流式细胞术检测循环血骨髓瘤细胞的研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是恶性浆细胞在骨髓内恶性增殖和广泛浸润的一种血液系统肿瘤,目前尚不能治愈。循环骨髓瘤细胞(CMCs)具有独特的免疫表型、细胞遗传学及生物学功能,这些特征与多发性骨髓瘤患者的预后相关。近年来应用流式细胞术检测CMCs已得到广泛应用,二代流式(NGF)检测敏感性高达10-6,提高了CMCs的检出率。本文拟就CMCs的免疫表型、检测方法及预后意义的研究进展进行综述。     

单克隆抗体治疗多发性骨髓瘤研究进展

多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)是浆细胞的恶性肿瘤,好发于老年人,占血液肿瘤的第二位。随着多发性骨髓瘤治疗新药包括沙利度胺、硼替佐米、雷利度胺等的出现及自体干细胞移植和清髓、减量异体干细胞移植的临床应用,多发性骨髓瘤治疗缓解率较前大为提高,生存时间明显延长;但复发、难治仍是临床面临的巨大难题,故迄今为止仍被     

BCMA CAR-T细胞调节骨髓瘤长期免疫应答的研究进展北大核心CSCD

多发性骨髓瘤是一种异质性的血液肿瘤疾病,在骨髓微环境中,浆细胞恶性增殖导致的肿瘤免疫逃逸和累积的基因组畸变推动了疾病的进展,进展中损伤的免疫功能易使疾病复发。然而,近年来靶向B细胞成熟抗原(BCMA)的嵌合抗原受体T细胞疗法使骨髓瘤症状产生持久且深度的缓解,复发/难治性骨髓瘤的治疗取得了突破性进步。因此,本文综述了BCMA CAR-T治疗复发/难治性骨髓瘤的最新研究进展,为进一步恢复患者抗肿瘤免疫能力及形成长期免疫应答提供参考。     

来那度胺辅助常规药物治疗多发性骨髓瘤患者的效果观察

目的:探讨来那度胺辅助常规药物治疗多发性骨髓瘤患者的效果及其对免疫因子、血管新生能力的影响.方法:选取80例多发性骨髓瘤患者,随机分为对照组40例给予硼替佐米联合地塞米松,观察组40例在对照组治疗基础上增加来那度胺.2个月后,对比两组患者临床疗效,以流式细胞仪检测免疫因子,以全自动生化分析仪检测血管新生能力,以酶联免疫分析法检测血清生化指标.结果:观察组总缓解率大于对照,观察组CD4+/CD8+、CD3+、CD4+水平均大于对照组,观察组血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、肝癌衍生长因子、β2-微球蛋白、血清白蛋白、血清肌酐尿素氮水平均小于对照组(P<0.05).结论:来那度胺辅助常规药物治疗多发性骨髓瘤患者效果确切,能够抑制血管生成,改善免疫功能及肝肾功能.     

DC-CIK过继免疫联合沙利度胺治疗复发难治性多发性骨髓瘤的回顾性研究

目的探讨以自身树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)为效应细胞的过继免疫联合沙利度胺(Thd)治疗复发难治性多发性骨髓瘤(MM)的临床疗效。方法回顾性选择48例诊断明确的复发难治性MM患者作为研究对象,其中对照组24例,接受单纯Thd维持治疗;免疫组24例,接受DC-CIK联合Thd治疗。研究Thd对CIK表型和DC-CIK骨髓瘤细胞杀伤效应的影响,比较两组患者的临床疗效。结果 Thd作用后,CIK表型增强,DC-CIK对U266的杀伤率明显提高;治疗后免疫组患者较之对照组患者生活质量改善,临床疗效提高(P<0.05);结论 DC-CIK过继免疫联合Thd治疗复发难治性MM有良好的临床疗效和应用价值。     

硼替佐米纳米载药体系的研究进展

正硼替佐米(bortezomib,BTZ)是临床批准的第一个蛋白酶抑制剂,可用于治疗多种恶性肿瘤,不仅发现对肺癌、前列腺癌、结直肠癌和乳腺癌等有效,更已进入多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤的临床应用。BTZ通过抑制内源性NF-κB抑制剂I-κB的泛素化和蛋白内体降解而抑制NF-κB的活性,最终导致肿瘤细胞的程序性死亡~([1～3])。多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是以浆细胞恶性增殖并分泌单克隆免疫球蛋白为特征     

