干扰素gamma的信号转导通路

干扰素gamma(IFN-γ)是一个重要的多向细胞因子,它通过激活细胞膜表面的激酶(JAK)、磷酸化偶联信号转导系统(STAT),活化的STAT移至核内,并结合特异的DNA元件,进行相应的基因转录.JAK-STAT1信号的各个水平均受到严格的抑制性调控,指导基因转录.严格的弱化性抑制信号调控对于精确可控的细胞反应至关重要,其中该信号有三个抑制信号,磷酸酪氨酸磷酸酶(FTP)家族,细胞因子信号抑制因子(SCOS)家族以及活化STAT抑制蛋白(PIAS)家族,它们各自通过特异性的途径在信号转导的不同层面显示出核心调控作用.     

固有免疫中信号转导和转录激活因子在脓毒症中的作用

固有免疫是生物体长期种系进化过程中形成的一系列防御机制.其可对侵入的病原体迅速产生应答,发挥非特异抗感染免疫作用.在固有免疫中,白细胞的募集和激活是很有必要的,可被各种化学介质调控,这其中就包括细胞因子.研究表明,信号转导和转录激活因子(STAT)蛋白在脓毒症期间大鼠的固有免疫中起着重要作用,并且不同的细胞因子活化的STAT不同.STAT1、STAT3、STAT4和STAT6可以分别介导IFN-γ、IL-10、IL-12和IL-13信号.细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)是对细胞因子应答而迅速被诱导的蛋白质家族,可以通过JAK/STAT信号途径减弱细胞因子的信号传导,由此将为治疗脓毒血症提供了理论依据.     

酪氨酸蛋白激酶JAK1 在IL-6诱导JAK/STAT 途径活化中的作用

目的 酪氨酸蛋白激酶JAK1和转录因子STAT3为参与IL－6诱导的JAK／STAT信号转导途径的两种主要的信号蛋白分子。本研究试图揭示JAK1在JAK／STAT途径诱导活化中的作用。方法 分别采用凝胶阻滞电泳（EMSA）和免疫沉淀（IP）法观察IL－6刺激作用下STAT3和JAK1在3种骨髓瘤细胞系（XG－7，KM－3和Sko-007)中的诱导活化状态。采用RTPCR和Western-blot法检测这两种信号蛋白分子在以上3株靶细胞中的表达情况。结果 尽管SAT3在3株靶细胞中都能够正常表达，但只有Sko-007细胞中出现IL－6刺激作用下STAT3的诱导活化。在XG－7细胞中，既没有检测到JAK1的表达，也没有观察到JAK1的活化。尽管JAK1在KM－3细胞中能够正常表达，但不能被IL－6诱导激活。Sko-007细胞中则同时出现JAK1的表达及IL－6刺激后的诱导活化。结论 JAK1的正常表达和激活是IL－6刺激作用下JAK／STAT信号转导途径在骨髓瘤细胞中诱导活化的前提条件。     

视神经切断术后视网膜内信号转导子与转录激活子STAT3蛋白的表达变化

目的 探讨视神经损伤后，信号转导子与转录激活子(STAT3)蛋白在视网膜内表达和分布的变化。方法 免疫细胞化学、Westetn blot及计算机图像分析技术。结果 视神经切断术后，视网膜内STAT3表达水平上调，术后1d达到高峰，并出现核转位增多现象。5d后STAT3水平逐渐下降至正常。结论 Janus激酶一信号转导子与转录激活子(JAK-STAT)信号转导途径可能通过STAT3蛋白的活化，参与视神经切断后视网膜内的病理改变过程。     

髓细胞白血病—1基因及其产物研究进展

髓细胞白血病-1(myeloid cell lekemia-1,MCL-1)基因是高度可调节的分化早期活化基因,属于抗凋亡基因家族成员,其编码产物Mcl-1蛋白与正常和异常造血细胞的生存及分化有密切关系.细胞外调节蛋白激酶通路、Janus激酶/信号转导与转录活化因子(JAK/STAT)通路、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸激酶Akt通路等多个信号转导途径参与了正常和异常造血细胞内MCL-1表达的调控.     

