低分子量多肽基因多态性与支气管哮喘的相关性探讨

支气管哮喘的发病涉及遗传、免疫和环境等因素。国内外已有报道，支气管哮喘与ＭＨＣ基因有关。低分子量多肽（ｌｏｗｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ｐｅｐｔｉｄｅ，ＬＭＰ）作为加工抗原蛋白酶体的亚基，其基因定位于人第６对染色体短臂上的ＭＨＣ区域，并与ＨＬＡ－Ｉ、Ⅱ类基因一样具有多态性［1.2］。关于 ＬＭＰ基因的多态性与支气管哮喘的关系国内尚无人问津。为此，我们检测了５５例支气管哮喘患者及ｌ００例正常人ＬＭＰ基因的频率，以探讨ＬＭＰ基因在支气管哮喘发病中的意义。ｌ 对象和方法１．１ 研究对象 正常人１００例，…     

中国南京地区汉族人HLA－DR4DNA的快速分型

应用ＡＲＭＳ（ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｆｒａｃｔｏｒｙｒｎｕｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ）方法对南京地区１００例汉族健康人ＨＬＡ－ＤＲ４进行基因分型，结果表明，本地区汉族人ＨＬＡ－ＤＲ４基因纯合子占６％，杂合子占１５％，非ＤＲ４占７９％。本法较ＰＣＲ／ＳＳＯ法简单、快速，结果可靠，可用于ＨＬＡ配型。检测结果为ＨＬＡ相关联疾病及人类学的研究提供了参考依据。     

家族性肥厚型心肌病易感基因与HLA—DQ位点相关性…

本文报道应用ＰＣＲ／ＳＳＯ方法分析了４个无肌凝蛋白重链基因突变的肥厚型心肌病多发家系成员ＨＬＡ－ＤＱ基因多态性，进行患病同胞共享ＨＬＡ ＤＱＡ１／ＤＱＢ１单倍型分析和Ｌｏｄｓ分析，结果表明，本病的易感基因与ＨＬＡ－ＤＱ基因存在连锁关系，提示在ＨＬＡ－ＤＱ座位附近可能存在与家族性肥厚型心肌病易感性有关的致病基因。     

家族性肥厚型心肌病易感基因与HLA-DQ位点相关性分析

本文报道应用ＰＣＲ／ＳＳＯ方法分析了４个无肌凝蛋白重链基因突变的肥厚型心肌病多发家系成员ＨＬＡ－ＤＱ基因多态性，进行患病同胞共享ＨＬＡＤＱＡ１／ＤＱＢ１单倍型分析和Ｌｏｄｓ分析。结果表明，本病的易感基因与ＨＬＡ－ＤＱ基因存在连锁关系。提示在ＨＬＡ－ＤＱ座位附近可能存在与家族性肥厚型心肌病易感性有关的致病基因。     

可溶性HLA的研究进展

可溶性人类白细胞抗原（ｓＨＬＡ）是存在于人类血清中ＨＬＡ的可溶性形式。近几年来，人们对ｓＨＬＡ进行了大量的研究，发现ｓＨＬＡ与器官移植中的移植物抗宿主反应（ＧＶＨＲ）和移植器官的排斥有密切的关系。在某些自身免疫性疾病和感染性疾病中，血清中的ｓＨＬＡ变化也很大。本文就近几年人们对ｓＨＬＡ进行的研究予以了综述。     

可溶性HLA—I类分子的研究进展

可溶性ＨＬＡ－Ｉ类分子（ｓＨＬＡ－Ｉ），是以可溶形式存在在清或其他体液中的ＨＬＡ－Ｉ类抗原。健康个体血清中ｓＨＬＡ－Ｉ浓度为０．５－２５μｇ／ｍｌ。不同的个体ｓＨＬＡ－Ｉ水平的高低一表型相关。ｓＨＬＡ－Ｉ可抑制免疫耐受，并且与器官移植、肿瘤、ＨＩＶ等病毒感染、自身免疫病现象相关。     

