通心络对低压低氧性肺动脉高压大鼠HIF-1α及相关因子的作用

目的:探讨通心络对低压低氧性肺动脉高压大鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及相关因子的影响。方法:30只体重200-250g的SD雄性大鼠,随机分为常压常氧对照组(对照组)、低压低氧模型组(模型组)、低压低氧+通心络干预组(通心络干预组),每组10只。采用低压低氧舱模拟海拔5 000m的高原环境(大气压50kp,氧浓度10%)。模型组和通心络干预组大鼠每日入舱8h,其余时间为常压常氧环境。通心络干预组每天入舱前给予通心络1.2g生药/kg灌胃1次,对照组于同一实验室的常压常氧环境中饲养。4周后比较各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室(RV)肥厚指数以及血清HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素-1(ET-1)等因子水平。结果:4周后,与对照组相比,模型组大鼠mPAP、RV肥厚指数及HIF-1α、VEGF、ET-1等因子水平显著升高(P0.05)。与模型组相比,通心络干预组大鼠mPAP、RV肥厚指数及血清HIF-1α、VEGF、ET-1等因子水平均显著降低(P0.05),且RV肥厚指数及血清HIF-1α、ET-1水平与对照组水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:通心络可能通过降低HIF-1α水平等干预低压低氧性肺动脉高压的发生发展。     

GSTP1基因在急性低压低氧大鼠模型肺组织中的定量检测

通过模拟低压低氧(7000±50 m)考察谷胱苷肽转移酶p1基因(G lu tath ione S-transferase p1,G STP 1)对低压低氧的敏感性,以探讨G STP 1在机体适应急性低压低氧环境中的分子机制。30只雄性SD大鼠随机分为5组:0、1、3、5、7 d组,每天在模拟7000±50 m高度的低压低氧舱内暴露12 h,连续暴露6 h后,休息1 h,再继续暴露6h。采用荧光定量-反转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)技术对急性低压低氧大鼠模型肺组织中G STP 1基因表达进行定量分析,同时用分光光度法测定了肺组织中谷胱苷肽转移酶(g lu tath ione S-transferases,G ST s)的活性和丙二醛(M a le ic d ia ldehyde,M DA)的变化。结果显示,与未暴露组相比,G STP 1基因从第1 d到第7 d的表达有显著性差异(P<0.05);G ST s活性从第1 d到第7 d呈下降趋势,M DA呈上升趋势,与未暴露组相比,均有显著性差异(P<0.05)。结果表明:G STP 1基因对低压低氧敏感,并可考虑作为机体适应特殊环境进行基因选材的一个新指标。     

血小板活化因子受体拮抗剂对实验性肾病综合征的疗效观察及机制探讨

目的:探讨血小板活化因子受体拮抗剂对实验性肾病综合征的疗效及机制。方法: 实验大鼠均复制成阿霉素(ADR)肾病模型,分为2组:ADR肾病组和ADR肾病+血小板活化因子(PAF)受体拮抗剂(BN52021)组。结果: ADR肾病+BN52021组大鼠各期尿蛋白量、血清总蛋白下降幅度、血清胆固醇上升幅度均显著低于ADR肾病组(P＜0.05),第21 d时血清肌酐含量显著低于ADR肾病组(P＜0.05);电镜下肾组织病理改变显著轻于ADR肾病组。ADR肾病组中,肾皮质PAF最大产量在14 d(先于最大蛋白尿量),而肿瘤坏死因子(TNFα)最大含量在21 d,而且, ADR肾病+BN52021组肾皮质内PAF、TNFα含量显著低于ADR肾病组。结论: PAF可能直接或间接通过刺激肾小球固有细胞(肾小球系膜细胞、上皮细胞等)产生TNF导致肾小球损伤,PAF拮抗剂可能通过抑制肾皮质内PAF、TNFα合成,而减轻肾小球损伤。     

丹参治疗重症急性胰腺炎的血液流变学及其相关指标的实验研究

目的 :观察丹参对犬重症急性胰腺炎 (SAP)的血液流变学及其相关指标的影响。方法 :实验分三组 :正常对照组 (NC)、重症急性胰腺炎组 (SAP)和复方丹参干预组 (TS)。用 5 %牛磺胆酸钠和牛胰蛋白酶混合液胰管注入 ,制备犬SAP模型。TS组于模型制备后 15min和 12h分别静脉滴注复方丹参(2ml/kg)。术后动态观察各组以下指标 :血液流变学、血小板活化因子(PAF)、血栓素A2 (TXA2 )、前列腺素I2 (PGI2 )、内皮素 (ET)和一氧化氮(NO)。结果 :SAP组TXA2 、PGI2 、ET、NO、PAF较NC组显著升高 (P <0 .0 1) ,血液流变学指标也有显著的改变 (P <0 .0 1) ;复方丹参对各项指标均有不同的影响 (P <0 .0 5 )。结论 :血液流变性、炎性介质PAF、二对血管活性物质TXA2 /PGI2 和ET/NO均是介导SAP胰腺血循环障碍的重要因素 ,复方丹参是有效的治疗措施之一。     