细胞因子信号转导抑制分子的研究进展

SOCS是一类新型的免疫抑制分子,可抑制多种细胞因子、激素和生长因子的生物学作用。生理情况下,SOCS在组织中低水平表达。此外,它也受到转录水平、蛋白合成水平及降解水平的严密调控。SOCS分子主要通过抑制JAK/STAT通路抑制信号转导,从而对细胞因子、激素、生长因子作用的强度和持续时间进行调控。     

SOCS3与BCR-ABL阴性的骨髓增殖性疾病

一系列细胞因子通过JAK/STAT通路诱导细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)基因的表达，SOCS蛋白又负反馈调节细胞因子信号转导通路， 形成细胞因子信号转导反馈调节环。在BCR-ABL阴性的骨髓增殖性疾病的发病机制中，JAK2V617F点突变的发现是一个重大的突破。JAK2V617F点突变可导致SOCS3基因表达的增高，但通过某种机制逃逸了SOCS3的负向调控作用。     

JAK/STAT信号转导通路在树突状细胞分化成熟过程中的作用

树突状细胞(DC)是目前发现的效能最高的专职性抗原提呈细胞,其分化成熟过程对机体免疫功能的发挥起着至关重要的作用.大量研究表明JAK/STAT信号转导通路与DC分化成熟密切相关.JAK/STAT是一种多效联级的信号转导通路,是大量细胞因子和生长因子传递信号的主要途径,参与细胞生长发育繁殖凋亡等过程的调节.多种肿瘤病人体内DC分化成熟障碍可能与JAK/STAT通路的异常表达有关.     

MRL/lpr小鼠肾组织JAK/STAT信号转导途径的表达和雷帕霉素对其表达的影响

目的 探讨JAK／STAT1信号转导途径在MRL／lpr小鼠狼疮肾炎中所起的作用以及雷帕霉素对JAK／STAT1信号转导途径活化的影响。方法采用MRL／lpr转基因鼠，给予雷帕霉素干预治疗后，采用免疫组化方法研究肾脏磷酸化STAT1的组织分布情况，采用Westernblot方法研究磷酸化STAT1蛋白的表达，采用SYBRgreen嵌合荧光法real-time定量PCR研究SOCS-1mRNA的表达，从而研究STAT1的活化水平。结果MRL/lpr狼疮鼠肾脏的磷酸化STAT1蛋白明显活化，SOCS-1基因的表达升高，给予雷帕霉素治疗后肾脏的磷酸化STAT1蛋白表达降低，SOCS-1基因的表达降低。结论JAI（／STAT1信号转导途径的活化与狼疮肾炎的发病相关，雷帕霉素可以降低JAK／STAT1信号转导途径的表达．这可能是雷帕霉素治疗系统性红斑狼疮的机理之一。     

IL—6诱导人骨髓瘤细胞表达CD45

目的：研究髓瘤细胞系Sko-007中IL－6信号途径活化与CD45诱导表达之间的关系。方法：首先采用凝胶阻滞电泳（electrophoretic mobility shift assay,EMSA)方法检测参与IL－6信号转导功能的转录因子STAT3和NF－IL－6在Sko-007细胞中的诱导活化情况并确定该细胞中IL－6信号转导途径;进而采用RT－PCR和FACS方法检测CD45mRNA和蛋白在IL－6刺激作用下的诱导表达情况;最后采用以上两种方法观察CD45诱导表达与I－6信号途径活化之间的关系。结果：①两种主要的IL－6信号转导途径JAK／STAT和Ras/NF-IL-6都能够在Sko-007细胞中诱导激活;②CD45mRNA和蛋白的表达量在IL－6刺激作用下明显增加;③STAT3反义表达质粒导入Sko-007细胞后JAK／STAT途径活化信号减弱,同时CD45mRNA诱导表达量下降。结论：Sko－007细胞中JAK／STAT途径的诱导激活介导了CD45的诱导表达。     