内质网应激与多发性骨髓瘤细胞耐药的机制研究

多发性骨髓瘤是来源于浆细胞的恶性肿瘤,为血液系统第二大常见的恶性肿瘤。以硼替佐米(bortezomib,BTZ)为代表的蛋白酶体抑制剂(proteasome inhibitor,PI)是一类重要的多发性骨髓瘤治疗药物,其总体有效率高达80%-90%。但是,大多数骨髓瘤患者最终会出现耐药,导致疾病复发。因此,增加骨髓瘤细胞对PI的敏感性是一个亟待解决的临床问题。近年来的研究发现,骨髓瘤恶性增殖的过程中,细胞内累积大量异常免疫球蛋白,使内质网(endoplasmic reticulum stress,ER)应激增强,继而激发未折叠蛋白反应(nfolded protein response,UPR)。硼替佐米可阻止蛋白质的降解,增加细胞内的蛋白质负荷,加重ER应激,引发细胞凋亡。文章就ER应激在多发性骨髓瘤中的作用及其与骨髓瘤耐药的关系作一综述,进而为临床治疗多发性骨髓瘤提供新的思路。     

沙利度胺治疗多发性骨髓瘤前后血清TNF-α水平变化的观察

为观察沙利度胺治疗多发性骨髓瘤(MM)前后TNF-α水平。选择20例沙利度胺治疗的难治、复发性多发性骨髓瘤患者,所有病例均于治疗前留取血浆标本,治疗有效组在最大反应率时留取标本,治疗无效组在治疗结束后留取标本。采用酶联免疫吸附法测定血浆TNF-α水平。结果显示沙利度胺治疗有效组、无效组治疗前TNF-α水平无明显差异。沙利度胺治疗有效组,治疗前后血浆TNF-α水平分别是(55.2854±11.3558)pg/ml和(29.2842±11.5684)pg/ml,治疗前血浆TNF-α水平明显高于治疗后(P=0.0001);治疗无效组,治疗前后血浆TNF-α水平分别是(54.0688±6.4732)pg/ml和(54.4672±3.3512)pg/ml,无明显差异(P=0.87310)。结论:沙利度胺治疗有效组可明显减少MM患者TNF-α水平,进一步支持TNF-α在多发性骨髓瘤发生、发展中的作用,同时说明TNF-α水平可以作为判断疗效的指标。     

自身骨髓瘤抗原致敏树突细胞介导特异性CTL反应的研究

目的：研究多发性骨髓瘤(MM)患者肿瘤冻融物致敏的树突细胞(DC)能否诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应。方法：用MM患者骨髓CD34^ 细胞诱生DC。将MM患者骨髓瘤冻融物冲击致敏DC。MTT法检测骨髓瘤抗原致敏及非致敏DC诱导的自身T细胞对不同靶细胞(患者骨髓瘤细胞、K562细胞)的杀伤率。结果：骨髓瘤冻融物致敏DC诱导的自身T细胞对患者骨髓瘤细胞的杀伤远大于对K562细胞的杀伤。结论：患者骨髓瘤冻融物致敏的DC能有效诱导自身T细胞特异性抗瘤免疫。     

流式细胞术免疫表型分析在多发性骨髓瘤及其他浆细胞疾病诊断中的应用

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是以骨髓内单克隆恶性浆细胞增生,伴有单克隆免疫球蛋白或轻链增多为特征的恶性肿瘤。骨髓中异常浆细胞数量为其主要诊断标准和疗效判断依据之一,但是,MM有别于其他血液系统恶性肿瘤,骨髓瘤细胞在骨髓中往往呈灶性分布,骨髓穿刺部位不同,细胞数量差异很大。有时肿瘤浆细胞和正常浆细胞形态     