红景天苷对低压低氧诱发大鼠脑损伤的保护作用

目的观察红景天苷对低压低氧暴露大鼠脑损伤的保护作用,初步探讨红景天苷预防低压低氧脑损伤的可能机制。方法利用低压低氧小动物模拟实验舱,模拟海拔6000 m急性暴露,制备低压低氧脑损伤大鼠模型。检测各组大鼠呼吸频率改变,利用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠海马齿状回(DG)区细胞凋亡情况,利用Western blot法检测海马DG区Ras同源分子家族成员A(Rho A)的表达和磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK)、c-Jun氨基端激酶(p-JNK)的水平变化。结果模拟海拔6000 m急性暴露后,大鼠呼吸频率显著增加,低压低氧脑损伤引起大鼠海马DG区神经元发生凋亡,大鼠海马DG区组织中Rho A表达下降,ERK和JNK蛋白磷酸化水平下降;红景天苷干预可显著减少海马DG区神经元凋亡,并逆转Rho A蛋白表达和ERK和JNK蛋白的磷酸化水平。结论急性低压低氧暴露引起海马DG区神经细胞凋亡,红景天苷对低压低氧暴露诱发神经细胞凋亡起到保护作用。     

慢性低压低氧暴露对小鼠海马CA1区神经元树突棘形态及细丝蛋白A表达的影响

目的:探讨低压低氧暴露对小鼠海马CA1区神经元树突棘形态及细丝蛋白A表达的影响。方法:6～8周龄C57BL/6雄性小鼠分为常氧暴露7 d组、常氧暴露14 d组、低压低氧暴露7 d组和低压低氧暴露14 d组。低压低氧暴露组置于低压舱模拟6 000 m海拔高原进行低压低氧暴露。Golgi染色法观察小鼠海马CA1区树突的分支数,以及基树突棘和顶树突棘长度和密度的变化; Western blot方法检测小鼠海马细丝蛋白A表达水平的变化;免疫组织荧光染色法检测小鼠海马CA1区细丝蛋白A的表达及分布变化。结果:与常氧暴露组相比,低压低氧暴露后,小鼠海马CA1区树突分支数的差异无统计学显著性,但基树突棘和顶树突棘的长度显著增加(P 0. 05),密度显著降低(P 0. 01)。低压低氧暴露后,小鼠海马细丝蛋白A表达水平低于常氧暴露组(P 0. 01或P0. 05)。免疫组织荧光染色显示细丝蛋白A在小鼠海马CA1区表达,低压低氧暴露后,海马CA1区细丝蛋白A表达水平降低(P 0. 05)。结论:慢性低压低氧暴露可影响小鼠海马CA1区细丝蛋白A表达,并导致海马CA1区神经元树突棘形态发生改变。     

芪参复康胶囊对心理应激促发的高原肺损伤的效果研究

目的 研究芪参复康胶囊对心理应激促发的高原低压低氧环境下大鼠肺损伤的干预效果.方法 雄性SD大鼠随机分为低氧组,实验组(低氧+应激)和芪参复康胶囊干预组(低氧+应激+药物).应激采用旁观电击心理应激模型.模拟高原低压低氧环境处置,把大鼠置于模拟海拔6000m低压舱内24h.用推挽灌流的方法收集海马细胞外液,用高效液相色谱—电化学测定海马细胞外液中的去甲肾上腺素(NE)的含量.通过测定大鼠肺湿/干比值、肺湿重/体重比值和与细支气管伴行小血管“袖套”面积/血管面积的比值来评定肺损伤程度.结果 ①实验组海马细胞外液中的NE含量、肺湿/干比值和血管“袖套”/血管比值均显著高于低氧组(t=2.453,2.514,2.813;P均＜0.05);②干预组海马细胞外液中的NE含量、肺湿/干比值和血管“袖套”/血管比值均显著低于实验组(t=2.183,2.171,2.242;P均＜0.05).结论 芪参复康胶囊能有效预防心理应激促发的低压低氧环境下的大鼠肺损伤.     

