膀胱移行细胞癌细胞周期调节相关基因表达与肿瘤生物学行为的关系

目的：探讨细胞周期调节相关基因p16INK4,p21WAF／CIP1,p53mlt在膀胱移行细胞癌中的表达与肿瘤增殖能力,病理分级及临床分期的关系。方法：应用免疫组织化学技术分析77例膀胱移行细胞癌组织p16INK4,p21WAF/CIP1,p53mlt基因的表达和增殖细胞核抗原（PCNA）表达情况,并与病理分级及临床分期之间进行综合分析。结果：p16INK4,p21WAF/CIP1,p53mlt在膀胱移行细胞癌中的表达及PCNA增殖指数与肿瘤的病理分级有关,与临床分期无关。p16,p21,p53阳性组与阴性组分别比较,其PCNA增殖数之间有差异性。多因素分析发现,p16INK4和p21WAF／CIP1阴性及p53mlt阳性组的PCNA值明显高于p16INK4和p21WAF／CIP1阳性及p53mlt阳性组,两者比较不同病理分级的阳性表达构成比亦有显著性差异。结论:联合检测p16INK4,p21WAF/CIP1,p53mlt基因的表达情况能充分反映膀胱移行细胞癌的增殖能力及生物学行为,对膀胱移行细胞癌患者的预后判断及治疗有指导意义。     

肺癌组织中HSG、p21和PCNA的表达及意义

目的 探讨细胞增殖抑制基因(HSG)、p21WAF1、增殖细胞核抗原(PCNA)在肺癌中的表达及其相关性.方法 采用免疫组化SP法检测92例肺癌(鳞、腺癌)组织中HSG、p21WAF1和PCNA的表达.结果 HSG在肺癌组织中的表达与组织学分型、分化程度有关(P<0.01、P<0.001);p21WAF1在肺癌组织中的表达与分化程度、淋巴结转移有关(P<0.001、P<0.01);PCNA在肺癌组织中的表达与分化程度、淋巴结转移有关(P<0.001).HSG与p21WAF1在肺癌组织中的表达呈正相关(r=0.34,P<0.05);HSG与PCNA在肺癌组织中的表达呈负相关(r=-0.41,P<0.05);p21WAF1与PCNA在肺癌组织中的表达呈负相关(r=-0.49,P<0.05).结论 HSG、p21WAF1和PCNA的表达与肺癌的发生、发展密切相关.     

p~(21)~(WAF1)和PCNA在乳腺癌中的表达与预后的关系

目的 :探讨p2 1WAF1、PCNA蛋白表达与乳腺癌预后的关系。方法 :以免疫组化S P法检测 15 2例乳腺癌组织p2 1WAF1和PCNA蛋白的表达水平。结果 :在 15 2例乳腺癌组织中 p2 1WAF1蛋白阳性 6 1例 (40 1% ) ,其中低表达 43例 (70 5 % ) ,高表达18例 (2 9 5 % ) ;6 9例 (45 % )PCNA低指数表达 ,83例 (5 5 % )PCNA高指数表达 ;p2 1WAF1蛋白的表达与乳腺癌组织腺管形成(γs=0 34 1,P <0 0 1)、细胞核多型 (γs=0 5 16 ,P <0 0 1)、核分裂象计数 (γs=0 35 1,P <0 0 1)和组织学分级 (γs=0 415 ,P <0 0 1)呈正相关 ;单因素预后分析显示 p2 1WAF1蛋白高表达组生存期低于低表达组 (χ2 =6 92 ,P <0 0 1) ,PCNA高指数表达组生存期短于低指数表达组 (χ2 =5 14,P <0 0 5 ) ,p2 1WAF1- /PCNA低指数表达组 ,p2 1WAF1+/PCNA低指数组 ,p2 1WAF1+/PCNA高指数组和p2 1WAF1- /PCNA高指数组生存期依次减少 (χ2 =11 0 7,P <0 0 1)。结论 :(1)p2 1WAF1/PCNA的联合检测有利于更准确地判断细胞增殖活性和预后 ;(2 ) p2 1WAF1在乳腺癌中的不同表达水平可能与不同的调控方向有关。     

