p53依赖的X-连锁凋亡抑制蛋白调节与卵巢癌顺铂耐药的关系

目的本研究旨在探讨X-连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法应用RT—PCR、Western Blot、流式细胞仪等检测卵巢癌顺铂敏感细胞株0V2008、A2780s和耐药株C13＊、A2780cp中XIAP表达和卵巢癌细胞的凋亡率,并将反义XIAP寡核苷酸（XIAPAs—ODN）、正义XIAP寡核苷酸（XIAPs—ODN）和随机对照链导入顺铂耐药细胞C13＊（p53野生型）和A2780cp（p53突变型）中,比较转染前、后耐药细胞Caspase-3活性和顺铂耐药性的改变。结果卵巢癌顺铂敏感细胞和耐药细胞中XIAP在mRNA水平的表达无明显差异（P〉0．05）。顺铂可以引起OV2008和A2780s中XIAP蛋白表达明显下降（P〈0．05）,而对C13＊和A2780cp的XIAP蛋白含量无明显影响（P〉0．05）。转染XIAPAs—ODN可降调p53野生型耐药细胞C13＊中XIAP的表达,并显著增加Caspase-3活性和对顺铂敏感性（P〈0．05）,而XIAP As—ODN对p53突变型耐药细胞A2780cp无此作用。结论卵巢癌细胞对顺铂产生耐药可能与XIAP蛋白相对高表达有关,反义XIAP可在一定程度上逆转卵巢癌顺铂耐药,该作用与卵巢癌细胞的p53表型有关。     

磷酸化修饰对p53线粒体作用的影响以及与卵巢癌顺铂耐药的关系

目的探讨磷酸化修饰对p53直接线粒体转移的影响以及在顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用以及与卵巢癌顺铂耐药的关系。方法应用Western Blot检测顺铂作用前后卵巢癌顺铂敏感细胞OV2008、A2780s和顺铂耐药细胞C13＊、A2780cp的线粒体和细胞浆中Smac蛋白含量以及线粒体和全细胞中磷酸化p53（P-p53）的含量,并应用Hoechst染色法检测卵巢癌细胞的凋亡率。结果顺铂能引起卵巢癌敏感细胞OV2008、A2780s线粒体释放Smac至胞浆并引起细胞凋亡,但在C13＊和A2780cp中无此反应。顺铂处理后进入卵巢癌敏感细胞线粒体中的p53蛋白为磷酸化的p53。结论顺铂能引起p53转移至线粒体并导致卵巢癌敏感细胞线粒体释放Smac至胞浆,促进卵巢癌细胞的凋亡,并且磷酸化修饰作用可以影响p53的直接线粒体功能,与卵巢癌化疗耐药有关。     

卵巢癌顺铂敏感与耐药细胞ClC-3蛋白表达及通道功能的差异

目的:从分子和细胞水平研究卵巢癌顺铂敏感(a2780)及耐药(a2780cp)细胞中ClC-3氯通道蛋白表达及通道功能的差异。方法:MTT法检测人卵巢癌a2780和a2780cp细胞对顺铂敏感性的差异;real-time PCR法检测ClC氯通道家族在a2780和a2780cp细胞中的mRNA表达;Western blot检测ClC-3蛋白的表达;免疫荧光法观察ClC-3蛋白在a2780和a2780cp细胞的分布;全细胞膜片钳技术记录细胞氯电流。结果:(1) a2780和a2780cp细胞对顺铂的敏感性存在差异,其IC_(50)值分别为5μmol/L和20μmol/L(P0.01);(2)对ClC氯通道家族mRNA表达的检测结果显示,a2780和a2780cp细胞主要表达ClC-3,且在a2780cp细胞中ClC-3 mRNA表达显著减少(P0.01);(3)在蛋白水平上,与a2780细胞相比,a2780cp细胞的ClC-3蛋白表达量显著降低(P0.01);(4)免疫荧光显示ClC-3在a2780细胞中主要分布在胞膜上,而在a2780cp细胞中则主要表达在胞质内;(5)顺铂能激活a2780细胞的氯通道,产生ClC-3介导的氯电流,但在a2780cp细胞中则不能;(6)ClC-3 siRNA处理a2780细胞后,顺铂诱导的氯电流则不再出现。结论:ClC-3氯通道在顺铂敏感和耐药的卵巢癌细胞蛋白分布、表达和功能上存在差异,可能是引起顺铂耐药的潜在机制之一。     

