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相似文献
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1.
将人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的cDNA插入融合蛋白表达载体pGEX-4T-1中,构建成质粒pGEX/MCP转化大肠杆菌JM109,经IPTG诱导后合成GST-MCP-1融合蛋白。用12%SCS-PAGE检测在30kD左右有新生蛋白条带出现,表达量约占菌体总蛋白的31.7%,趋化实验证明,该产物具备明确的单核细胞趋化活性。  相似文献   

2.
免疫组化和PCR—SSCP检测p53基因异常的一致性探讨   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨免疫组化检测p53蛋白表达和PCR-SSCP检测p53基因突变的一致性。方法:单克隆抗体DO-7检测85例非小细胞肺癌(NSCLC)的p53蛋白表达,PCR-SSCP检测其中31例腺癌的p53基因突变。结果:85例NSCLC中p53蛋白表达阳性率为68%(58/85),31例腺癌中p53蛋白表达阳性率为61%(19/31),14例(46%)出现p53基因5~8外显子突变,p53蛋白免疫组化和PCR-SSCP检测p53基因突变无显著相关(χ2=0.1,P=0.76),其一致率为52%。结论:p53蛋白表达并不能很好地反映p53基因突变。  相似文献   

3.
将人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的cDNA插入融合蛋白表达载体pGEX-4T-1中,构建成质粒pGEX/MCP转化大肠杆菌JM109,经IPTG诱导后合成GST-MCP-1融合蛋白。用12%SDS-PAGE检测在30kD左右有新生蛋白条带出现,表达量约占菌体总蛋白的31.7%。趋化实验证明,该产物具备明确的单核细胞趋化活性。  相似文献   

4.
P物质对人多形核白细胞功能的影响   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的研究P物质(SP)对人多形核白细胞(PMN)有关方面作用及可能的意义。方法应用硝基四氮唑蓝(NBT)还原法,荧光法和Griess反应等测定不同浓度SP单独或在细菌衍生肽类似物FMLP甲酯存在下对PMN产生超氧阴离子(O-2,)过氧化氢(H2O2),一氧化氮(NO)和PMN膜上一功能酶中性内肽酶(NEP)活性及膜流动性的影响。结果SP(≥10-5mol/L)可剌激PMN显著产生O-2,H2O2和NO,后者被L-单甲基精氨酸(NMMA)所抑制;SP(10-8~10-4mol/L)能显著增加FMLP甲酯剌激PMN产生H2O2,并显浓度递增依赖性;SP与FMLP甲酯协同可下调NEP活性;SP能提高PMN膜流动性。结论SP可通过PMN介导调节炎症反应,对PMN的杀菌功能有增强作用,SP对PMN的这些影响可能是神经系统参与炎症和免疫调节的途径之一。  相似文献   

5.
目的研究ER阳性和ER阴性人乳腺癌细胞株p53、mdm-2和p21WAF1蛋白的表达及其与细胞生物学特性的关系。方法应用细胞培养、基因转染和免疫组化染色LSAB法等技术,检测ER阳性、表达野生型p53(wtp53)蛋白的MCF-7细胞和ER阴性、表达突变型p53(mtp53)的MDA-MB-231细胞以及ER转染阳性MDA-MB-231细胞中p53、mdm-2和p21WAF1蛋白的表达水平,比较其与细胞生物学特性的关系。结果(1)MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞p53蛋白的性质和分布明显不同,前者p21WAF1和mdm-2蛋白的表达水平明显高于后者(P<0.05),且前者的生物学特性较后者为好。(2)ER质粒转染MDA-MB-231细胞后,其p53蛋白的表达水平降低(P<0.05),而mdm-2蛋白的表达水平增加(P<0.05),生物学特性得以改善。结论乳腺癌细胞ER状态与p53和mdm-2蛋白的表达水平以及生物学特性有关。  相似文献   