低氧减弱CD4~+T细胞激活降低脑脊髓炎小鼠神经病理损伤

目的:分别于常氧环境和低压低氧环境下建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型,通过测定小鼠的神经病理损伤和外周免疫激活,评估低压低氧环境对EAE小鼠的病理影响和潜在机制。方法:C57BL/6J雌性小鼠皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-35(MOG33-35),建立EAE模型,于常氧环境和低压低氧环境(模拟海拔4500 m)分别暴露32 d,通过测定小鼠体重、临床病理评分(CS)评估小鼠病理损伤,利用苏木精-伊红(HE)染色测定中枢神经系统(CNS)炎性浸润、腊克沙固蓝(LFB)染色评估白质脱髓鞘状况,并利用CD3、CD4、IL-17α和IFN-γ免疫组织化学染色明确CNS浸润的免疫细胞种类;此外,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清细胞因子IL-17α、IFN-γ和IL-21水平,流式细胞分析测定脾脏CD4+效应T细胞中IL-17α+、IFN-γ~+和IL-2+细胞比例,进而评估小鼠外周免疫激活状态。结果:与常氧EAE组小鼠相比,低压低氧EAE组小鼠临床病理评分在疾病高峰期显著降低,同时HE染色和LFB染色显示CNS炎性浸润和白质脱髓鞘均显著减轻,提示小鼠神经病理损伤减轻。此外,低压低氧EAE小鼠CNS中CD3~+、CD4~+、IFN-γ~+细胞浸润显著减少,同时血清中IFN-γ和IL-17α细胞因子水平显著降低,脾脏激活的IL-17α+、IFN-γ+的CD4~+效应T细胞比例显著降低,提示低压低氧导致EAE小鼠外周免疫激活减弱,可能是中枢浸润免疫细胞减少的主要原因。结论:低压低氧环境可以通过减弱外周CD4~+T细胞的免疫激活,减少IFN-γ和IL-17α细胞因子的分泌,从而减少CNS免疫细胞浸润,降低EAE小鼠神经病理损伤。     

血小板活化因子对大鼠肾脏系膜细胞作用及机制探讨

目的观察血小板活化因子 (PAF)对大鼠肾小球系膜细胞 (GMC)作用 ,探讨其作用机制 ,并寻找由PAF诱导GMC损伤的保护方法。方法Wistar大鼠 ,160～200g,用改良的Hapar方法培养肾小球系膜细胞。分别置于硅化试管中 ,随机分为5组。①PAF组 ,调整RPML1640培养液中含PAF含量和45CaCl2,浓度为10 -7mmol/L和1.25mmol/L,分别测定GMC存活率、细胞内蛋白漏出量、细胞丙二醛 (MDA)、测定45Ca 的放射活性。②MnSO4 组 :调整细胞悬液中MnSO4 浓度为5×10 -4mmol/L ,测定内容同PAF组。③Verapamil(异博定 )组调整细胞悬液中Verapamil浓度为2×10 -4mmol/L,测定内容同PF组。④银杏皂甙组 :调整细胞血液中银杏皂甙提取物为浓度为100μg/ml外 ,测定内容同PF组。⑤对照组 :细胞悬液中不含PAF,测定内容同PF组。结果经PAF刺激后GMC死亡率显著升高 ,细胞外钙内流、细胞pr漏出、细胞脂质过氧化显著加强 (P<0.01)。应用Verapamil可显著减少细胞外钙内流 ,减少GMC死亡率 (P<0.01)。结论应用银杏叶醇提取物可显著减少GMC死亡率细胞脂质过氧化     

高剪切场诱导血小板活化和聚集机制的研究进展

剪切诱导血小板聚集(shear-induced platelet aggregation,SIPA)是动脉血栓的重要成因。在高剪切流场下血小板由膜表面膜糖蛋白(GP Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ和GP Ⅱb／Ⅲa)与血浆中的von Willebrand因子(vWF)介导发生活化、黏附和聚集。但在低剪切流场却观察不到这种现象,因而SIPA现象是生化因素和力学因素的耦合作用的结果。作者以介导血小板聚集的蛋白质分子为线索综述了近年来有关SIPA机制的研究成果,并提出从力学环境与生化反应的耦合关系入手研究SIPA现象触发机制是今后值得深入的研究方向。     