急性髓细胞白血病患者外周血淋巴细胞亚群的特征及临床意义

目的通过检测急性髓细胞白血病患者外周血各淋巴细胞亚群的分布,探讨该类患者免疫功能状况。方法通过流式细胞术检测健康对照组(n=20)、急性髓细胞白血病初发患者(n=31)及完全缓解期患者(n=31)外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞、TCRγδ+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、CD16+CD56+NK细胞比例;通过细胞杀伤实验分析NK细胞和γδT细胞的杀伤活性以及与Treg的关系。结果与对照组相比,初发白血病患者和完全缓解患者外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞比例无明显差异,但CD4+CD25+Treg比例明显增高,TCRγδ+T细胞和CD16+CD56+NK细胞比例明显下降。初发病患者NK细胞和γδT细胞具有杀伤活性,但Treg能明显抑制其杀伤活性。结论急性髓细胞白血病患者外周血γδT和NK细胞虽具有杀伤功能,但比例明显下降,Treg对其杀伤功能具有抑制作用。     

139例恶性肿瘤患者外周血自然杀伤细胞活性的研究

本研究采用细胞介导微量细胞毒测定法检测139例恶性肿瘤患者和355例健康个体外周血自然杀伤细胞(NK细胞)对用~(125)IUdR标记的K562靶细胞的细胞毒直接杀伤效应。结果表明,肿瘤患者NK细胞活性显著低于健康个体,其中,肝胆肿瘤和晚期肿瘤患者NK活性降低尤为显著,临床治愈者NK活性恢复到正常人水平。不同临床阶段肿瘤患者经过肿瘤手术切除以及药物加放射线治疗好转者NK活性均显著升高。健康个体随着年龄增长NK活性下降,说明非特异免疫监视能力减弱与肿瘤的发生、发展关系密切。     

135例多发性骨髓瘤细胞遗传学分析

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种难以治愈的以骨髓中克隆性浆细胞恶性增殖和异常积聚为特征的血液系统恶性肿瘤.MM部分核型异常是非随机分布的.我们对135例MM患者进行细胞遗传学分析.     

沙利度胺对白血病细胞NKG2D配体表达及NK细胞杀伤敏感性的影响

目的:探究沙利度胺对白血病细胞自然杀伤细胞及活性受体D(natural killer cell group 2 member D,NKG2D)配体表达及自然杀伤细胞(natural killer,NK)杀伤敏感性的影响.方法:取对数生长期白血病细胞株HL-60、K562细胞,以不同浓度沙利度胺作用48 h,并设置未经沙...     

三氧化二砷提高多发性骨髓瘤ARH-77细胞对NK细胞杀伤敏感性的研究

目的 研究三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)前后人多发性骨髓瘤ARH-77对NK细胞杀伤细胞敏感性的变化,并初步探讨其机制.方法 分别应用CCK-8法和台盼蓝染色法测算ATO对ARH-77细胞株的50%抑制量(IC50)和细胞活性;乳酸脱氢酶释放法检测ATO作用前后ARH-77细胞对NK细胞的杀伤敏感性.流式细胞仪检测ARH-77细胞表面NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULBP2、ULBP3)和HLA-Ⅰ类分子表达以及ATO作用前后的细胞周期变化.结果 ATO对ARH-77细胞的IG50为5.0μmol/L.NK 细胞杀伤ATO作用前后ARH-77细胞的活性有显著差异(P＜0.05).ATO作用后,ARH-77细胞发生G1/S期阻滞,同时其表面MICA/B、ULBP1、ULBP3表达显著升高,二者之间差异有统计学意义(P＜0.05).ULBP2和HLA-Ⅰ类分子无明显变化(P＞0.05).结论 ATO能提高ARH-77细胞NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULIBP3)表达;从而使其对NK细胞的杀伤敏感性增强.     

浆细胞CD45和CD31的表达与多发性骨髓瘤细胞分化程度的关系

目的: 了解反映多发性骨髓瘤(MM)细胞生物学行为的免疫标记在骨髓不同阶段浆细胞中的表达情况,为临床调整治疗策略和判断疾病病程及预后提供依据。方法: 用流式细胞术检测MM患者及对照组浆细胞表面相关分化抗原的表达情况,分析其在良、恶性浆细胞表达的差异,及其与原始浆细胞比例的相关性。结果: MM患者浆细胞CD45和CD31表达率低于对照组浆细胞; MM细胞 CD45和CD31的表达率与原始浆细胞比例呈负相关;CD45表达与CD31表达呈现正相关。结论: 浆细胞CD45和CD31的表达率与MM细胞的分化程度呈正相关,其表达可能与MM的疾病进展有一定关系。     