外源性IL-8诱导卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇产生耐药的机制及相关信号转导通路的初步探讨

目的探讨外源性IL-8诱导卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇产生耐药的机制及相关信号转导通路。方法在原工作基础上,以两种人卵巢癌细胞系A2780(不分泌IL-8,对顺铂、紫杉醇敏感)和SKOV-3(高分泌IL-8,对顺铂、紫杉醇耐药)为研究模型,观察外源性IL-8是否影响卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性,并对其作用的机制和可能的信号转导通路进行研究。结果①体外经IL-8处理的A2780细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性均明显降低即产生部分耐药(耐药倍数分别为6.07和7.23),其耐药程度均低于IL-8高表达的SKOV-3细胞(耐药倍数分别为8.22和9.03)。②IL-8可以剂量依赖的方式上调A2780和SKOV-3细胞的耐药相关基因MDR1和凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xL及XIAP的表达。③MEK1/2抑制剂和PI3K抑制剂均能阻断IL-8诱导的卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇产生的耐药。结论IL-8-很可能通过上调耐药相关基因MDR1和凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xL及XIAP的表达而致卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇产生耐药。IL-8的上述作用是由Ras/Raf/MEK/MAPK和PI3K/Akt信号通路介导的。     

姜黄素联合顺铂调控PI3K/Akt信号通路对卵巢癌耐药细胞增殖、迁移和凋亡的影响北大核心CSCD

目的:讨论姜黄素联合顺铂对卵巢癌耐药细胞增殖、迁移及凋亡能力的作用,并分析其与PI3K/Akt通路的关系。方法:首先用不同浓度的姜黄素及顺铂单独处理细胞株,根据各浓度细胞的存活率确定35µmol/L姜黄素、4.0 mg/L顺铂疗效最好,用于后续实验。将卵巢癌耐药细胞分为空白对照组、姜黄素单独处理组(35µmol/L)、顺铂单独处理组(4.0 mg/L)、姜黄素+顺铂联合处理组(35µmol/L+4.0 mg/L),采用MTT法、Transwell小室、流式细胞术检测四组细胞的生长抑制率、迁移细胞数及细胞凋亡率;Western blot检测四组细胞中p-PI3K及p-Akt蛋白表达水平;PCR检测四组细胞中PI3K、Akt、Ki67、Bcl-2、Bax mRNA表达水平。结果:与空白对照组比较,其余三组细胞生长抑制率及细胞凋亡率均显著升高,迁移细胞数显著减少(P<0.05),且姜黄素+顺铂联合组细胞生长抑制率及细胞凋亡率显著高于姜黄素组、顺铂组,迁移细胞数则低于姜黄素组、顺铂组(P<0.05);与空白对照组比较,姜黄素处理组及姜黄素+顺铂联合组细胞中p-PI3K、p-Akt蛋白及PI3K、Akt、Ki67、Bcl-2 mRNA表达水平均显著降低、Bax mRNA显著升高(P<0.05),且联合组细胞表达量明显低于姜黄素处理组(P<0.05),而顺铂单独处理组细胞中PI3K、p-Akt蛋白及PI3K、Akt、Ki67、Bcl-2、Bax mRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:姜黄素联合顺铂能够提高卵巢癌耐药细胞的敏感性,抑制细胞的增殖及迁移,同时诱导细胞凋亡,这一过程可能通过下调PI3K/Akt通路的表达实现。     