宫颈鳞癌中p16、p21WAF1、Rb、cyclinE蛋白的表达

目的通过观察p16、p21WAF1、Rb、cyclinE 4种细胞周期相关蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达,探讨它们在宫颈癌的细胞周期调控中的作用.方法采用免疫组化Eli Vision二步法对88例宫颈鳞癌组织,16例宫颈上皮内病变(CIN)组织,15例宫颈炎组织进行p16、p21WAF1、Rb、cyclinE 4种蛋白表达的检测.结果p16、p21WAA1、cyclinE在宫颈癌中的表达高于宫颈炎(P＜0.05);Rb在宫颈癌的表达少于宫颈炎(P＜0.05);Rb与p16在宫颈癌中的表达呈负相关(r=-0.675,P＜0.05).结论宫颈癌细胞周期G1期中,由于Rb蛋白的缺失,使cyclinE表达升高,致使癌细胞增生;同时,p16、p21WAF1蛋白在宫颈癌中的表达增高,并失去抑制作用.     

肾透明细胞癌QKI、HIF-1α的表达及相关性研究

目的 研究QKI、HIF-1α在人肾透明细胞癌中的表达及其相关性,探讨QKI、HIF-1α的表达与肾透明细胞癌病理分级、浸润深度及临床分期的关系。方法 收集110例肾透明细胞癌和10例正常肾组织石蜡包埋标本作为研究对象,采用免疫组化SABC法检测QKI、HIF-1α的表达和分布,并应用图象分析仪判定,统计学处理,对肾透明细胞癌的病理分级、浸润深度及临床分期进行对比分析及相关性研究。结果 QKI在肾透明细胞癌中的阳性表达率为67.3%,正常肾组织为100%,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α在肾透明细胞癌中的阳性表达率为92.7%,正常肾组织为30%,统计学有显著性差异(P<0.01)。在肾透明细胞癌中QKI的表达强度与病理分级(r=-0.471,P<0.001)、浸润深度(r=-0.392,P<0.001)、TNM分期(r=-0.451,P<0.001)均为线性负相关;HIF-1α的表达强度与病理分级(r=0.404,P<0.001)、浸润深度(r=0.324,P=0.001)、TNM分期(r=0.330,P<0.001)均为线性正相关。QKI与HIF-1α表达强度具有统计学差异(P=0.002),并呈线性负相关性(r=-0.417,P=0.002)。结论 QKI的表达与肾透明细胞癌病理分级、浸润深度及临床分期呈负相关性,而HIF-1α的表达与其呈正相关性,在发病机制中可能涉及到QKI、HIF-1α的异常表达。同时,作为新的分子标志物,QKI、HIF-1α可作为判定肾透明细胞癌恶性程度、进程及预后的一项有价值的生物学指标,对临床诊治也可提供有意义的帮助。     

子宫颈癌中Plk1和Cyclin B1、p21 WAF1的表达及其临床意义

目的：探讨Plk1(polo-like kinase1)和Cyclin B1、p21WAF1在子宫颈癌中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法利用组织芯片技术,结合免疫组化EliVision 法对102例子宫颈癌、20例子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)、20例正常子宫颈组织中Plk1和Cyclin B1、p21WAF1的表达进行检测,并分析相关数据。结果 Plk1在子宫颈癌、CIN 中的阳性率分别为70．5%、55．0%,明显高于正常子宫颈组织(10%),差异有统计学意义(P <0．01)。Cyclin B1在子宫颈癌、 CIN 中的阳性率分别为52．9%,30．0%,明显高于正常子宫颈组织(10．0%),差异有统计学意义(P <0．01)。p21WAF1在子宫颈癌、CIN 中的阳性率分别为23．5%、10．0%,明显高于正常子宫颈组织(0),差异有统计学意义(P <0．05)。Plk1、Cyclin B1和 p21WAF1在子宫颈癌、CIN 中的表达差异均无统计学意义(P >0．05)。Plk1表达与子宫颈癌间质浸润深度相关(P <0．05)。Cyclin B1表达与子宫颈癌间质浸润深度及淋巴结转移相关(P <0．05)。p21WAF1在子宫颈癌中的表达与组织学分级相关(P <0．01)。组织学分级低的子宫颈癌中p21WAF1阳性率高。Plk1和Cyclin B1在子宫颈癌中的表达呈正相关(rs =0．297,P =0．002)。Plk1和p21WAF1在子宫颈癌中的表达呈负相关(rs =-0．403,P <0．001)。结论 Plk1、Cyclin B1和p21WAF1的表达与子宫颈癌的发生、发展相关,且前两者与子宫颈癌预后相关,三者联合检测有可能成为子宫颈癌临床治疗的新靶点。     