IL-12对狼疮肾炎PBMC中信号传递分子STAT_3、STAT_4的作用

目的 :为了探讨IL 12对狼疮肾炎PBMC发挥生物学作用的细胞内信号传递机制。方法 :采用MTT、免疫沉淀、免疫印迹等方法 ,检测IL 12对PBMC增殖及STAT3、STAT4的作用 ,并比较在狼疮肾炎活动期、静止期的差别。结果 :发现与正常人对照及静止期相比 ,IL 12对活动期PBMC不需要IL 2的预诱导 ,可促进PBMC增殖并在短时间内激活STAT3、STAT4,而IL 2对STAT4无作用。结论 :表明IL 12对PBMC的作用可通过STAT3、STAT4途径发挥 ,活动期PBMC存在异常活化 ,这可能是IL 12促进狼疮肾炎PBMC参与发病的细胞内机制之一     

Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor induces a unique set of STAT factors in murine dendritic cells

Cytokine-mediated signaling pathways were studied in mouse dendritic cells (DC) by analysis of the activation pattern of STAT factors. Electrophoretic mobility shift assays were performed to detect STAT isoform-specific complexes. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) simultaneously induced complexes containing STAT1, STAT3, STAT5A, STAT5B and STAT6. In non-DC, a similar broad activation pattern of STAT factors by GM-CSF or other cytokines has not been observed so far. By comparison, in peritoneal macrophages, GM-CSF induced a complex with the properties of a truncated form of STAT5. Other cytokines tested on DC either failed to induce STAT factors [interleukin (IL)-1β, IL-2, IL-15], or activated the same STAT factors as observed in peritoneal macrophages (IL-4, IFN-γ). Our results implicate a specific effect of GM-CSF on STAT signaling in DC which might account for the cell type-specific effect of this cytokine on development and function.     

STAT3和SOCS3与子宫内膜异位症的相关性研究

目的: 探讨信号转导和转录活化因子3(STAT3)和细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)的表达与子宫内膜异位症的相关性。方法: 采用Western blotting方法检测30例子宫内膜异位症患者异位(异位组)、在位子宫内膜(在位组)和25例正常子宫内膜(对照组)中总STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)和SOCS3蛋白的表达情况。结果: 总STAT3蛋白在3组内膜中表达无差异,而其活化水平(p-STAT3/STAT3)在异位组最高,SOCS3蛋白表达在异位组最低,两者与在位和对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05),相关性分析显示内异症患者中STAT3活化水平与SOCS3蛋白表达呈负相关(r=-0.499, P<0.01)。结论: 在子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜组织中存在STAT3过度活化和SOCS3蛋白表达下降,两者呈负相关。     

信号转导子和转录激活子6及其mRNA在哮喘大鼠气道炎症中的作用

目的：探讨信号转导子和转录激活子6(STAT6)及其mRNA在哮喘大鼠气道炎症中的作用。 方法： 20只二级雄性SD大鼠随机分为2组, 对照组和哮喘组。以卵清白蛋白(OVA) 致敏激发法复制大鼠哮喘模型，每只大鼠左肺留取肺组织，右肺进行支气管肺泡灌洗并留取支气管肺泡灌洗液(BALF)。对BALF进行细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数和分类计数；应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（Sandwich ELISA）法测定BALF和血清中IL-4浓度；采用免疫组化法和原位杂交法测定STAT6蛋白和STAT6 mRNA的表达情况。 结果： (1) BALF和血清中白细胞介素4(IL-4)的浓度哮喘组均显著高于对照组(均P<0.01)；(2)免疫组化和原位杂交显示，哮喘组支气管STAT6蛋白和STAT6 mRNA的表达均显著高于对照组(均P<0.01)，其主要表达细胞是上皮细胞；(3)支气管上皮细胞STAT6蛋白及其mRNA含量分别与BALF中的IL-4浓度、EOS绝对值呈非常显著正相关。 结论： 哮喘大鼠STAT6蛋白和mRNA高表达，上皮细胞是其主要表达细胞，并与IL-4浓度、EOS募集密切相关。     