中国胰岛素依赖性糖尿病病人（HLA－DR9）的HLA－DQB1基因顺序分析

用血清学方法研究显示中国人胰岛素依赖性糖尿病（ＩＤＤＭ）与ＨＬＡ－ＤＲ９相关。鉴于白种人中的研究显示ＩＤＤＭ与ＨＬＡ－ＤＱβ链第５７位氨基酸相关，Ａｓｐ－５７对ＩＤＤＭ呈抗性，ｎｏｎ－Ａｓｐ与ＩＤＤＭ易感性相关。我们用ＰＣＲ技术扩增了中国人中血清学ＤＲ９纯合的ＩＤＤＭ患者和正常对照的ＨＬＡ－ＤＱＢ１基因第二外显子并测定了核苷酸顺序，结果未发现ＩＤＤＭ特异ＨＬＡ－ＤＱＢ１等位基因，但发现ＩＤＤＭ病人ＨＬＡ－ＤＱＢ１５７位均为天冬氨酸。表明中国ＩＤＤＭ患者中的ＨＬＡ－ＤＱＢ１５７位天冬氨酸不一定具有保护个体抵抗ＩＤＤＭ的足够能力。ＩＤＤＭ易感性可能涉及多个基因位点的变化，另外还可能与其它遗传因素及环境因素有关。     

中国胰岛素依赖性糖尿病病人（HLA－DR9）的HLA－DQB1基因顺序分析

用血清学方法研究显示中国人胰岛素依赖性糖尿病（ＩＤＤＭ）与ＨＬＡ－ＤＲ９相关。鉴于白种人中的研究显示ＩＤＤＭ与ＨＬＡ－ＤＱβ链第５７位氨基酸相关，Ａｓｐ－５７对ＩＤＤＭ呈抗性，ｎｏｎ－Ａｓｐ与ＩＤＤＭ易感性相关。我们用ＰＣＲ技术扩增了中国人中血清学ＤＲ９纯合的ＩＤＤＭ患者和正常对照的ＨＬＡ－ＤＱＢ１基因第二外显子并测定了核苷酸顺序，结果未发现ＩＤＤＭ特异ＨＬＡ－ＤＱＢ１等位基因，但发现ＩＤＤＭ病人ＨＬＡ－ＤＱＢ１５７位均为天冬氨酸。表明中国ＩＤＤＭ患者中的ＨＬＡ－ＤＱＢ１５７位天冬氨酸不一定具有保护个体抵抗ＩＤＤＭ的足够能力。ＩＤＤＭ易感性可能涉及多个基因位点的变化，另外还可能与其它遗传因素及环境因素有关。     

用地高辛标记的PCR/SSO方法进行HLA-B27等位基因检测

目的建立检测ＨＬＡ－Ｂ２７等位基因的聚合酶链反应／顺序特异的寡核苷酸探针方法，并分析其实用性。方法采用４对引物Ｅ４０ｓ、Ｅ９０ａｓ；Ｅ９１ａｓ、Ｅ１３６ａｓ；Ｅ９１ｂｓ、Ｅ１８１ａｓ；Ｅ４０ｓ、Ｅ１３０ａｓ分别扩增靶ＤＮＡ，用１０个探针ＣＬ－１～９和ＰＡＮ－Ｂ２７分别进行杂交，探针用地高辛系统标记和检测，可检定Ｂ＊２７０１～２７０８共８个等位基因。结果通过对Ｂ２７等位基因已明确的８个阳性对照ＤＮＡ、５例Ｂ２７阴性标本及７５例阳性标本的检测，表明本方法技术稳定结果可靠，不会与其它ＨＬＡⅠ类基因产生交叉杂交而影响结果的指定。结论本研究为ＨＬＡ－Ｂ２７多态性和强直性脊椎炎关联研究提供了一种有效方法，也为ＨＬＡⅠ类分子基因分型研究积累了经验。     

HLA研究的新热点

研究ＨＬＡ分子对人类认识生命现象的本质及临床研究有重要作用，因此长期以来ＨＬＡ是生命科学研究的重点之一。第１３届国际组织相容性大会（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｗｏｒｋｓｈｏｐ ａｎｄ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ，ＩＨＷＣ）筹备委员会提出的ＨＬＡ发展方向，第１２届欧洲组织相容性会议展现的ＨＬＡ研究新动向及相关文献，反映了近期ＨＬＡ研究的一些热点。强调ＤＮＡ水平的ＨＬ     