肾透明细胞癌中Eotaxin-1的表达与肿瘤增殖能力相关

目的探讨嗜酸性粒细胞趋化因子-1 Eotaxin-1在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达情况及其与肿瘤增殖能力的关系。方法免疫组织化学检测58例肾透明细胞癌患者肾癌组织及癌旁组织中Eotaxin-1以及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达并分析其与肾癌临床病理特征的关系;用Western blot法分析10例相互配对肾癌组织、癌旁组织中Eotaxin-1及PCNA的表达,并对Eotaxin-1与PCNA做相关性分析。结果 Eotaxin-1主要表达于胞质,PCNA主要表达于细胞核内,Eotaxin-1和PCNA在肾癌组织的阳性率明显高于癌旁组织(P0.05);病理分级为2-3级组的Eotaxin-1及PCNA阳性率显著高于病理分级1级组(P0.01)。临床分期为Ⅲ/Ⅳ组的Eotaxin-1及PCNA阳性率显著高于临床分期Ⅰ/Ⅱ组(P0.05),有淋巴结转移组的Eotaxin-1及PCNA阳性率高于无淋巴结转移组(P0.05);10例肾癌组织中Eotaxin-1及PCNA蛋白水平显著高于癌旁组织(P0.01,P0.05);Eotaxin-1与PCNA在肾癌组织中的表达存在相关性(P0.05)。结论肾透明细胞癌组织中Eotaxin-1与肾透明细胞癌的增殖能力密切相关,对Eotaxin-1的研究可能为临床对肾透明细胞癌诊断治疗提供新的思路。     

胃癌中BRG1蛋白的表达及意义

目的 探讨BRG1基因蛋白在胃癌组织中的表达及与pRb、p53基因的相互关系。方法 应用S-P免疫组化法检测30例胃癌组织中BRG1及pRb和p53的表达情况，分析其相关性，并且结合临床病理因素，初步探讨其和胃癌发生、发展及预后的关系。结果 BRG1与pRb的表达有相关性，而和p53无关。BRG1在胃癌中的表达率为76.67％(23/30)，与正常组织相比呈高表达。BRG1和pRb的表达与胃癌的浸润、淋巴结转移、分级和分期有关。结论 BRG1蛋自在胃癌中高表达，对胃癌的发生、发展可能起重要作用。BRG1及pRb的表达可作为判断胃癌恶性程度及预后的重要指标。     