6.
缺氧对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及其传递途径   总被引:1,自引:1,他引:1  
本文观察了低氧对离体培养成年牛肺动脉平滑肌细胞(PASMC)^3H-TdR参入的影响,并用异搏定、H7、PMA和EGF进行干预实验,对MSC增殖中信息传递途径作了初探。结果显示:(1)缺氧24h,PASMC^3H-TdR参入显著增高。(2)异搏定及H7显著降低低氧H-SMC^3H-TdR参入,而PMA及EGF显著增加HSMC^3HTdR参入。(3)H-SMC对PMA和EGF反应强于常氧N-SMC;  相似文献   

7.
绿脓杆菌外毒素A对人PMN功能的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
为了证明绿脓杆菌外毒素A(PEA)对人中性粒细胞(PMN)的破坏以及对pMN功能的影响,本文报道用不同剂量的pEA和作用时间作用于PMN,并用抗pEA抗体进行中和保护,分别测定完存的PMN数目、超氧(O2-)水平、特殊颗粒(SG)数目、胞内杀菌力(ICBA)和吞噬百分数。结果表明,PEA40~100μg/ml作用1~3h,使PMN数目、O2-水平、SG数目和ICBA测值明显下降,作用2h以后使其吞噬百分数也明显下降;抗pEA抗体能阻止上述指标测值的下降(p<0.05)。上述结果证实:PEA是造成PMN杀菌力和完存PMN数目下降的直接原因。  相似文献   

8.
目的:初探炎性刺激对人多核白细胞(PMN)和脐静脉内皮细胞(HUVEC)的血小板内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1)表达的影响和PECAM-1的可能作用。方法:使用流式细胞仪和免疫组化法,观察脂多糖(LPS)、白介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-a对PMN和HUVEC PECAM-1表达的变化。结果:LPS、1L-1β和TNF-a可引起PMN表达PECAM-1蛋白减少,而对HUVEC PECAM-1的表达无显著影响,但组化显著在HU-VEC连接部的PECAM-1染色变淡。结论:上述炎性刺激物不仅可引起PMN表达PECAM-1减少、激活PMN,而且可改变内皮细胞PECAM-1的分布,因此PECAM-1在炎症中可能起重要作用。  相似文献   

9.
bcl-2、p53蛋白及PCNA表达与横纹肌肉瘤临床病理相关性研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:研究横纹肌肉瘤(RMS)中bcl-2、p53、PCNA表达与其临床病理的相关性。方法:对50例(随访41例)横纹肌肉瘤进行免疫组化ABC法标记。结果:bcl-2、p53基因蛋白和PCNA,发现bcl-2、p53、PCNA阳性表达率分别为28%、72%、70%,其阳性表达与年龄、性别及不同组织类型的RMS无关(P>0.05)。但与分化程度有关,p53、PCNA在低分化RMS阳性率分别为85%、95%,显著高于高分化RMS42.8%和14.3%(P<0.05),随访存活1年以内的p53、PCNA阳性率均为86.7%,亦明显高于存活超过3年以上的阳性率33.3%和41.7%(P<0.05)。而bcl-2在低分化RMS阳性20%显著低于高分化71.4%(P<0.05),随访存活1年以内的阳性率13.4%明显低于存活超过3年以上的41.4%(P<0.05)。p53与bcl-2阳性表达呈明显负相关,p53阳性率越高,而bcl-2阳性率越低。结论:PCNA、p53、bcl-2蛋白表达能比较准确地反映RMS的生物学特性,p53、bcl-2可作为肿瘤预后显著相关的有效指标。  相似文献   

10.
目的:探讨bcl-2和p53蛋白的表达与端粒酶活性的相关性及其与HCC发生的关系。方法:利用端粒酶原位标记法显示端粒酶活性,采用S-P法免疫组化技术的检测bcl-2和p53蛋白。结果:端粒酶在HCC中的阳性率(91.7%)显著高于癌旁肝组织(58.3%)(P〈0.05),端粒酶活性强度与HCC分化程度无关(P〉0.05);癌组织中bcl-2和p53蛋白的阳性率均高于癌旁组织(P〈0.01);HCC  相似文献   

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