过敏性哮喘与HLA相关性研究

过敏性哮喘（ＡＡ）是一种多因素引起的变态反应性疾病，其发生可能有其免疫遗传学基础。对上海地区６２例ＡＡ患者及２５０例正常人对照进行了ＨＬＡ分型，发现ＨＬＡ-ＤＲ３、ＤＲ７、ＤＱＷ２在病人组中明显高于正常人对照组，Ｘ２＞３．８４，Ｐ＜０．０５。而ＨＬＡ-Ａ９、Ｂ１５、ＤＲ２、ＤＱＷ１在病人组中明显低于正常人对照组。但这两组间的这种ＨＬＡ抗原频率差异Ｐ值经校正后不再显著。提示ＨＬＡ抗原与ＡＡ的发生无直接关系，而可能存在一个与ＨＬＡ-ＤＲ３、ＤＲ７、ＤＱＷ２处于连锁不平衡状态的ＡＡ易感基因，控制着ＡＡ的发生。     

HLA-A2基因亚型与中国南方汉族鼻咽癌相关性研究

70年代Ｓｉｍｏｎｓ等相继报道ＨＬＡ Ａ2抗原与新加坡华人鼻咽癌相关[1] ,但对中国大陆不同地域的多次血清学分型调查均未发现ＨＬＡ Ａ2与鼻咽癌之间存在关联[2 4 ] 。由于ＨＬＡ Ａ2等位基因存在种族和地域差异 ,应用基因分型技术可以更准确地揭示ＨＬＡ Ａ2与鼻咽癌遗传易     

091 HLA—Ⅱ类基石民人类疾病相关性研究进展

通过ＤＮＡ分型技术，已经明确了多疾病的发生和发展与ＨＬＡ－Ⅱ类基因相关联。可通过计算相对危险因子（ＲＲ）来判断ＨＬＡ等基因的频率。ＨＬＡ－Ⅱ类基因多态性可以改变ＨＬＡ分子、抗原、Ｔ细胞之间相互作用的特性，并因此控制对外来抗原（有时自身抗原（）的免疫应答。ＨＬＡ－Ⅱ类基因的编码的某一氨基酸序列控制着对疾 易感性和临床性状。构成ＨＬＡ基因群的各个基因是高度连锁的，因而与某一特定疾病关联的易感基因有可     

遗传性血色病(HH)分子遗传学研究进展

遗传性血色病是欧籍人群中一种重要遗传病，ＨＬＡＨ 基因的突变是本病发病的分子遗传学基础，其Ｃｙｓ２８２Ｔｙｒ 突变和Ｈｉｓ６３Ａｓｐ 突变是绝大部分患者发病分子基础的阐明，为欧籍人群ＨＨ 病家族的基因诊断提供了科学的依据。本文就此加以概述。     

家族性热性惊厥与HLA—D区基因关联性的研究

为探讨家族性热性惊厥与ＨＬＡ－Ｄ区基因的关系，应用限制性片段长度多态性方法，对５０个简单型热性惊厥（ｆｅｂｒｉｌｅｃｏｎｖｕｌｓｉｏｎｓ，ＦＣ）患儿及家系成员进行了人类白细胞抗原（ＨＬＡ）ＤＲ、ＤＱ区等位基因分型，并以１０１例健康人做对照。结果显示，ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱ区各等位基因在ＦＣ患者及有ＦＣ史亲属组中的频率较健康对照组无明显增高；而ＨＬＡ－ＤＲβ９（ＨＬＡＤＲＢ１＊０９０１）及ＤＱβ３ａ（ＤＱＢ１＊０３０２－０３０３，０４０１－０４０２）等位基因的表型频率较健康对照组明显降低。家系中无ＦＣ史亲属组中ＨＬＡ各等位基因的分布与健康对照组无差异。结果提示，ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱ基因区域内未发现与ＦＣ易感性有关的等位基因型。作为健康人群中频率最高的等位基因型。ＨＬＡ－ＤＲβ９和ＤＱβ３ａ等位基因可能具有某种生物学优势，在抵抗ＦＣ发病中起一定作用。     

