Expression of connexins and their significance in skin pathological scar and scar carcinoma tissues

目的 探讨连接蛋白Cx26、Cx32、Cx43在皮肤病理性瘢痕及瘢痕癌中的表达及意义.方法 以皮肤病理性瘢痕、瘢痕癌组织为研究对象,以正常皮肤组织为对照.采用免疫组化SP法分别检测Cx26、Cx32和Cx43蛋白的表达,采用核酸分子原位杂交法检测Cx26、Cx32、Cx43 mRNA的表达,结合图像分析,分别观测3组中所检各项指标的表达(平均光密度和阳性面积),所有数据输入计算机后运用SPSS 16.0软件包进行统计学分析.结果 (1)在瘢痕癌组中,3项检测指标均呈弱阳性或阴性表达,低于病理性瘢痕组和正常皮肤组;(2)在病理性瘢痕组中,Cx26及其mRNA的表达比瘢痕癌组和正常皮肤组高;(3)Cx43及其mRNA在正常皮肤表皮、病理性瘢痕和瘢痕癌组织中的表达水平和表达强度逐渐降低,两两比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 (1)3种连接蛋白在瘢痕癌中低表达,可能与瘢痕癌的发生均有相关性.(2)Cx26及其mRNA在病理性瘢痕中的高表达可能参与了病理性瘢痕上皮细胞的增生.(3)与正常皮肤表皮相比较,病理性瘢痕上皮Cx43及其mRNA的表达水平降低,可能是瘢痕癌变的危险信号.     

不同瘢痕组织中Survivin蛋白的表达及临床意义

目的分析不同瘢痕组织中Survivin蛋白的表达及临床意义。方法选取58例病理性瘢痕组织,20例正常皮肤组织,检测病理性瘢痕及正常皮肤中Survivin蛋白表达的阳性率、分布情况及Survivin蛋白IOD值。结果光学镜下,病理性瘢痕在表皮基底层、部分棘层和表皮下均可见Survivin阳性细胞,胞浆及部分胞核颜色为棕黄色至褐色;病理性瘢痕组织中Survivin蛋白阳性表达率显著高于正常皮肤(P0.05)。瘢痕疙瘩中和癌变瘢痕中Survivin蛋白IOD值均显著高于增生性瘢痕(P0.05);癌变瘢痕与瘢痕疙瘩中的Survivin蛋白IOD值比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 Survivin抗凋亡的作用参与了病理性瘢痕形成过程,研究Survivin蛋白的表达对鉴别和诊断不同瘢痕组织有重要的意义。病理性瘢痕组织中Survivin蛋白阳性表达率显著高于正常皮肤,瘢痕疙瘩和癌变瘢痕中Survivin蛋白IOD值显著高于增生性瘢痕,故Survivin蛋白的阳性表达情况及Survivin蛋白IOD值对鉴别和诊断不同瘢痕组织有重要的意义。     

皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中连接蛋白的表达及意义

目的探讨连接蛋白Cx26、Cx32、Cx43在皮肤病理性瘢痕及瘢痕癌中的表达及意义。方法以皮肤病理性瘢痕、瘢痕癌组织为研究对象,以正常皮肤组织为对照。采用免疫组化SP法分别检测Cx26、Cx32和Cx43蛋白的表达,采用核酸分子原位杂交法检测Cx26、Cx32、Cx43 mRNA的表达,结合图像分析,分别观测3组中所检各项指标的表达(平均光密度和阳性面积),所有数据输入计算机后运用SPSS 16.0软件包进行统计学分析。结果 (1)在瘢痕癌组中,3项检测指标均呈弱阳性或阴性表达,低于病理性瘢痕组和正常皮肤组;(2)在病理性瘢痕组中,Cx26及其mRNA的表达比瘢痕癌组和正常皮肤组高;(3)Cx43及其mRNA在正常皮肤表皮、病理性瘢痕和瘢痕癌组织中的表达水平和表达强度逐渐降低,两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 (1)3种连接蛋白在瘢痕癌中低表达,可能与瘢痕癌的发生均有相关性。(2)Cx26及其mRNA在病理性瘢痕中的高表达可能参与了病理性瘢痕上皮细胞的增生。(3)与正常皮肤表皮相比较,病理性瘢痕上皮Cx43及其mR-NA的表达水平降低,可能是瘢痕癌变的危险信号。     