多发性骨髓瘤的发病机制及药物治疗进展

多发性骨髓瘤(mu ltip le myelom a,MM)是一种恶性增殖性疾病,其发病机制十分复杂,近年集中在早期遗传学异常、造血微环境与骨髓瘤细胞的相互作用、NF-κB和Notch信号通路、MM耐药机制几方面,形成了以针对信号通路和骨髓微环境治疗为主的综合治疗框架。一些有前景的药物如沙利度胺、蛋白酶体抑制剂、砷剂等的应用使MM的治疗得到了极大的突破。     

多发性骨髓瘤患者血清CRP及β2-m检测的临床意义

多发性骨髓瘤（MM）是以骨髓异常浆细胞恶性克隆增殖为特征的恶性肿瘤。其瘤细胞可产生异常单克隆蛋白（M蛋白）,并引起溶骨性破坏、贫血、肾功能损害和免疫功能缺陷。目前认为,CRP及β2-m水平是MM患者最重要的预后因素[1]。     

急性髓细胞白血病患者血清UL16结合蛋白3(ULBP3)水平升高并抑制NK细胞的杀伤活性

目的检测急性髓细胞白血病(AML)患者血清可溶性UL16结合蛋白3(s ULBP3)的水平,探讨其对AML患者免疫细胞功能的调节作用。方法通过时间分辨免疫荧光技术检测健康对照组(n=20)、AML初发组患者(n=30)及AML完全缓解组患者(n=30)血清中s ULBP3的水平;通过细胞杀伤实验(乳酸脱氢酶释放法)分析s ULBP3对自然杀伤(NK)细胞杀伤活性的影响;通过异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexinⅤ-PE/7-AAD)双染色结合流式细胞术分析NK细胞凋亡率。结果与对照组相比,AML初发组患者血清中s ULBP3水平明显增高;AML完全缓解组患者血清中s ULBP3水平也增高,但较初发组患者则明显降低。AML初发组患者血清中s ULBP3水平与NK细胞比例呈负相关,与γδT细胞比例不相关。体外实验显示,添加外源性ULBP3蛋白增加NK细胞的凋亡率,抑制NK细胞对靶细胞的杀伤率。结论 AML患者血中s ULBP3水平增加与NK细胞比例有关,s ULBP3通过增加细胞凋亡抑制NK细胞的杀伤活性。     

不明原因自然流产与蜕膜NK细胞表面活化性受体表达的相关性研究

探讨不明原因自然流产患者蜕膜NK细胞杀伤活性与其细胞表面活化性受体NKp46、NKp44、NKp30和NKG2D表达的相关性。选取21例早孕不明原因自然流产患者为病例组,25例正常早孕人流妇女为对照组,收集两组的蜕膜组织,Ficoll密度梯度离心分离淋巴细胞,MACS磁珠分选CD3-CD56+NK细胞。以K562细胞为靶细胞,用细胞染色及流式细胞技术检测两组蜕膜NK细胞杀伤活性,用流式细胞技术检测两组蜕膜CD56brightCD16-NK和CD56dimCD16+NK细胞上活化性受体NKp46、NKp44、NKp30和NKG2D的表达,并与NK细胞杀伤活性进行相关性分析。结果:(1)早孕蜕膜NK细胞具有杀伤活性;(2)病例组蜕膜NK细胞的杀伤活性较正常对照组显著增强(P=0.014);(3)病例组蜕膜CD56brightCD16-NK细胞中NKp44的表达比正常对照组显著升高(P=0.021);病例组蜕膜CD56dimCD16+NK细胞中NKp46和NKp44的表达比正常对照组显著升高(分别P=0.026,P=0.041);其余活化性受体的表达两组未见明显差异;(4)蜕膜NK细胞杀伤功能与蜕膜CD56brightCD16-NK细胞中NKp44的表达呈显著正相关(r=0.677,P<0.05),和蜕膜CD56dimCD16+NK细胞中NKp46的表达呈显著正相关(r=0.634,P<0.05)。蜕膜NK细胞活化性受体NKp46和NKp44表达增加,从而使蜕膜NK细胞的杀伤功能增强可能在不明原因自然流产的发病中起重要作用。