慢性缺氧和炎性细胞因子刺激对大鼠颈动脉体中IL-1β表达的影响

采用免疫组织化学染色和图像分析方法观察慢性低压性缺氧和腹腔注射重组鼠IL-1β(rmIL-1β)对颈动脉体中IL-1β表达的影响。雄性SD大鼠20只,随机分为4组:T1组缺氧并腹腔注射rmIL-1β;T2组单纯缺氧;T3组仅腹腔注射rmIL-1β;T4组不缺氧也未腹腔注射rmIL-1β。T1组和T2组采用慢性低压性缺氧模型,大鼠在低压氧舱内连续缺氧2周,每天9h(PB=375Torr)。T3组和T4组也每天放入低压氧舱内9h,但不给予低压缺氧。T1组和T3组在第13d放入低压氧舱前,给予腹腔注射rmIL-1β1000ng/kg,T2组和T4组给予腹腔注射相同体积的生理盐水。第14d四组动物分别在低压缺氧舱中缺氧或常氧处理6h后,注射与前一天相同量的rmIL-1β或生理盐水,然后继续低氧或对照处理3h。处理完毕后麻醉处死动物。结果显示:与未给予缺氧和rmIL-1β刺激的T4组相比,T2组(单纯缺氧组)或T3组(单纯注射rmIL-1β)颈动脉体中IL-1β表达均上调(P<0.05);双因素方差分析的结果表明,缺氧和腹腔注射rmIL-1β之间无交互作用(P>0.05)。以上结果提示:慢性缺氧和炎性细胞因子刺激均可导致颈动脉体内IL-1β的上调,IL-1β可能与颈动脉体的功能调节有关。     

危重烧伤患者GPⅡb/Ⅲa、CD62p变化与病情及预后的相关性研究

目的探索血小板变化与危重烧伤患者病情及预后的关系。方法对67例危重烧伤患者进行分组,A组（特重烧伤组）选择烧伤总面积〉50%TBSA或（及）Ⅲ度烧伤面积〉20%TBSA的患者;B组（重度烧伤组）为烧伤总面积为30%～49%或（及）Ⅲ度烧伤面积10%～19%的患者,选择伤后3、5、7、14、28天测定两组的PLT、GPⅡb/Ⅲa、CD62p值并进行统计分析。结果 A组患者的PLT、GPⅡb/Ⅲa较B组患者的PLT、GPⅡb/Ⅲa显著降低（P〈0.05）,A组患者的CD62p较B组患者的CD62p显著增高（P〈0.05）。结论血小板的变化是影响危重烧伤患者病情及预后重要因素之一,血小板水平和功能变化越明显,病情越重,预后越凶险。动态观测血小板（PLT、GPⅡb/Ⅲa、CD62p）的变化对病情的判定及预后的估计有很好的预见性。     

缺氧敏感性不同的大鼠血小板活性的比较研究

HT(Hilltop SD)缺氧敏感大鼠与普通W(Wistar)大鼠,分平原对照组与置模拟5000米高度低压舱10天的慢性缺氧组。慢性缺氧组与对照组肺动脉收缩压的均值(PAP),在HT大鼠分别为51.9±14.2与31.3±3.0mmHg,P<0.001,慢性缺氧组比对照组高65.8%;W大鼠分别为39.7±7.4与28.9±4.7mmHg,P<0.001,慢性缺氧组比对照组高37.4%。对照HT大鼠全血及肺组织5-羟色胺(5-HT)高于对照W大鼠(P<0.05)。慢性缺氧组HT大鼠血小板数增加,与对照组相比,P<0.01;全血及肺5-HT明显减少,与对照组相比,P<0.001及P<0.05;血浆TXB_2增高,与对照组相比,P<0.001;对ADP诱导血小板聚集敏感性降低。慢性缺氧组W大鼠以上指标变化与HT大鼠相似,除血小板聚集外,HT大鼠以上变化比W大鼠更明显。提示对照组两种大鼠血小板功能状态不完全相同,慢性缺氧时,HT大鼠血小板活化程度高于W大鼠,这在HT大鼠肺动脉对缺氧的增压反应敏感中可能起一定作用。     

Effect of Prenatal Hypobaric Hypoxia on Glutamatergic Signal Transduction in Rat Brain

Ca²⁺-mediated signal transduction of group I metabotropic glutamate receptors (ImGluR) was studied in the brain of young (15 days) and old rats (90 days) exposed to severe hypobaric hypoxia on gestation days 14–16. Changes in the concentration of bound intracellular Ca²⁺ (Ca²⁺ response) were evaluated after repeated application of a selective ImGluR agonist 3,5-dihydroxyphenylglycine (DHPG) to cultured brain slices. Primary application of DHPG for 2 min induced a negative Ca²⁺ response in slices from 15-day-old intact animals, while repeated application caused a positive response. In slices from 90-day-old control animals, both responses were negative. In slices from rats of both age groups subjected to severe prenatal hypobaric hypoxia, both responses were mainly positive, but short-term negative components were present in adult animals. Our results suggest that severe hypobaric hypoxia changes the balance between the two constitutive signal pathways triggered by ImGluR (inosine triphosphate and diacylglycerol pathways). This procedure is followed by the increased influx of extracellular Ca²⁺ (as compared to Ca²⁺ release from the intracellular stores). This imbalance is particularly pronounced at the early stage of ontogeny.     