人补体第4成分基因在各种HLA单倍型上的结构特点及其规律性

对５５个已知ＨＬＡ单倍型的细胞株进行人补体第４成分（Ｃ４）基因限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）检测，在所检测的２４种ＨＬＡ单倍型中观察到７种Ｃ４基因结构形式；探讨了Ｃ４蛋白质的遗传多态性与其基因结构多态性之间的关系；阐述了Ｃ４基因结构与ＨＬＡ祖传单倍型（ＡＨ）之间严格的规律性，相同的ＨＬＡ单倍型携带着同样的Ｃ４基因结构形式，即Ｃ４基因的结构多态性具有ＨＬＡ单倍型性质，而且有的Ｃ４基因结构形式为某一种ＨＬＡ单倍型所特有，即ＨＬＡ单倍型特异性；结果支持了ＨＬＡ祖传单倍型在遗传进化的过程中是高度保守的。     

可溶性HLA Ⅰ类分子检测在移植排斥反应监护中的意义

当同种异体器官移植病人发生移植排斥反应及感染时，血清可溶性ＨＬＡ（ｓＨＬＡ）抗原水平会出现变动。组织学方法确诊前约１０ｄ，血清ｓＨＬＡ抗原即可达正常水平的２～５倍，持续时间因个体差异有所不同，且受应用免疫抑制剂的种类和剂量影响。移植病人体内还存在供体器官释放或脱落的ｓＨＬＡ抗原，后者可与抗ＨＬＡ抗体形成免疫复合物存在于血循环中。因而，检测移植病人血清ｓＨＬＡⅠ类抗原水平，将有助于临床上对移植排斥反应的监护和估计移植物的预后。     

江浙沪地区汉人HLA－DQA1基因对重症肌无力的遗传易感性研究

采用一种新的多聚酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）基因分型法，研究了江浙沪地区中国汉人重症肌无力（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａｇｒａｖｉｓ，ＭＧ）４５例和对照组９８例的ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因。发现ＭＧ的胸腺瘤型和非胸腺瘤型ＤＱＡ１基因遗传背景有所不同，ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０３０１基因参与非胸腺瘤型ＭＧ（尤其是男性组）的遗传易感作用（ＲＲ＝３．６３，Ｐ＜０．０５），家系分析支持群体研究结果。推测了中国汉人ＭＧ可能的ＨＬＡ易感单体型：ＤＱＡ１＊０３０１ＤＱＢ１＊０３０３－ＤＲＢ１＊０９０１和ＤＱＡ１＊０３０１－ＤＱＢ１＊０３０３－ＤＲＢ１＊０４０６．结果从基因分型的角度统一了关于华人ＭＧ与ＨＬＡ相关抗原提法不一致的报道，并揭示了ＭＧ的其它ＨＬＡⅡ系统易感基因ＤＱＢ１＊０３０１、ＤＲＢ１＊０９０１及ＤＲＢ１＊０４０６或ＤＢＲ＊０４０５存在的极大可能性。为进一步分析ＭＧ的遗传易感机理提供了重要依据。     

遗传性血色病（HH）分子遗传学研究进展

遗传性血色病是欧籍人群中一种重要遗传病，ＨＬＡ－Ｈ基因的突变是本病发病的分子遗传学基础，其Ｃｙｓ２８２Ｔｙｒ突变和Ｈｉｓ６３Ａｓｐ突变绝大部分患发病基础的阐明，为欧籍人群ＨＨ病家族的基因诊断提供了科学的依据。本就此加以概述。     

γ射线引起HLA—B8表达缺失黑色素瘤细胞株的克隆研究

用７００ｒａｄγ射线照射ＨＬＡ－Ｂ８＋黑色素瘤细胞，于照射后第３天用抗ＨＬＡ－Ｂ８ＩｇＭ型单抗及补体做免疫选择。存活细胞培养１ｗ后，进行第２次免疫选择。存活细胞继续培养１ｗ，然后用有限稀释法在９６孔平底细胞培养板内进行克隆。从５×１０６个受诱变的细胞中共获得６个细胞克隆，其中１个克隆经流式细胞仪表型分析显示ＨＬＡ－Ｂ８无表达，此细胞的ＲＮＡ经ＲＴ－ＰＣＲ电泳分析表明ＨＬＡ－Ｂ各亚型基因的总表达量减弱，提示克隆到ＨＬＡ－Ｂ８表达缺失的突变株。本研究方法的建立及此突变株的获得，为进一步制备广谱型黑色素瘤“瘤苗”以及研究ＨＬＡｃｌａｓｓⅠ各亚型分子在肿瘤免疫中的作用提供了有力工具。