超薄切片制备关键环节的处理

超薄切片质量是电镜技术的基础,理想的超薄切片应该是厚度适中,厚薄均匀,结构清晰,没有颤痕、皱褶、重叠、刀痕、空洞及污染.优质超薄切片的获得,与样品的取材、脱水、浸透、包埋和切片的好坏诸因素息息相关.笔者根据多年的工作经验,就样品制备的几个关键环节在实践中不断研究和探讨,摸索出一些技巧,供同行们参考.     

一种大面积超薄切片方法

鉴于超薄切片技术上的要求,通常能进行超薄切片的面积极小(0.1mm×0.5mm),这就给那些难以定位的样品及需要大范围观察的样品带来局限性。为此,     

豚鼠海马CAI区锥体细胞间的缝隙连接——超薄切片和冷冻复型的电镜观察

本实验用超薄切片和冷冻复型电镜技术,研究了豚鼠海马CAI区锥体细胞间的缝隙连接(GJ)。在冷冻复型样品中见到,海马CAI区锥体细胞劈裂面EF上有清楚的GJ存在,另外在锥体细胞顶树突EF面上,也见到GJ。上述GJ的膜内微粒聚集成区,微粒的大小和数目不一,有的区内排列成行,较整齐;有的区内排列不整齐或较分散。     

超薄切片技术的质量控制

超薄切片技术作为病理学诊断和组织学研究的一个重要技术 ,已广泛应用于临床病理诊断、教学和科研工作。一位出色的电镜技术工作者不仅要熟悉透射电镜样品制备的原理 ,还要熟练掌握该技术 ,能制备出一张优质的超薄切片 ,以便日常工作的顺利开展。近年来电镜用于活检和疑难病诊断也逐渐增加 ,由于电镜样品制备费用比较昂贵 ,因此有必要对超薄切片的质量进一步要求。1　标本的取材和固定如何获得 1张超微结构保存完整的超薄切片 ,固定是极为重要的过程。为了使离体组织如同活组织一样 ,这就要求生命的全过程 (包括酶促反应 )立刻停止 ,细胞及…     

提高电镜超薄切片染色效率的装置

随着电镜技术应用的普及,利用电镜观察肾小球超微结构进行临床诊断的样品日益增多.传统的超薄切片染色方法不能1次进行大批量染色操作(费时、费工,且易造成污染).为此,笔者对传统的电镜染色法作了探索和改进,最终做出了制作简便、染色量大、染色效果稳定的电镜超薄切片染色装置.     

应用免疫冷冻超薄切片技术观察小鼠小肠微皱褶细胞

利用免疫冰冻超薄切片技术对小肠Peyer集合淋巴小结进行透射电镜 (TEM )的观察 ,结果表明 ,胶体金 (10nm )标记的荆豆凝集素 (UEA1)可以与小肠中的Peyer集合淋巴小结表面的微皱褶细胞特异性地结合 ,为探讨M细胞的形态结构和生物学功能 ,为口服疫苗的推广提供理论依据 ,同时为免疫冷冻超薄切片技术的可行性提供了实验证据     

关于透射电镜样品污染问题的探讨

在透射电镜样品制备过程中,经常会遇到超薄切片被污染的问题。本文分析了造成超薄切片污染的原因,并针对超薄切片制作过程中的污染,提出了改善切片室环境、铜网支持膜、合理使用切片刀及刀槽的改进措施,针对切片电子染色过程中的污染,提出了在染液配制过程中严格遵守操作程序、在染色操作过程中严格坚持正确的方法等注意事项,并阐明了必要的防范措施,这些将有效避免电镜样品污染现象。     

包埋前免疫金电镜标记的使用难点及解决方法

根据免疫标记与标本之间的不同关系,免疫电镜技术可分为包埋前、包埋后及冷冻超薄切片免疫电镜技术。本文仅介绍包埋前免疫金电镜标记在使用过程中的一些难点及解决方法。     

825例乳腺疾病冷冻切片诊断分析

随着冷冻切片技术和临床外科手术的发展，术中冷冻切片病理诊断的病例数不断增多，临床医师和患者对病理诊断的期望值也相应提高。冷冻切片病理诊断病例以乳腺疾病为最多，笔者总结上海某某基层医院825例乳腺冷冻切片资料，探讨基层医院提高冷冻切片诊断准确性的方法。     

病变细胞定位超薄切片方法的建立CSCD

目的建立一种针对感染病毒病变细胞的定位超薄切片方法。方法选取适于进行定位切片的细胞培养皿作为包埋模具,以人腺病毒5型（humanadenovirustype5,Ad5）、A／HN／SWL3／09（H1N1）流感病毒分别感染HEK293细胞和MDCK细胞为模型,当细胞出现病变时,原位包埋细胞,通过修块暴露病变细胞,并针对病变细胞进行超薄切片,以透射电子显微镜观察病变细胞的超薄切片。结果通过定位超薄切片技术成功对目标病变细胞进行切片,病变细胞的切片上可以容易地观察到病毒颗粒。结论建立了一种针对病变细胞的定位超薄切片方法,该方法定位准确、能够快速检测病变细胞,提高了电镜检测效率。