皮肤基底细胞癌极少转移生物学行为相关因素分析

目的 探讨Cx43、Kai1、survivin、PTEN与皮肤基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)极少发生转移生物学行为的相关性.方法 采用免疫组化SP法,分别检测BCC和皮肤鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)组织中Cx43、Kai1、survivin、PTEN的表达;采用原位杂交法检测Cx43 mRNA的表达.各项检测指标进行统计学处理.结果 (1)Cx43蛋白、Cx43 mRNA在BCC中呈阳性表达,在SCC中呈阴性或弱阳性表达,表达差异均具有统计学意义(P<0.05).(2)Kai1、PTEN蛋白在BCC中呈阳性表达,在SCC中呈阴性表达,表达差异均具有统计学意义(P<0.05).(3)survivin蛋白在BCC中呈弱阳性或阴性,在SCC中的染色呈强阳性,其表达具有统计学意义(P<0.05).(4)相关分析显示,BCC组织中,PTEN的表达与Kai1呈正相关(r =0.629,P<0.01),与Cx43的表达也呈正相关(r=0.519,P<0.01);Cx43蛋白与Cx43 mRNA的表达呈正相关(r=0.732,P<0.01).结论 与SCC相比较,BCC中Cx43及其mRNA、Kai1、PTEN的高表达,survivin的低表达,可能与BCC生长缓慢及极少转移的特有生物学行为有关.     

连接蛋白43在病理性瘢痕成纤维细胞中的表达

目的:探讨连接蛋白43(Cx43)及其构成的缝隙连接细胞间通讯(GJIC)在病理性瘢痕中的调控作用.方法:选择临床上不同病理分类的瘢痕组织(包括瘢痕疙瘩、增生性瘢痕)和正常修复组织,以正常皮肤为对照,应用免疫组织化学检测Cx43在成纤维细胞中的表达.结果:Cx43在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达明显少于正常修复组织及正常皮肤.结论:成纤维细胞Cx43的表达下调可能是造成病理性瘢痕组织中成纤维细胞间GJIC异常,从而导致病理性瘢痕发生的因素之一.     

Expression of Cx43 and CD147 and their significance in primary hepatocellular carcinoma

目的 探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中Connexin43(Cx43)和CD147蛋白的表达及意义.方法 采用免疫组化PV6000法检测74例HCC和20例正常肝组织中Cx43和CD147的表达.结果 Cx43和CD147在HCC组织中阳性率分别为27.03%、63.51%,在正常肝组织中阳性率分别为95.00%、30.00%,Cx43在正常肝组织中的阳性率明显高于HCC组织中的阳性率,差异有显著性(P<0.01);CD147在HCC组织中阳性率明显高于正常肝组织的阳性率,差异有显著性(P<0.01).Cx43和CD147阳性表达与肝细胞癌的肿瘤大小、分化程度、TNM分期及肝内血管癌栓具有相关性(P<0.05),与患者的年龄、性别、有无伴肝硬化、门静脉癌栓及术前血清甲胎蛋白水平无相关性(P>0.05).肝癌组织中Cx43表达下调,CD147表达上调,两者呈负相关(P<0.01).结论 联合检测HCC组织中Cx43和CD147的表达情况,可预测HCC的浸润和转移,对指导临床治疗和判断预后有重要意义.     

皮肤瘢痕及瘢痕癌组织中cyclin A、p21WAF1的表达及意义

目的 探讨cyclin A、p21WAF1在皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌组织中的表达及意义.方法 以病理性皮肤瘢痕、皮肤瘢痕癌组织为研究对象,以正常皮肤组织为对照.采用免疫组化SP法分别检测cyclin A、p21WAF1蛋白的表达,采用核酸分子原位杂交法检测cyclin A mRNA、p21WAF1 mRNA的表达,结合图像分析,分别观测3组被检组织中所检各项指标的表达(平均光密度和阳性面积);所有数据输入计算机后运用SPSS 16.0软件包进行统计学分析.结果 (1)cyclin A、cyclin A mRNA在正常皮肤表皮和病理性皮肤瘢痕上皮中的表达呈阴性或弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性.瘢痕癌组的表达(平均光密度和阳性面积)与正常皮肤组及皮肤瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),但正常皮肤组与瘢痕组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)p21WAF1蛋白、p21WAF1 mRNA在正常皮肤表皮和病理性皮肤瘢痕上皮中的表达呈阴性或弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性.瘢痕癌组的表达(平均光密度和阳性面积)与正常皮肤组及皮肤瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01),但正常皮肤组与瘢痕组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(3)相关分析显示,在皮肤瘢痕癌中,cyclin A 与cyclin A mRNA(r=0.766,P<0.01)、p21WAF1与p21WAF1 mRNA(r=0.791,P<0.01)的表达呈正相关;cyclin A与p21WAF1蛋白(r=0.656,P<0.01)的表达呈正相关;cyclin A mRNA与p21WAF1 mRNA的表达呈正相关(r=0.475,P<0.05).结论 (1)cyclin A及其mRNA的高表达,可能与皮肤瘢痕癌的发生有关;(2)在瘢痕癌中,cyclin A、p21WAF1同时存在蛋白水平和基因水平的异常表达;(3)p21WAF1及其mRNA在瘢痕癌中的高表达可能与细胞周期调控的反馈机制有关.     