circDIDO1通过miR-141/Keap-Nrf2/HO-1通路对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探讨环状非编码RNA(circ)DIDO1通过微小RNA(miR)-141/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)通路探讨对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖、侵袭和迁移的影响。方法 qRT-PCR检测卵巢癌组织及细胞系（SKOV3、OVCAR3和A2780）及IOSE80细胞中miR-141、circDIDO1、Keap1、Nrf2、HO-1 mRNA表达水平；取SKOV3细胞，设置分组为对照组、DIDO1过表达（Exo-circDIDO1）组（转染Exo-circDIDO1）、过表达阴性对照（Exo-vector）组（转染Exo-vector）、Exo-circDIDO1+miR-141模拟物（miR-141mimics）组（共转染Exo-circDIDO1、miR-141mimics）、Exo-circDIDO1+模拟物阴性对照（mimicsNC）组（共转染Exo-circDIDO1、mimicsNC）。48h后，CCK-8及Transwell实验检测细胞迁移、侵袭及增殖变化；qRT-PCR检测及Weste...     

基质金属蛋白酶抑制剂RECK基因在卵巢癌细胞株中的表达及意义

目的检测RECK基因(reversion-inducing-cysteine-rich protein with Kazal motifs)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在不同卵巢癌细胞株SKOV-3、A2780、HO-8910及正常卵巢上皮细胞中的表达,并探讨其表达差异及其意义。方法应用RT-PCR检测卵巢癌细胞株SKOV-3、A2780、HO-8910及正常卵巢上皮细胞中RECK及MMP-2 m RNA的表达;应用Western blot方法检测不同卵巢细胞株中RECK蛋白的表达。结果卵巢癌细胞株SKOV-3、A2780、HO-8910中RECK m RNA的表达较正常卵巢上皮细胞中明显降低(P0.01),MMP-2 m RNA表达则明显升高(P0.01),但三种卵巢癌细胞株中RECK m RNA的表达没有差异(P0.05);SKOV-3、A2780、HO-8910细胞株中RECK蛋白的表达量较正常卵巢上皮细胞明显降低(P0.01)。结论 RECK基因在卵巢癌中的表达量明显下降,而MMP-2的表达量明显升高,RECK基因可能通过抑制MMP-2的表达起到抑癌基因的作用。     

卵巢癌细胞IL-6、IL-8分泌与其化疗敏感性及耐药相关基因和凋亡抑制基因表达关系的初步探讨

目的 分析比较4种常见的人E皮性卵巢癌细胞系IL-6、IL-8分泌与其化疗敏感性及部分耐药相关基因和凋亡抑制基因表达的关系,为今后研究IL-6、IL-8诱导卵巢癌细胞对化疗药物产生耐药的机制奠定基础.方法 IL-6、IL-8及其受体的表达采用RT-PCR、ELISA及免疫印迹技术进行检测,卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性采用M1Tr试验进行分析,耐药相关基因和凋亡抑制基因的表达则采用RT-PCR进行测定.结果 1)4种卵巢癌细胞除A2780细胞外均组成性分泌IL-6和IL-8,二者转录水平与其蛋白水平基本一致.2)4种卵巢癌细胞均表达IL-6受体和IL-8受体.3)4种卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性不同,其中A2780细胞最敏感,ES-2细胞次之,CAOV-3和SKOV-3细胞则有不同程度的耐药性.4)部分耐药相关基因和凋亡抑制基因在A2780和ES-2细胞中的表达水平均较低,而在CAOV-3和SKOV-3细胞中的表达水平均较高.结论 卵巢癌细胞IL-6、IL-8的自分泌水平(尤其是IL-6的水平)与其对顺铂和紫杉醇的敏感性基本呈负相关趋势,与其部分耐药相关基因和凋亡抑制基因的表达水平相一致.     

