细胞术、划痕实验及Transwell迁移实验分析候选miRNA抑制前后胃癌细胞生物学功能的变化;构建多西环素诱导多重靶向候选miRNA的裸鼠移植瘤模型,观察联合靶向阻断候选miRNA后,肿瘤细胞体内生长情况。结果:miRNA表达芯片发现miR-29b、miR-92b及miR-106b在发生淋巴结转移患者的胃癌组织最高,并将它们确定为胃癌转移相关候选miRNA;分别在BGC-823细胞中抑制上述miRNA,可导致细胞活力减弱,凋亡诱导增加,迁移能力显著下降(P 0. 05);同时,体内联合阻断miR-29b/92b/106b,裸鼠移植瘤的形成较对照组显著减少。结论:miR-29b、miR-92b及miR-106b与胃癌细胞的迁移有关,联合阻断上述miRNA可明显抑制胃癌细胞体内外生长。这3个miRNA可能作为潜在的治疗靶点。