银杏叶制剂对急性肾功能衰竭兔心肌缺血的保护作用

目的 探讨银杏叶制剂（Ginkgo bilobal Extraction，GbE）对急性肾功能衰竭（Acute renal failture，ARF）兔心肌缺血的保护作用。方法 实验分为3组。对照组（8只）：用生理盐水10ml／kg行后肢肌肉内加压注射。ARF组（12只）：用50％甘油10ml／kg行后肢肌肉内加压注射。GbE组（8只）于注射甘油前0．5h腹腔注射GbE15mg／kg，每6h重复一次。检测各组不同时相血小板聚集功能、PGI2、TXA2、内皮素（Endothelins，ET）等指标以及心肌组织形态学变化。结果 2、24h时：ARF组与对照组比较，血小板聚集率明显增高（P〈0．01），TXA2、ET明显升高（P〈0．01），6-Keto-PGF1α明显降低（P〈0．01），心肌组织出现严重的缺血性损害；GbE组与对照组比较上述指标则无显著性差异；GbE组与ARF组比较，血小板聚集率则明显降低（P〈0．01），TXA2、ET明显降低（P均〈0．01），6-Keto-PGF1α明显升高（P〈0．01），心肌组织缺血性损害明显减轻。结论 1、ARF时血小板聚集率明显增高，TXA2、ET水平明显升高。2、ARF兔心肌组织发生严重的缺血性损害。3、GbE对ARF兔心肌组织缺血性损害有明显的保护作用。     

Effect of melatonin on cyclic nucleotide content and intensity of lipid peroxidation in the hippocampus and habenula of rats exposed to acute hypoxia

Single intraperitoneal injection of melatonin in a dose of 1 mg/kg prevented accumulation of cGMP and intensification of lipid peroxidation in the hippocampus and habenula of rats exposed to acute hypobaric hypoxia (12,000 m). Changes in habenular content of cGMP suggest that melatonin prevents hypoxia-induced activation of heme-oxygenase. Translated fromByulleten’ Eksperimental’noi Biologii i Meditsiny, Vol. 130, No. 8, pp. 168–171, August, 2000     

The effects of hypobaric hypoxia (50.6 kPa) on blood components in guinea-pigs

One hundred and five male (Hartley) guinea-pigs weighing 350-380 g and 30 splenectomized guinea-pigs were exposed to simulated hypobaric hypoxia of 50.6 kPa (equal to an altitude of 5486 m) for 14 days. The partial pressure of oxygen was set at half that at sea level. The white blood cell count increased significantly on day 3 of the simulated high altitude experiment but returned to normal on day 7, whereas the red blood cell count increased continuously. To study the effect of high altitude exposure on platelets, the platelet count in the splenectomized group was compared to that in a non-splenectomized group. Investigation of the resistance of red blood cell membranes to osmotic pressure under hypobaric conditions revealed a shift of the onset of haemolysis in the hyperosmotic direction. These findings may help to increase our understanding of the biochemical mechanisms of adaptation to hypobaric hypoxia.     

Involvement of platelet activation in experimental osteonecrosis in rabbits

Osteonecrosis (ON) was produced experimentally in rabbits by intravenous injection of platelet activating factor (PAF) in combination with lipopolysaccharides (LPS) on two occasions separated by a week-long interval. Eleven of 15 rabbits (73%), with administration of both LPS (50 microg/kg) and PAF (10 microg/kg), exhibited microcirculatory injuries including extravasation of erythrocytes into sinusoidal spaces and formation of microthrombi in arterioles near regions of erythrocyte extravasation. Seven of 15 rabbits (47%), which received both LPS (50 microg/kg) and PAF (10 microg/kg), exhibited necrosis of trabeculae and 8 of 15 (53%) exhibited bone marrow necrosis. In addition, PAF receptor antagonist (0.3 and 3.0 mg/kg) significantly reduced the incidence of trabecular necrosis (0%) in this model. The findings of the present study suggest that platelet activation may play an important role in inducible ON, and that suppression of platelet activation may contribute prevention of ON.