顺铂联合白花蛇舌草素通过降低SRPK1 的表达抑制骨肉瘤细胞的恶性行为

目的:探讨顺铂联合白花蛇舌草素对骨肉瘤细胞体外作用及机制研究。方法:骨肉瘤分为对照组(Control)、顺铂给药组(Cisplatin)和顺铂联合白花蛇舌草素给药组(Cisplatin+HD)。CCK-8和克隆形成实验检测给药前后细胞增殖能力的变化;细胞划痕实验检测细胞给药前后细胞迁移能力的变化;Transwell小室检测细胞给药前后细胞侵袭能力的变化;RNA转录测序检测顺铂给药组和联合给药组转录组RNA表达差异;qRT-PCR和Western blot检测细胞内差异基因的表达;63例骨肉瘤标本和63例正常软骨组织进行免疫组化染色,观察两组骨肉瘤组织中差异基因表达。结果:白花蛇舌草素增强顺铂对骨肉瘤MG-63和Saos-2细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用(P0.05);顺铂联合白花蛇舌草素给药后肿瘤免疫相关蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(SRPK1)在MG-63和Saos-2细胞表达显著下调;免疫组化结果显示SRPK1在骨肉瘤组织中的表达显著高于正常组织(P0.05)。结论:白花蛇舌草素通过抑制肿瘤免疫相关蛋白SRPK1的表达增强顺铂对骨肉瘤细胞的体外抑制作用。     

Snail在卵巢癌细胞侵袭转移潜能方面研究

目的研究Snail与卵巢癌侵袭转移问的关系,并探讨其分子机制。方法分别构建正义全长Snail真核表达载体和小分子干扰RNA,分别转染卵巢癌细胞系A2780、C13＊。采用Western印迹方法分析相关蛋白表达,Transwell试验检测细胞侵袭转移能力。结果①成功构建Snail正义全长真核表达载体,并合成Snail小分子RNA干扰片段;②在转染PEGFPCI／Snail的卵巢癌细胞株A2780、C13＊中E-eadhefin表达明显下调,Snail和Vimentin则表达上调;而在转染Snail／SiRNA的卵巢癌细胞株A2780、C13‘中E—cadherin表达明显上调,Snail和Vimentin则表达下调;③Snail过表达可显著促进卵巢癌细胞株A2780、C13＊的侵袭转移潜能;封闭Snail表达水平可一定水平抑制卵巢癌细胞株A2780、C13＊的侵袭转移潜能。结论snail可通过促进卵巢癌上皮细胞间质化转变（epithelial—mesenchymaltransition,EMT）而提高其侵袭转移能力;封闭Snail表达可一定程度逆转卵巢癌上皮细胞间质化转变（EMT）而抑制其侵袭转移能力。     

内源性IL-8诱导卵巢癌细胞对顺铂与紫杉醇产生耐药的机制研究

目的探讨内源性IL-8诱导卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇产生耐药的机制及相关信号转导通路。方法在原有工作基础上,以2种人卵巢癌细胞系A2780(不分泌IL-8,对顺铂、紫杉醇敏感)和SKOV-3(高分泌IL-8,对顺铂、紫杉醇耐药)为研究模型,分别将正义(sense,ss)IL-8基因或反义(antisense,as)IL-8基因稳定转染至A2780细胞或SKOV3细胞,应用MTT法、Caspase-3活性测定、RT-PCR及Western blot技术等观察内源性IL-8是否影响卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性,并对其作用的机制和可能的信号传导通路进行研究。结果 1)内源性过表达IL-8可诱导A2780细胞对顺铂和紫杉醇产生耐药,而抑制IL-8表达可恢复SKOV3细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性,IL-8诱导的卵巢癌细胞化疗耐药是通过降低Caspase-3活性来实现的;2)内源性过表达IL-8可上调A2780细胞的耐药相关基因MDR1和凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xL及XIAP的表达,而抑制IL-8表达可使上述基因的表达明显降低;3)Wortmannin(PI3K抑制剂)和PD98059(MEK1/2抑制剂)能分别阻断IL-8诱导下卵巢癌细胞的Akt和ERK活化及化疗耐药作用。结论 IL-8诱导的卵巢癌细胞化疗耐药可能与其上调耐药相关基因MDR1和凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xL及XIAP的表达以及活化Raf/MEK/ERK和PI3K/Akt信号通路相关,提示调节IL-8表达或其相关信号通路可能是治疗耐药性卵巢癌的一种良好策略。     