20例皮肤瘢痕癌中RAS蛋白表达及意义

目的探讨皮肤瘢痕癌中RAS蛋白(H-ras/N-ras/K-ras)表达及意义。方法以20例皮肤瘢痕癌组织为研究对象,以10例正常皮肤表皮和16例瘢痕上皮为对照。采用免疫组化SP法分别检测H-ras、N-ras、K-ras蛋白的表达并结合图像分析,分别观测各组被检组织中所检各项指标的表达(平均光密度和阳性面积)。结果 (1)H-ras、N-ras、K-ras蛋白在正常皮肤表皮和瘢痕上皮中呈阴性或弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性,瘢痕癌组的表达(平均光密度和阳性面积)与正常皮肤组和瘢痕组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)K-ras蛋白阳性信号在正常皮肤表皮呈胞核表达,在瘢痕上皮中同时出现胞核和胞质表达,在瘢痕癌中呈胞质表达,出现自胞核向胞质移位表达。(3)瘢痕癌中不管是组织学类型还是细胞的分化,均显示分化越高RAS蛋白表达越强,分化越低RAS蛋白表达越弱,高分化组与低分化组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 H-ras、N-ras、K-ras 3种蛋白的高表达以及K-ras蛋白的移位表达可能与瘢痕癌的发生有关3,种蛋白的表达强度与肿瘤细胞的分化成熟度相一致。     

病理性瘢痕组织中转化生长因子β1的表达及其临床病理学意义

目的 研究病理性瘢痕组织中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达,探讨其在病理性瘢痕组织的形成过程中所起的作用,为瘢痕的治疗提供理论依据.方法 采用免疫组织化学SP法,检测增生性瘢痕组织、瘢痕疙瘩组织及正常皮肤组织各32例中TGF-β1的表达.结果 增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组患者TGF-β1阳性表达率分别为84.4%和90.6%,与正常对照组TGF-β1表达阳性率28.1%比较,差异有显著性(P<0.05).增生性瘢痕组与瘢痕疙瘩组患者TGF-β1阳性表达之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 TGF-β1在病理性瘢痕组织的形成过程中起着重要作用.     

间隙连接蛋白43在舌黏膜癌变过程中的表达

目的 研究间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在口腔黏膜癌变过程中的表达变化,探寻其与口腔黏膜癌变的关系及意义.方法 用4亚基硝氧喹啉(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)诱导SD大鼠口腔黏膜癌变,应用免疫组化方法检测Cx43在口腔黏膜癌变过程中各阶段的动态变化,分析Cx43与口腔黏膜癌变的关系.结果 Cx43蛋白主要表达于大鼠舌黏膜上皮细胞的胞膜、上皮基底层、棘层和颗粒层呈阳性染色,角质层未见表达.随着舌黏膜上皮异常增生程度的增加,Cx43的表达明显下降.在口腔鳞状细胞癌组织中,Cx43染色分布于癌细胞胞质以及鳞癌组织的角化珠内.Cx43在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、口腔鳞癌组织中阳性表达率分别为100.00％(10/10)、85.71％(12/14)、66.67％(8/12)、40.00％(4/10)、33.33％(4/12),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 4NQO诱发舌黏膜癌变的过程中,Cx43蛋白表达水平随病变程度加重而显著下降,提示Cx43表达异常参与了口腔黏膜的癌变过程.Cx43表达下降是口腔黏膜癌变的早期事件.     

原发性肝细胞癌组织中Connexin43和CD147的表达及意义

目的探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中Connexin43(Cx43)和CD147蛋白的表达及意义。方法采用免疫组化PV6000法检测74例HCC和20例正常肝组织中Cx43和CD147的表达。结果 Cx43和CD147在HCC组织中阳性率分别为27.03%、63.51%,在正常肝组织中阳性率分别为95.00%、30.00%,Cx43在正常肝组织中的阳性率明显高于HCC组织中的阳性率,差异有显著性(P<0.01);CD147在HCC组织中阳性率明显高于正常肝组织的阳性率,差异有显著性(P<0.01)。Cx43和CD147阳性表达与肝细胞癌的肿瘤大小、分化程度、TNM分期及肝内血管癌栓具有相关性(P<0.05),与患者的年龄、性别、有无伴肝硬化、门静脉癌栓及术前血清甲胎蛋白水平无相关性(P>0.05)。肝癌组织中Cx43表达下调,CD147表达上调,两者呈负相关(P<0.01)。结论联合检测HCC组织中Cx43和CD147的表达情况,可预测HCC的浸润和转移,对指导临床治疗和判断预后有重要意义。     