敲减STAT3基因表达对胰腺祖细胞增殖的影响

目的:探讨敲减信号转导和转录激活因子3(STAT3)基因的表达对胰腺祖细胞增殖的影响。方法:将靶向STAT3基因的小干扰RNA(siRNA)转染胰腺祖细胞,采用qPCR和Western blot验证STAT3基因表达下调,通过光学显微镜、活细胞计数法和CCK8法检测STAT3基因沉默对胰腺祖细胞增殖和活力的影响,流式细胞术检测细胞周期进程的变化,Western blot检测细胞周期蛋白D2(CCND2)的表达水平。结果:干扰片段有效沉默STAT3基因的表达,STAT3的蛋白表达水平降低了(78.62±0.08)%,与对照组相比,敲减STAT3基因的表达使胰腺祖细胞数量减少了(45.62±0.03)%,活力降低了(43.68±0.05)%,细胞周期阻滞在G 0/G 1期,CCND2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:敲减STAT3基因表达通过抑制CCND2蛋白表达,阻滞细胞周期在G0/G1期,抑制胰腺祖细胞的增殖和活力。     

IL-6和AG490对Burkitt淋巴瘤细胞生长的影响

 目的: 观察IL-6和AG490对Raji细胞生长的影响,探讨信号转导及转录激活因子3(STAT3)及survivin在Burkitt淋巴瘤发生发展中的作用,为寻找淋巴瘤生物治疗的新靶标提供实验依据。方法: 培养Raji细胞,分别加入STAT3的激动剂IL-6和抑制剂AG490,用real-time PCR和Western blot检测STAT3、survivin的表达情况及STAT3的磷酸化,MTT法检查细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化。结果: 培养细胞中加入IL-6或AG490后,细胞生长受明显影响并呈现药物浓度依赖关系(P<0.05);与相应的对照组比较,IL-6组Raji细胞中STAT3、survivin mRNA的表达明显升高,AG490组Raij细胞中STAT3、survivin的mRNA表达明显降低。不同浓度的IL-6组之间、不同浓度的AG490组之间,STAT3和survivin mRNA的表达亦有显著差异(P<0.05),且2种基因mRNA表达都呈现出药物浓度依赖关系。p-STAT3、STAT3和survivin的蛋白水平在IL-6作用下表达增高,AG490作用下表达降低;细胞凋亡率在IL-6作用下逐渐降低,在AG490作用下逐渐升高,且都呈现出药物浓度依赖关系;经AG490处理后,G₁期Raji细胞明显增加,S期细胞无明显改变,G₁/S比值增加,而在IL-6组中,S期细胞明显降低。结论: IL-6和AG490对Raji细胞生长有明显影响,STAT3及其下游靶基因survivin的表达改变可能是IL-6及AG490影响Raji细胞生长的重要分子机制。     

干扰STAT3基因对哮喘气道损伤的影响

目的:探讨信号转导及转录激活因子3(STAT3)在哮喘气道损伤中的作用及相关机制。方法:首先,通过Western blot检测哮喘患者的支气管黏膜组织中STAT3的表达及活化情况;其次,以支气管上皮细胞为研究对象,检测屋尘螨抗原P1(Derp1)刺激对STAT3的表达及活化的影响;再次,采用shRNA干扰支气管上皮细胞中STAT3的表达,CCK-8实验检测细胞活力,同时检测细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的含量来反映细胞的炎症反应,检测细胞中丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性来反映细胞氧化应激水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:哮喘患者的支气管黏膜组织中p-STAT3的蛋白水平显著上升,Derp1刺激可显著上调支气管上皮细胞中p-STAT3的蛋白水平。沉默STAT3可抑制TNF-α、IL-1β和IL-6释放,降低MDA的含量,升高SOD和GSH-Px的活性,并抑制细胞凋亡,提高细胞活力(P0.05)。结论:沉默STAT3可减轻尘螨诱导的气道损伤,其作用机制可能是通过抑制JAK/STAT信号通路的激活,抑制支气管上皮细胞分泌炎症细胞因子及细胞内氧化应激反应,进而减少细胞凋亡。