紫草素对卵巢癌细胞SKOV3/DDP顺铂耐药的逆转作用

目的:探讨紫草素是否逆转卵巢癌细胞SKOV3/DDP的顺铂耐药效应及其作用机制。方法:采用CCK-8法确定紫草素和顺铂的最佳作用条件,流式细胞术检测细胞的周期分布及凋亡率;Western blot检测周期及凋亡相关调控因子细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、P18、p-Rb、Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:CCK-8实验结果显示,相较于单用顺铂,联合使用紫草素对顺铂耐药卵巢癌细胞SKOV3/DDP的生长抑制作用较为显著。此外,联用紫草素和顺铂可显著抑制细胞周期G_1/S转化,并增加细胞早期凋亡率。Western blot结果显示,相较于顺铂处理组,紫草素和顺铂联用组的cyclin D1、CDK2、p-Rb及Bcl-2的蛋白水平显著降低,而P18、Bax及cleaved caspase-3的蛋白表达显著增加。结论:紫草素可逆转卵巢癌SKOV3/DDP细胞的顺铂耐药效应,其作用机制可能与影响细胞周期及凋亡相关因子的表达,进而抑制细胞活力促进细胞凋亡相关。     

NGAL基因沉默对人卵巢癌细胞株A2780凋亡的影响及机制

目的探讨人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)基因沉默对人卵巢癌细胞株A2780凋亡的影响及机制。方法构建针对NGAL基因的siRNA真核表达载体,转染入A2780细胞中,实验分为3组:空白对照组(Control)、转染NGAL-siRNA沉默组(NGAL-siRNA)和转染阴性对照组(NC-NGAL)。免疫荧光检测NGAL在A2780细胞及IOSE80正常卵巢细胞的表达情况。通过RNA技术沉默NGAL后,运用qRT-PCR及Western blot检测沉默NGAL基因效率。CCK-8法检测细胞活力,TUNEL染色及流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测NF-κB、Caspase-3蛋白表达。结果 NGAL在A2780细胞呈高水平表达。NGAL-siRNA组NGAL基因及蛋白表达都受到明显的抑制(P0.01)。与Control组相比,NGAL-siRNA组细胞凋亡率及Caspase-3蛋白表达明显增加,细胞活力及NF-κB蛋白表达明显下降(P0.01),而NC-NGAL组各项指标与Control组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论沉默人卵巢癌细胞株A2780中NGAL基因表达,抑制细胞生长并促进细胞凋亡,与上调Caspase-3蛋白表达和下调NF-κB蛋白表达相关。     

腹腔热灌注与顺铂联用增加人卵巢癌细胞系凋亡

目的研究腹腔热灌注(HIPE)和顺铂对人卵巢癌细胞凋亡的影响。方法将人卵巢癌OVCAR-3和A2780细胞各分为对照组、顺铂组、热疗组和热化疗组;显微镜观察卵巢癌细胞形态;AO/GV染色、流式细胞仪检测卵巢癌细胞凋亡细胞比率;荧光定量PCR(q-PCR)检测卵巢癌细胞凋亡相关基因caspase7、caspase9和Bid等。结果 1)顺铂组、热疗组及热化疗组卵巢癌细胞回缩,部分漂浮,其中热化疗组细胞变化最明显;2)顺铂组、热疗组及热化疗组较对照组凋亡细胞增多,其中热化疗组凋亡细胞数量最多(P0.05);3)顺铂组、热疗组、热化疗组较对照组凋亡细胞比率增多,热化疗组凋亡细胞比率最大(P0.05);4)促凋亡相关基因caspase3、caspase6、caspase7、caspase8、caspase9、Bax、Bak和Bid在热化疗组表达明显高于其他各组,凋亡抑制相关基因Bcl-2、Bcl-x L、Mcl-1和c-FLIP表达较其他各组明显下降。结论顺铂和热疗可促进卵巢癌细胞凋亡,且热化疗联合作用效果最明显。     

