微生物药物筛选研究进展

微生物药物是指具有抗微生物作用及其它生理活性的微生物次生代谢产物及其衍生物。具有抗微生物感染及抗肿瘤等作用的抗生素是人类在二十世纪取得抗感染决定性胜利的最重要的武器 ,是经典的微生物药物 ,其在临床上占有不可替代的重要地位。而近二十年来不断发现和开发成功的非抗菌性的特异性酶抑制剂、免疫调节剂和受体拮抗剂等的生理活性物质已经成为当今微生物药物研究与开发的主体。微生物药物的筛选研究符合药物筛选的一般规律 ,但又有其自身的特殊性。药物筛选是指以获得新型药物先导化合物为目标的新药发现过程。经典微生物药物———…     

不育夫妇外周血淋巴细胞对男性抑制物质的LPCA反应

<正> 现知精液中含有男性抑制物质(maleinhibition material,MIM)或称精浆免疫抑制物质,它能抑制淋巴细胞对PHA及抗原的反应,抑制NK活性和E花环形成。为了研究MIM在男性不育或女性不孕中可能起的作用。我们用外周血淋巴细胞促凝血活性(LPCA)的方法检测76例怀孕夫妇和112例不孕夫妇、24例习惯性流产夫妇外周血淋巴细胞对MIM的细胞免疫反应。     

CCC-HPF-2细胞基因组DNA可作为STR分型标准物质

目的检测细胞培养传代过程中的基因稳定性,筛选符合中国人遗传特性的DNA标准物质,建立DNA标准细胞库。方法通过显微镜下观察、免疫组织化学、核型分析检测细胞传代过程中形态、分子表达及核型是否稳定;应用PCR方法检测细胞的外源微生物及种属来源;STR检测验证细胞在传代过程中STR表达谱的平衡性及稳定性。结果 CCC-HPF-2细胞呈成纤维细胞样;波形蛋白表达阳性,CK阴性;无外源微生物污染;细胞来源于人;所有15个STR基因座都得到扩增,呈现较好的扩增平衡性,各代细胞STR表达谱一致,表现了高度稳定性。结论 CCC-HPF-2细胞来源于人,30代内的该细胞DNA可作为STR分型标准物质。     

卡斯帕酶-3抑制剂的高通量筛选及活性化合物F03ZA-575的初步研究

目的筛选并初步研究微生物来源的卡斯帕酶-3(Caspases-3)抑制剂活性化合物。方法使用E.coli异源表达的卡斯帕酶-3作为靶酶,建立基于Caspase-3酶抑制剂的体外高通量筛选模型并对微生物来源的共计10026个次级代谢产物提取物进行了筛选。使用有机溶剂萃取、硅胶柱和LH-20柱层析、高压液相分离等方法从代谢产物中分离活性化合物并经各种理化性质及NMR分析等对活性化合物的结构进行确定。结果从10026个微生物来源的代谢产物中筛选获得了10个阳性样品。其中,从1株真菌的代谢产物中分离得到的化合物F03ZA-575对Caspase-3酶显示出较强的抑制活性,结构解析确认该化合物与Duclauxin同质。结论该化合物对Caspase-3酶的抑制活性将有助于揭示其抗肿瘤作用的机制。     

牛磺酸对大鼠心肌梗塞及血管活性物质的影响

本实验结扎在鼠左冠状动脉前降支建立心肌梗塞模型，观察牛磺酸对心肌梗塞的治疗作用及对血和活性物质的影响。结果显示外源性注射牛磺酸可减少大鼠心肌梗塞坏死面积和缩小梗塞范围：血清ＣＰＫ、ＣＫ ＭＢ活性下降，ＭＤＡ含量降低；牛磺酸还可使血浆内皮素、甘丙素、Ｐ物质、ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ水下下降，提示牛磺酸对急性心肌缺血坯死有明显的保护作用。     