存活素在胰腺癌组织中的表达

目的　探讨胰腺癌中存活素(survivin)表达的意义。方法　应用免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)、Western印迹法检测59例胰腺癌及其癌旁组织、11例慢性胰腺炎组织、7个胰腺癌细胞系中存活素的表达。结果　胰腺癌组织中存活素的阳性表达率为72. 8% (43 /59),与胰腺癌分期及分化程度无关(P>0 .05),癌旁组织及慢性胰腺炎组织中存活素表达均为阴性; 7个胰腺癌细胞系存活素mRNA及蛋白均为阳性表达。结论　存活素在胰腺癌中的表达具有一定的肿瘤特异性,可能是胰腺癌治疗的一个理想靶目标。     

宫颈癌组织中survivin与BCL-X表达及其相关性

目的研究宫颈癌组织中survivin、BCL-X的表达及其相关性。方法用免疫组化SP法检测survivin、BCL-X在10例正常宫颈组织及51例宫颈癌组织中的表达。结果Survivin在正常宫颈组织中不表达,在宫颈癌组织中表达阳性率为64.71%,Survivin表达阳性率与宫颈癌病理分级与临床分期呈正相关。Survivin表达阳性率与宫颈癌组织中BCL-X表达正相关。结论Survivin异常表达引起的凋亡抑制在宫颈癌发生、发展中起一定作用,其过表达提示宫颈癌预后不良。宫颈癌组织中survivin的表达与BCL-X的表达呈正相关。     

Aberrant expression pattern of gap junction connexins in endometriotic tissues

The expression of gap junction connexins (Cx) in the female reproductive tract of rodents and in the human endometrium is highly regulated by steroid hormones. Here we have investigated the distribution and regulation properties of Cx43, Cx26 and Cx32 in the human ectopic endometrium of 41 patients, using immunohistochemistry. The biopsies were obtained during the early or late follicular phase (26 cases), during the corpus luteum phase (five cases) and after a 6 month treatment with a gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) agonist (three cases) or progestin (seven cases). Aberrant expression of Cx43 was found in the epithelium of nearly all endometriotic glands whereas Cx26, typical for human uterine epithelium cells, was only detected in 18 cases; in 17 it was co-expressed with Cx43. The stromal compartment of the tissues did not express any connexins investigated. Staining for Cx32 was absent in all endometriotic tissues. Strong expression of Cx43 was correlated with a high serum value of 17 beta-oestradiol, whereas a strong expression of Cx26 was found with high values of progesterone mainly in patients after progestin treatment. The epithelium of endometriotic implants collected after GnRH agonist treatment expressed Cx26 and Cx43 only moderately. The patterns described demonstrate an aberrant connexin expression and a different hormonal regulation pattern in endometriotic tissues compared to the normal cyclic uterine endometrium, thus indicating a high dedifferentiation from the normal situation. However, endometriosis still remains a hormonally-dependent benign disease, and hence, can be treated hormonally.      

渗透压变化对缝隙连接蛋白在培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞和神经元表达的影响

目的观察渗透压改变对培养的下丘脑星形胶质细胞的缝隙连接蛋白Connexin43（Cx43）和神经元的缝隙连接蛋白Cx32表达的影响。方法体外培养孕14d或新生1d SD大鼠下丘脑的神经元和星形胶质细胞并进行纯化和鉴定。实验各分两组，第1组：细胞由等渗培养液移至高渗培养液（含9％NaCl）分别放置1min、3min、5min、10min和15min后将液体吸出常规固定；第2组：细胞先置于高渗培养液中15min后换成等渗培养液，分别在1min、3min、5min和10min后将等渗培养液吸出常规固定。两者均进行抗Cx43或抗Cx32的免疫荧光染色，Confoeal显微镜观察。结果第1组，Cx43在刺激1min后在星形胶质细胞表达比对照组有所增加，3min达到高峰，以后逐渐降低，15min恢复正常；而Cx32在刺激后1min的神经元中表达比对照组增加，5min达到高峰，以后降低。15min恢复正常。第2组同样为Cx43在星形胶质细胞刺激1min后表达增加，3min达到高峰，以后降低，10min恢复正常；神经元的Cx32表达在刺激后5min达到高峰，以后降低，10min恢复正常。两组Cx43表达的高峰期均早于Cx32。结论Cx43和Cx32可能参与星形胶质细胞与神经元渗透压的调节。     