RNAi靶向沉默FLIP基因促进TRAIL诱导卵巢癌A2780细胞凋亡

目的 探讨RNAi靶向沉默FLIP基因对TRAIL诱导卵巢癌细胞凋亡的影响。方法 设计并体外化学合成FLIP序列特异性双链RNA,在脂质体（LipofectamineTM2000）介导下转染人卵巢癌细胞株A2780。采用半定量RT-PCR和Western blot法检测FLIP-siRNAs转染前后A2780细胞FLIP mRNA和蛋白表达的变化,并筛选出抑制作用最强的FLIP-siRNA.四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测FLIP-siRNA转染前后TRAIL对A2780细胞生长抑制作用的变化。以Annexin-V-PI双染法流式细胞术（FCM）比较FLIP-siRNA转染前后TRAIL诱导的细胞凋亡的情况。结果 特异性FLIP-siRNA片段能有效降低A2780细胞中FLIP mRNA和蛋白水平（P<0.01）,并具有时间依赖性;转染FLIP-siRNA后,TRAIL对A2780细胞的生长抑制作用明显增强（P<0.05）,TRAIL诱导的细胞凋亡也显著增加（P<0.05）。结论 靶向FLIP基因的siRNAs可在转录和翻译水平抑制FLIP表达,并可增加细胞对TRAIL的敏感性。     

Annexin A3抑制顺铂诱导人卵巢上皮癌细胞凋亡

目的 进一步探讨annexin A3能否通过凋亡途径调节卵巢癌细胞对顺铂敏感性.方法 运用反转录病毒载体构建及目的细胞感染技术,获得annexin A3稳定上调和稳定下调卵巢癌细胞系,运用annexin V/碘化丙啶分析方法和免疫印迹法检测细胞凋亡率、细胞内caspase蛋白裂解水平和annexin A3表达水平.结果 顺铂敏感细胞annexin A3表达水平上调后,60μg/mL顺铂诱导细胞凋亡率由68.72%±1.01%下调至29.13%±2.61%(P<0.05);高浓度顺铂诱导caspase和PARP蛋白裂解.相反,顺铂耐药细胞内mumxin A3水平下调后,凋亡率由35.05%±3.06%上升至76.73%±6.42%(P<0.05),低浓度顺铂诱导caspase和PARP蛋白裂解.此外,annexin A3还能够显著抑制卵巢癌细胞内P38 MAPK磷酸化.结论 Annexin A3能通过抑制细胞凋亡调节卵巢癌细胞对顺铂的敏感性.     

上调分子伴侣mortalin经由MAPK-ERK信号转导通路促进卵巢癌细胞增殖

目的 通过获得稳定表达mortalin的卵巢癌细胞株（A2780、A2780/cis）,检测mortalin与卵巢癌细胞增殖的关系及可能机制。方法 CCK-8实验检测mortalin过表达组和对照组细胞增殖的变化;通过流式细胞术检测mortalin过表达对卵巢癌细胞周期的影响;Western blotting检测mortalin上调表达后,卵巢癌细胞中MAPK/ERK和JNK/SAPK信号通路蛋白的变化。 结果 Mortalin上调表达促进卵巢癌细胞A2780和A2780/cis的增殖。Mortalin通过加快卵巢癌细胞由G₁期快速过渡到G₂/M期,促进细胞增殖,且MAPK/ERK信号通路参与该过程。结论 Mortalin上调表达促进了卵巢癌细胞的增殖,与其对MAPK-ERK信号通路的激活有关。     