人心肌干细胞的体外改良培养

 目的:用改良的培养基培养人心肌干细胞,并筛选鉴定。方法: 通过心脏外科手术取下右心耳组织,用组织块培养法来获得原代心肌干细胞,用改良的心肌干细胞培养液培养,增殖传代后进行心肌干细胞表面标志物的鉴定,再用免疫磁珠筛选以获得较纯的目的心肌干细胞。结果: 培养约2周后,贴壁良好的心肌组织块周围可见有小、圆、亮的细胞爬出,用Accutase(细胞消化液)短时间消化后冲洗细胞,培养增殖传代,其增殖能力与传统心肌干细胞培养液培养的细胞比较无显著差异,用流式细胞术鉴定c-Kit(干细胞表面标志物),其阳性率（6.8±2.1）%,之后用含抗c-Kit抗体（anti-c-Kit）的磁珠进行分选,即得较纯的c-Kit阳性（c-Kit+）心肌干细胞,它们可以分化为心肌细胞。结论: 通过心脏组织块贴壁培养法,用改良后的心肌干细胞培养基培养,再借助免疫磁珠的分选,同样可得到较纯的c-Kit+心肌干细胞。     

门脉高压形成,调节的细胞机制研究进展

肝星状细胞是肝非实质细胞中的一种,具有贮存脂肪、维生素A和参与维生素A代谢的功能。近年发现肝星状细胞具有收缩性,能调节肝窦血流,体外培养及体内研究发现,肝星状细胞的收缩性受内皮素及一氧化氮等多种血管活性物质调节,活化的肝星状细胞与血管活性物质的相互作用,可能是门脉高压形成的重要病理机制之一,对肝星状细胞收缩性进行调节有可能成为降低门静脉高压的新途径。     

备用根大鼠脊髓后角组织神经营养活性物质的分离纯化和生 …

目的 进一步分离纯化备用根大鼠部分去传入纤维支配（手术侧）的脊髓后角组织提取液，以获得某种营养活性物质。方法 用Ｓｕｐｅｒｄｅｘ Ｇ－７５ ｐｒｅｐ ｇｒａｄｅ凝胶层析、高效液相色谱（ＨＰＬＣ）层析和细胞培养等技术分离和检测神经营养活性物质。结果 手术侧脊髓后角组织提取液经Ｓｕｐｅｒｄｅｘ Ｇ－７５ ｐｒｅｐ ｇｒａｄｅ凝胶层析和ＨＰＬＣ层析后，得到的Ａ峰洗脱液具有促进体外培养鸡胚背根节（ＤＲＧ     

CCC-HPF-2细胞基因组DNA可作为STR分型标准物质

目的 检测细胞培养传代过程中的基因稳定性,筛选符合中国人遗传特性的DNA标准物质,建立DNA标准细胞库.方法 通过显微镜下观察、免疫组织化学、核型分析检测细胞传代过程中形态、分子表达及核型是否稳定；应用PCR方法检测细胞的外源微生物及种属来源；STR检测验证细胞在传代过程中STR表达谱的平衡性及稳定性.结果 CCC-H...     

金纳多治疗脑梗塞的疗效观察

目的：观察金纳多治疗脑梗塞病人的临床疗效及血液流变学指标和血管活性物质的变化,了解金纳多治疗脑梗塞的作用机理。方法：脑梗塞病人每日采用金纳多注射液２０ｍｌ加入到０．２％盐酸培他啶５００ｍｌ,静脉滴注２个疗程。同时对照观察患者血液流变学及血浆中ＴＸＢ２、６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α、ＥＴ、ＣＧＲＰ、ｔ－ＰＡ、ＰＡＩ等血管活性物质的变化。结果：金纳多组总有效率９０％,显效率７５％。对照组总有效率８３％,显效率４０．４％。金纳多组血液流变学指标改善显著。缩血管活性物质显著下降,舒血管活性物质显著升高;血浆组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）的活性升高,纤溶酶原激活剂抑制物（ＰＡＩ）的活性降低。结论：金纳多具有协同培他啶增加脑组织微循环血流、提高脑组织氧供应和防止脑组织损伤等作用,可以作为治疗脑梗塞的辅助药物。     