人鼻咽上皮组织中间隙连接蛋白基因表达谱的研究

目的:研究细胞间隙连接蛋白基因(Cx)在正常人鼻咽上皮组织中的表达谱,在此基础上探索细胞间隙连接蛋白在鼻咽癌组织中的表达,为研究鼻咽组织癌变的原因和机理提供新思路。方法:根据基因库中人间隙连接蛋白基因的mRNA序列,合成间隙连接蛋白基因家族中13个基因的PCR引物,用RT-PCR的方法检测这些基因在鼻咽组织中的表达。结果:18例正常人鼻咽组织中,检出Cx30、31.1、37、40、43分别有16、16、17、15、17例表达,Cx26、31、32、45分别有10、11、9、9例表达,Cx36、46、46.6、50分别有1、0、1、3例表达。结论:正常人鼻咽组织中,主要表达的间隙连接蛋白为Cx30、31.1、37、40、43。     

Remodeling of cardiac fibroblasts following myocardial infarction results in increased gap junction intercellular communication

BackgroundWe have recently shown that native murine ventricular fibroblasts express both connexin43 (Cx43) and Cx45, and that the level of Cx43 expression influences intercellular coupling and cell proliferation. Relatively little is known, however, about how myocardial infarction (MI) influences expression of Cx43, or how altered Cx43 expression may affect fibroblast function post-MI. Fibroblasts are critical for infarct healing and post-infarct ventricular remodeling. They can couple electrically with cardiac myocytes and influence myocardial activation patterns. Thus, Cx43 remodeling and the level of intercellular communication in fibroblasts expressed in the infarcted heart were the subject of the present investigation.MethodsFibroblasts were isolated from both infarct scar and remote, noninfarcted regions of murine hearts 6 d after coronary ligation. Expression levels of Cx43, α-smooth muscle actin and N-cadherin were quantified by immunoblotting. Gap junctional intercellular communication was quantified by Lucifer yellow dye transfer.Results and ConclusionsFibroblasts isolated from infarcted hearts exhibited marked up-regulation of Cx43 protein expression and enhanced intercellular coupling. Exogenous administration of transforming growth factor-β (TGF-β) to fibroblast cultures from normal, non-operated hearts produced comparable up-regulation of Cx43, suggesting that increased intercellular communication between fibroblasts in infarct and peri-infarct regions may be secondary to activation of a TGF-β pathway. Unlike cardiac myocytes that down-regulate Cx43, presumably to limit intercellular transmission of biochemical mediators of ischemic injury, fibroblasts may up-regulate Cx43 to maintain electrical and metabolic coupling at a time when intercellular communication is compromised.     

Survivin expression in hepatocellular carcinoma: correlation with proliferation, prognostic parameters, and outcome.

Survivin is a novel inhibitor of apoptosis. It is detected in fetal and neoplastic adult tissue, but not in normal tissues. Several recent studies have shown that survivin not only inhibits apoptosis, but also accelerates cancer cell proliferative activity. Expression of the protein may be of prognostic significance and therapeutic relevance in many cancers. We investigated survivin expression in hepatocellular carcinoma, correlating results with proliferation (MIB-1), prognostic factors, and outcome. Paraffin-embedded sections of 72 hepatocellular carcinoma were immunostained for survivin and MIB-1 using tissue microarray technology. Expression was evaluated in nuclei and cytoplasm as intensity (0-3+), and percentage of positive cells scored on a four-tiered system with less than 10%=negative; 10-25%=1; 26-50%=2; 51-75%=3; and 76-100%=4. Frequency of nuclear survivin expression was 43%. There was a significant correlation between nuclear survivin expression and nuclear grade (P=0.0271), microvascular invasion (P=0.0064), mitotic rate (P=0.0017), and MIB-1 (P=0.0001), as well as local recurrence (P=0.0487), and disease-free survival (P=0.0098). Histologic grade (P=0.0544) and stage (P=0.0548) tended to correlate with survivin expression, which did not correlate with cirrhosis, tumor necrosis, multiple tumors, metastatic disease, or overall survival. Survivin expression correlates with poor prognostic parameters (high nuclear and histologic grade, microvascular invasion, increased proliferation (mitotic count, MIB-1)), local recurrence, and shorter disease-free survival, but does not correlate with overall survival. An important role is suggested for survivin in progression, recurrence, and treatment of hepatocellular carcinoma.