PSA启动子介导的TAT-p21WAF1/CIP1融合蛋白在前列腺癌细胞中的特异表达及活性初探*

目的：设计并构建含有前列腺组织特异性抗原（PSA）启动子的TAT-p21WAF1/CIP1融合蛋白真核表达载体（pPSA-TAT-p21），使由TAT蛋白转导结构域（TAT）介导的抑癌基因蛋白p21WAF1/CIP1(p21)能够在前列腺癌细胞中实现特异性的跨膜转运，增强p21对前列腺癌的抑制作用。方法：利用PCR技术构建含有PSA启动子、TAT蛋白转导序列和p21读码框架的真核表达载体pPSA-TAT-p21，并进行酶切、测序鉴定。脂质体法在前列腺癌LNCaP细胞和大肠癌HT-29细胞中转染上述表达载体及对照质粒后进行反转录PCR（RT-PCR），检测p21的mRNA以及蛋白在不同细胞中的表达情况。MTT法检测转染pPSA-TAT-p21后LNCaP细胞的增殖情况。结果：成功构建pPSA-TAT-p21真核表达载体。RT－PCR和Western blotting结果显示PSA-TAT-p21在前列腺癌细胞中有明显表达，在大肠癌细胞中基本不表达，呈现特异性的表达，而由CMV启动子介导的p21（pCMV-21）对照组在两个细胞株中均有表达。细胞增殖实验结果显示，含有TAT蛋白转导结构域的PSA-TAT-p21的融合蛋白对前列腺癌细胞增殖的抑制作用明显高于不含TAT的PSA-p21蛋白。 结论：pPSA-TAT-p21能够在前列腺癌细胞中特异性地高效表达，为前列腺癌基因的靶向治疗提供了实验依据。     

骨肉瘤中p53、p21WAF1、cyclinA蛋白的表达及其意义

目的探讨骨肉瘤中p53、p21WAF1、cyclinA蛋白的表达及相互关系.方法应用免疫组化方法对骨肉瘤组织及正常软组织中p53、p21WAF1、cyclinA的蛋白表达进行检测.结果正常软组织中p53表达均阴性,28%(14/50)骨肉瘤中可检测到p53蛋白的异常积累;正常软组织中均有不同程度的p21WAF1蛋白的阳性表达,52%(26/50)骨肉瘤p21WAF1阴性,骨肉瘤中p21WAF1的蛋白表达表现为p53蛋白依赖性的方式;正常组织中cyclinA为阴性,75.6%(28/37)骨肉瘤中存在cyclinA蛋白过表达,cyclinA与p21WAF1的表达呈负相关(r=-0.874,P＜0.01);p21WAF1蛋白的表达与骨肉瘤的分化呈正相关(r=0.687,P＜0.01).结论p53蛋白的异常积聚、p21WAA1的失表达及cyclinA的过表达参与了骨肉瘤失控的增生及肿瘤的形成.     

8-Br-cAMP对人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞抑癌基因表达的效应

目的 探讨８－Ｂr－CＡＭＰ对人视网膜母细胞瘤之ＨＸＯ－Ｒb４４细胞抑癌基因表达的 效庆及其对细胞生长的影响。方法 应用原位杂交、ＲＮＡ斑点印迹检测Ｐ１６＾ＩＮＫ４mＲＮＡ、p２１＾ＷＡＦ１mＲＮＡ、wp５３mＲＮＡ、mp５３mＲＮＡ和ＲｂｍＲＮＡ,应用免疫组织和化学和蛋白质斑点印迹技术检测ＰＣＮＡ－ＩＲ、p２１＾ＷＡＦ１－ＩＲ、 ｐ１６－ＩＲ、ｐＲｂ－ＩＲ、ｃｄｋ２、ＩＲ和ｃｄｋ４－ＩＲ。结果 在人ＨＸＯ－Ｒ     

人脑神经胶质瘤中p16、p21~(WAF1/CIP1)蛋白表达的研究

目的　探讨 p16、p2 1WAF1/CIP1两种抑癌基因与人脑神经胶质瘤恶性程度的关系。方法　采用SABC免疫组织化学方法对 6 4例人脑胶质瘤组织及 8例正常脑组织标本中p16和 p2 1WAF1/CIP1表达情况进行检测 ,并进行相关分析。结果　①p16和 p2 1WAF1/CIP1阳性表达率在人脑胶质瘤中分别为 4 5 .3%和 6 4 .1%与正常脑组织中的表达情况差异显著 (P <0 0 5 ) ;②p16蛋白和 p2 1WAF1/CIP1蛋白阳性表达率均随着胶质瘤的恶性程度的增高而降低 ,差异显著 (P <0 0 1) ,且呈负相关关系 ;③p16蛋白和 p2 1WAF1/CIP1蛋白可协同表达 ,且在正常脑组织和脑胶质瘤各分级中 p16蛋白和 p2 1WAF1/CIP1蛋白协同表达率差异显著 (P <0 0 5 ) ,并呈负相关关系。结论　p16与p2 1WAF1/CIP1蛋白的阳性表达率及协同表达率可在一定程度上反映胶质瘤细胞的恶性程度 ,可作为判断其恶性程度的有效指标     