肠道微生物组的研究方法进展

微生物遍布于人体所有与外环境相通器官,尤以肠道微生物数量众多,对人体有着非常重要的生理意义。但因其种类繁多、体型微小,增加了对其全面、深入认识的难度。随着分子生物学、基因组学、生物信息学等学科的兴起,大大促进了微生物组研究技术的发展。微生物组研究的重点:一是多样性,包括分离、鉴定种类及定量;二是活性,即微生物在其所处环境中起何种功能作用。围绕这一主题,微生物组研究方法可概括为传统检测方法、构建基因文库法、遗传指纹图谱技术、分子杂交技术和DNA测序技术等。     

精神活性物质使用问题筛查量表中文版的信效度

目的:初步评估精神活性物质使用问题筛查量表(Alcohol,Smoking,and Substance Use In-volvement Screening Test,ASSIST)中文版的信度与效度。方法:采用横断面研究的方法对122名精神疾病与药物依赖者进行ASSIST与DSM-IV轴I诊断用定式临床检查手册病人版(Structured Clinical Interview for DSM-IVAxisI Disorders-Patient Edition,SCID-I/P)访谈,其中73例进行两位评定者独立评估获取评定者间一致性信息,并在一周后由同一评定者对上述73例对象重新评估获取重测信度。用受试者工作特征曲线(ROC)分析确定ASSIST的预测临界值,并以SCID诊断结果作为效标,评定ASSIST的效度。结果:AS-SIST对筛查所涉及的10类精神活性物质评分者一致性较高(ICC内部相关系数均0.90),重测信度也较高(ICC内部相关系数0.90,Spearman等级相关系数0.80,Kappa值0.77)。采用ROC工作特征曲线法确定的诊断界值与ASSIST的分界值也具有较高的一致性,除酒精依赖外(Kappa值:0.56),ASSIST筛查结果与SCID物质依赖诊断一致性较高(Kappa值:0.94～1.00)。结论:精神活性物质使用问题筛查量表中文版在我国具有较好的信效度,可用于临床工作中对烟草、酒精及其他精神活性物质使用问题的筛查。     

五谷虫抗金黄色葡萄球菌物质的纯化及抗菌机制

背景：五谷虫抗菌物质提纯方法存在争议,抗菌作用机制不清。 目的：分离纯化五谷虫抗菌物质,并明确其抗菌机制。 方法：应用超滤法对五谷虫粗提物进行纯化,用酶标浊度法及K-B纸片琼脂扩散法筛选出具有明显抗菌活性的滤出液;MTT法检测滤出液对金黄色葡萄球菌增殖的影响及测定最低抑菌浓度(MIC);应用电镜技术观察抗菌物质作用后金黄色葡萄球菌的形态变化。 结果与结论：酶标浊度法及K-B纸片琼脂扩散法均显示与五谷虫粗提物及截留液相比较,滤出液   (Mr<10 000)的抗菌活性最强(P < 0.05),能明显抑制金葡萄菌增殖,且对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为1 g/L。五谷虫滤出液抗菌物质能使金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性增加,使细菌细胞膜破裂,细胞内容物渗出。五谷虫抗菌物质相对分子质量小于10 000,其可能通过作用于金黄色葡萄球菌细胞膜而形成孔洞,增加细胞膜通透性,而发挥抗菌作用。     

TLSFjm生物学活性检测方法及产生最佳条件的选择

在建立三种简便、敏感的TLSFjm生物学活性检测方法的基础上,筛选出TLSFjm产生的最佳条件。结果表明,以细胞浓度1×10~6/ml,培养时间48h,TLSFjm产生活性最高,PHA和IL-1β对JM产生TLSFjm具有协同促进作用,A23187单独也可促进JM细胞产生TLSFjm,无血清RPMI1640培养条件产生的TLSFjm活性同10％NCS RPMI1640无明显差异,为纯化TLSFjm提供了实验依据。另外还发现1％BSA能很好保护TLSFjm活性,BSA还可保护TLSFjm,使之在冻融过程中避免活性丧失。TLSFjm活性在-20℃保存明显优于4℃。     