应用XIAP siRNA逆转卵巢癌顺铂耐药性的研究

目的本研究旨在探讨应用siRNA下调XIAP在卵巢癌耐药细胞中的表达而逆转其对顺铂的耐药性。方法应用Western Blot、Hoechst 33258等检测卵巢癌顺铂敏感细胞株COC1和耐药株COC1／DDP中XIAP表达和卵巢癌细胞的凋亡率,并将XIAPsiRNA导入耐药细胞,比较转染前、后耐药细胞对顺铂耐药性的改变。结果卵巢癌耐药细胞COC1／DDP中XIAP蛋白表达明显比敏感细胞COC1中高（P〈0．05）。XIAP siRNA可下调耐药细胞COC1／DDP中XIAP的表达,并显著增加对顺铂敏感性（P〈0．05）。结论XIAP siRNA可在一定程度上逆转卵巢癌顺铂耐药。     

微小RNA-98-5p靶向调控核糖核苷酸还原酶小亚基M2调控宫颈癌细胞顺铂的耐药性

目的 探讨微小RNA（miR)-98-5p对顺铂(DDP)耐药宫颈癌细胞顺铂敏感性的调控及其机制。 方法 用脂质体法将DDP+miR-NC组（转染miR-NC）、DDP+miR-98-5p组（转染miR-98-5p mimics）、DDP+si-NC组（转染si-NC）、DDP+si-核糖核苷酸还原酶小亚基M2（RRM2）组（转染si-RRM2）、DDP+miR-98-5p+pcDNA组（共转染miR-98-5p mimics和pcDNA）、DDP+miR-98-5p+pcDNA-RRM2组（共转染miR-98-5p mimics和pcDNA-RRM2）转染至HeLa/DDP组细胞;Real-time PCR、Western blotting、CCK-8、迁移实验（Transwell）和双荧光素酶报告基因检测细胞中miR-98-5p、RRM2、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、P21、基因金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的表达、细胞的抑制率、半数抑制浓度（IC50）、迁移和侵袭及荧光活性。 结果 与HeLa组细胞相比,HeLa/DDP组细胞中miR-98-5p表达显著降低,RRM2表达显著升高,IC₅₀值显著升高（P<0.05）;过表达miR-98-5p或抑制RRM2可明显抑制HeLa/DDP细胞的增殖、迁移和侵袭,下调cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白,上调P21蛋白;miR-98-5p明显抑制野生型RRM2细胞的荧光活性,并且过表达RRM2反转了miR-98-5p对HeLa/DDP细胞增殖、迁移侵袭的抑制作用。 结论 MiR-98-5p可抑制顺铂耐药宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,增强对顺铂的敏感性,其机制与靶向RRM2相关,将可为顺铂耐药宫颈癌细胞的治疗提供方向。     

白蛋白结合型紫杉醇调控SLC25A25-AS1对肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨白蛋白结合型紫杉醇是否调控SLC25A25-AS1影响肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭.方法 将A549细胞分为对照组、低剂量药物组、中剂量药物组、高剂量药物组、高剂量药物+si-NC组、高剂量药物+si-SLC25A25-AS1组.细胞计数试剂盒(CCK-8)法、集落形成实验检测细胞增殖;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法分析上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)和神经钙黏素(N-cadherin)蛋白表达量.结果 与对照组比较,中、高剂量药物组A549细胞活力、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、划痕愈合率、N-cadherin蛋白表达量显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白和SLC25A25-AS1表达量显著升高(P<0.05).与高剂量药物+si-NC组比较,高剂量药物+si-SLC25A25-AS1组A549细胞活力、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、划痕愈合率、N-cadherin蛋白表达量显著升高(P<0.05),E-cad-herin蛋白表达量显著降低(P<0.05).结论 白蛋白结合型紫杉醇可抑制肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调SLC25A25-AS1表达有关.