p21WAF1／CIPI基因导入对p53突变人肺癌细胞系生长特性的影响

目的 探讨含突变ｐ５３基因癌细胞系ｐ２１基因的抗肿瘤作用。方法 构建人ｐ２１表达重组子,导入ｐ５３基因突变的人肺癌ＰＧ细胞每当增产同表达ｐ２１的细胞系;然后观察其形态太生长特性的改变;ＣＤＫ４,ＰＣＮＡ水平;对基因毒性物的反应性。结果 在含ｐ５３基因突变的ＰＧ细胞内导入的性ｐ２１基因,其高表达ｐ２１约是ＰＧ细胞的６倍,转谬为薄等异型性降低;生长速度下降（５０％）,叠落生长不明显;在０．５％血甭条件     

p21 WAF1/CIP1基因导入对p53突变人肺癌细胞系生长特性的影响

目的　探讨含突变ｐ５３ 基因癌细胞系表达ｐ２１ 基因的抗肿瘤作用。方法　构建人ｐ２１表达重组子,导入ｐ５３ 基因突变的人肺癌ＰＧ细胞系,建立稳定高表达ｐ２１ 的细胞系;然后观察其形态及生长特性的改变;ＣＤＫ４ ,ＰＣＮＡ水平;对基因毒性物的反应性。结果　在含ｐ５３ 基因突变的ＰＧ 细胞内导入外源性ｐ２１ 基因,其高表达ｐ２１ 约是ＰＧ 细胞的６ 倍;转染细胞出现核规则、核膜变薄等异型性降低;生长速度下降（５０％ ） ,叠落生长不明显;在０ ．５％ 血清条件下生长显著低于对照组;血清依赖性升高;软琼脂集落实验：转染细胞集落形成率降低为１ ％ （ 对照组为２８％ ） 。ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 显示,ｐ２１ 转染细胞的ＣＤＫ４ 和核仁组成区相关蛋白水平显著降低。但顺铂诱导下转染细胞凋亡发生延缓至４８ 小时以后（ 对照组２４ 小时）。结论　在有ｐ５３ 基因突变的肿瘤细胞ｐ２１ 的高表达仍能抑制癌细胞的生长,降低恶性表型;其作用可能与降低细胞ＣＤＫ４ 和ＰＣＮＡ 水平有关,而不依赖细胞凋亡机制。表达ｐ２１ 基因可作为恢复ｐ５３ 基因功能的旁路途径。     

nm23—H1与p21、p53蛋白在人卵巢癌中表达的相关性研究

目的：研究人卵巢癌组织中肿瘤转移抑制基因nm23-H1、抑癌基因p21^WAFI及p53蛋白的表达,探讨它们在卵巢癌发生、发展中的作用。方法：采用免疫印迹技术,对74例卵巢癌组织及21例卵巢非癌组织中nm23-H1p21^WAFI及p53蛋白进行检测。结果：在卵巢癌中nm23-H1、p53蛋白的表达高于卵巢非癌组织,p21^WAFI蛋白的表达呈下调;肿瘤发生转移时卵巢癌组织中nm23-H1和p21WAF蛋白表达显著低于未发生肿瘤转移的癌组织。p53蛋白表达与肿瘤转移无关。nm23-H1 \p21^WAFI 蛋白与卵巢癌组织类型无关,但与卵巢癌的临床分期相关。p53蛋白的表达与卵巢癌组织类型及卵巢癌的临床分期无关。nm23-H1与p53、p21^WAFI蛋白间表达在卵巢癌中呈相关性。结论：nm23-H1、p53、p21^WAFI 基因在卵巢癌发生、发展中起一定的作用,nm23-H1与p53、p21^WAFI基因在卵巢癌发生、发展中可能起协同作用。