备用根大鼠脊髓后角组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定

目的　进一步分离纯化备用根大鼠部分去传入纤维支配 (手术侧 )的脊髓后角组织提取液 ,以获得某种神经营养活性物质。　方法　用 Superdex G- 75 prep grade凝胶层析、高效液相色谱 (HPL C)层析和细胞培养等技术分离和检测神经营养活性物质。　结果　手术侧脊髓后角组织提取液经 Superdex G- 75 prep grade凝胶层析和 HPL C层析后 ,得到的 A峰洗脱液具有促进体外培养鸡胚背根节 (DRG)分离神经元存活及其神经突起生长的神经营养活性作用。经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)显示 ,A峰洗脱液呈现一条分子量约为 6 0 k D的蛋白质主带。　结论　结合生物活性检测结果 ,分子量约 6 0 k D的蛋白质可能是手术侧脊髓后角组织的神经营养活性物质     

白桦三萜类物质的抗肿瘤作用及其对免疫功能的增强效应

目的：研究白桦三萜类物质（ＴＢＰ）体内抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：利用小鼠体内移植瘤模型,测定ＴＢＰ对小鼠黑色素瘤Ｂ１６、肉瘤Ｓ１８０、Ｌｅｗｉｓ肺癌和艾氏腹水癌等肿瘤的抑瘤率。采用放射性掺入法检测ＣｏｎＡ诱导的脾细胞增殖反应;放射性释放法检测巨噬细胞细胞毒活性;中性红释放法检测ＴＮＦ和ＮＫ细胞活性,结果：ＴＢＰ对各瘤株的抑瘤率均达到３０％以上,对黑色素瘤Ｂ１６的效果最好,抑瘤率     

血管活性物质与急性肾功能衰竭

急性肾功能衰竭时 ,血管活性物质异常释放可引起肾血流量的异常。本文对肾素、血管紧张素Ⅱ、内皮素、一氧化氮、心房肽、精氨酸加压素等血管活性物质在急性肾功能衰竭中的作用作一综述。     

钾离子通道在物质依赖中的研究进展

物质依赖是一种以强迫性觅药、高复发性为特征的疾病,物质依赖机制涉及神经元结构的适应性和突触的可塑性改变。钾离子通道与神经细胞的自律性、神经冲动发放的频率有关,参与动作电位幅度、频率和突触传递等过程,在中枢神经系统发挥着重要作用。文献报道干预钾离子通道的活性可显著影响实验动物的成瘾行为,表明钾离子通道参与成瘾行为的形成。本文对钾离子通道在物质依赖中的研究进行综述,为物质依赖的预防和治疗提供新思路。     

嗅鞘细胞培养上清液对体外培养脊髓神经元存活及活性的影响

目的:通过检测鞘嗅细胞培养上清液,研究其是否能够分泌促进神经元存活及活性的物质,以便为CNS神经损伤修复提供相关移植的理论依据。方法:分离培养嗅神经及嗅球颗粒层(ONGL)细胞,经过传代培养进行纯化嗅鞘细胞,最后收集其培养上清液。浓缩并检测其蛋白浓度,分别以10ug/ml、20ug/ml、40ug/ml、80ug/ml、160ug/ml的浓度加到培养的脊髓神经元的存活及活性指标。结果:嗅鞘细胞培养上清的蛋白浓度为40ug/ml、80ug/ml时对神经元夏活具有促进作用(与对照组相比P<0.01),而80ug/ml时对神经元活性具有促进作用(P<0.01)。结论:嗅鞘细胞在培养状态能够分泌一些活性物质,这些活性物质对神经元的存活和活性有明显的促进作用。     

日开发出新的抗炎性反应物质

新华社东京电（记者钱铮）日本研究人员新开发出一种效果不亚于类固醇的抗炎性反应物质。这种肽能够抑制在炎性反应中起核心作用的物质的活性，不良反应小，可望用来治疗过敏和皮炎。[第一段]